健膝丸含药血清对IL-1β作用下兔关节软骨细胞Type-IICollagen、MMP-1、MMP-13蛋白表达的影响

目的:观察健膝丸含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)作用下体外培养的兔关节软骨细胞表达II型胶原(Coll-II)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响,探讨健膝丸防治骨关节炎的作用机制。方法:提取1月龄的兔关节软骨细胞、Ⅰ代细胞用于实验。实验分为空白组、模型组、健膝丸组和抗骨增生组。细胞在培养第4天时,模型组、健膝丸组和抗骨增生组分别加入10 ng·mL-1的IL-1β继续进行培养,分别在培养24 h、48 h、72 h时提取蛋白,并用In-cell western blot法检测其表达情况。结果:各时间点空白组与模型组Coll-II、MMP-1及MMP-13的表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05);健膝丸组较模型组Coll-II的表达在48 h、72 h时,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-1及MMP-13表达在各时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:健膝丸可能在刺激软骨细胞分泌Coll-II,或者减轻对Coll-II的破坏,及减少MMP-1、MMP-13表达等途径发挥作用,从而促进软骨细胞增殖和延缓软骨基质降解,具有保护软骨细胞、延缓软骨基质降解的作用,临床上可作为骨关节炎的治疗用药。

健膝丸对大鼠膝骨关节炎组织形态学的影响

目的:观察健膝丸对膝骨关节炎模型大鼠的软骨光镜下组织形态学的影响。方法:将40只大鼠随机区组法分为正常组、模型组、实验组(健膝丸组)、对照组(抗骨增生胶囊组)。按照改良Hulth方法建立动物模型。用药8周后处死动物取材,分别经HE、Masson、Safranin-O染色,光镜观察并行Mankin's评分。结果:光镜下观察实验组、对照组及模型组均有软骨破坏,模型组更为明显。Mankin's评分,与正常组比较,其余3组积分显著增加(P<0.05),实验组、对照组与模型组相比均有显著性差异(P<0.05),实验与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:健膝丸可减少软骨Ⅱ型胶原和蛋白多糖丢失,减轻关节软骨破坏,减缓软骨下骨硬化,延缓骨关节炎的发展进程,但同时表明其不能停止或逆转关节软骨的退变。

健膝丸对大鼠膝骨关节炎SOD、MDA、NO的影响

目的:通过观察健膝丸对膝骨关节炎模型SD大鼠血清SOD、MDA、NO表达水平的影响,以探求健膝丸在防治膝骨关节炎方面的作用机理,从而为本药的临床应用及药物开发提供科学的理论依据,同时进一步探索骨关节炎的发病机制。方法:以40只雌性SD大鼠为实验对象,随机分为正常组、模型对照组、健膝丸组、抗骨增生胶囊组,每组10只。除正常组外,其余各组均采用改良Hulth法对大鼠进行造模。术后连续3 d肌肉注射青霉素20万U,1周后开始强迫大鼠每天活动0.5 h,连续8周。同时各组大鼠均采用灌胃给药途径给予相应药液,根据人与动物体表面积等效剂量折算出健膝丸组及抗骨增生胶囊组灌胃给药量。正常组及模型对照组给予质量浓度0.9%的生理盐水,连续8周。8周后分别抽取各组大鼠腹腔静脉血,离心后取上清,按照SOD、MDA、NO测试盒说明操作,用754分光光度计测各管吸光度(OD值),从而进一步计算出各组血清中的各指标的含量。结果:血清中SOD、MDA、NO含量测定结果显示,模型对照组与正常组比较,模型对照组血清中SOD活性显著下降(P<0.01),MDA、NO含量显著升高(P<0.01)。健膝丸组与正常组比较,SOD活性差异无统计学意义(P>0.05),MDA及NO含量差异有统计学意义(P<0.05)。健膝丸组与模型对照组比较,SOD活性显著升高(P<0.01),MDA含量差异无统计学意义(P>0.05)、NO含量显著下降(P<0.01)。对SOD、MDA、NO含量的影响,健膝丸组与抗骨增生胶囊组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:通过对实验各组SD大鼠血清中SOD、MDA、NO水平的检测,结果显示,在膝骨关节炎模型SD大鼠血清中,SOD活性下降,MDA及NO含量升高,由此可知氧自由基等因子在骨关节炎的发病及软骨细胞的破坏进程中起到重要作用。健膝丸对血清MDA的含量影响不明显,但可显著提高SOD活性、清除体内过量的氧自由基,同时抑制了NO的过度产生、降低其生物效应,改善关节微循环、保护软骨细胞或促使受损细胞的修复,从而起到延缓关节软骨退变的作用。

骨痹舒片治疗膝骨关节炎的临床研究

目的:观察骨痹舒片治疗膝骨关节炎(KOA)的临床疗效,探讨膝骨关节炎早、中期运用骨痹舒片的疗效并阐述其作用机理,以能更好地推广防治膝骨关节炎的最佳方案。方法:采用随机、平行对照、多中心临床治疗观察方法将120例中医辨证为肝肾亏虚证的膝骨关节炎患者分为骨痹舒片治疗组(A组,58例)、抗骨质增生胶囊治疗组(B组,34例)、健膝丸治疗组(C组,28例)。3组分别采用骨痹舒片、抗骨质增生胶囊、健膝丸治疗3个月。观察记录各组治疗前后临床症状、膝关节功能活动及不良反应情况,并检测各组患者治疗前后血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)指标,进行统计分析比较。结果:经临床治疗3个月后,3组患者关节晨僵时间、关节压痛、肿胀、疼痛、关节功能活动及ESR、CRP与治疗前比较,均有明显改善(P<0.01),且A组改善明显优于C、B组(P<0.01);3组显效率比较,A组改善明显优于C、B组(P<0.05)。结论:骨痹舒片治疗膝骨关节炎临床效果良好,无明显的不良反应。