Lager酵母中CRISPR-Cas9基因敲除系统的构建

利用CRISPR-Cas9基因编辑技术在Lager型啤酒酵母(Saccharomyces pasteurianus)中建立CRISPRCas9基因敲除系统。将质粒pMY中毕赤酵母基因表达系统中常用GAP启动子替换为酿酒酵母基因表达系统中常用PGK1启动子,增强外源基因表达量。设计酿酒酵母(S.cerevisiae)基因组及真贝酵母(S.eubayanus)基因组中目的基因TRP1小向导RNA。增加向导RNA结构中锤头状核酶和肝炎三角洲病毒核酶结构,提高gRNA转录水平。Lager型啤酒酵母Pilsner中TRP1基因被敲除,成功构建Lager型啤酒酵母中CRISPR-Cas9基因敲除系统。

高抗氧化活性lager型啤酒酵母选育

采用过氧化氢刺激lager型啤酒酵母,Tadpoling法筛选细胞活力恢复较快突变菌,根据各菌株线粒体膜电位、胞内氧自由基(ROS)水平筛选获得4株活性较高菌株。比较突变菌与原始菌传代发酵性能、胞内ROS、活力指标及每一代细胞死亡率水平,最终获得一株抗氧化能力提高且活力稳定性较高啤酒酵母菌株。分析验证突变菌线粒体DNA修复相关基因MHR1发现,该基因发生部分碱基突变。

麦汁关键氨基酸对Lager酵母发酵性能的影响

为探究麦汁中氨基酸在啤酒酿造中的作用,研究了麦汁中4种关键氨基酸(谷氨酸、脯氨酸、缬氨酸和赖氨酸)对酵母发酵性能的影响。以工业Lager酵母(Saccharomyces pastorianus TT-1)为研究对象,通过关键氨基酸添加的发酵实验,在合成培养基中对关键氨基酸在酵母增殖及风味物质代谢中的作用进行了分析,并进一步在工业生产麦汁中对其作用进行了验证。结果表明,谷氨酸和脯氨酸抑制酵母增殖;赖氨酸会促进酵母的增殖;缬氨酸会促进高级醇的生成。

Lager啤酒酵母起源的历史足迹及基因组学研究

Lager酵母(Saccharomyces pastorianus)是由酿酒酵母(S. cerevisiae)与真贝氏酵母(S. eubayanus)通过自然杂交获得的异源多倍体菌株。Lager酵母保留了来自于两个亲本的染色体,同时也产生了新的重组片段,这就赋予Lager酵母适合低温发酵、麦芽三糖利用率高等重要特性。根据菌株的染色体含量,可以将Lager酵母分为两个类型:GroupⅠ型(Saaz型)与GroupⅡ型(Frohberg型)。近年来,多株Lager酵母菌株陆续完成了全基因组测序,为探索不同类型Lager酵母起源提供了基因组学基础。该文综述了Lager酵母的起源及基因组信息,并讨论了不同类型Lager酵母进化的模型。

根据异α-酸降解预测Lager啤酒的保质期

在实验室进行3L规模的啤酒生产和设计试验.采用高效液相色谱定量顺式/反式-异α-酸的浓度在4℃-50℃加速老化过程后,反式α-酸与顺式α-酸比例值从0.62变化至0.49浅色Lager啤酒中的反式-异α-酸的降解遵循一级反应并且符合阿伦尼乌斯方程,其反式-异合葎草酮的活化能（Ea）从69.2 kJ/mol变化至74.4 kJ/mol,频率因子（A）从1 88×1010days-1变化至1 3642×1011 days-1.Ea值越高说明反式异α-酸在加速贮存期间对温度越敏感 当温度从4℃增至40℃,浅色Lager啤酒的平均半衰期从471天减少到12天.如果已知啤酒中异α-酸的初始浓度,利用反式-异α-酸降解的活化能和加速老化的温度曲线,可以建立一个数学模型来预测异α-酸的减少量.对于暖期以及夏天温度可达40℃的热带国家来说,本研究的实验结果在预测啤酒苦味变化方面有极其重要的作用。

连续接种对Lager酿造酵母质量的影响

连续接种这个词是指发酵结束后将酵母茵体回收和用于后来的发酵。尽管连续接种造成酵母质量的衰退通常是可以接受的，但酵母重复处于环境的压力对其生理状态的影响，此前未有报道。在本次研究中，我们将酵母的活性和活力作为酵母代数的一个函数，发现连续接种对酵母生理状态的影响不是普遍性的，而有一种依赖菌种特性的现象。重复处于压力环境会产生可逆和不可逆伤害的积累。而且，在酿造酵母处理期间存在综合压力(压力反应元素STRE)反应的激活现象。

负滤光片膜系讨论与修改

阐述了实验室条件下修改理想负滤光片膜系的可行性采用新膜系镀制的光学器件满足了单态氧二聚物非线性效应实验研究的需要．修改后的负滤光片膜系用到三种介质材料：（TiO2＋ZrO2）5：3混合料，ZrO2及SiO2，比理想负滤光片膜系所用材料减少一种，膜系由高级次修改为调谐比，不但保证了反射带宽度而且降低了膜层厚度．膜系最外层介质材料由SiO2替代MgF2提高了光学器件耐用性能．同时，本文对膜系进行了简化处理与计算通过估算和参数直接对比可清楚镀件的光谱特性．

基于B/S与C/S混合模式的图书馆管理系统

为提高图书管理的效率和图书信息的利用率,采用面向对象的设计方法,应用B/S和C/S混合结构模式,并用统一建模语言的顺序图描述数据处理流程,进行系统之间数据转换,应用书条形码和读者借阅卡条形码自动识别技术,设计出用于乡镇图书馆的图书馆管理系统.该系统简化了工作流程,有利于提高工作效率.

超大型船舶废气利用的途径和措施

超大型船舶主机功率庞大,废气排放热量可观。借助废气余热利用系统,可将部分排气热量转换为电能,达到节能的目的。船舶安装废气余热利用装置可提高燃油利用率。对于不同的船舶,须从工作可靠性与经济性综合考虑,选取适合的废气余热利用系统。通过系统静态特性的模拟分析,可合理预测和校验系统的实际工作情况,为船舶废气余热利用系统的设计提供正确的方法和必要的参考。由系统的热平衡计算,可求出系统的热力学参数,由系统部件的热力设计可得到系统各部件的结构、损失与效率。对船舶废气余热利用系统进行优化分析,可为系统部件提供最优工作参数,使系统达到最佳工作状态。

麦汁组成对快速发酵中酵母代谢的重要性

在啤酒发酵过程中可以通过提高酵母接种量或者高浓酿造来提高产量，然而，这两种技术对酵母的新陈代谢都有显著的影响。在这项研究中，对高浓度酿造和高酵母数发酵相结合对酵母的生理和风味物质生成的影响进行了评价。此外．试验在快速发酵系统中通过优化麦汁中游离氨基氯含量来降低总双乙酰的产生，较高的麦汁浓度会导致酵母活力的下降，这与海藻糖含量的增加及与压力相关的基因表达水平的增加有关。不只是麦汁浓度。不同的可发酵性糖含量对酵母发酵性能及风味物质的生成都有强烈的影响。麦汁中高含量的蔗糖对氨基酸的吸收、酵母的生长、糖原的形成、海藻糖的重复利用、乙酯的合成和总双乙酰的还原速度都有促进作用．与其他的高浓度麦汁相比．酵母处于高浓度蔗糖环境中会经历更高的渗透压和压力相关的影响。尽管蔗糖相比于麦芽糖可以促进转录激活因子ATFI的活性，可以观察到乙酸酯类明显的降低。但是考虑到蔗糖对酵母性能的不利影响，采用蔗糖和麦芽糖组合来提高麦汁浓度还是可取的。

啤酒酿造过程中含硫化合物的测定

利用固相微萃取技术，采用气相色谱化学发光检测法可以对啤酒及酿造过程中的含硫挥发性物质进行检测。市售啤酒中含硫化合物的种类十分相似，包括ale啤酒在内的所有样品中，都含有较高浓度的二甲基硫，以及甲硫醇和硫代甲酸乙酯；仅有一种啤酒不合二氧化硫，也仅有一种啤酒不含二甲基二硫，所有试验啤酒均未检出乙硫醇、二乙基硫及乙基甲基硫。硫代甲酸乙酯是由甲硫醇产生的，这是最值得关注的酵母代谢产物。但似乎由于酵母的作用，使得二甲基硫、二氧化硫，可能还有甲硫醇的含量在发酵后期达到一个大体的平衡。ale啤酒在自然存放条件下，硫代甲酸乙酯的含量会逐渐增加，而甲硫醇则会下降，延长后酵也会导致含硫的挥发性物质含量的增高，尤其是二甲基硫和硫代甲酸乙酯。我们发现，同一种啤酒桶装方式比瓶装方式的含硫挥发物含量高，这可能是由于清洗操作过程中挥发性物质损失掉了。

抗氧化啤酒酵母菌株TK-10的选育及工业生产验证

以啤酒酿造Lager酵母TS-01为出发菌株,依次利用含乙硫氨酸、羟基正缬氨酸的平板进行定向育种,利用硝酸铅平板分离出高产SO2、低产H2S的菌株,然后通过EBC管、100 L中试发酵试验,以发酵液的SO2、H2S、双乙酰、乙醛、高级醇的含量和发酵度为筛选指标,得到1株发酵性能优良的菌株TK-10。以出发菌株TS-01为对照进行600 t大生产对比验证,表明新菌株TK-10的SO2产量明显升高,成品酒抗氧化性能得到改善,且口感良好,保持原有风味不变。

基于非靶向风味组学分析3种品牌啤酒的风味差异

通过顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱鉴定Lager啤酒中挥发物,并利用主成分分析、偏最小二乘-判别分析(partial least squares-discrimination analysis,PLS-DA)法及随机森林分类(random forest classifier,RFC)法区分3种品牌的Lager啤酒的风味差异。使用二乙烯基苯/碳分子筛/聚二甲基硅氧烷萃取纤维,室温固相微萃取5 min,然后在气相色谱仪进样口解吸,并通过色谱分离进行啤酒挥发物分析。在被鉴定的风味化合物中,辛酸乙酯、癸酸乙酯等是区分Lager啤酒品牌的关键性风味物质。在建立的PLS-DA与RFC模型中上述组分对啤酒风味差异的贡献较大,模型的预测准确度均达到100%,此策略对基于风味的啤酒分类方法的建立起到积极作用。

在快速发酵中麦汁组分对酵母代谢的重要性

通过应用较高接种比例的方法可以提高发酵过程的生产效率。其次是使用高浓酿造已经成为一种标准的提高生产能力的措施，但这两种工艺会对酵母代谢产生影响。在本研究中，我们组合了高浓和高酵母细胞密度的发酵，然后评估其对酵母生理和最终啤酒风味的影响，另外，试图通过优化麦汁的游离氨基氮含量来降低快速发酵的总联二酮产生量。较高的麦汁浓度导致酵母活力的下降，这可以从压力相关基因表达的增加和海藻糖含量较高来看出；更为严重的是可发酵性糖的种类及数量差异也会对酵母发酵性能和风味产生影响。麦汁中含有较高浓度的蔗糖会刺激氨基酸的吸收、酵母增殖、肝糖形成、海藻糖的重复利用、乙基酯的合成以及总联二酮的还原速度等。酵母在高浓度蔗糖的环境中较其他高浓麦汁会面临更大的渗透压影响。尽管将蔗糖和麦芽糖相比，对ATF1的表达有促进作用，但乙酸酯的生成显著下降。考虑蔗糖对酵母性能的负面作用，避免使用高浓度的这些糖类是明智的，我们采用了一种蔗糖和麦芽糖复合糖浆作为提高麦汁浓度的方法。

石油地球物理勘探局机械厂简介

石油地球物理勘探局机械厂是生产石油物探钻机、水井钻机及配套设备的专业工厂。建厂二十多年以来,致力于物探钻机的科研和开发,不断吸收、消化世界先进技术。现生产 WTZ—300型、WTZ—200型、

概述德语对英语的影响

每种语言在其发展过程中都会程度不等地受到其他语言的诸多影响,并从中吸取一些有益成分来改变、丰富、完善自己。英语之所以极富于表达力,最富有国际性,原因之一就在于英语对世界上几乎所有主要语种的有益成分都尽可能地兼收并蓄。其中,对英语影响最大的莫过于拉丁语和法语。德语对英语的影响自然是无法与它们相比拟。然而,对英语语言的发展来说。德语的影响也绝不是微不足道的。

两种用于强调的状语从句

英语中有两种从句从字面上看是表示条件、比较、方式等,但实际上起着强调作用。现浅析如下: 一、从表面上看是条件状语从句,但实际上是起着强调作用。这种状语从句通常由if引导,后接度量名词短语,从极小的单位条件说起。这种条件当然是可以成立的,因而主句的陈述也是完全可以实现的,从而加强了对主句陈述的肯定。请看:

漫话英语的“酒”

英语中“酒”的说法不下四种:drink,liquor,spirits和wine。drink既指酒类,也指其他饮料,指其他饮料时,前面应加soft-词;hard drink则指酒类,等于alcoholic drink或strong drink,但人们较少说 hard drink。liquor 是指经过蒸馏而酿成的酒。spirits主要指酒精含量高的烈性酒。如:whisky,brandy,gin等。wine是指由果汁经发酵而制成的酒,多指葡萄酒。如whitewine,red wine。在酒类中,啤酒是销量最大的。在西方国家,啤酒几乎成了日常的茶。英语关于“啤酒”的说法较多,常见的有。ale,beer,lager,mum,malt liquor,guinness和stout。ale 是淡色啤酒。

英国的pubs(小酒馆)

大多数英国人在工作之余,喜欢去pubs聚会、聊天,以松驰一下绷紧的神经。这与英国的传统有关,18、19世纪,疲劳已极的工人唯一的去处,唯一的消遣就是去肮脏拥挤的小酒馆,倾其所有,狂喝滥饮。现在,Pubs是同事、同学、朋友聚会,庆祝同事的升迁,庆祝同学顺利通过考试等的好去处。酒馆里面气氛热烈、友好、和谐,是社交的好场所。

静水高压对啤酒保质期的影响

过滤清亮的lager啤酒样品进行静水高压（HHP，20℃、350MPa处理3min和5min）或传统的热巴氏杀菌（60℃处理15min）处理。56天贮存期间显示，HHP和热巴氏杀菌对pH和色泽的影响相似（P〈0．05）。然而，在贮存期结束时与热巴氏杀菌样品相比，HHP处理样品的苦味值和蛋白敏感性较低，冷混浊值较高。HHP处理啤酒的微生物稳定性与热处理啤酒相同，贮存56天期间乳酸菌和醋酸菌都被抑制。虽然应对有关HHP处理不同类型lager和kle啤酒的影响进行更多的研究，但我们的研究结果已显示，HHP可成功用于提高啤酒的保质期，即使温度低于热巴氏杀菌所需的温度。