解毒通络方促进脑缺血损伤后神经元突起再生的研究

为了探讨解毒通络方促进神经元突起再生及其对生长相关蛋白合成的作用 ,本研究对 Wistar大鼠脑缺血损伤模型进行了形态计量学及相关生物因子表达特征的分析。结果显示 :脑缺血损伤导致海马 CA1 区神经元突起溃变、突起密度下降 ,2周时下降至最低点 ,模型组是假手术组的 61.7% ,治疗组是假手术组的 66.6% ,两组间有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ;4周时突起密度呈复升趋势 ,但治疗组复升幅度显著高于模型组 ( P<0 .0 1) ;至术后 8周与假手术组差异已不显著 ,治疗组神经元胞体 GAP-4 3含量曲线显著左移 ,GAP-4 3的表达早于神经元突起密度的提高。结论

解毒通络方对脑缺血损伤海马区突触可塑性的影响

目的 观察解毒通络方对大鼠脑缺血损伤后海马神经毯的突触形态与突触素P38的表达的影响。方法 :本文应用超微结构分析与免疫组化方法。结果 缺血损伤引起海马CA1区突触前成分溃变、突触数密度下降、突触素P38低水平表达 ;术后 8周 ,模型组与治疗组出现数量较多的新生突触和突触素P38表达水平的提高 ,治疗组突触数密度恢复最为显著 ,已达假手术组的 87 4% ,并明显高于模型组 ;与假手术组比较 ,模型组突触素P38表达COD值提高到 80 % ,而治疗组提高到 114 7% ,治疗组COD值显著高于模型组 (P<0 0 1)。结论 解毒通络方具有促进突触再建和增强。

扶正解毒通络方对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制研究

目的:探讨扶正解毒通络方对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:MTT法观察细胞增殖能力; RT-PCR检测细胞内Bax和Bcl-2 mRNA水平;免疫印迹(Western blot)检测细胞中Bax、Bcl-2、活化的caspase-3、SIRT3、P53及Fas蛋白水平。结果:扶正解毒通络方能明显诱导减少HepG2细胞内Bcl-2基因转录,增加Bax基因转录;扶正解毒通络方能明显诱导减少HepG2胞内Bcl-2蛋白表达,增加Bax、活化的caspase-3、SIRT3、P53及Fas蛋白表达。结论:与正常对照组比较,正常血清组人肝癌细胞HepG2细胞内Bax、Bcl-2、活化的caspase-3、基因及蛋白表达水平无明显改变;与正常血清组比较,扶正解毒通络方低、中和高剂量含药血清和阳性对照组HepG2细胞内Bcl-2基因转录减少,蛋白表达减少; Bax基因转录增加,蛋白表达增加,活化的caspase-3蛋白表达增加。

益气活血通络解毒方通过抑制caspase-12减轻小鼠肺缺血/再灌注损伤

目的：探讨益气活血通络解毒方（Yiqi Huoxue Tongluo Jiedu Fang,YHTJF）对小鼠肺部缺血/再灌注损伤及caspase-12表达的影响。方法：选取雄性10~12周龄C57BL/6J小鼠70只,体重21~25g,复制在体左肺缺血/再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）损伤模型。随机分为7组：正常对照（control）组,羧甲基纤维素钠（carboxyl methyl cellulose-Na,CMC-Na）组,假手术（sham）组,I/R模型组,YHTJF低（low,L）、中（meddle,M）、高（high,H）浓度干预组。CMC-Na、sham和I/R组术前连续7 d腹腔注射CMC-Na溶液,YHTJF-L、YHTJF-M和YHTJF-H组术前连续7 d腹腔注射低、中、高浓度的YHTJF溶液。术毕,取左肺测定肺组织湿/干比值（W/D）及总肺含水量（TLW）,行肺泡损伤评估（IQA）;光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变;原位末端标记法（TUNEL）测组织细胞凋亡指数（AI）;RT-PCR和Western blot分别检测caspase-12和葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的mRNA和蛋白表达量。结果：相比control组,I/R组的W/D、TLW、IQA和AI明显升高（P〈0.01）,肺组织形态学破坏显著,caspase-12和GRP78的mRNA和蛋白表达量增加（P〈0.01）,而CMC-Na组和sham组各项指标与control组无明显差异;与I/R组比较,YHTJF-L组、YHTJF-M组和YHTJF-H组各项指标（除GRP78外）数值均下降（P〈0.01）,组织损伤明显减轻。结论：YHTJF可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,其机制可能与其抑制caspase-12通路所致凋亡有关。

解毒通络生津方治疗原发性干燥综合征血液系统损害的临床研究

目的:探讨解毒通络生津方治疗干燥综合征血液系统损害的疗效及安全性。方法:将72例原发性干燥综合征患者随机分为治疗组和对照组,每组36例。治疗组以解毒通络生津方联合羟氯喹治疗,对照组以醋酸泼尼松联合羟氯喹治疗。2组1个疗程均为12周。比较2组治疗前后血常规、红细胞沉降率、C-反应蛋白、补体、免疫球蛋白(Ig)、SSDDI评分、骨代谢、感染事件等,进行疗效及安全性评价。结果:治疗后,2组白细胞降低、贫血、血小板减少、红细胞沉降率、C-反应蛋白均有改善,但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组可升高补体C3,对照组可升高补体C4,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组治疗前后SSDDI评分均<4分,治疗前后均未出现其他系统损害。2组均可降低IgG,治疗组可降低IgA,对照组可降低IgM,但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组25羟基维生素D水平较基线值显著降低(P<0.05),治疗组无明显变化(P>0.05)。对照组的感染事件多于治疗组(P<0.05)。2组均可改善患者的中医症状,但治疗组疗效更显著(P<0.05)。结论:解毒通络生津方联合羟氯喹对干燥综合征血液系统损害有治疗作用,可改善患者的炎症指标、抑制自身免疫,对患者的骨代谢影响更小,安全性较好。

益气活血通络解毒方对肺缺血／再灌注损伤小鼠细胞凋亡及c—Jun氨基末端激酶通路的影响

目的观察益气活血通络解毒方（YHTJF）对小鼠肺缺血／再灌注（I／R）损伤（LIRI）的影响，并探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）是否参与其凋亡机制。方法选择雄性C57BL／6J小鼠70只，按随机数字表法分为正常对照组（C组）、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）＋正常对照组（CMC-Na＋C组）、CMC-Na＋假手术组（CMC-Na＋S组）、CMC-Na＋I/R模型组和CMC-Na＋YHTJF低、中、高浓度干预组（CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组）。C组不进行任何处理；CMC-Na＋S组只开胸，不夹闭肺门；其余各组均开胸夹闭肺门30min，再松开动脉夹使左肺再灌注3h。术毕处死小鼠留取肺组织，光镜和电镜下观察肺组织形态学及超微结构改变，并观察肺泡损伤定量评估指标（IQA）的变化；用原位末端缺刻标记试验（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡指数（AI）；用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）和反转录-聚酶链反应（RT-PCR）检测JNK、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的mRNA和蛋白表达；并分析肺组织AI与JNK、GRP78的mRNA和蛋白表达及IQA的相关性。结果CMC-Na＋I／R组IQA、AI及JNK和GRP78 mRNA和蛋白表达均较CMC-Na＋S组明显升高[IQA：（74．00±7．31）％比（7．00±1．23）％，AI：（64．40±11．97）％比（5．60±1．14）％，JNKmRNA（灰度值）：1．143±0．284比0．152±0．128，GRP78 mRNA（灰度值）：0．897±0．129比0．284±0．044，JNK蛋白（A值）：0．428±0．074比0．073±0．052，GRP78蛋白（A值）：1．075±0．145比0．589±0．060j，CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组IQA、AI、JNK mRNA和蛋白、GRP78mRNA表达均较CMC-Na＋I／R组明显下降，以CMC-Na＋YM组较CMC-Na＋YL和CMC-Na＋YH组下降程度更显著[IQA：（26．20±3．35）％比（34．00±5．34）％、（41．20±9．18）％，AI：（29．40±3．05）％比（48．20±3．83）％、（39．20±6．14）％，JNK mRNA（灰度值）：0．681±0．130比0．804±0．153、0．938±0．11，GRP78 mRNA（灰度值）：0．450±0．105比0．747±0．231、0．566±0．115，JNK赁白（A值）：0．188±0．049比0．261±0．065、0．209±0．063，均P〈0．01]，CMC-Na＋YH组、CMC-Na＋YL组和CMC-Na＋YM组GRP78蛋白表达较CMC-Na＋I／R组明显升高，以CMC-Na＋YH组升高程度较CMC-Na＋YL组和CMC-Na＋YM组更显著（A值：1．429±0．226比1．130±0．169、1．128±0．177，均P〈0．01）。光镜下可见各组细胞凋亡以肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞为主，棕色颗粒为阳性细胞。电镜下可见：CMC-Na＋I／R组细胞核固缩并边集在核膜下，胞质浓缩，板层体减少、排空增多，细胞膜上微绒毛减少或消失，线粒体肿胀，肺泡隔及毛细血管内炎性细胞附壁增多。与CMC-Na＋I／R组比较，CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组肺组织超微结构损伤减轻，肺泡结构超微结构清晰可辨，核染色质较均匀，胞质增多，Ⅱ型肺泡上皮细胞表面微绒毛较多，板层小体数量增多，线粒体肿胀减轻，以CMC-Na＋YM组减轻最明显。肺组织AI与JNK、GRP78的mRNA和蛋白表达、IQA均呈显著正相关性（r值分别为0．907、0．928、0．880、0．712、0．911，均P〈0．01）。结论YHTJF可有效减轻小鼠LIRI肺组织细胞的凋亡，其机制可能与抑制JNK通路有关。

解毒通络调肝方对2型糖尿病大鼠体重及血糖的影响

目的:观察解毒通络调肝方对2型糖尿病模型大鼠体重及血糖的影响。方法:以自发性2型糖尿病ZDF大鼠为研究对象,将55只健康雄性ZDF大鼠随机分为5组:模型对照组、盐酸二甲双胍组及解毒通络调肝方小剂量组、中剂量组、大剂量组;ZL大鼠为空白对照组。空白对照组与模型对照组使用生理盐水灌胃,其余各组使用相应药物灌胃,动态观察大鼠体重,并于取材后观察血糖变化。结果:各组ZDF大鼠与ZL大鼠体重差异有统计学意义(P<0.01),ZDF各组大鼠糖化血清蛋白与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:解毒通络调肝方大剂量组对ZDF大鼠的体重有控制作用,中剂量组有良好的控制血糖作用,其降糖作用效果优于西药组。