TRPC1与BK-α的表达对大鼠糖尿病肾病的影响

目的 探究瞬时受体电位C1(transient receptor potential channel 1,TRPC1)蛋白和大电导钙离子激活钾通道α亚单位(large conductance Ca^(2+)-activated K^(+)channel α subunit,BK-α)蛋白对大鼠糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组(n=15)和模型组(n=15)。利用高脂饲料和链脲佐菌素(streptozocin,STZ)构建DKD模型。采用血糖分析仪检测大鼠血糖变化;采用全自动生化分析仪检测大鼠肾功能水平;HE染色检测肾组织的病理变化以确定造模成功。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹分别检测肾组织TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白表达水平;免疫组化检测TRPC1和BK-α的分布和表达情况。结果 模型组大鼠空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rates,UAER)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,Cr)均显著高于对照组(P <0.01);模型组大鼠肾小管内壁细胞出现膨胀现象,部分细胞脱离;可见肾小管发生病变或死亡;此外,在许多肾小管及肾间质区域发现有中性白细胞及其残骸;以上HE染色结果提示,DKD模型复制成功。TRPC1和BK-α在肾小球部位最为丰富,且模型组大鼠肾组织中TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白水平都显著高于对照组(P <0.05)。结论 大鼠糖尿病肾病影响TRPC1和BK-α在肾组织中的分布和表达。

外用维生素K防治靶向表皮生长因子受体单抗相关性皮疹有效性和安全性系统评价

目的系统评价外用维生素K预防和治疗靶向表皮生长因子受体(EGFR)单抗相关性皮疹的有效性和安全性。方法检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、Web of Science、中国知网、维普和万方数据库,检索时限为各数据库自建库起至2022年4月。筛选文献、提取数据,评价文献质量,对结果数据进行描述性分析或采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果纳入12项研究。涉及的EGFR单抗主要为西妥昔单抗,外用维生素K的剂型主要是乳膏,给药方法多为浓度0.05%~0.1%的维生素K每天外用1次或2次,大部分研究所用维生素K亚型为K1。3项对照试验的Meta分析结果显示,相比对照组,试验组≥2级皮疹的发生率未显著降低[RR=1.18,95%CI(0.96,1.45),P=0.12],同时凝血功能异常及其他皮肤不良事件发生率也无显著差异;除3项对照试验外,纳入的病例系列结论虽均认为外用维生素K可降低≥2级皮疹的发生率,并缩短皮疹持续时间,但以上研究未设置对照组,不能排除外用制剂中保湿剂等辅料的保护作用。结论当前证据表明,浓度0.05%~0.1%的维生素K每天外用1次或2次预防和治疗靶向EGFR单抗相关性皮疹有效性不明确,也未见额外的安全性问题。未来需在维生素K给药剂量、频次、人群分层等方面进一步探索。

κ－阿片激动剂增高心室易颤性及其机制

研究结果表明，在离体心脏Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ模型，κ－阿片激动剂Ｕ５０４８８Ｈ可降低心室颤动阈（ＶＦＴ）、有效不应期（ＥＲＰ）和舒张期兴奋阈（ＤＥＴ）；且可被特异。桔抗剂ＭＲ２２６６所阻断。硝苯吡啶和细胞外低钙预处理可取消Ｕ５０４８８Ｈ的心脏作用。Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ预处理可取消Ｕ５０４８８Ｈ对ＥＰＰ和ＤＥＴ的作用，但不能取消其降低ＶＦＴ的作用、结果提示，Ｕ５０４８８Ｈ激活κ－受体具致心律失常作用，这一作用主要依赖于跨膜钙内流。

多巴胺D_3受体对SHR大鼠肾脏内皮素B受体的异常调节在高血压发生中的作用

目的探讨多巴胺D3受体对肾脏内皮素B(ETB)受体表达及功能的调节与高血压(EH)发生的关系。方法分别以D3多巴胺受体基因敲除(D3-/-)小鼠和肾脏近曲小管上皮细胞(RPT)株为研究对象,观察刺激D3受体后ETB受体蛋白表达和功能的变化,D3受体的蛋白表达采用免疫印迹测定,ETB受体的功能采用Na+-K+-ATP酶活性表示。结果D3-/-小鼠肾脏皮质ETB受体的蛋白表达(0·8±0·2)DU明显低于对照小鼠[(1·2±0·1)DU,P<0·05,n=5];D3受体兴奋剂PD128907(10-7mol/L·24h)刺激D3受体可增加Wistar-Kyoto(WKY)大鼠RPT细胞ETB受体的表达,却抑制自发性高血压(SHR)大鼠ETB受体的表达[WKY(对照1·0±0·1比PD1289071·5±0·1)DU;SHR(对照1·0±0·1比PD1289070·7±0·2)DU;n=9,P<0·05]。用ETB受体激动剂BQ3020(10-8mol/L·15min)刺激ETB受体可明显降低WKY大鼠RPT细胞的Na+-K+-ATP酶的活性,但在SHR的RPT细胞,这种抑制作用却丧失;基础状态下SHR的Na+-K+-ATP酶活性明显高于WKY大鼠。预先刺激D3受体均可使ETB受体对Na+-K+-ATP酶活性的抑制作用进一步加强,但这种作用在WKY的RPT细胞明显强于SHR的RPT细胞(下降幅度SHR9·1%比WKY16·9%)。结论D3受体通过对ETB受体蛋白表达的调节作用,从而调控ETB受体的功能,D3/ETB受体之间的异常调节参与了EH发生的发病机制。

运动时糖皮质激素分泌增多对大鼠心、肾糖皮质激素受体及 Na^+-K^+-ATP 酶的影响和机制分析

本文研究急性运动后糖皮质激素(GC)分泌增多对大鼠心、肾细胞糖皮质激素受体(GR)及Na^+-K^+-ATP 酶的影响,结果表明,无负荷游泳后造成 GR 的适度减少,伴有对 Na^+-K^+-ATP 酶的诱导加强,其发生可分别被 Trilostane 和 RU_(A86)抑制;6%体重负荷游泳1h 后,出现 GR 过度减少并伴有血浆 GC 对靶细胞 Na^+-K^+-ATP 酶诱导抑制,提示靶细胞对 GC 抵抗。本文提出运动时 GR 过度下降是限制机体运动能力的一个重要因素。

绝经后骨质疏松症相关骨代谢指标的分析

目的观察调控破骨细胞活性的主要因子和骨吸收及骨形成标志物在绝经后骨质疏松症(PMOP)患者体内水平的变化,为临床早期防治骨质疏松提供依据。方法测定38例PMOP患者、50例骨量减低患者及94名绝经后骨量正常者(正常对照组)血清骨保护素(OPG)、核因子-kβ受体活化因子配体(RANKL)、骨源性碱性磷酸酶(BAP)、血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)-5b、雌二醇(E2)、血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平。剔除年龄、E2因素后对部分指标进行偏相关分析;对所有指标进行独立危险因素分析及二分类Logistic回归分析;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价诊断准确度。结果 PMOP组、骨量减低组与正常对照组之间E2、Hcy、OPG、RANKL、TRACP-5b、BAP水平差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01、P<0.001);PMOP组BAP水平明显高于骨量减低组及正常对照组(P<0.001),E2水平则明显低于骨量减低组(P<0.001)及正常对照组(P<0.05)。正常对照组与骨量减低组之间E2、BAP水平无明显差异(P>0.05)。控制年龄因素后,E2与TRACP-5b、BAP呈负相关[r值分别为-0.198(P=0.007)、-0.157(P=0.035)];控制年龄、E2因素后,Hcy与RANKL、TRACP-5b、BAP呈正相关(r值分别为0.368(P<0.001)、0.193(P=0.009)、0.224(P=0.002)],与OPG呈负相关(r值=-0.330,P<0.001)。OPG与TRACP-5b呈负相关(r=-0.458,P=0.008),RANKL与BAP呈正相关(r=0.228,P=0.044)。E2、Hcy、OPG、RANKL、TRACP-5b、BAP诊断骨质疏松的ROC曲线下面积分别为0.819、0.686、0.803、0.776、0.731和0.719。骨质疏松影响因素的Logistic回归分析表明,独立于年龄,E2、OPG、TRACP-5b、Hcy对骨质疏松有显著影响,优势比(OR)分别为0.901、0.046、4.165、9.112。结论 TRACP-5b、Hcy和BAP对骨质疏松症的诊断准确度较好,可以作为临床早期防治PMOP的依据。

绝经后骨质疏松症相关骨代谢指标、细胞因子IGF-1的临床观察

目的检测绝经后骨质疏松症(PMOP)患者体内的骨代谢指标、细胞因子的水平变化。为临床早期防治骨质疏松提供有力依据。方法选取长春地区45-69岁绝经后女性108例,按照WHO标准将入选女性分为骨密度正常者组46例,骨密度减低者组30例,骨质疏松组32例,双能X线吸收法DEXA测定2-4腰椎BMD;测定108例受试者血清雌二醇(E2)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、骨碱性磷酸酶(BAP)及血清骨保护素(OPG)、核因子-k受体活化因子配体(RANKL)的水平,并进行相关性分析。结果 PMOP组、骨量减低组和正常对照组之间E2、OPG、RANKL、BAP、IGF-1差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。PMOP组BAP水平明显高于骨量减低组及正常对照组(P<0.01),E2水平明显低于骨量减低组(P<0.01)及正常对照组(P<0.05)。骨量减低组与正常对照组之间BAP和E2水平差异无统计学意义(P>0.05)。通过综合分析,E2与IGF-1呈显著正相关(r=0.562,P<0.01),与BAP呈负相关[r值分别为-0.15(P=0.034);RANKL与BAP呈正相关(r=0.224、P=0.036)。结论 E2、IGF-1、OPG、BAP、RANKL在PMOP临床诊治中有帮助,可作为其辅助指标。

k阿片受体激动剂抑制大鼠吗啡戒断症状的发生

用多次注射吗啡的方法造成大鼠对吗啡的依赖，给大鼠脊髓蛛网下腔（ｉ．ｔ．）注射ｋ（ｋａｐｐａ）阿片受体激动剂Ｕ－５０，４８８Ｈ（２．５、５、１０μｌ）或ｋ受体拮抗剂ｎｏｒ—ＢＮＩ（１．２５、２．５、５μｌ／１０μｌ）后，用纳洛酮（ＮＸ）催瘾，观察并记录四种戒断症状：湿科（ｗｅｔｓｈａｋｅｓ）、咬牙（ｔｅｅｔｈｃｈａｔｔｅｒｉｎｇ）、逃跑企图（ｅｓｃａｐｅａｔｔｅｍｐｔｓ）、体重丢失（ｗｅｉｇｈｔｌｏｓｅ）。结果表明Ｕ—５０，４８８Ｈ可以明显减轻湿抖、咬牙和逃跑企图，并呈量效关系；ｎｏｒ—ＢＮＩ则使温抖、咬牙和体重丢失三种症状明显加重，也呈量效关系。上述结果表明，激活脊髓。受体对吗啡戒断症状有明显的抑制作用，阻断Ｋ受体则加重戒断症状。

肠易激综合征的新药治疗初析

针对肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome IBS)主要症状采用相应的新药靶向治疗。其中包括通过改善胃肠转运 药物如止泻剂;改善内脏敏感性药如K受体激动剂、5-羟色胺(5-HT3,5-HT4)拮抗剂、生长激素抑制剂类似物及抗抑郁药 等。

Zacopride增强心肌内向整流钾电流(Ⅰ_(K1))效应的受体和信号转导通路

目的:探讨5-HT4受体激动剂兼5-HT3受体阻断剂zacopride增强心肌内向整流钾电流(IK1)效应的受体和细胞信号转导机制。方法:应用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞膜IK1电流,分别观察10μmol/L 5-HT4受体阻断剂RS23597-190、10μmol/L 5-HT3受体激动剂间氯苯双胍(m-CPBG)、5μmol/L PKA抑制剂KT5720、5μmol/L PKC抑制剂GF109203x和5μmol/L PKG抑制剂KT5823对zacopride增强IK1的影响。结果:10μmol/L 5-HT4受体阻断剂RS23597-190本身可抑制IK1电流,在预先应用RS23597-190的基础上,1μmol/Lzacopride仍可明显激动IK1通道,使其内向电流(-100 mV)增强32.5%(P<0.05)。10μmol/L 5-HT3受体激动剂m-CPBG对IK1电流无明显影响,也不能逆转1μmol/L zacopride对IK1的增强效应(P>0.05)。此外,5μmol/LPKA阻断剂KT5720能显著抑制1μmol/L zacopride对IK1的增强效应(P<0.05),而PKC阻断剂GF109203x和PKG阻断剂KT5823则对1μmol/L zacopride的效应无明显影响(P>0.05)。结论:Zacopride对IK1的增强作用可能经由PKA介导的信号转导通路,而不依赖于5-HT3和5-HT4受体。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因及k-ras基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)肿瘤组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因及k-ras基因突变与临床病理特征的关系。方法应用显微切割技术及蝎形探针扩增阻滞突变系统(scorpions amplification refractory mutation system,Scorpions ARMS)检测170例NSCLC石蜡包埋肿瘤组织中EGFR基因第18、19、20和21外显子突变及k-ras基因12、13密码子突变,统计分析EGFR及k-ras基因突变与不同组织类型NSCLC临床和病理特征的相关性。结果 Scorpions ARMS检测结果显示,170例NSCLC肿瘤组织中84例存在EGFR突变,突变检出率为49.4%,其中39例为EGFR第19外显子缺失改变,34例为EGFR第21外显子L858R点突变,3例为EGFR第21外显子L861Q点突变,4例为EGFR第20外显子插入突变,2例为EGFR第20外显子S768I点突变,另外2例为EGFR第20外显子T790M点突变和第21外显子L858R点突变同时存在。170例NSCLC肿瘤组织标本中检测到14例k-ras基因突变,检出率为8.2%,均位于12密码子,其中8例为12CYS点突变,3例为12ASP点突变,3例为12VAL点突变。未发现k-ras基因突变与EGFR基因突变发生在同一NSCLC肿瘤组织标本中。腺癌与非腺癌EG-FR基因突变比较差异具有统计学意义(P<0.001),突变更常见于腺癌。此外,比较EGFR基因突变与NSCLC各临床病理因素的关系,发现EGFR基因突变更常见于女性、不吸烟、肿瘤较小(≤3cm)且分化程度较好的NSCLC患者;然而,k-ras基因突变与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、组织学类型、肿瘤分化程度、淋巴结转移及pTNM分期等均无显著的相关性(P>0.05)。结论中国NSCLC患者的EGFR基因突变检出率明显高于其他国家,且女性、不吸烟、腺癌患者突变率较高;而k-ras基因突变的检出率很低,其突变与性别、年龄等临床病理特征无关;EGFR和k-ras基因突变不会同时存在同一患者中。吉非替尼疗效和耐药与EGFR和k-ras基因突变相关。Scorpions ARMS技术可快速、敏感、准确地检测EGFR与k-ras基因突变,能为临床治疗及预后提供重要信息。

人参皂苷代谢产物Compound K抑制TNF-α诱导的人支气管上皮细胞分泌RANTES

目的探讨人参皂苷代谢产物Compound K（CK）对炎症因子TNF-α诱导的人支气管上皮细胞BEAS-2B分泌调节活化正常T细胞表达和分泌趋化因子（RANTES）的影响及其机制。方法 ELISA法测定CK对BEAS-2B细胞上清液中RANTES含量的影响;采用RT-PCR和蛋白质免疫印迹技术检测RANTES mRNA及蛋白的表达情况;采用荧光素酶报告基因系统检测CK对活化蛋白转录因子1（activator protein 1,AP-1）和糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）转录抑制或转录激活的影响;运用GR拮抗剂米非司酮,验证CK对RANTES的抑制效应是否由GR介导。结果 3~30μmol/L的CK抑制了TNF-α诱导的RANTES分泌、mRNA及蛋白水平;CK抑制AP-1的转录激活,在BEAS-2B细胞中激活GR信号通路;并且,CK通过GR抑制了BEAS-2B细胞分泌RANTES。结论 CK能够抑制炎症因子TNF-α诱导的支气管上皮细胞分泌RANTES,其机制可能与激活GR、抑制AP-1对下游靶基因的调控有关。

腺苷受体激动剂对大鼠离体主动脉的作用及其机制

目的 研究不同腺苷受体 (A R)激动剂对大鼠离体主动脉环的作用及其机制。方法 分别给予A2 R激动剂CPCA和A1 R激动剂CPA ,观察离体主动脉环对 0 6 2 μmol·L-1去甲肾上腺素的反应 ,并观察它们的作用是否依赖于血管内皮、细胞外钙和ATP敏感性钾通道 (KATP)。结果 5 0 μmol·L-1CPCA可引起血管扩张 ,去除血管内皮或换用无钙营养液后此作用消失 ,KATP阻滞剂格列苯脲并不能阻断CPCA的血管扩张作用。CPA在 10 μmol·L-1浓度时不引起血管扩张 ,10 0 μmol·L-1浓度时有血管扩张作用 ,此作用在去除内皮后或换用无钙营养液后仍然存在 ,格列苯脲不能阻断此作用。结论 CPCA引起主动脉的扩张依赖于血管内皮和细胞外钙的存在 ,高浓度CPA则通过直接作用于平滑肌细胞而引起血管扩张 ,KATP均不参与A

表现为磨玻璃样病变的肺腺癌临床特点与EGFR及K-RAS基因突变的关系

目的探讨表现为磨玻璃样病变(GGO)的肺腺癌的临床特点与EGFR及K-RAS基因突变关系。方法连续选择37例经胸腔镜手术及病理证实为肺腺癌的肺GGO病例,分析其临床特点,检测EGFR与K-RAS基因突变情况,及与各临床因素之间的关系。结果 34例行肺叶切除术,3例行肺楔形切除术,术后病理结果显示:16例为原位腺癌,13例为微浸润腺癌,8例为浸润性腺癌。EGFR基因突变22例,K-RAS基因突变1例;在单纯型GGO及混合型GGO病例中,EGFR与K-RAS基因突变均无明显差异;在女性、不吸烟病例中EGFR基因突变相较男性及吸烟病例差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EGFR基因在表现为GGO的肺腺癌病例中表现出较高的突变率,为肺GGO病例临床治疗提供了重要参考。

咪唑啉结合位点及受体与心血管功能

人及大鼠心肌细胞存在 2 型咪唑啉结合位点 ,多种动物的血管平滑肌存在 1 型和 2 型咪唑啉结合位点 ,其中 2 型咪唑啉结合位点可能参与血管平滑肌的增殖。支配心血管系统的交感神经末梢存在突触前咪唑啉受体 ,激动该受体抑制NE的释放。与多数咪唑啉类化合物不同 ,莫索尼定对突触前咪唑啉受体无效 ,而大麻受体拮抗剂SR141716A对该受体具有拮抗作用。已经证实多数咪唑啉类化合物具有抗心律失常作用 ;咪唑啉受体的内源性配基胍丁胺降低动物窦房结起搏细胞的放电频率 ,延长人与动物心肌细胞的动作电位时程 ,对异丙肾上腺素诱发的后除极具有抑制作用。但是 ,咪唑啉类和胍类化合物非竞争性抑制心血管系统的KATP通道 ,可能干扰IK .ATP的心脏保护作用。

κ-银环蛇毒素敏感的烟碱受体激活引起的去甲肾上腺素释放参与烟碱诱导的长时程增强样反应(英文)

烟碱可以增强学习记忆功能,但其相关机制仍不清楚。海马长时程增强被认为是学习记忆的细胞机制。本研究室以往研究表明,当单脉冲的强度为诱发80%最大群体锋电位时,烟碱(10μmol/L)可以在海马CA1区诱导长时程增强样反应。本文通过细胞外记录离体海马脑片CA1区锥体细胞层群体锋电位,探讨烟碱诱导长时程增强样反应所涉及的烟碱受体亚型与相应的神经递质释放。结果显示,烟碱诱导的长时程增强样反应可以被美加明(mecamylamine,1μmol/L)或κ-银环蛇毒素(κ- bungarotoxin,0.1μmol/L)阻断,但不被dihydro-β-erythtroidine(DHBE,10μmol/L)阻断。烟碱诱导的长时程增强样反应可以被普萘洛尔(propranolol,10μmol/L)阻断,但不被酚妥拉明(phentolamine,10μmol/L)或阿托品(atropine,10μmol/L)阻断。以上结果提示,κ-银环蛇毒素敏感的烟碱受体激活引起的去甲肾上腺素释放参与烟碱诱导的海马CA1区长时程增强样反应。

氟对人体红细胞膜C3b,IC受体含量及Na^＋—K^＋ATP酶活性的影响

用花环法及酶学比色法检测了氟暴露工人红细胞膜Ｃ３ｂ受体，免疫复合物受体含量及Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶活性。结果表明氟暴露工人红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶活性明显低于对照组，但Ｃ３ｂ受体及免疫复合物受体与对照组比较差异无显著性。提示氟对红细胞具有一定的毒性作用。

刺激κ-阿片受体诱导的延迟性心肌保护作用

本研究利用-κ阿片受体激动剂U50488H预处理(U50488Hpretreatment,UP)大鼠,在离体Langendorff灌流心脏和缺血/复灌模型上观察-κ阿片受体激动剂诱发的延迟性心肌保护作用,研究结果表明U50488H预处理大鼠24h后,可明显改善心肌缺血后的复灌期内LVEDP的抬高,以及LVDP和±dP/dtmax的下降(P<0.05);其作用可被κ阿片受体选择性拮抗剂Nor-binaltorphimine(nor-BNI)所阻断。结论:刺激-κ阿片受体诱导了延迟性心肌保护作用。

U50,488H对大鼠腹主动脉的舒张作用及其机制

目的 观察 U5 0 ,488H(选择性 κ-阿片受体激动剂 )对大鼠腹主动脉的舒张作用 ,并探讨其机制 .方法 采用离体血管灌流实验 ,测定血管张力的改变 .结果 1U5 0 ,488H对大鼠腹主动脉具有明显的舒张作用 ;2 U5 0 ,488H对大鼠腹主动脉的舒张效应依赖于内皮细胞的存在 ;3优降糖可明显抑制 U5 0 ,488H对大鼠腹主动脉的舒张作用 ;4U5 0 ,488H的舒张血管效应与 M受体、β受体、前列腺素及 NO无关 .结论 U5 0 ,488H是一种有效的扩血管物质 ,其舒张血管的效应具有内皮依赖性 ,且与 K+

猪TOLL样受体2基因在CHO-K1细胞中的表达

将含猪TLR2(猪Toll样受体2,pTLR2)基因的真核表达载体PcDNA3.1/CT-GFP-pTLR2,采用脂质体法转染到CHO-K1细胞,用G418持续筛选获得了阳性细胞克隆.阳性细胞克隆系经PCR和RT-PCR检测表明:pTLR2基因得到稳定整合并能成功地转录.荧光显微镜观察,转染细胞可见绿色荧光,表明获得了表达pTLR2的克隆细胞系.