男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ_2、leptin、TNF-α mRNA的表达与胰岛素抵抗

目的:研究肥胖患者腹部皮下脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(PPARγ2)、瘦素(leptin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:应用RT-PCR凝胶成像半定量技术测定男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA及TNF-α mRNA,以及空腹血清leptin、胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBS),计算胰岛素抵抗指数(IRI),分析观察指标与肥胖之间的相关关系。结果:①肥胖组FINS、leptin、IRI、脂肪组织mRNA、leptin mRNA及TNF-α mRNA高于非肥胖组(P<0.05);②IRI与leptin mRNA、TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptin、BMI、FINS成正相关(P<0.05);③以IRI为应变量,TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptinmRNA、血清leptin、BMI为自变量做多元逐步回归分析,回归方程:Y=0.358+0.813PPARγ2mRNA。结论:①男性肥胖患者leptin及腹部皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA、TNF-α mRNA较非肥胖者升高;②男性患者PPARγ2 mRNA与IR密切相关,可以反映IR的程度。

早期饲喂沙棘提取物对猪生长性能、肉品质和血清Leptin水平及脂肪Leptin mRNA表达的影响

本试验旨在研究早期饲喂沙棘提取物对猪生长性能、肉质、血清leptin水平及脂肪组织lept★表达的影响。选用(28±2)日龄断奶的长白×大白二元杂交仔猪24头,随机分成试验组和对照组,每组3个重复,每重复4头猪(公母各1/2)。第一阶段对照组饲喂基础日粮,试验组日粮在其基础上添加0.1%沙棘提取物,于57日龄起第二阶段全部饲喂基础日粮,至180日龄结束试验。运用荧光相对定量PCR测定脂肪中leptin mRNA表达量,以及沙棘提取物对肉质和血清leptin水平的影响。结果表明,早期饲喂沙棘提取物可显著提高试验组肥育猪眼肌面积(P<0.05),降低背膘厚和肌内脂含量(P<0.05);试验组仔猪血清leptin水平显著高于对照组(P<0.05),而肥育猪的试验组与对照组无显著差异(P>0.05);试验组肥育猪背部皮下脂肪和肠系膜脂肪leptin mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),腹部皮下脂肪leptin mRNA表达量高于对照组,差异极显著(P<0.01)。脂肪leptin mRNA表达量与血清leptin水平呈极显著负相关(P<0.01);对照组脂肪leptin mRNA表达量与背膘厚、眼肌面积和肌内脂呈显著相关(P<0.05)。综合分析认为,在断奶仔猪日粮中添加0.1%沙棘提取物可通过影响脂肪leptin mRNA表达量及血清leptin水平,改变与肉质的相关系数,来改善肥育猪肉质特性。

长型Leptin(瘦素)受体mRNA在大鼠消化道中的表达

本试验以 5只 SD雌性大鼠为研究对象 ,采用原位杂交技术研究了大鼠消化道长型 Leptin (瘦素 )受体 m RNA的表达及其分布。结果表明 ,长型 Leptin受体 m RNA在大鼠胃和十二指肠的粘膜及粘膜下层组织中广泛表达 ,从而证明了在大鼠消化道存在长型

不同能量摄入水平对围产期奶牛脂肪组织Leptin mRNA和HSL mRNA表达的影响

选用围产期健康奶牛30头随机均分为3组,其中组为对照组,组和组为试验组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组于产前28d开始分别饲喂中国奶牛饲养标准(2000)标准日粮(能量摄入100%组)、标准日粮增加20%日粮(能量摄入120%组)和标准日粮减少20%日粮(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂同一标准日粮至56 d。试验各组奶牛分别于产前28、14 d、产后1、14、28、56 d尾根部手术采取脂肪样品,采用荧光RT-PCR法对脂肪组织Leptin mRNA及HSL mRNA表达水平进行定量分析。结果表明,不同能量摄入水平显著影响脂肪组织Leptin mRNA和HSL mR-NA表达。低能饲喂明显提高了脂肪组织中Leptin mRNA表达,降低了HSL mRNA表达;高能饲喂明显降低了脂肪组织中Leptin mRNA表达,提高了HSL mRNA表达。

丹参多酚酸盐对实验性肝硬化大鼠肝组织TNF-α和IL-6 mRNA的表达影响

目的:观察丹参多酚酸盐对肝硬化大鼠肝组织TNF-α和IL-6 mRNA表达影响。方法:SD大鼠40%CCL4-橄榄油溶液建立肝硬化大鼠模型,随机分成4组:模型组、丹参多酚酸盐治疗低、中、高剂量组,分别每天腹腔注射葡萄糖溶液、丹参多酚酸盐12、24、48 mg/kg 2周。另取10只大鼠正常对照。治疗结束后观察各组大鼠死亡率,肝组织外观,光度法测门静脉血内毒素水平,光镜下观察病理形态学改变,Real-time RT-PCR法检测肝脏组织TNF-α和IL-6 mRNA的表达变化。结果:模型组大鼠死亡率42.86%,丹参多酚酸盐高剂量组无死亡率;与正常组比较,模型组内毒素水平显著升高(P<0.01),经丹参多酚酸盐治疗后低剂量组内毒素水平降低(P<0.05),丹参多酚酸盐中剂量组与高剂量组显著降低(P<0.01)。丹参多酚酸盐治疗组肝脏色泽、质地、边缘、表面光滑度及组织病理较模型对照组有明显改善。高剂量组TNF-αmRNA和各治疗组IL-6mRNA表达量与模型组相比有显著统计学差异(P<0.01),中剂量组TNF-αmRNA表达量与模型组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:丹参多酚酸盐降低肝硬化大鼠死亡率,改善肝硬化大鼠肝组织炎症程度,抑制肝组织TNF-α和IL-6 mRNA表达。

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑Leptin受体及神经肽Y mRNA的影响

目的：从基因转录水平探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠（ASR）肥胖及无排卵的影响。方法：采用α－32P标记瘦素（leptin）受体（OB－R）及神经肽Y（NPY）寡核苷酸探针原位杂交、放射自显影技术结合图像分析，观察中药治疗前后下丘脑弓状核（AR）两种物质mRNA的表达变化。结果：ASR中ARC的NPY基因表达水平明显增加（P＜0．01），OB－R基因表达水平明显降低（P＜0．01），ASR呈肥胖、无排卵状态。用中药天癸方治疗后，NPY基因表达下降，OB－R基因表达上升至正常大鼠水平。结论：ASR肥胖及无排卵可能与NPYmRNA过度表达、OB－RmRNA数目异常有关，中药可调节NPY和OB－RmRNA表达而发挥减肥及促排卵作用。

侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑前阿黑皮素mRNA表达的影响

给体重 180～ 2 0 0 g的雌性 SD大鼠侧脑室中注射重组瘦素 (L eptin) 1μg,采用 RT- PCR测定了其下丘脑前阿黑皮素 (POMC) m RNA和 L eptin受体 (OB- R) m RNA的表达水平。结果表明 ,注射重组 L eptin后 ,OB- R基因和 POMC基因表达量均上升 ,与生理盐水注射组、空白对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。由此认为 ,L eptin在大鼠下丘脑

通痹灵对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞TNF-αmRNA表达的影响

类风湿性关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）是一种免疫介导的炎症性疾病，多种细胞因子如：ＩＬ－１、ＩＬ－６及ＴＮＦ单独或联合介导ＲＡ炎症组织损伤。其中ＴＮＦ在ＲＡ炎症、软骨吸收和骨破坏中起重要作用，是ＲＡ发病机理中居中心地位的促炎症...

+Gz重复暴露大鼠脑组织中IL-1β和TNF-αmRNA表达变化

目的了解反复高 +Gz暴露后大鼠脑组织中IL 1 β和TNF αmRNA表达变化。方法 2 0只SD大鼠随机分成对照组、+Gz重复暴露后 3 0min、6h、2 4h和 48h五组 ,每组 4只。对照组大鼠G值为 +1Gz ,实验组大鼠在动物离心机上经历了 3次 +1 4Gz/45s(两次间间隔 3 0min)作用。分别于暴露后 3 0min、6h、2 4h和 48h处死大鼠取脑 ,提取总RNA ,用半定量反转录聚合酶链反应 (RT -PCR)检测方法检测大鼠脑组织中IL 1 β和TNF αmRNA表达水平。结果 +Gz暴露后 3 0min、6h和 2 4h大鼠脑组织IL 1 β和TNF αmRNA均有升高 ,但 48h时均恢复正常。结论反复高 +Gz暴露可刺激大鼠脑组织内IL 1 β和TNF αmRNA表达 ,它们在 +Gz所致脑损伤中起一定的作用 。

长型Leptin(瘦素)受体mRNA在大鼠卵巢中的表达和分布

以5只SD雌性大鼠为研究对象,采用原位杂交技术研究了大鼠长型Leptin受体mRNA在大鼠卵巢中的表达及其分布。结果表明,Leptin受体mRNA在大鼠卵巢中,主要分布于黄体细胞以及黄体、初级卵泡、生长卵泡和成熟卵泡周围基质颗粒细胞内。而且在黄体细胞上有黄褐色阳性颗粒密集分布;在基质等其他部位中未能检测到Leptin受体mRNA杂交信号。

电针对脑缺血再灌注大鼠缺血脑区IL-1β和TNF-α mRNA表达的调节

目的 :探讨早期针刺治疗抗脑缺血再灌注炎性损伤的机制。方法 :采用大脑中动脉线栓法制备MCAO缺血再灌注模型 ,应用原位杂交的方法观察脑缺血再灌注及电针对大鼠大脑皮质、纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA表达的影响。结果 :脑缺血再灌注后 ,缺血侧皮层及纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA免疫阳性细胞表达增高 (模型组与正常组、假手术组比较P <0 0 1 ) ;电针可显著降低缺血侧皮层及纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA免疫阳性细胞表达 (电针组与模型组比较P <0 0 1 )。结论 :早期针刺治疗可能通过下调缺血脑区IL 1 βmRNA、TNF

补阳还五汤对AD大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1β mRNA、IL-6mRNA、TNF-α mRNA表达影响的研究

目的:采用分子杂交技术观察补阳还五汤对Aβ1-40所致老年痴呆(AD)大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA及TNF-αmRNA表达的影响,进一步探讨该组方治疗AD的机制,为其临床应用提供实验依据。方法:70只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、补阳还五汤组、补气组、活血组和脑复康组,每10只。采用注射Aβ1-40的方法制备AD模型,分子杂交技术检测大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的表达。结果与结论:补阳还五汤能够明显降低AD大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA和TNF-αmRNA的表达,从而改善大脑记忆障碍,达到防治AD的作用。

国产降纤酶对缺血/再灌注大鼠脑组织TNF-α及IL-1βmRNA表达的影响

目的观察国产降纤酶对局灶性缺血/再灌注不同时程大鼠脑组织TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达的影响,探讨降纤酶减轻脑缺血/再灌注损伤的可能机制。方法应用RT-PCR技术,分析降纤酶治疗的脑缺血3h/再灌注3h、6h、24h和72h大鼠脑组织TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达水平。结果缺血3h/再灌注72h,降纤酶治疗组动物缺血侧脑组织TNF-αmRNA的表达水平明显低于生理盐水对照组(P<0.01);降纤酶治疗组动物缺血侧脑组织IL-1βmRNA的表达水平在缺血3h/再灌注3h和6h时显著低于生理盐水组(P<0.05)。结论降纤酶减轻脑的缺血/再灌注损伤与下调细胞因子TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达有一定的关系。

哮喘病人TNF-α-308位点A/G基因多态性及mRNA表达与代谢综合征的关系

目的:探讨哮喘病人TNF-α-308位点的基因多态性及mRNA表达与代谢综合征(MS)的关系。方法:根据是否合并MS将124例哮喘病人分为哮喘并MS组48例和哮喘非MS组76例,选择健康志愿者60例为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法测定TNF-α-308位点基因多态性,实时荧光定量PCR法检测其外周血单个核细胞中TNF-αmRNA表达水平。同时测定生化指标及受试者肺功能。结果:(1)哮喘并MS组与对照组比较,GA+AA基因型频率及A等位基因频率明显升高(P<0.05);(2)哮喘组GA+AA基因型组与GG基因型组比较,舒张压、腰围、体重指数、TG、LDL-C、HOMA-IR、IgE、CRP、TNF-α水平明显升高(P<0.05~0.01);TNF-αmRNA表达明显增加(P<0.01),FEV1%和FEV1/FVC%明显下降(P<0.01);(3)多因素回归分析结果显示,TNF-αmRNA表达与CRP、TNF-α、腰围及FINS呈正相关(t=2.100~3.932,P<0.05~0.01);HOMA-IR与LDL-C、TNF-α-308A等位基因携带呈正相关(t=7.156、7.555,P<0.01),与FEV1/FVC呈负相关(t=-4.063,P<0.01);FEV1%与IgE、FINS、TNF-α呈负相关(t=-3.639^-5.644,P<0.01)。结论:哮喘病人TNF-α-308位点G→A变异及TNF-αmRNA表达增加与哮喘病人的代谢表型有关。TNF-α-308位点A等位基因携带、LDL-C水平增加及肺功能下降导致胰岛素抵抗,进而造成哮喘病人代谢综合征的发生率增加。

赤雹根总皂苷对佐剂型关节炎大鼠的抗炎作用及TNF-α,IL-1β和IL-6mRNA表达的影响

目的观察赤雹根总皂苷(STDR)对大鼠佐剂型关节炎(AA)的治疗作用及对其炎症组织中TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达水平的影响,探讨STDR治疗类风湿性关节炎的作用机制,为临床应用提供实验依据。方法雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、STDR 40mg·kg-1·d-1,80mg·kg-1·d-1,160mg·kg-1·d-1剂量组和雷公藤多苷12mg·kg-1·d-1对照组。除正常对照组外,其余各组大鼠均于右后足跖部皮下注射完全弗氏佐剂0.1ml。造模18天后各给药组均ig给予相应药物,模型对照组ig给予等体积蒸馏水,给药21 d。于给药后第21天处死大鼠,取其足跖部,采用RT-PCR法提取炎症组织中mRNA测定TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达水平,并取膝关节滑膜组织进行病理学观察。结果 TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达水平明显著低于模型组(P<0.05或P<0.01),膝关节滑膜增生及炎症反应明显轻于模型组。结论 STDR对大鼠AA具有显著的治疗作用,其抑制TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA的表达可能是其治疗AA的机制之一。

氧化苦参碱干预急性出血坏死性胰腺炎大鼠TNF-α mRNA和IL-1β mRNA的表达

目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)干预实验性急性出血坏死性胰腺炎(acute hemorrhagic necrotizing pan-creatitis,AHNP)大鼠TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达。方法以5 g/dl牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射建立Sprague-Dewley(SD)大鼠AHNP,将SD大鼠随机分为SO组、AHNP-NS组及AHNP-OM组。检测血清TNF-α和IL-1β含量及胰腺组织中TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达。结果AHNP-NS组和AHNP-OM组血清TNF-α水平3 h与6 h分别为286.5±50.3pg/ml和150.3±40.7 pg/ml及500.5±45.3 pg/ml和240.5±60.3 pg/ml(P<0.05);AHNP-NS组和AHNP-OM组3 h与6 h血浆IL-1β分别为:293.8±46.3 pg/ml,388.0±44.5 pg/ml和150.2±47.5 pg/ml,182.7±30.6 pg/ml(P<0.05);AHNP-OM组造模3 h与6h胰腺组织TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达较AHNP-NS组显著减弱(P<0.05)。结论OM预处理能够显著减少牛磺胆酸钠SD大鼠AHNP模型炎症细胞因子IL-1β和TNF-α,从而改善胰腺炎病变的严重程度。

基底节脑出血手术患者HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA变化及其与预后的关系

目的探讨基底节脑出血外侧裂入路手术患者糖化血红蛋白(HbA1c)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM-3)mRNA的变化及其与预后的关系。方法选取经外侧裂入路治疗基底节脑出血的患者286例,根据患者术后90 d改良Rankin量表(mRS)评分分为预后良好组(0~2分,n=234)和预后不良组(3~6分,n=52)。比较2组患者术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平变化,并记录2组患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分和格拉斯哥昏迷评分(GCS)变化。采用Pearson相关分析法分析各血液指标与NIHSS评分、GCS评分的相关性;采用Logistic回归方程分析各血液指标与患者预后的关系;采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析术前、术后7 d各血液指标预测预后的效能,以ROC分析各指标的截断值,将患者分为HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA高危、低危患者;采用卡普兰—迈耶(KM)生存曲线分析HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA高危、低危患者的不良预后发生率。结果预后不良组术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平均高于预后良好组(P<0.05)。预后不良组术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的NIHSS评分均高于预后良好组,GCS评分均低于预后良好组(P<0.05)。患者术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平与术前NIHSS评分均呈正相关,与GCS评分均呈负相关(P<0.05);术前、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平较高与患者不良预后显著相关(P<0.05);术前各指标联合预测不良预后的AUC为0.856,术后7 d为0.881,高于任一单一指标预测结果;KM生存曲线分析显示,术前、术后7 d高危患者不良预后发生率高于低危患者(P<0.05)。结论基底节脑出血外侧裂入路手术围术期HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA处于持续高水平状态的患者多存在预后不良的可能,且术前、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平与预后显著相关,检测患者HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平有望成为一个预测预后的可靠方法。

慢性不完全性睡眠剥夺大鼠对海马TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA表达及脾脏NK细胞活性的影响

目的:探讨慢性疲劳大鼠睡眠剥夺后对血清细胞因子,海马TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA表达及脾脏NK细胞活性的影响。方法:采用负重力竭游泳法制备CFS大鼠模型,用小平台水环境法剥夺睡眠12 h,将20只SD大鼠随机分为对照组和睡眠剥夺组,连续应激21 d后,Morris水迷宫测量大鼠学习记忆能力;采用ELISA检测血清TNF-α、IFN-γ、TGF-β的含量;Rael time-PCR检测海马TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA的表达;LDH释放法检测脾脏NK细胞活性。结果:与对照组相比,睡眠剥夺组体质量在7 d、21 d明显降低(P <0. 01),14 d降低(P <0. 05);力竭时间7 d增长(P <0. 05),14 d减少(P> 0. 05),21 d明显增长趋势(P> 0. 05);Morris水迷空间搜索实验,总路程、平均速度提高(P <0. 05),经过平台次数降低(P <0. 05);血清IFN-γ含量和海马IFN-γ mRNA表达升高(P <0. 05);脾脏NK细胞活性降低(P <0. 05)。结论:CFS出现的认知功能下降、抑郁等神经精神症状很可能是睡眠质量差导致,长期睡眠不足使NK细胞活性降低,是机体对致病微生物的抵抗能力崩溃的主要原因。

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成过程中TNF-αmRNA表达的影响

目的 检测血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗对小鼠肝虫卵肉芽肿细胞内ＴＮＦ－ｍＲＮＡ表达的影响。方法 用１０～６ＣＦＵ疫苗皮下注射和腹腔注射分别免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，免疫后８Ｗ用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染，感染后６Ｗ剖杀小鼠，分离肝脏，运用原位杂交技术检测ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ表达。结果 疫苗免疫，尾蚴攻击后小鼠肝虫卵肉芽肿细胞内ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ表达显著加强。结论 血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗能促进宿主Ｔｈ１反应，加强宿主抗血吸虫感染的保护性免疫力。

动脉粥样硬化闭塞症兔动脉TNF-α mRNA、NF-κB mRNA表达的变化

目的:探讨动脉粥样硬化闭塞症(ASO)兔模型TNF-α mRNA、NF-κB mRNA表达的变化,部分阐明ASO炎症反应机制。方法:建立动脉粥样硬化闭塞症动物模型,观察主动脉内皮组织TNF-α mRNA,NF-κB mRNA表达情况,采用SPSS 11.0统计软件进行单因素方差检验。结果:通过以目的基因的相对转录量为参数进行统计分析可知,模型组兔子动脉内皮组织TNF-α mRNA、NF-κB mRNA的表达与对照组比较均显著升高,有统计学差异(P<0.01)。结论:ASO形成过程中,动脉内皮组织TNF-α mRNA、NF-κB mRNA的表达显著升高,提示抑制TNF-α mRNA表达,阻断NF-κB的激活,或抑制NF-κB mRNA,对于拮抗ASO的发生发展都有着极其重要的临床意义。