重复经颅磁刺激对阿尔茨海默病小鼠海马齿状回钾离子通道的影响

背景:经颅磁刺激已经被用于治疗阿尔茨海默病,但其机制尚未完全明确。目的:分析重复经颅磁刺激对阿尔茨海默病小鼠海马齿状回神经兴奋性的作用机制。方法:采用随机数字表法,将16只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=8)、对照+磁刺激组(n=8),将16只APP/PS1小鼠随机分为痴呆组(n=8)、痴呆+磁刺激组(n=8),对照+磁刺激组与痴呆+磁刺激组给予重复经颅磁刺激,2 h/d,连续刺激14 d。磁刺激结束后,采用水迷宫实验检测小鼠认知能力,全细胞膜片钳技术采集动作电位,分析阿尔茨海默病对动作电位的影响;全细胞膜片钳技术采集钾离子通道电流,分析其动力学特性对神经兴奋性的作用。结果结论:①水迷宫实验结果显示,正常小鼠接受重复经颅磁刺激后能够更加精准地找到确定原平台位置,阿尔茨海默病导致小鼠学习记忆能力下降,找到平台次数下降,海马齿状回神经元退化,而重复经颅磁刺激可提高阿尔茨海默病小鼠的学习记忆能力;②全细胞膜片钳技术检测结果显示,重复经颅磁刺激能够使阿尔茨海默病小鼠神经元更容易发生去极化,使神经元更易兴奋;③钾离子通道电流分析结果显示,阿尔茨海默病使得瞬时外向钾通道半数激活电压增大,失活曲线向着去极化方向偏移,复活时间常数延长,使得延迟整流钾通道激活曲线向着去极化的方向偏移,而重复经颅磁刺激干预延迟了钾离子通道的打开与关闭,抑制了细胞内钾离子的外流,使得细胞内保持较高浓度K^(+),提高了神经元兴奋性;④结果表明,重复经颅磁刺激可能通过提高海马齿状回颗粒神经元兴奋性来缓解认知能力的衰退。

反式钙钛矿太阳电池中钾离子掺杂NiO提升电荷收集能力研究

反式钙钛矿太阳电池(perovskite solar cell,PSC)是当前钙钛矿电池领域的重点发展方向,其中,NiO作为一种无机空穴传输材料,具有良好的化学稳定性,被广泛用于制备反式结构器件.然而,由于NiO的电导率和空穴迁移率相对较低且与钙钛矿薄膜的界面接触较差,使其在实现高性能反式PSC方面存在困难.为克服上述问题,本工作采用乙酸钾为钾源,通过在NiO纳米晶中掺入钾离子(K+)有效提升了NiO的电导率和空穴迁移率.此外,掺杂K+后,NiO与钙钛矿薄膜之间具有更好的界面接触,光生电荷的分离更有利.实验结果表明,最优的K+掺杂摩尔分数为3%,经过K+掺杂后电池效率从15.15%提高到16.75%,这主要得益于短路电流密度和填充因子的提升.

细胞凋亡、坏死和焦亡信号网络关键节点的识别

细胞死亡作为一项基本的生命过程,在生物体的发育、自稳态和病理方面有重要作用.寻找细胞死亡信号通路中的关键节点一直是领域的研究焦点,而信号网络的构建及分析可为其提供重要的理论参考.主要关注凋亡、坏死和焦亡这3种研究最多的细胞死亡方式.首先从已发表文献和生物信息数据库中获取初步数据,对数据进行文本处理,利用处理后的数据构建凋亡、坏死和焦亡的信号网络.然后分别计算各网络的度中心性、介数中心性、接近中心性和特征向量中心性指标,并利用k-壳分解和社团发现方法对节点进行不同的划分.最终综合上述方法所得结果,鉴定出各网络中的关键节点.

CK20及Cathepsin K在肾脏具有嗜酸细胞形态肿瘤中的表达及意义

目的分析并探讨CK20及Cathepsin K在肾脏具有嗜酸细胞形态肿瘤中的表达及意义。方法回顾性分析155例肾脏肿瘤,具有嗜酸细胞形态的包括:34例嫌色性肾细胞癌嗜酸细胞亚型、17例肾脏嗜酸细胞瘤、16例小眼畸形相关转录因子家族易位性肾细胞癌、6例嗜酸性实性囊性肾细胞癌、5例肾脏上皮样血管平滑肌脂肪瘤、4例肾脏低级别嗜酸细胞肿瘤、3例延胡索酸水合酶缺陷型肾细胞癌、6例未能分类的嗜酸性肾肿瘤。并将44例I型乳头状肾细胞癌、20例透明细胞性肾细胞癌作为对照,观察CK20及Cathepsin K在上述肿瘤中的表达情况。结果CK20及Cathepsin K在上述肿瘤中表达结果基本相似,在多种嗜酸细胞形态肾肿瘤中呈现高阳性率,在对照组中呈现阴性及低表达。结论CK20及Cathepsin K在诊断肾脏伴有嗜酸细胞形态的肿瘤时,缺乏特异性,并不能作为包括嗜酸性实性囊性肾细胞癌在内的具体某一类型的特异性标记,但两个抗体同时阳性能够对嗜酸细胞形态的肾肿瘤初步分类,有助于进一步分析和诊断。

银杏内酯K调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对乳腺癌细胞自噬和凋亡的影响

目的 探讨银杏内酯K(GK)调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对乳腺癌细胞自噬和凋亡的影响。方法 取对数生长期的MCF-7细胞,设置分组为对照组、GK低浓度(GK-L,12.5μg/mL)组、GK中浓度(GK-M,25μg/mL)组、GK高浓度(GK-H,50μg/mL)组、GK-H+AMPK抑制剂(Compound C,50μg/mL GK+50μmol/L Compound C)组。观察各组细胞形态以及细胞增殖、凋亡、自噬状况并分析自噬相关基因LC3、P62、Beclin1 mRNA表达以及AMPK、p-mTOR、mTOR、p-ULK1、ULK1、LC3、P62、Beclin1表达。结果 与对照组相比,GK-L、GK-M、GK-H组细胞自噬泡数量增多,增殖率、p-mTOR/mTOR、p-ULK1/ULK1、p62表达显著下降,凋亡率、LC3、Beclin1表达、AMPK蛋白表达显著增加(P<0.05);与GK-H组相比,GK-H+Compound C组细胞自噬泡数量减少,增殖率、p-mTOR/mTOR、p-ULK1/ULK1、p62显著增加,凋亡率、LC3、Beclin1表达、AMPK蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 GK可以诱导乳腺癌细胞自噬和凋亡、抑制其增殖,可能与激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路有关。

维生素K、快速CRP、WBC在儿童腹泻感染类型诊断中的价值探究

目的探究维生素K、快速C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)在儿童腹泻感染类型诊断中的价值。方法选取腹泻患儿90例,按照病原体不同分为细菌性腹泻组(n=58)、病毒性腹泻组(n=17)和非感染性腹泻组(n=15),选取同期体检的90例健康者为对照组。对比各组维生素K、CRP、WBC水平,并评价上述指标对儿童腹泻感染类型的诊断价值。结果腹泻组CRP、WBC水平均高于对照组,维生素K水平低于对照组(P<0.05);治疗后CRP、WBC水平低于治疗前,维生素K水平高于治疗前(P<0.05);细菌性腹泻组CRP、WBC水平均大于病毒性腹泻组和非感染性腹泻组,维生素K水平低于病毒性腹泻组和非感染性腹泻组(P<0.05);病毒性腹泻组CRP、WBC水平均大于非感染性腹泻组,维生素K水平低于非感染性腹泻组(P<0.05);细菌性腹泻组CRP、WBC及维生素K阳性率均高于病毒性腹泻组和非感染性腹泻组(P<0.05);CRP、WBC、维生素K水平及三者联合诊断对儿童细菌性腹泻与非细菌性腹泻诊断的ROC曲线显示,CRP、WBC、维生素K水平的最佳截断值分别为5.13mg/L、11.06×10^(9)/L、0.081ng/mL时,联合诊断的AUC为0.776均高于单独诊断的0.685、0.682、0.693(P<0.05)。结论维生素K、CRP、WBC联合检测对儿童细菌性腹泻与非细菌性腹泻的诊断具有一定临床意义。

骨质流失与血管钙化的相关性研究进展

在老年人、糖尿病以及慢性肾衰竭人群中,骨质流失和血管钙化常同时存在。越来越多的证据表明,血管钙化与骨质流失可能存在共同的病理生理机制,血管钙化与骨代谢存在高度临床相关性。血管钙化是钙和磷酸盐沉积的过程,血管平滑肌细胞(VSMC)在多种理化因素的作用下丧失收缩表型,最终完全转变为成骨细胞。血清甲状旁腺素(PTH)、磷、维生素K、基质Gla蛋白(MGP)等与RANK/RANKL/OPG系统和Wnt/β-catenin通路相互作用。血管钙化与骨质流失的关系错综复杂,涉及多种通路、因子、内环境及局部微环境等的改变,对其作用机制的研究,将有利于血管钙化早期诊断和治疗。基于此,本文对血管钙化与骨质流失的关系展开综述,深入了解其病理生理机制。

盐霉素通过Na^(+),K^(+)-ATP酶诱导脂肪干细胞和肝癌干细胞胀亡的作用机制研究

目的观察脂肪干细胞(ASCs)和肝癌干细胞(HCCSCs)对盐霉素处理的反应,探讨Na^(+),K^(+)-ATP酶在盐霉素选择性杀伤ASCs和HCCSCs中的作用。方法采用CCK-8、Transwell实验分析盐霉素对ASCs及HCCSCs的细胞毒性反应,显微镜下观察细胞形态变化,采用Na^(+),K^(+)-ATP酶检测试剂盒测定细胞内Na^(+)和K^(+)离子浓度,通过ATP检测试剂盒测定细胞内ATP浓度。采用Western blot法分析Na^(+),K^(+)-ATP酶各亚基及细胞上皮间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平。通过上述方法验证盐霉素通过调控Na^(+),K^(+)-ATP酶诱导ASCs和HCCSCs胀亡(细胞肿胀、坏死)的作用机制。结果盐霉素选择性诱导ASCs和HCCSCs胀亡。在胀亡的ASCs和HCCSCs中,细胞内ATP浓度显著下降,伴随Na^(+),K^(+)-ATP酶活性丧失和细胞内Na^(+)滞留。所有类型的Na^(+),K^(+)-ATP酶亚基在ASCs中均有表达,而在盐霉素诱导分化的ASCs中仅表达α1和β1亚基。β1亚基的丧失是阿霉素诱导肝癌Huh-7细胞EMT的关键事件,相反β1亚基的过表达可以抑制阿霉素诱导的Huh-7细胞EMT。结论Na^(+),K^(+)-ATP酶的活性差异是盐霉素对干细胞产生选择性细胞毒性的原因,且β1亚基是肝癌EMT过程中一个重要因素。Na^(+),K^(+)-ATP酶亚基对ASCs和HCCSCs的干性及癌症干细胞样的EMT过程起关键作用。

YTHDC1介导的CENPK调节人宫颈癌细胞侵袭和增殖

目的:找寻宫颈癌的预测、治疗靶点,探究靶点与N6-甲基腺苷(m6A)核酸修饰之间的联系及发挥的生物学功能。方法:在GEPIA2数据库提供的数据中筛选宫颈癌差异表达的基因。EdU实验、划痕实验以及Transwell实验分别检测着丝粒蛋白K(CENPK)对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。RNA m6A修饰的定量测定结合蛋白质印迹法研究m6A修饰与CENPK高表达的关系。结果:CENPK在宫颈癌组织中上调(P<0.05)。沉默CENPK基因导致宫颈癌细胞增殖能力下降,抑制了细胞迁移和侵袭(P<0.01)。m6A阅读器YTH域包含蛋白1(YTHDC1)通过降低CENPK蛋白的表达在宫颈癌细胞中发挥作用(P<0.01)。结论:CENPK可能是一个潜在的宫颈癌治疗靶点。

Sev对低氧缺糖诱导的脑神经元细胞损伤的影响

目的 研究七氟醚(Sev)调控Toll样受体4 (TLR4)/核转录因子κB (NF-κB)信号通路抑制低氧缺糖对脑神经元细胞损伤的保护作用。方法 将大鼠皮质神经元细胞分为对照组、模型组、1.0MAC和2.0 MAC七氟醚组;细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。试剂盒检测丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-8 (IL-8)水平;蛋白印迹法(Western blot)检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、TLR4、磷酸化核因子κB抑制蛋白α (p-IκBα)和核因子κB抑制蛋白α (IκBα)蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组细胞存活率、SOD、CAT活性降低(均P<0.05),凋亡率、MDA含量、TNF-α、IL-6、IL-8水平升高(P<0.05),TLR4、p-IκBα蛋白表达升高;与模型组比较,Sev显著升高细胞存活率、SOD、CAT活性(P<0.05),显著降低细胞凋亡率、MDA含量、TNF-α、IL-6、IL-8水平(P<0.05),TLR4、p-IκBα蛋白表达降低(P<0.05)。结论Sev可减轻低氧缺糖诱导的脑神经元细胞损伤,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

β-榄香烯诱发肿瘤细胞凋亡的研究

目的 :探讨 β -榄香烯的抗癌疗效及其作用机制。方法 :采用MTT方法、Hoechst3334 2和PI荧光染色法、电镜及流式细胞术分析法 ,发现 β-榄香烯乳剂对K562 细胞生长的影响。结果 :β -榄香烯明显抑制K562 细胞的生长 ,对K562 细胞的半数生长抑制剂量 (IC50 )为 17.14μg/ml。其抑制细胞生长能力主要是通过诱导细胞凋亡 ,并且呈浓度和时间依赖性。在影响细胞周期方面 ,主要使G1期细胞数目增多 ,S期细胞数目下降。结论 :β -榄香烯诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用机制的重要方面之一。

雄黄诱导K_(562)细胞凋亡的研究

目的检测雄黄诱导Ｋ５６２细胞的能力。方法应用形态学观察、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪（ＦＣＭ）检测细胞凋亡。利用ＦＣＭ分析细胞周期并测定Ｋ５６２细胞线粒体膜ＡＰＯ２．７蛋白表达。结果雄黄可以诱导Ｋ５６２细胞产生凋亡现象，并导致Ｓ期细胞降低。

hnRNP K调控细胞自噬参与急性髓系白血病阿霉素耐药研究

目的:探索核内不均一的核糖核蛋白K(hnRNP K)调控细胞自噬参与急性髓系白血病耐药机制,为白血病治疗提供新的分子标志物。方法:应用荧光定量PCR技术,分别从临床标本及细胞株水平验证hnRNP K与髓系白血病耐药的关系;利用RNA干扰技术调节hnRNP K的表达水平,Western blot方法检测细胞自噬相关蛋白LC3I/Ⅱ表达变化,并进一步检测hnRNP K调控前后细胞对化疗药物(阿霉素)的敏感性。结果:在骨髓未缓解及复发的原代细胞及耐药细胞株中,hnRNP K的表达水平明显增高,而细胞自噬相关蛋白LC3I/Ⅱ表达水平也明显升高,将hnRNP K的表达水平降低后,LC3I/Ⅱ蛋白水平亦降低,而细胞对于阿霉素的敏感性可以恢复。结论:hnRNP K可能通过调控细胞自噬参与急性髓系白血病阿霉素耐药的形成。

粉防己碱诱导人红白血病细胞凋亡的研究

目的 探讨粉防己碱诱导人红白血病细胞 (K56 2 )凋亡的作用。 方法 采用光镜、电镜、免疫荧光观察K56 2 细胞形态的改变 ,以流式细胞仪分析细胞周期 ,以ABC法检测细胞中Bcl 2和p5 3蛋白的改变 ,以TUNEL法检测细胞凋亡。 结果 K56 2 细胞经粉防己碱诱导 4 8h后 ,出现细胞凋亡早期形态学改变 ;流式细胞仪显示细胞DNA合成受到抑制 ;ABC法检测出细胞中Bcl 2水平降低和p5 3水平升高 ;TUNEL法原位检测揭示有DNA断裂。结论 粉防己碱可抑制K56 2 细胞的生长 ,其作用与浓度相关 。

槲寄生凝集素对肿瘤细胞细胞周期的影响

目的通过体外实验研究槲寄生凝集素对肿瘤细胞的细胞毒性作用。方法采用MTT比色分析法测定槲寄生凝集素注射液对肿瘤细胞生长曲线的影响 ;采用流式细胞仪技术检测槲寄生凝集素注射液对肿瘤细胞细胞周期的影响。

钠钾ATP酶抑制剂通过调节DNA损伤感应复合体Mre11/Rad50/Nbs1的表达诱导肝癌HepG2细胞周期阻滞

目的研究钠钾ATP酶抑制剂华蟾毒配基(cinobufagin)对人肝癌HepG2细胞DNA损伤修复阻断及其发生机制。方法免疫组化分析人肝癌临床组织标本、正常肝组织中钠钾ATP酶α1亚单位的表达;以人肝癌细胞HepG2为靶细胞,实验分为对照组、5μmol·L^(-1)华蟾毒配基作用6、12和24 h组;单细胞电泳检测DNA双链断裂,Real time-PCR和Western blot检测损伤修复基因Mre11、Rad50、Nbs1和p53的表达变化,流式细胞术检测细胞周期。结果肝癌组织钠钾ATP酶α1亚单位表达与癌旁组织相比明显升高(P<0.05);华蟾毒配基诱导HepG2细胞DNA断裂的发生率与作用时间高度相关,作用时间延长断裂效应更加明显(P<0.05),Mre11,Nbs1,Rad50和p53表达随药物作用时间延长逐渐升高(P<0.05),流式细胞术分析细胞周期对照组S期细胞比例为(21.32±4.21)%,5μmol·L^(-1)华蟾毒配基处理6 h后为(33.25±5.72)%,处理12 h后为(56.72±6.29)%,作用24 h后为(67.32±9.42)%。结论华蟾毒配基激活Mre11/Rad50/Nbs1损伤感应复合体介导肝癌Hep G2细胞周期阻滞。

HSP70高表达对K_(562)细胞热耐力的影响

为探讨HSP70高表达与细胞热耐力的关系 ,用硫酸镉诱导细胞HSP70高表达 ;RT -PCR检测HSP70mRNA水平 ;观察HSP70水平对细胞热耐力的影响。结果 :硫酸镉作用于细胞 1h后 ,细胞的HSP70水平显著增高 ,HSP70水平高的细胞其热耐力明显强于HSP70水平低的细胞组 ;HSP70水平于细胞热耐力间正相关。结论 :化学因素诱导的HSP70表达增高可以保护热暴露细胞 ,提高细胞热耐力。

莪术油诱导K-562细胞凋亡分子机制的实验研究

目的探讨莪术油(OCW)诱导慢性粒细胞白血病(CML)细胞株K-562凋亡及可能的分子机制。方法以不同浓度OCW(0,2.5,5,10和20 mg/mL)处理K-562细胞24 h后,光镜下观察形态学改变;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Hoechest33258荧光染色及FITC-AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡率;半定量RT-PCR及Western blot方法检测bcr/abl、bcl-2、p53、Fas/FasL表达的变化。结果OCW明显抑制K-562细胞增殖,诱导细胞凋亡,与浓度呈正相关;各组药物干预后Fas/FasL基因在mRNA和蛋白水平呈浓度依赖性上调,而bcr/abl、bcl-2、p53基因表达无明显变化。结论不同浓度OCW能有效诱导K-562细胞凋亡,其作用可能通过Fas/FasL途径而实现的,与bcr/abl、bcl-2、p53基因无明显相关。

姜黄素对人类红白血病细胞(K_(562))的抑制及诱导分化作用

用人类红白血病细胞（Ｋ５６２）为材料，通过细胞计数、ＭＴＴ法测定，形态学观察、ＮＢＴ还原试验及联苯胺反应等方法检测了不同浓度姜黄素对体外人Ｋ５６２细胞的作用。结果表明，姜黄素对Ｋ５６２细胞有明显的抑制作用，随浓度增加，抑制作用逐渐增强。形态学观察可见轻微诱导分化作用。鉴于姜黄素对人类红白血病细胞兼有轻微诱导分化和增殖抑制作用，提示姜黄素有可能应用于人类红白血病的治疗。

青黛复方对K-562细胞Bcr/Abl融合基因及p210蛋白表达的影响

目的探讨青黛复方对K-562细胞调亡、Bcr/Abl融合基因及p210蛋白的影响。方法以不同浓度青黛复方(0、2.5、5、7.5、10和20mg/ml)处理K-562细胞24h后,采用半定量RT-PCR技术检测各组Bcr/Abl融合基因的表达,Western blot技术检测p210Bcr/Abl蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随药物作用浓度升高,K-562细胞凋亡率呈浓度依赖性增加;Bcr/Abl在mRNA和蛋白水平均呈浓度依赖性下调,尤以10mg/ml和20mg/ml处理组更为显著。结论青黛复方能部分抑制K-562细胞Bcr/Abl的表达并呈浓度依赖关系,其对慢性髓细胞性白血病(CML)的疗效可能是通过促进细胞凋亡而实现的。