基于p16/ki67细胞学双染检测宫颈癌前病变的研究

目的探讨p16/ki67细胞学双染检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法收集妇科宫颈病变门诊患者56例为研究对象,所有患者均行宫颈液基细胞学检查(TCT)、人乳头瘤状病毒(HPV)检测、阴道镜活检,并进行p16/ki67双染,分析比较双染与TCT、HPV检查诊断宫颈病变的效能,并研究p16/ki67双染诊断宫颈病变的价值。结果在细胞学为非侵入式负荷监测(NILM)、不典型鳞状细胞(ASC-US)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)以上病变的分级患者中p16/ki67双染阳性的比例分别是15.38%、66.67%、92%,不同宫颈组织学诊断结果中慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)、宫颈上皮内瘤变Ⅱ级(CINⅡ)和Ⅲ级(CINⅢ)的患者中p16/ki67双染阳性率分别为6.66%、75%、78.57%、100%,总体差异有统计学意义(P<0.05)。结论p16/ki67免疫细胞化学染色阳性率与宫颈癌前期病变的严重程度呈现正相关。P16/ki67双染较TCT和HPV提高了宫颈病变筛查的灵敏性和特异性,并提高了高级别鳞状上皮内病变(HSIL)的检出率,减少阴道镜的转诊率,值得应用于临床。

PD-L1联合Ki67对非小细胞肺癌不同基因突变情况下分期、预后的影响

目的:探究TP53、EGFR和KRAS突变情况下PD-L1或Ki67异质性表达对非小细胞肺癌患者肿瘤分期分级及预后生存的影响。方法:基于TCGA数据库分析非小细胞肺癌TP53、EGFR和KRAS是否发生突变情况下PD-L1或Ki67表达;qRT-PCR和免疫组化(IHC)验证非小细胞肺癌患者肿瘤组织TP53、EGFR和KRAS突变与否情况下PD-L1或Ki67 mRNA和蛋白水平;TCGA数据分析PD-L1或Ki67异质性表达对患者肿瘤分期的影响,R软件绘制KM生存曲线和DCA曲线验证PD-L1或Ki67异质性表达对非小细胞肺癌TP53、EGFR和KRAS突变患者预后生存及临床模型预测效果的影响。结果:TCGA数据、qRT-PCR和IHC结果表明,TP53突变可导致PD-L1显著上调,而EGFR和KRAS突变后组织PD-L1变化不显著;TP53突变导致Ki67水平显著提高,但EGFR或KRAS突变显著降低Ki67水平;Ki67异质性表达对患者肿瘤分期分级具有显著影响,KM生存曲线表明PD-L1或Ki67异质性表达不影响患者预后,但DCA预测模型中Ki67或Ki67联合PD-L1预测模型的效果更好。结论:Ki67异质性表达显著影响患者肿瘤分期,Ki67或Ki67联合PD-L1预测模型能更好预测患者预后。

核增殖抗原表达基因Ki67与人肺癌临床病理生理特征及其预后的关系

目的 研究细胞增殖状态与肺癌临床病理生理特征和预后的关系 ,探讨 Ki6 7对临床诊断和预后判断的价值。 方法 应用免疫组织化学法检测 16 6例肺癌组织标本和 37例肺良性病变组织中 Ki6 7的表达水平。 结果 (1)肺癌组织中 Ki6 7指数显著高于肺良性病变组织 (P<0 .0 1) ,而癌旁组织与良性病变组织相比差别无显著性意义 ;(2 )肺癌组织中 Ki6 7表达水平增强与肺癌组织学类型、细胞分化程度有关 (P<0 .0 5 ) ,而与患者 PTNM分期、淋巴结转移程度、吸烟与否以及患者的性别、年龄无明显关系 ;(3) Ki6 7高表达组肺癌患者的术后生存时间显著低于低表达组 (P<0 .0 1) ,按 PTNM分期分层后这种差别仍然存在 (P<0 .0 5 )。 结论 Ki6 7能较好地反映肺癌细胞的增殖状态 。

新辅助化疗对乳腺癌p170、Ki67、p53的影响

目的了解乳腺癌对新辅助化疗的反应性以及与相关生物学标志物的关系并探讨其机制。方法37例新诊断为T2-3N0-1M0期的乳腺癌患者术前给予CTF(cyclophosphamide,环磷酰胺;pirarubicin,吡喃阿霉素;5-fluorouracil,氟尿嘧啶)方案化疗2个周期,在化疗前、后分别观察癌组织中p170、Ki67、p53的表达情况及与化疗疗效的关系。结果本组患者经2个周期化疗后,部分缓解和轻度缓解分别为27.0%和54.1%;化疗前p170的表达率为18.9%,经化疗后表达率升高至43.2%(P<0.05);Ki67在化疗前、后表达率分别为32.4%和10.8%(P<0.05);p53无明显变化。结论CTF方案新辅助化疗有一定疗效,经化疗后反映残留癌细胞多药耐药的p170表达呈增加趋势,而反映细胞增殖的Ki67表达呈下降趋势。

Ki67基因RNA干扰增殖型腺病毒对肺癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨Ki67基因小干扰RNA(Ki67-siRNA)增殖型腺病毒对肺癌细胞的杀伤作用及Ki67的表达情况。方法提取重组腺病毒的DNA,PCR鉴定正确后,大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。ZD-Ki67感染人肺癌细胞系(A549),通过荧光显微镜下观察和结晶紫染色法检测细胞病作用、MTT法检测细胞存活、Western印迹法检测E1A、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ki67表达。结果PCR鉴定表明ZD55-Ki67包含目的基因且无野生型腺病毒的污染;ZD55-Ki67滴度为4.5×1010PFU/ml;免疫印迹法证实ZD55-Ki67在肿瘤细胞中表达E1A;ZD55-Ki67抑制Ki67表达及肺癌细胞生长的作用显著优于Ad-Ki67。结论ZD55-Ki67能够有效抑制Ki67基因的表达,降低肺癌细胞的增殖能力,为肺癌研究和抗肿瘤基因治疗提供新的策略。

PTTG基因及Ki67抗原在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨PTTG基因和Ki6 7在胃癌发生、发展中的作用及二者的相关性。方法 采用免疫组织化学SP法检测了4 0例胃癌患者胃组织中PTTG基因和Ki6 7的表达情况。结果 PTTG基因和Ki6 7在胃癌组织中的阳性表达率分别为72 .5 %和95 % ,均与胃癌的病理组织学分级、临床分期及淋巴结转移有关(P<0 .0 5 ) ,而与组织学类型无关(P>0 .0 5 )。PTTG基因和Ki6 7表达强度呈显著正相关(P<0 .0 5 )。结论 PTTG基因和Ki6 7在胃癌的发生、发展中有协同作用,可作为反映胃癌生物学行为的指标。

肿瘤增殖基因Ki67反义寡核苷酸对人肾癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨肿瘤增殖基因Ki67反义寡核苷酸(Ki67-ASODNs)对人肾癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:将Ki67- ASODNs转染人肾癌细胞系786-0细胞,采用免疫组化、Western blot技术检测Ki67表达,细胞生长曲线、3H-TdR掺入试验等检 测肾癌细胞增殖,免疫组化TUNEL法检测肾癌细胞凋亡。结果:Ki67-ASODNs处理组(10,40 μmol/L)的786-0细胞Ki67表 达阳性率(％)(29.9±0.4,24.5±1.2)降低,Ki67蛋白(％)(82.1±2.2,66.6±4.2)降低,分别与对照组(33.4±0.8,100)比 较,差异有显著性(P<0.01)。Ki67-ASODNs处理组的3H-TdR掺入率(％)(44.5±4.4,34.5±3.2)与对照组(100)比较,差异 有显著性(P<0.01)。Ki67-ASODNs处理组凋亡细胞阳性率(％)(12.7±0.5,23.1±2.1)增加,与对照组(9.3±2.0)比较,差 异有显著性(P<0.01)。结论:肿瘤增殖基因Ki67反义寡核苷酸能抑制人肾癌786-0细胞Ki67基因表达,进而抑制其增殖, 促进其凋亡,且有剂量依赖性。

STK15和ki67基因在胃癌组织中的表达研究

目的研究丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)基因在胃癌组织中的表达,及其与临床病理指标以及ki67表达的关系。方法采用免疫组化检测STK15和ki67在89例胃癌组织中的表达。结果STK15在胃癌组织中的表达阳性率为34.83%(31/89),显著高于邻近的非癌组织的4.49%(12/89)(P<0.01);STK15基因过表达与分化型胃癌及其侵润深度密切相关(P<0.05),而与ki67的表达无相关性。结论STK15基因可能在胃癌发生、发展中起相应作用,其过表达程度可作为胃癌的某些生物学行为新的判定指标。

Ki67反义多肽核酸抑制肾癌生长的体外及动物实验研究

为研究肿瘤增殖基因Ki67反义多肽核酸(AS-PNAs)对人肾癌细胞的体内外抑制作用.将AS-PNAs(10.0μmol/L)转染人肾癌786-0细胞,采用免疫组化、Western印迹技术检测Ki67表达;3H-TdR掺入试验检测细胞增殖;免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡。裸鼠移植瘤内注射AS-PNAs(10.0μmol/L)连续4d后,第3、6、12天处死小鼠,取瘤组织检测肿瘤体积、Ki67表达、细胞凋亡。结果发现,AS-PNAs处理组786-0细胞Ki67表达明显降低,3H-TdR掺入率明显降低,细胞凋亡率明显增加,与随机PNAs对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。动物实验AS-PNAs处理组小鼠肿瘤体积明显缩小,Ki-67抗原表达明显降低,细胞凋亡明显增加,与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。Ki67基囚AS-PNAs在体外及动物体内均有抑制增殖、促进凋亡作用,是一种有前途的反义治疗药物。

Ki67基因RNA干扰腺病毒表达载体的构建及其抗结肠肿瘤作用研究

目的:构建针对肿瘤增殖基因Ki67的小干扰RNA(Ki67-siRNA)腺病毒表达载体,体外研究其对人结肠癌细胞株SW620细胞生长影响,为结肠癌的基因治疗提供参考。方法:设计可形成小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pCA13,构建Ki67-siRNA表达质粒pCA13-Ki67。鉴定正确后,将pCA13-Ki67与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染至293细胞,包装成复制缺陷型腺病毒Ad-Ki67。大量扩增Ad-Ki67,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。Ad-Ki67感染人结肠癌细胞,结晶紫染色法检测细胞病理作用,MTT法检测细胞存活,Western印迹法检测Ki67表达。结果:酶切分析、测序鉴定表明pCA13-Ki67构建成功,PCR分析表明Ad-Ki67含有Ki67-siRNA序列。Ad-Ki67可显著抑制Ki67蛋白表达及结肠癌细胞生长。结论:含有Ki67-siRNA的重组腺病毒构建成功,其能抑制人结肠癌细胞Ki67基因表达和生长。

Ki67、nm23基因在鼻咽癌中的表达及其意义

目的:研究Ki67、nm23基因在鼻咽癌的表达以及同鼻咽癌临床分期、远处转移等的关系。方法:对66例鼻咽癌标本应用免疫组化法研究Ki67、nm23基因的表达情况。在66例中,33例有远处转移(有远处转移组),33例无远处转移(无远处转移组),其中,46例有颈淋巴结转移,20例无颈淋巴结转移。结果:①从Ki67表达水平来看有远处转移组的鼻咽癌组织明显高于无远处转移组(z=-5.395,P<0.001),而nm23的表达明显低于无远处转移组(z=-3.866,P<0.001);②Ki67的表达与临床分期呈正相关(r=0.268,P<0.05);nm23的表达与临床分期呈负相关(r=-0.246,P<0.05);③Ki67和nm23的表达与T分期无明显关系(分别为r=0.171、-0.130,均P>0.05);④Ki67、nm23的表达在有无淋巴结转移组无明显差异(z=-1.498、-0.901,P>0.05);⑤Ki67与nm23的表达呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论:Ki67、nm23表达的增高和降低很可能是鼻咽癌的远处转移的因素之一;Ki67与nm23表达的高低与鼻咽癌的临床分期有关,在预后评估中Ki67、nm23表达的高低很有可能是重要的参考指标。

Ki67、PTEN在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织中Ki67和PTEN的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法,检测32例卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织和26例卵巢浆液性囊腺癌组织中Ki67和PTEN表达,并与10例卵巢浆液性囊腺瘤和11例正常卵巢组织进行比较。结果 Ki67和PTEN在卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织中阳性表达率分别为65.6%和93.8%,与卵巢浆液性囊腺瘤组织(分别为60.0%和100.%)比较,无统计学意义(P>0.05),而与卵巢浆液性囊腺癌组织比较有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ期卵巢交界性浆液性囊腺瘤患者PTEN阳性表达率,与Ⅲ期患者比较,有统计学意义(P=0.03),而Ⅰ、Ⅱ期卵巢交界性浆液性囊腺瘤患者Ki67阳性表达率,与Ⅲ期患者比较,无统计学意义(P>0.05)。结论 Ki67和PTEN可能在卵巢交界性浆液性囊腺瘤的发生、发展中起重要作用,可能成为卵巢交界性浆液性囊腺瘤预后评价的指标。

RNAi沉默livin基因对裸鼠移植瘤生长及Ki67蛋白表达的影响

目的利用慢病毒携带的livin基因短发夹RNA(shRNA)干扰裸鼠移植瘤中Livin蛋白表达,探讨其对肺腺癌裸鼠移植瘤生长及Ki67蛋白表达的影响。方法建立肺腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤长至100mm3左右时,以携带livin基因shRNA慢病毒载体注入移植瘤,观察肿瘤生长情况。用免疫组织化学方法检测各组Livin蛋白、Ki67蛋白表达,分析二者相关性。结果 livin基因shRNA干预组与空白对照组和阴性载体对照组相比,瘤体生长减缓,移植瘤质量明显减小(P<0.01),Livin蛋白、Ki67蛋白的表达明显降低(P<0.01,P<0.01),且Livin蛋白与Ki67蛋白的表达呈正相关(r=0.54,P<0.01)。结论利用livin基因shRNA可抑制移植瘤生长,Livin蛋白表达明显降低,Ki67蛋白的表达也降低,两者呈显著正相关。

Ki67基因在鼻咽癌中的表达及其意义

目的 :探讨 Ki6 7基因在鼻咽癌的表达及其与鼻咽癌远处转移、临床分期等的关系。方法 :应用免疫组化法对 6 6例鼻咽癌标本 Ki6 7基因表达情况进行检测 ,其中 33例有远处转移 ,33例无远处转移。 4 6例有颈淋巴结转移 ,2 0例无颈淋巴结转移。结果 :1有远处转移组的鼻咽癌组织 ,Ki6 7表达水平明显高于无远处转移组 (P<0 .0 0 1) ;2 Ki6 7的表达与临床分期呈正相关 (r =0 .2 6 8,P <0 .0 5 ) ;3Ki6 7的表达与 T分期无明显关系 ;4有淋巴结转移的病例其 Ki6 7的表达高于无淋巴结转移组 ,但差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :Ki6 7表达的增高可能与鼻咽癌远处转移有关 ;Ki6 7表达的高低可能与鼻咽癌的临床分期有关 ,Ki6

细胞核增殖相关抗原ki67和bcl-2、bax与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理及预后的关系

目的 :研究细胞核增殖相关抗原ki6 7和凋亡抑制基因bcl 2、促凋亡基因bax与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理及预后的关系。方法 :采用免疫组化SP法检测 85例卵巢上皮性肿瘤中ki6 7、bcl 2、bax表达情况。结果 :①ki6 7指数在恶性卵巢上皮性肿瘤中显著高于良性及交界性肿瘤 ;与恶性卵巢上皮性肿瘤组织学分级呈正相关 ,与预后呈负相关。②bax表达水平在卵巢恶性肿瘤组中高于良性组 ,与恶性卵巢上皮性肿瘤组织学分级呈负相关 ,与预后呈正相关 ;bcl 2表达水平在恶性组中高于良性组及交界组 ;高分化组中bcl 2∶bax≤ 1的患者所占比例高于中、低分化组 ,bcl 2∶bax≤ 1患者预后较好。③恶性卵巢上皮性肿瘤中ki6 7指数与bax表达负相关 ,与bcl 2表达及bcl 2∶bax比值正相关 ;低增殖高凋亡易感组预后好于高增殖低凋亡易感组。④临床分期和bax表达水平是影响恶性卵巢上皮性肿瘤患者预后的主要因素。结论 :ki6 7可作为评价卵巢肿瘤生物学行为及预后的指标 ,bcl 2、bax相互作用 ,对恶性卵巢上皮性肿瘤的发生、发展及预后中起一定作用 ,高增殖低凋亡易感性促使肿瘤恶性发展 。

霍奇金淋巴瘤转染mtrⅡ基因后ki67的表达及其意义

目的:探讨ki67在转染mtrⅡ基因后的霍奇金淋巴瘤中的表达情况及其意义。方法:将mtrⅡ转染人霍奇金淋巴瘤细胞系,采用免疫组化法检测转染前后ki67的表达情况。结果:未转染mtrⅡ基因的ki67阳性率为21.3%,转染mtrⅡ基因后ki67的阳性率为36.8%,两者之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:mtrⅡ基因可能参与了霍奇金淋巴瘤恶性转化的过程。

膀胱癌Ki67的表达在临床应用的研究

目的本研究旨在探讨Ki67在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭,转移及预后的关系。方法用免疫组化SP法检测154例膀胱癌组织中Ki67的表达。结果Ki67在126例肿瘤组织中有阳性表达,阳性率为81.8%。Ki67在膀胱癌组织的表达与肿瘤病理分级,T分期,远处转移呈正相关(P<0.05)。结论Ki67可能参与了膀胱癌的侵袭与转移,Ki67可做为预后判断因子,结合病理分级和临床分期分析能提高对膀胱癌患者预后判断的准确性。

P57^(kip2)与Ki67表达对结肠癌侵袭性的影响

目的：研究结肠癌中P57^(kip2)与Ki67基因的表达与肿瘤的发生、发展的关系。方法：收集69例结肠癌手术切除标本,病理诊断均为结肠癌,以10例正常结肠黏膜为实验对照。采用免疫组化技术ABC法检测P57^(kip2)与Ki67抗原在正常结肠黏膜组织和结肠癌组织中的表达。结果：结肠癌组织中P57^(kip2)抗原表达的标志指数(labeling index,LI)较正常结肠黏膜组织明显降低(P=0.0001)；Ki67抗原表达的LI较正常结肠黏膜组织明显升高(P=0.0001)；不同性别、年龄结肠癌患者癌组织中P57^(kip2)、Ki67的表达没有统计学差异；P57^(kip2)在结肠癌低分化腺癌组织中的表达较中高分化腺癌组织中的表达明显降低(P=0.032)。Ki67在结肠癌低分化腺癌组织中的表达较在中高分化腺癌组织的表达明显升高(P=0.0226)。P57^(kip2)在有淋巴管浸润的结肠癌组织中的表达较在无淋巴管浸润的结肠癌组织中的表达明显降低(P=0.0001)；Ki67在有淋巴管浸润的结肠癌组织中的表达较在无淋巴管浸润的结肠癌组织中的表达明显升高(P=0.0001)；P57^(kip2)在结肠癌Dukes分期A期和B期的癌组织中的表达较在C期和D期癌组织中的表达明显升高(P=0.0002)。Ki67在DukesA期和B期的癌组织中的表达较在C期和D期癌组织中的表达明显降低(P=0.0006)；P57^(kip2)与Ki67在结肠癌组织中的表达呈现明显的负相关,相关系数r= =0.847,P=0.000l。结论：P57^(kip2)表达下调,Ki67表达上调在结肠癌的发生、发展和转移过程中发挥着重要作用。

胃肠道间质肿瘤DOG1和Ki67、p53的表达及意义

目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)患者中的DOG1和细胞增殖核抗原Ki67以及p53突变型蛋白的相互关系及病理学意义。方法应用免疫组织化学方法检测86例GIST患者与20例非GIST患者组织中的DOG1及Ki67、p53的表达,比较分析各个指标在GIST各危险性分级和各部位的表达情况。结果在86例GIST组织中,DOG1与CD117的表达阳性率间比较差别无统计学意义(97.7%vs 90.7%,P>0.05);而CD117表达阴性的GIST组织中,DOG1阳性表达率为87.5%。GIST经危险性分层后,DOG1阳性表达率在高、中、低、极低度危险组中比较差别无统计学意义(P>0.05)。Ki67和p53在GIST组织中的阳性表达率分别为58.1%和47.7%;Ki67和p53在高度和中度危险性组的表达阳性率显著高于低度和极低度危险性组。GIST组织的DOG1、CD117、Ki67和p53阳性表达率显著增高于非GIST组织(P<0.01)。结论 DOG1联合CD117可作为诊断GIST或鉴别非GIST的一个敏感而特异的重要标记物;Ki67以及突变型p53蛋白可作为判断GIST良恶性的生物学指标以及预后判断的重要标志。

双氢睾酮耦联Ki67多肽核酸对激素非依赖性前列腺癌细胞的抑制作用

目的:探讨双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)耦联Ki67多肽核酸(peptide nucleic acids,PNAs)对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞Ki67表达、细胞生长及凋亡的影响方法:人工合成针对Ki67基因的多肽核酸并与DHT耦联(DHT-PNAs)后转染PC-3细胞,采用RT-PCR、免疫细胞化学、Western blotting检测PC-3细胞Ki67抗原的表达,CCK8法检测PC-3细胞增殖,原位末端标记法(TUNEL)检测PC-3细胞凋亡,以上实验均以以PNAs组、DHT组为对照组。结果:DHT-PNAs、PNAs均能抑制非激素依赖性前列腺癌细胞系PC-3的Ki67表达,诱导PC-3细胞凋亡,使细胞生长受抑,并且均具有浓度依赖性。DHT-PNAs作用强度明显强于相同剂量的PNAs,3μmol/L DHT-PNAs即可达到9μmol/L PNAs的作用强度。结论:DHT-PNAs能有效增强PNAs阻抑PC-3细胞Ki67表达、诱导细胞凋亡及抑制细胞生长的作用。