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CONSTRUCTION OF Sesbania rostrata COSMID GENOMIC LIBRARY AND MOLECULAR CLONING OF LEGHEMOGLOBIN GENE
1
作者 刘阳 范云六 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1989年第12期1457-1464,共8页
Using plant mini-Ti cosmid pEND4K, the cosmid genomic library of Sesbania rostratawas constructed. Sizes of plant DNA inserts in clones were 25- 33 kb. The restrictionmapping showed that different recombinant involved... Using plant mini-Ti cosmid pEND4K, the cosmid genomic library of Sesbania rostratawas constructed. Sizes of plant DNA inserts in clones were 25- 33 kb. The restrictionmapping showed that different recombinant involved various types of plant DNA insert. 4clones containing leghemoglobin gene sequence of S. rostrata were obtained by in situ hy-bridization of colonies. The cloning of leghemoglobin gene sequence has been confirmedby plasmid DNA dot hybridization and Southern blot hybridization. 展开更多
关键词 SESBANIA ROSTRATA plant cosmid GENOMIC library leghemoglobin gene molecular cloning
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TRANSCRIPTION AND TRANSLATION OF ALFALFA LEGHEMOGLOBIN GENES DURING ROOT NODULE DEVELOPMENT
2
作者 荆玉祥 ALAN S.PAAU WINSTON J.BRILL 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1990年第9期1078-1083,共6页
LegHb mRNAs isolated from 2 to 10-week old alfalfa nodules are actively translated in vitro to give a full component of legHb products suggesting that legHb genes, once expressed, are not regulated at the transcriptio... LegHb mRNAs isolated from 2 to 10-week old alfalfa nodules are actively translated in vitro to give a full component of legHb products suggesting that legHb genes, once expressed, are not regulated at the transcription level during the lifetime of a nodule. In vitro translation studies with legHb mRNAs from 10-week old nodules indicate that translation of mRNAs is partially inhibited by addition of alfalfa legHb components themselves and is not promoted by addition of myoglobin and hemoglobin as compared with those of alfalfa legHb mRNAs isolated from 4-week old nodules. This intimates that the regulation of alfalfa legHb synthesis in old nodules at the translation level is weakened. 展开更多
关键词 leghemoglobin root NODULES transeription translation MEDICAGO SATIVA L. Vernal
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云南七彩花生根瘤菌固氮能力及其与豆血红蛋白含量的关系
3
作者 李林 孙毅 +3 位作者 方海东 史亮涛 岳学文 闫帮国 《花生学报》 北大核心 2023年第3期56-62,共7页
为了阐明豆血红蛋白在花生与根瘤菌互作关系中的作用,通过对云南省元谋干热河谷区七彩花生根瘤中分离到的29株慢生根瘤菌进行盆栽接种试验,研究了各菌株对云南七彩花生生物量和植株全氮与豆血红蛋白含量的影响,探讨了植物生物量、根瘤... 为了阐明豆血红蛋白在花生与根瘤菌互作关系中的作用,通过对云南省元谋干热河谷区七彩花生根瘤中分离到的29株慢生根瘤菌进行盆栽接种试验,研究了各菌株对云南七彩花生生物量和植株全氮与豆血红蛋白含量的影响,探讨了植物生物量、根瘤菌固氮能力与豆血红蛋白总量和根瘤鲜质量的关系。结果表明:与对照组相比,接种各根瘤菌菌株后植株生物量、株高均明显提高,总体上不同根瘤菌之间的固氮能力差异不显著,其中来自七彩花生种植地的根瘤菌固氮效果高于其他来源的根瘤菌。豆血红蛋白总量、根瘤鲜质量均与花生生物量和植株氮总量呈极显著正相关,但豆血红蛋白总量的解释力更高。去除根瘤质量的影响后,花生生物量、植株氮总量与豆血红蛋白含量仍具有极高的相关性,表明豆血红蛋白是影响花生根瘤固氮能力的关键因素,可以作为筛选高效固氮根瘤菌菌株的重要指标。此外,本研究表明,作为云南省的乡土品种,七彩花生可以通过豆血红蛋白的增减来调节对不同固氮能力根瘤菌的资源投入,实现其与根瘤菌共生关系间的奖惩机制。 展开更多
关键词 云南七彩花生 根瘤菌 固氮 豆血红蛋白
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豆血红蛋白在酿酒酵母中的异源表达
4
作者 薛常鲁 张鹏飞 +2 位作者 白丽君 肖功年 魏培莲 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第20期101-107,共7页
豆血红蛋白是一种植物源血红蛋白,在植物蛋白肉加工中可作为重要的风味催化剂和着色剂,大大增加植物蛋白肉的拟真性。为实现豆血红蛋白在食品级微生物中的异源表达,将携带豆血红蛋白LBC2基因的质粒PESC-TRP转入酿酒酵母CEN.PK2-1C中,通... 豆血红蛋白是一种植物源血红蛋白,在植物蛋白肉加工中可作为重要的风味催化剂和着色剂,大大增加植物蛋白肉的拟真性。为实现豆血红蛋白在食品级微生物中的异源表达,将携带豆血红蛋白LBC2基因的质粒PESC-TRP转入酿酒酵母CEN.PK2-1C中,通过添加kozak序列促进其翻译,并进一步对启动子序列进行选择,以提高豆血红蛋白表达量。对重组菌株进行发酵,用Western blot分析LegH蛋白表达水平。结果显示,诱导型启动子GAL1,10较三种组成型启动子TEF1、ADH1、GAP在表达LegH能力上具有显著优势,较产量最低的ADH1启动子提升了3.93倍。在组成型启动子中,TEF1启动子能力较优,是ADH1启动子的2.91倍,是GAP启动子的1.2倍。最后,利用Ni柱亲和层析对蛋白进行浓缩纯化,测得LegH发酵浓度为2.79 mg/L。本研究成功实现了豆血红蛋白在酿酒酵母中的异源表达,经后续优化有可能成为豆血红蛋白异源表达的又一途径。 展开更多
关键词 酿酒酵母 豆血红蛋白 启动子优化 异源表达 蛋白质印迹
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施氮对大豆根瘤生长和结瘤固氮的影响 被引量:70
5
作者 王树起 韩晓增 +2 位作者 乔云发 严君 李晓慧 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期176-179,共4页
采用框栽试验研究了施氮对大豆根瘤生长和结瘤固氮的影响,结果表明,施氮对大豆根瘤形成、生长和固氮能力有显著影响,随着N用量的增加,根瘤干质量、根瘤数量呈现先逐渐增加而后降低的趋势,而固氮酶活性和豆血红蛋白含量则表现为持续下降... 采用框栽试验研究了施氮对大豆根瘤生长和结瘤固氮的影响,结果表明,施氮对大豆根瘤形成、生长和固氮能力有显著影响,随着N用量的增加,根瘤干质量、根瘤数量呈现先逐渐增加而后降低的趋势,而固氮酶活性和豆血红蛋白含量则表现为持续下降的趋势,适量施氮对根瘤生长有显著的促进作用,当氮素供应不足时则会抑制根瘤的生长,但当氮素供应过量时也会抑制根瘤的形成。从根瘤干质量和根瘤数量来看,各处理间表现为N100>N200>N50>N25>N0,以N100处理下根瘤干质量最大,根瘤数量最多,显著高于不施氮(N0)和其他施氮处理,从不同生育时期来看,根瘤干质量表现为从苗期到花期再到鼓粒期,大豆根瘤的数量呈现出先明显增加后逐渐减少的趋势,高峰出现在花期,而根瘤数量表现为花期>苗期。施氮显著抑制了固氮酶活性和豆血红蛋白含量,随施氮水平的增加,固氮酶活性和豆血红蛋白含量显著降低,表现为N0>N25>N50>N100>N200,表明施氮使大豆根瘤的固氮效率显著降低,因此,从大豆固氮效率来讲,施氮对大豆根瘤固氮具有抑制作用。方差分析结果表明,施氮和不施氮处理间均达到了5%的差异显著水平。因此,从大豆固氮和氮肥施用平衡的角度来看,应适量施用氮肥,既可以充分利用大豆的固氮功能,节约氮肥,又可以获得较高的产量。 展开更多
关键词 根瘤生长 固氮酶活性 豆血红蛋白含量 氮水平 大豆
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缺磷胁迫对大豆根瘤生长和结瘤固氮的影响 被引量:12
6
作者 王树起 韩晓增 +2 位作者 乔云发 严君 李晓慧 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1000-1003,共4页
采用砂培培养方法研究了缺磷胁迫对大豆根瘤生长和结瘤固氮的影响。结果表明:缺磷胁迫抑制了大豆根瘤的生长,表现为根瘤干重下降,根瘤数量减少;缺磷胁迫显著降低了大豆的固氮能力,表现为根瘤固氮酶活性和豆血红蛋白含量降低;缺磷胁迫降... 采用砂培培养方法研究了缺磷胁迫对大豆根瘤生长和结瘤固氮的影响。结果表明:缺磷胁迫抑制了大豆根瘤的生长,表现为根瘤干重下降,根瘤数量减少;缺磷胁迫显著降低了大豆的固氮能力,表现为根瘤固氮酶活性和豆血红蛋白含量降低;缺磷胁迫降低了大豆的固氮量,固氮量随磷水平的增加而增加,随着生育时期的推进,固氮量表现为先增加后降低再增加的趋势,无磷(0μmol.L-1)与高磷(50μmol.L-1)以及低磷(30μmol.L-1)与高磷处理间均达到了5%的显著差异。因此,缺磷胁迫抑制了大豆的结瘤固氮作用,使大豆的固氮效率降低。 展开更多
关键词 低磷胁迫 固氮酶活性 豆血红蛋白含量 固氮量 大豆
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豆血红蛋白的研究进展 被引量:14
7
作者 赵亚兰 尉亚辉 《西北植物学报》 CAS CSCD 2000年第4期684-689,共6页
简要介绍了豆血红蛋白的制备分析方法和基本特征及生物学功能 ,概括了其生物合成的机理 ,并初步归纳了近年来有关豆血红蛋白研究方面的主要趋势。
关键词 豆血红蛋白 脱辅基蛋白 生物合成 生物固氮
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重金属胁迫对长喙田菁茎瘤豆血红蛋白和叶绿素含量的影响 被引量:2
8
作者 袁剑刚 杨中艺 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期127-128,共2页
盆栽试验种植长喙田菁 ,栽培介质分别为纯铅锌尾矿 (T)、改性铅锌尾矿 (ST )和纯土壤 (S) ,对各处理长喙田菁茎瘤的豆血红蛋白和叶绿素含量进行分析。结果表明 ,T、ST组的茎瘤数量分别为S组的 5 5 %和 89% ,茎瘤生物量则分别为S组的 6 ... 盆栽试验种植长喙田菁 ,栽培介质分别为纯铅锌尾矿 (T)、改性铅锌尾矿 (ST )和纯土壤 (S) ,对各处理长喙田菁茎瘤的豆血红蛋白和叶绿素含量进行分析。结果表明 ,T、ST组的茎瘤数量分别为S组的 5 5 %和 89% ,茎瘤生物量则分别为S组的 6 6 %和 90 % ,但各实验组长喙田菁茎瘤的豆血红蛋白和叶绿素含量无显著性差异 ,暗示尾矿环境对茎瘤的固氮活性可能无显著影响。 展开更多
关键词 重金属胁迫 长喙田菁 茎瘤 豆血红蛋白 红绿素 铅锌尾矿 生物固氮体系 固氮活性 生物量
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PEG在模拟植物干旱胁迫和组织培养中的应用(综述) 被引量:24
9
作者 张云贵 谢永红 《亚热带植物通讯》 1994年第2期61-64,共4页
本文就PEG(聚乙二醇)的物理特性、使用方法及其在模拟植物干旱胁迫和组织培养研究中的应用进行了述评。此外,还指出了存在的一些问题。
关键词 聚乙二醇 水份胁迫 组织培养
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毛萼田菁茎瘤豆血红蛋白含量与固氮活性的关系 被引量:1
10
作者 王慧英 黄维南 《亚热带植物通讯》 1994年第2期26-29,共4页
在个体瘤发育的不同阶段和植株生长的不同时期,以及在不同的光照条件下,分别测定茎瘤的固氨活性和豆血红蛋白含量。结果表明,毛萼田菁茎瘤的固氨活性和豆血红蛋白含量呈正相关,豆血红蛋白在茎瘤的共生固氮中起着重要的作用。
关键词 毛萼四菁 茎瘤 固氮活性 豆血红蛋白
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咪唑乙烟酸抑制大豆根瘤固氮酶活性的机理研究 被引量:5
11
作者 李慧 丁伟 +1 位作者 姜俊凤 王怀彪 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期4173-4178,共6页
【目的】探索咪唑乙烟酸抑制大豆根瘤固氮酶活性的关键机制,为解决咪唑乙烟酸长期大量应用对根瘤固氮的毒害提供依据。【方法】采用田间试验方法,研究咪唑乙烟酸茎叶处理对根瘤固氮酶活性的影响与根瘤豆血红蛋白含量、根瘤类菌体和细胞... 【目的】探索咪唑乙烟酸抑制大豆根瘤固氮酶活性的关键机制,为解决咪唑乙烟酸长期大量应用对根瘤固氮的毒害提供依据。【方法】采用田间试验方法,研究咪唑乙烟酸茎叶处理对根瘤固氮酶活性的影响与根瘤豆血红蛋白含量、根瘤类菌体和细胞浆中氨含量的关系。【结果】咪唑乙烟酸施用后21 d内,固氮酶活性受到显著抑制。112.5和225.0 g a.i./hm2施药量下,对豆血红蛋白含量的抑制峰值分别出现在第7、14天,抑制率分别为30.52%和35.41%,抑制作用分别在第21、28天得到解除。根瘤类菌体中氨含量抑制峰值均出现在第14天,抑制率分别为35.33%和48.96%,第28天氨含量均恢复正常。细胞浆中氨含量显著增高,且分别在第21、28天恢复正常。【结论】咪唑乙烟酸茎叶处理后,豆血红蛋白含量降低是导致固氮酶活性降低的1个重要原因,同时细胞浆中氨积累也造成了对固氮酶活性的反馈抑制。 展开更多
关键词 咪唑乙烟酸 大豆 根瘤固氮酶 豆血红蛋白 氨含量
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大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建 被引量:2
12
作者 于海鹏 潘钰 +1 位作者 蒙明明 李海英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期69-74,共6页
以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列。利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR10... 以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列。利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba。采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)和SFH(pTR102)。盆栽试验发现,接种SFH(pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH(pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标。试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果。 展开更多
关键词 土著大豆根瘤菌 大豆血红蛋白基因lba DNA重组技术 工程菌株 三亲本杂交
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大豆血红蛋白串联基因簇转化根瘤菌工程菌株的构建 被引量:2
13
作者 于海鹏 潘钰 李海英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2011年第2期233-236,共4页
研究提取大豆根瘤总RNA并将其反转录成cDNA,以其为模板采用同源序列克隆法,利用PCR技术获得大豆血红蛋白基因lbc3、lbc2、lbc1、lba的编码区序列;利用DNA重组技术,将4个血红蛋白基因顺序连接,构建成串联基因簇lbc3-lbc2-lbc1-lba(命名为... 研究提取大豆根瘤总RNA并将其反转录成cDNA,以其为模板采用同源序列克隆法,利用PCR技术获得大豆血红蛋白基因lbc3、lbc2、lbc1、lba的编码区序列;利用DNA重组技术,将4个血红蛋白基因顺序连接,构建成串联基因簇lbc3-lbc2-lbc1-lba(命名为lbX),并构建了lbX的原核表达载体pTR-Plac-lbX;采用三亲本杂交的方法,将原核表达载体pTR-Plac-lbX转化土著大豆根瘤菌,构建转基因根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lbX),为研究转基因工程菌株对大豆根瘤固氮能力的影响奠定基础。 展开更多
关键词 大豆根瘤菌 大豆血红蛋白基因 串联基因簇 DNA重组技术 三亲本杂交
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大豆根瘤豆血红蛋白含量与产量关系研究 被引量:2
14
作者 王田 王志杰 +4 位作者 张云鹤 叶岩 郭明旸 陈展宇 张治安 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期45-51,共7页
为明确大豆豆血红蛋白与产量的关系,以12个吉林省审定推广的吉农系列大豆品种为材料,在盛花期(R2)、结荚期(R4)、鼓粒期(R6)和成熟期(R8)测定根结瘤特性和根瘤中豆血红蛋白的含量测量产量,并分析不同品种根瘤数量、干重和豆血红蛋白含... 为明确大豆豆血红蛋白与产量的关系,以12个吉林省审定推广的吉农系列大豆品种为材料,在盛花期(R2)、结荚期(R4)、鼓粒期(R6)和成熟期(R8)测定根结瘤特性和根瘤中豆血红蛋白的含量测量产量,并分析不同品种根瘤数量、干重和豆血红蛋白含量变化规律及其与产量的相关关系。结果表明:吉农51、吉农39和吉农41产量处于较高水平,显著高于吉农38、吉农43和吉农45,并且在R6和R8期吉农51、吉农41和吉农39根瘤豆血红蛋白含量比其它品种高12.4%~95.7%和14.6%~88.1%。R6和R8期根瘤豆血红蛋白的含量与根瘤数量和干重呈显著正相关,且R6期相关性更大。R6和R8期根瘤干重和根瘤数量与产量均呈显著正相关,大豆根瘤豆血红蛋白含量与产量呈极显著正相关。结果说明豆血红蛋白与产量的关系密切,豆血红蛋白含量可以作为筛选高固氮结瘤能力大豆品种的指标。 展开更多
关键词 大豆 根瘤 豆血红蛋白 产量
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硝酸盐对毛萼田菁茎瘤固氮的影响
15
作者 洪莉 陈金标 +1 位作者 娄无忌 樊庆笙 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1996年第3期225-233,共9页
KNO3对毛萼田菁(Sesbaniarostrata)茎瘤和根瘤固氮的抑制作用与瘤中积累,碳水化合物减少(特别是蔗糖)以及豆血红蛋白(lghemoglobin,Lb)浓度减少和功能受阻相关.经KNO3处理的植株的茎瘤... KNO3对毛萼田菁(Sesbaniarostrata)茎瘤和根瘤固氮的抑制作用与瘤中积累,碳水化合物减少(特别是蔗糖)以及豆血红蛋白(lghemoglobin,Lb)浓度减少和功能受阻相关.经KNO3处理的植株的茎瘤类菌体的呼吸作用和固氮活性明显下降.从KNO3处理的植株茎瘤中提取的类菌体悬液加上未经KNO3处理的正常Lb可提高固氮活性和耐pO2;加5mmol/LKNO2于正常的茎瘤类菌体悬液和Lb反应体系,引起固氮活性和耐pO2都降低,证明是Lb功能受阻的重要因素.施KNO3可能还导致茎瘤O2扩散的阻力增加. 展开更多
关键词 田菁 毛萼田菁 茎瘤 固氮作用 硝酸钾
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苜蓿核基因组文库的构建及其实验方法的几点改进
16
作者 关常辉 郑洪刚 +1 位作者 王斌 荆玉祥 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第6期480-482,共3页
目前,基因文库的构建方法虽已逐步普及,但仍有不少实验因最终未能从构建的文库中钓出目的基因而告失败。其主要原因是构建的文库没有达到预期的要求——真实有效.我们对核 DNA 分离和载体左右臂制备等的常用方法进行了改进,构建了苜蓿... 目前,基因文库的构建方法虽已逐步普及,但仍有不少实验因最终未能从构建的文库中钓出目的基因而告失败。其主要原因是构建的文库没有达到预期的要求——真实有效.我们对核 DNA 分离和载体左右臂制备等的常用方法进行了改进,构建了苜蓿的核基因组文库,其容量测定、重组子鉴定及初步的杂交筛选都证明该文库真实有效。苜蓿(Medicago sativa L.)DNA 的制备参照 Shure 等(1983)和 Ausubel 展开更多
关键词 苜蓿 基因组文库
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缺磷条件下低分子量有机酸对大豆氮积累和结瘤固氮的影响 被引量:4
17
作者 王树起 韩晓增 +2 位作者 乔云发 严君 李晓慧 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1079-1084,共6页
采用砂培方法在温室条件下研究了低分子量有机酸柠檬酸、草酸、苹果酸及3种酸的混合物对大豆植株氮素积累、结瘤和固氮的影响.结果表明:低分子量有机酸对大豆植株氮素积累有显著的抑制作用,使大豆地上部各时期氮素积累量的降低幅度分... 采用砂培方法在温室条件下研究了低分子量有机酸柠檬酸、草酸、苹果酸及3种酸的混合物对大豆植株氮素积累、结瘤和固氮的影响.结果表明:低分子量有机酸对大豆植株氮素积累有显著的抑制作用,使大豆地上部各时期氮素积累量的降低幅度分别为:苗期17.6%-44.9%,花期29.8%-88.4%,鼓粒期9.18%-69.6%,成熟期2.21%-41.7%;低分子量有机酸对大豆根瘤生长和固氮能力也有显著影响,表现为使根瘤数量、根瘤固氮酶活性和豆血红蛋白含量显著降低,降低幅度分别为11.4%-59.6%,80.5%-91.7%和11.9%-59.9%,从而使大豆的固氮效率降低,最终导致大豆的固氮量较对照显著降低(降低幅度9.71%-64.5%).低分子量有机酸对大豆氮积累、根瘤生长和固氮能力的抑制作用随浓度的增加而增加.3种有机酸中,草酸的抑制作用相对大于柠檬酸和苹果酸,3种有机酸混合后,抑制作用加强. 展开更多
关键词 低分子量有机酸 氮积累 固氮酶活性 豆血红蛋白含量 大豆
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转基因衣藻lba及对照藻产氢培养条件的优化
18
作者 许丽丽 阎光宇 +1 位作者 王全喜 吴双秀 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期44-49,共6页
通过对莱茵衣藻849及其转基因衣藻lba进行光照强度、细胞浓度和培养基中硫酸盐含量三因素三水平的正交实验,确定了两个藻种的最佳产氢条件,同时对转基因藻和849产氢培养条件下的光合放氧速率和pH进行了检测。实验结果表明,在25℃下,莱... 通过对莱茵衣藻849及其转基因衣藻lba进行光照强度、细胞浓度和培养基中硫酸盐含量三因素三水平的正交实验,确定了两个藻种的最佳产氢条件,同时对转基因藻和849产氢培养条件下的光合放氧速率和pH进行了检测。实验结果表明,在25℃下,莱茵衣藻849和转基因衣藻lba的最佳产氢条件都为光照强度60μmol/(m2.s),细胞浓度为叶绿素含量12.5μg/ml,培养基中硫酸盐含量0μmol/L。莱茵衣藻849和转基因衣藻lba的最高氢气产量分别达到了349μl/mg chlorophyll和634μl/mg chlorophyll。在产氢条件下,转基因藻lba的净光合放氧速率比849低。结果为利用豆血红蛋白特性通过基因工程手段提高莱茵衣藻产氢量提供基础实验数据。 展开更多
关键词 莱茵衣藻 转基因 豆血红蛋白 lba基因 培养条件优化
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豆血红蛋白在毕赤酵母中的表达条件优化 被引量:3
19
作者 陈林杰 薛常鲁 +3 位作者 苏悦 肖功年 徐志南 魏培莲 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期2050-2061,共12页
【背景】豆血红蛋白可赋予素肉制品类似牛肉的红褐色质地,已被美国食品药物监督管理局批准作为人造素肉的着色剂,近年来受到广泛关注。【目的】优化毕赤酵母产豆血红蛋白的培养条件,提高毕赤酵母产豆血红蛋白的产量。【方法】首先通过... 【背景】豆血红蛋白可赋予素肉制品类似牛肉的红褐色质地,已被美国食品药物监督管理局批准作为人造素肉的着色剂,近年来受到广泛关注。【目的】优化毕赤酵母产豆血红蛋白的培养条件,提高毕赤酵母产豆血红蛋白的产量。【方法】首先通过单因素试验研究蛋白胨种类、大豆蛋白胨浓度、铁盐种类及血红素浓度在诱导阶段对毕赤酵母产豆血红蛋白的影响;然后通过Plackett-Burman试验设计筛选出对豆血红蛋白产量影响最大的3个因素,再通过最陡爬坡法确定3个因素的变化范围,对3个因素进行响应面分析;最后根据响应面结果进行摇瓶发酵和发酵罐高密度发酵。【结果】单因素试验发现:用4%大豆蛋白胨作为主要氮源、甲醇诱导浓度为1.5%、血红素浓度为5μmol/L时发酵效果较好,经过响应面优化后得到蛋白胨浓度为51.48 g/L、pH 5.66、培养基装液量35.84mL/250mL是最优发酵条件。在此优化条件下,LegH摇瓶发酵产量为0.191 mg/mL,与预测值(0.183 mg/mL)比较接近。采用5 L发酵罐进行高密度发酵,LegH产量最高达到0.384 mg/mL。【结论】优化了毕赤酵母表达豆血红蛋白的发酵条件,获得了较高产量,通过罐上发酵的进一步优化,具有一定的工业化前景。 展开更多
关键词 豆血红蛋白 毕赤酵母 响应面法 培养基优化 高密度发酵
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氮处理对大豆根瘤固氮能力及GmLbs基因表达的影响 被引量:5
20
作者 杜梦柯 连文婷 +1 位作者 张晓 李欣欣 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期391-403,共13页
共生根瘤的固氮效率受外界氮素的严格调控。除固氮酶活性外,豆血红蛋白(Lb)浓度亦是反应固氮能力的重要指标。为明确氮水平对生物固氮作用的影响,以大豆(Glycine max)为材料,在低氮(0.53mmol·L^(-1))条件下接种根瘤菌,30天后再进... 共生根瘤的固氮效率受外界氮素的严格调控。除固氮酶活性外,豆血红蛋白(Lb)浓度亦是反应固氮能力的重要指标。为明确氮水平对生物固氮作用的影响,以大豆(Glycine max)为材料,在低氮(0.53mmol·L^(-1))条件下接种根瘤菌,30天后再进行高氮(5.3、10、20、30和40 mmol·L^(-1))处理7天,分析Lb浓度、固氮酶活性及类菌体发育状态。结果表明,随着外界氮浓度的增加,根瘤由红变绿,且红色Lb明显减少而绿色Lb急剧增加;固氮酶活性显著被抑制,类菌体中侵染细胞数目和面积显著下降,表明高氮引起Lb形态的改变与固氮能力关系密切。利用生物信息学及公开表达谱等数据进行分析,发现大豆根瘤中主要含有4个共生Lb基因,即GmLb1、GmLb2、GmLb3和GmLb4。4个GmLbs亲缘关系很近且位于进化树的同一分支。进一步分析GmLb1–4转录水平对氮的响应,结果表明,GmLb1–4的表达显著受高氮抑制。研究结果可为揭示氮介导根瘤衰老机制及生物固氮的应用提供依据。 展开更多
关键词 生物固氮 GmLbs 豆血红蛋白 氮浓度 大豆
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