苦参抗水产病原哈氏弧菌活性物质的提取、鉴定及作用机制

利用单因素实验、Box-Behnken试验设计结合响应面分析法,从提取溶剂(蒸馏水、50%甲醇、甲醇、50%乙醇、乙醇)、乙醇浓度(60%~100%)、提取温度(60℃、70℃、80℃、90℃、100℃)、提取时间(60 min、90 min、120 min、150 min、180 min)和液料比等对抑菌活性的影响几方面优化苦参抗水产病原哈氏弧菌(Vibrio harveyi)活性物质(ASSF)的提取工艺;采用高效液相色谱和标准品比对技术,鉴定ASSF的抗菌活性化合物;从对哈氏弧菌的生长、细胞膜的完整性和通透性、细胞壁的通透性等方面探讨ASSF的作用机理。结果表明:ASSF的最佳提取条件是:无水乙醇为溶剂,液料比30∶1 mL/g,提取温度79℃,提取146 min。在此条件下,提取物抑菌圈的实际值为(17.64±0.22)mm,与预测值无显著性差异。固态ASSF的得率为(21.17±0.91)%。鉴定出苦参酮是ASSF中的抗哈氏弧菌活性化合物。ASSF和苦参酮的最小抑菌浓度分别为0.125 mg/mL和0.0625 mg/mL。ASSF对于哈维氏弧菌的抑制作用主要是通过破坏细胞膜的完整性和通透性、细胞壁的通透性抑制细胞的增殖。本研究结果可为进一步开发苦参酮在水产病害防治中的应用提供依据。

苦参素注射液治疗各型湿疹

目的 :探索应用苦参素注射液治疗各型湿疹的临床疗效。方法 :选择各型湿疹病人 10 4人 ,分为苦参素组 62例和葡萄糖酸钙对照组 4 2例 ,分别用苦参素注射液 2 0 0mg ,im ,bid和 10 %葡萄糖酸钙注射液 10mL ,维生素C 1.0 g ,2 5%葡萄糖注射液 2 0mL ,iv ,qd ;2组均以 10d为一个疗程 (各 1～3疗程 )。结果 :经 1～ 3个疗程治疗显示苦参素组的总有效率为 87% ,葡萄糖酸钙对照组的总有效率为 81% (P >0 .0 5) ,2组相比无明显差别 ;但以 2组显效率 (痊愈 +显效 )比较 ,则分别为 66%和 4 3% ,2组相比差别有显著意义 (P <0 .0 5)。苦参素注射液对急性、亚急性湿疹的总有效率为 94 % ,慢性湿疹的总有效率为 79%。与对照组相比差别有显著意义 (均P <0 .0 1) ,从显效率比较 ,急性、亚急性组明显高于慢性。 (P <0 .0 1)。结论 :苦参素注射液对各型湿疹均有较好的疗效 ,对急性、亚急性湿疹的疗效尤为明显。

苦参杀虫抑菌活性成分研究

Two compounds with strongly insecticidal and fungicidal activity, Kurarinone and Sophoraflavanone G , were isolated from Sophora flavescens Ait under the direction of bioassay, and comfirmed by UV, IR, MS and NMR. The insecticidal activity of flavonoids from Sophora flavescens Ait was first reported here. The study of structure-activity relationship indicated that the methylation of 5-hydroxy on the phenyl ring would decrease the insecticidal and fungicidal activity of flavonoids.

苦参总黄酮含量测定方法的优化

目的优化苦参Sophora flavescens Ait.总黄酮含有量的测定方法。方法分别以80%乙醇、甲醇、乙酸乙酯和文献方法提取苦参,分别采用苦参酮盐酸-镁粉反应、槐属二氢黄酮G盐酸-镁粉反应、苦参酮紫外分光光度、槐属二氢黄酮G紫外分光光度测定总黄酮含有量(以苦参酮和槐属二氢黄酮G为对照),HPLC法同时测定苦参酮、槐属二氢黄酮G、异黄腐醇含有量。以反应时间、镁粉加入量、浓盐酸加入量为影响因素,苦参酮、槐属二氢黄酮G吸光度为评价指标,正交试验优化显色条件。再通过双因素方差分析结合LSD法优化测定方法。结果最佳显色条件为反应时间60 min,镁粉加入量250 mg,浓盐酸加入量3.5 m L。主效应A(4种测定方法)和主效应B(4种提取方法)对总黄酮含有量的影响均有显著性差异(P<0.01)。苦参酮盐酸-镁粉显色法与其他方法相比有显著性差异(P<0.01),并与HPLC法测定结果的相关性最好。同时,乙酸乙酯提取效果明显优于其他3种提取方法 (P<0.001)。结论乙酸乙酯提取苦参后,以苦参酮为对照品的盐酸-镁粉反应更适合测定其总黄酮含有量。

苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响

目的探讨苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响及可能机制。方法大鼠行单侧输尿管结扎(UUO)建立肾小管间质纤维化模型。实验分为假手术、UUO及苦参素治疗组。治疗组在UUO的基础上每天以苦参素100mg/kg腹腔注射。各组于术后第7、14、21天分别处死5只大鼠,分别检测大鼠血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)及24h尿蛋白定量。用PAS及Masson染色法观察肾脏病理改变。用免疫组织化学法观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达。用RT-PCR法测定肾组织TGF-β1及α-SMA mRNA水平。结果与UUO组比较,苦参素治疗组肾脏TGF-β1、Smad3、α-SMA及ColⅠ的表达明显减少,肾小管损害和肾间质纤维化的程度也明显减轻。治疗组TGF-β1 mRNA及α-SMA mRNA表达显著低于对应时间点的UUO组。结论苦参素可下调TGF-β1、ColⅠ的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化及肌成纤维细胞的活化与增殖,其作用途径可能是通过下调Smad3的表达,从而干预Smad3介导的细胞内信号转导,最终减轻肾间质纤维化。

苦参素抗肿瘤作用研究

目的 :研究苦参素的抗肿瘤作用。方法 :通过观察苦参素对S3 7荷瘤小鼠的瘤重、体重和血液中白细胞及红细胞数目的影响 ,研究苦参素的体内抗肿瘤作用。结果 :苦参素对S3 7荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用不明显 ,但对保持小鼠体重有明显作用 ,同时对荷瘤小鼠外周血红细胞、白细胞数目也有升高趋势。结论 :苦参素对S3 7瘤株不甚敏感 ,但有保持小鼠体重及升高外周血细胞数目的趋势。

HPLC测定不同地区苦参市售饮片中四种黄酮类成分的含量

目的测定不同地区苦参市售饮片中4种黄酮类成分三叶豆紫檀苷、降苦参酮、黄腐醇及苦参啶的含量。方法采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长分别为310 nm(三叶豆紫檀苷)、294 nm(降苦参酮)、365 nm(黄腐醇和苦参啶)。结果25批苦参市售饮片中4种黄酮类成分三叶豆紫檀苷、降苦参酮、黄腐醇和苦参啶的含量分别为0.05%～0.32%,0.05%～0.51%,0.55×10^(-3)%～4.87×10^(-3)%和0.06%～0.23%。结论苦参市售饮片中4种黄酮类成分的含量变化较大,应将其纳入苦参药材及饮片的质量控制指标。

苦参黄酮类成分的研究

苦参(Sphora flavescens Ait)为豆科槐属植物,根入药,具有清热、燥湿、杀虫之功效。近年来国内外对苦参的研究较为重视。我们对苦参的化学成分进行了系统的研究,从苦参总黄酮中分离出8种黄酮类化合物:高丽槐素(maackiain,1)、4-甲氧基高丽槐素(4-methoxy-maackiain,2)、三叶豆紫檀甙(trifolirhizin,3)、降脱水淫羊藿素(nor-anhydroicaritin,4)、异苦参酮(isokurarinone,5)、槐属二氢黄酮 B(sopho-raflavanone B,6)、降苦参酮(nor-kurarinone,7)和芒柄花素(formoronetin,8)。化合物1、2和6是首次从苦参中得到的。本文报道苦参黄酮类化合物的研究。

高效液相色谱法测定苦参药材及其黄酮部位中降苦参酮、黄腐醇和苦参啶的含量

目的:建立测定苦参药材及其黄酮部位中3种黄酮类成分降苦参酮、黄腐醇和苦参啶含量的高效液相色谱方法。方法:采用 Phenomenex Luna C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙睛-水为流动相,梯度洗脱(0～35 min,45:55→69∶31),流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长 294 nm(降苦参酮)和365 nm(黄腐醇、苦参啶)。结果:降苦参酮、黄腐醇、苦参啶的线性范围分别为0.12～0.60μg(r=0.9999),0.004～0.200μg(r=0.9996),0.20～1.02μg(r=0.9997);苦参黄酮部位平均加样回收率(n=6)分别为102.5%,101.5%,99.8%;苦参药材平均加样回收率(n=6)分别为101.8%,103.5%,99.9%。结论:3批样品测定结果表明,该方法简便准确,可用于苦参药材及其黄酮部位中降苦参酮、黄腐醇和苦参啶3种黄酮类成分的含量测定。

苦参素对慢性乙型肝炎患者血清TGF-β1、TNF-α及肝纤维化指标的影响

目的 探讨苦参素在慢性乙型肝炎中抗肝纤维化的作用机制。方法 采用ELISA和RIA方法对治疗Ⅰ组 (对照组 )和治疗Ⅱ组 (苦参素组 )患者治疗前及治疗 3月后的慢性肝炎轻度、中度、重度及肝硬化患者 171例血清转化生长因子 β1(TGF - β1)、肿瘤坏死因子α(TNF -α)、透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PcⅢ )、Ⅳ胶原 (C -Ⅳ )、层连蛋白 (LN)含量进行测定 ,并设立 30例健康献血人员作为正常组。结果 治疗前两组患者血清TGF - β1、TNF -α、HA、PcⅢ、C -Ⅳ、LN均不同程度的升高 ,与正常组相比差异有显著性意义 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;治疗后均有不同程度的降低 ,治疗Ⅱ组治疗后与治疗前相比明显下降(P <0 0 5或P <0 0 1) ,并与治疗Ⅰ组在慢性肝炎中度、重度、肝硬化间差异有显著性意义 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 苦参素具有逆转肝纤维化的作用 ,有部分机制通过抑制TGF - β1、TNF -α的分泌 。

苦参碱治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的观察苦参碱注射液治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法将84例慢性乙型肝炎患者分为两组:治疗组42例,用苦参碱注射液600mg静脉滴注;对照组42例,以阿拓莫兰1.2g静脉滴注,疗程8周,治疗前后检测肝功能、乙型肝炎病毒复制标志物HBVDNA和HBeAg,同时观察患者的症状、体征的变化及药物的不良反应。结果HBV复制指标HBeAg滴度、HBVDNA拷贝数下降水平治疗组明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05);HBV复制指标HBeAg、HBVDNA的转阴率治疗组明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。治疗结束后AST、ALT、TBil治疗组明显低于对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论苦参碱对乙型肝炎病毒有抑制作用,是治疗慢性乙型肝炎较为有效的中药制剂。

苦参素治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的 评价苦参素治疗慢性乙型肝炎的近期疗效，方法 随机开放性应用苦参素（６００ｍｇ／ｄ）治疗慢性乙型肝炎病人６９例，疗程３个月。疗效评价包括症状，肝功能和ＨＢＶ复制指标．结果 苦参素能改善慢性乙型肝炎患者的临床症状及肝功能，对慢性乙肝病人ＨＢＶ－ＤＮＡ及 ＨＢｅＡｇ的阴转率为 ４８．３３％和 ３１．６７％，结论 苦参素可改善慢性乙肝病人的症状及肝功能，且有较强的抗乙肝病毒作用，应用过程中安全性良好．

苦参素缓释纳米球的研制

目的制备缓释苦参素纳米球。方法采用沉淀法制备苦参素-PLGA-纳米球,并用透射电镜观察其外观形态,利用HPLC测定药物含量。结果制得缓释KU-PLGA-NS,其平均包封率为79.5%,平均载药量为1.75%,平均粒径为190.5 nm。结论制备KU-PLGA-NS基本达到设计要求,该制剂有望成为一种新的药物靶向载体系统。

苦参制剂对体外血清胆碱酯酶和转氨酶活性的影响

目的探讨临床常用苦参制剂(肝炎灵、苦参碱和苦参素)对血清胆碱酯酶和转氨酶活性的影响。方法采用体外药物与血清共育方式,分别于药物与血清共育10min和24h后,用全自动生化分析仪检测血清胆碱酯酶和转氨酶的活性。结果只有苦参碱对血清胆碱酯酶和转氨酶活性有直接抑制作用,苦参素和肝炎灵对血清胆碱酯酶和转氨酶活性均无直接抑制作用。结论苦参碱能直接抑制血清胆碱酯酶和转氨酶活性;肝炎灵和苦参素对体外血清胆碱酯酶和转氨酶活性无直接抑制作用,其体内用药致血清胆碱酯酶活性下降的原因是其在体内经过代谢转化成为苦参碱或其他具有强力抑制胆碱酯酶活性的代谢产物或转化产物。

苦参素联合核糖核酸注射液抗HBV作用临床研究

观察苦参素联合核糖核酸注射液对慢性乙型肝炎患者病毒学相关指标的影响 ,探讨其抗病毒作用效果及机制。将 85例患者随机分为两组 ,对照组 (38例 )采用基础治疗加苦参素注射液 ,治疗组 (4 7例 )采用基础治疗加苦参素注射液联合核糖核酸 ,各治疗 10周。治疗前 (0周 )、中 (4周 )、结束 (10周 )时分别检测患者丙氨酸转氨酶、血清白蛋白、HBeAg及HBV DNA定量等指标。结果 :治疗后两组肝功能均有明显改善 (P <0 0 1) ,治疗组白蛋白改善更明显 (P <0 0 1)、HBeAg和HBV DNA的阴转率均高于对照组 (P <0 0 5 ) ,总有效率为 89 4 %。提示苦参素注射液联合核糖核酸治疗慢性乙型肝炎较单用苦参素注射液能更好改善患者肝功能 。

益气活血汤合苦参素注射液杭乙型肝炎病毒临床观察

观察益气活血汤联合苦参素注射液抗乙型肝炎病毒的作用。设治疗组30例 ,以益气活血汤合苦参素注射液治疗 ,对照组 30例单纯用苦参素注射液治疗 ,疗程 6个月。结果 :治疗组HBeAg、HBV DNA的阴转率分别为 5 0 .0 0 %、5 6 .0 0 %。与对照组 40 .0 0 %、40 .91%相比有显著差异 (P <0 .0 5 )。症状体征改善、好转亦较对照组明显 (P <0 .0 5～P <0 .0 1)。提示益气活血汤联合苦参素注射液有明显的抗乙型肝炎病毒作用。

苦参素+山莨菪碱预防非小细胞肺癌化疗后骨髓毒性的研究

目的 探讨苦参素 +山莨菪碱预防非小细胞肺癌患者化疗后骨髓毒性的机理。方法 晚期非小细胞肺癌 39例 ,随机分为A组 2 5例 ,为治疗组 ;B组 1 4例 ,为对照组。 2组均用吡柔比星(THP) +异环磷酰胺 (IFO) +卡铂 (CBP)方案与卡铂 +依托泊苷方案交替化疗 ,治疗组在化疗同时加用苦参素 +山莨菪碱。 3周期后评价疗效和不良反应。结果 A组有效率为 68.0 % ,B组有效率为 57.1 % ,2组间疗效无显著性差异 (P >0 .0 5) ;A组与B组Ⅲ～Ⅳ级骨髓毒性发生率分别为 2 8.0 %和 42 .9% ,2组间有显著性差异 (P <0 .0 5)。心脏毒性发生率A组为 1例 ,为 1 3 .6 % ,B组未发生。结论 苦参素 +山莨菪碱能有效预防非小细胞肺癌化疗后的白细胞和血小板降低 。

苦参素对三维适形放射治疗中晚期肺癌疗效及血清VEGF、MMP-9水平的影响

目的探讨苦参素(0MT)对三维适形放射治疗中晚期肺癌临床疗效及患者血清VEGF、MMP-9水平的影响。方法将136例中晚期肺癌患者临床资料,按照治疗方案分为对照组(62例)和观察组(74例)。对照组患者给予三维适形放射治疗,观察组在对照组基础上给予0MT治疗。比较两组中晚期肺癌患者近期疗效、毒副反应及血清VEGF、MMP-9水平。结果两组中晚期肺癌患者近期疗效评价结果显示,观察组总有效率高于对照组(75.7%vs 56.4%,P<0.05)。治疗期间,观察组患者骨髓抑制、胃肠道反应、肝功能损害毒副反应发生率均低于对照组(P<0.05)。治疗后,与对照组相比,观察组患者血清VEGF、MMP-9水平降低(347.3±38.2 vs 404.5±42.0ng/L,476.8±47.3 vs 512.2±53.5ng/L),组间比较均有统计学差异(P<0.05)。结论在三维适形放疗基础上给予0MT治疗可以提高中晚期肺癌近期疗效,降低毒副反应发生率,而且能够降低血清VEGF、MMP-9水平,临床上值得进一步研究。

三种生物碱防治小麦蚜虫的药效研究

研究了三种生物碱对麦蚜的杀虫效果。结果表明：10%皂素烟碱1000倍、40%硫酸烟碱1000倍和0．3％苦参碱300倍对麦蚜的田间防效均稳定保持在98％以上，并能保护麦田中的天敌数量。此3种生物碱与40％氧化乐果乳油作药效对照．防蚜效果相当。对于减少化学农药污染环境，开发我国极其丰富的植物性农药资源，具有极显著的社会、生态和经济效益。