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Identification of Light-Harvesting Chlorophyll a/b-Binding Protein Genes of Zostera marina L.and Their Expression Under Different Environmental Conditions 被引量:3
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作者 KONG Fanna ZHOU Yang +3 位作者 SUN Peipei CAO Min LI Hong MAO Yunxiang 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS 2016年第1期152-162,共11页
Photosynthesis includes the collection of light and the transfer of solar energy using light-harvesting chlorophyll a/b-binding(LHC) proteins.In high plants,the LHC gene family includes LHCA and LHCB sub-families,whic... Photosynthesis includes the collection of light and the transfer of solar energy using light-harvesting chlorophyll a/b-binding(LHC) proteins.In high plants,the LHC gene family includes LHCA and LHCB sub-families,which encode proteins constituting the light-harvesting complex of photosystems I and II.Zostera marina L.is a monocotyledonous angiosperm and inhabits submerged marine environments rather than land environments.We characterized the Lhca and Lhcb gene families of Z.marina from the expressed sequence tags(EST) database.In total,13 unigenes were annotated as Zm Lhc,6 in Lhca family and 7 in Zm Lhcb family.Zm LHCA and Zm LHCB contained the conservative LHC motifs and amino acid residues binding chlorophyll.The average similarity among mature Zm LHCA and Zm LHCB was 48.91% and 48.66%,respectively,which indicated a high degree of divergence within Zm LHChc gene family.The reconstructed phylogenetic tree showed that the tree topology and phylogenetic relationship were similar to those reported in other high plants,suggesting that the Lhc genes were highly conservative and the classification of Zm Lhc genes was consistent with the evolutionary position of Z.marina.Real-time reverse transcription(RT) PCR analysis showed that different members of Zm Lhca and Zm Lhcb responded to a stress in different expression patterns.Salinity,temperature,light intensity and light quality may affect the expression of most Zm Lhca and Zm Lhcb genes.Inorganic carbon concentration and acidity had no obvious effect on Zm Lhca and Zm Lhcb gene expression,except for Zm Lhca6. 展开更多
关键词 叶绿素A 陆地环境 大叶藻 蛋白基因 系统进化树 鉴定 基因家族 表达序列标签
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毛竹捕光叶绿素a/b结合蛋白基因cab-PhE1的克隆与表达分析 被引量:15
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作者 高志民 刘成 +1 位作者 刘颖丽 彭镇华 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期145-149,共5页
The light harvesting chlorophyll a/b-binding protein is one of key proteins in the transformation from light energy to chemical energy. An open reading frame coding precursor protein of cab gene was cloned from the fi... The light harvesting chlorophyll a/b-binding protein is one of key proteins in the transformation from light energy to chemical energy. An open reading frame coding precursor protein of cab gene was cloned from the first strand of bamboo cDNA through RT-PCR methods,and named as cab-PhE1 (cab gene 1 from Phyllostachys edulis EF207229). The sequence analysis showed that the deduced polypeptide was highly homologous to some other CAB proteins from monocotyledon,and the gene belonged to lhcb2 family. Tissue specific expression showed that cab-PhE1 expressed higher in leaf than sheath and stem. The prokaryotic expression vector of cab-PhE1 gene encoding the mature protein was constructed by subcloning the fragment into pET-23 a and was expressed in Escherichia coli induced by IPTG. The molecular weight of the induced protein was about 28 ku,approximate to that of the mature protein. This work is a key to the further research on in vitro reconstitution of light-harvesting Chl a/b complexes. 展开更多
关键词 毛竹 捕光叶绿素a/b结合蛋白基因 组织特异性表达 原核表达
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绿竹cab-BO2基因的克隆及其表达载体的构建 被引量:7
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作者 高志民 李雪平 +1 位作者 岳永德 彭镇华 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第3期431-435,共5页
捕光叶绿素a/b结合蛋白基因是绿色植物光合系统中的重要基因,其编码的蛋白与色素所形成的蛋白复合体在光化学反应、光保护等方面都起着重要的作用。采用RT-PCR技术和与RACE-PCR技术,从绿竹中克隆到捕光叶绿素a/b结合蛋白基因的全长cDNA... 捕光叶绿素a/b结合蛋白基因是绿色植物光合系统中的重要基因,其编码的蛋白与色素所形成的蛋白复合体在光化学反应、光保护等方面都起着重要的作用。采用RT-PCR技术和与RACE-PCR技术,从绿竹中克隆到捕光叶绿素a/b结合蛋白基因的全长cDNA编码区,命名为cab-BO2(GenBank登记号:EF088668)。该基因编码区长为792bp,编码263个氨基酸。通过加酶切位点的方法,将基因的编码区直接构建到载体pBI121多克隆位点。经过酶切检测,获得了包含35S启动子、cab基因、GUS报告基因和NOS终止区域的植物表达载体。 展开更多
关键词 绿竹(Dendrocalamopsis oldhami) 捕光叶绿素a/b结合蛋白基因 cab-bO2基因 植物表达载体
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马尾松捕光叶绿素a/b结合蛋白基因cab-Pm1的克隆与原核表达 被引量:5
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作者 王猛 曹福祥 龙绛雪 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期172-177,共6页
光合作用是光合生物将光能转化为化学能,并同时将无机物转化成有机物贮存在生物体的过程。现已证明光合生物对光能的吸收、传递和转化都是在光合膜上具有一定的分子排列和空间构象的色素蛋白复合体上进行的(郁飞等,2001)。
关键词 马尾松 捕光叶绿素a/b结合蛋白基因 序列分析 原核表达
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中国水仙叶绿素a/b结合蛋白基因Ntcab1的克隆与序列分析 被引量:5
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作者 林江波 王伟英 +1 位作者 邹晖 戴艺民 《福建农业学报》 CAS 2013年第5期463-467,共5页
以多效唑诱导中国水仙的抑制差减杂交文库(SSH)获得的cDNA片段为基础,采用RACE及RT-PCR技术,分离克隆到1个叶绿素a/b结合蛋白基因Ntcab1。此基因包含有1个798bp完整阅读框架(ORF),编码265个氨基酸,分子量为28.155kD,理论等电点为5.48。... 以多效唑诱导中国水仙的抑制差减杂交文库(SSH)获得的cDNA片段为基础,采用RACE及RT-PCR技术,分离克隆到1个叶绿素a/b结合蛋白基因Ntcab1。此基因包含有1个798bp完整阅读框架(ORF),编码265个氨基酸,分子量为28.155kD,理论等电点为5.48。聚类分析表明:其氨基酸序列与拟南芥LHCb1.1聚为一类,推测其属于LHCb1类蛋白,与麦冬和石蒜的Cab亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析结果表明:喷雾多效唑后,Ntcab1在抽葶期和始花期的表达量比喷雾清水稍高。 展开更多
关键词 中国水仙 叶绿素A b结合蛋白 基因克隆
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金银花叶绿素a/b结合蛋白基因LjCab克隆与表达特性分析 被引量:5
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作者 蒋向辉 苑静 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第3期409-414,共6页
采用设计简并性引物和RACE克隆相结合,从金银花中克隆了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长,命名为LjCab(GenBank号:JQ621945.1).基因全长为960bp,开放阅读框为798bp,其编码265个氨基酸,基因不含内含子属于光系统II的Cab基因.对LjCab基因核... 采用设计简并性引物和RACE克隆相结合,从金银花中克隆了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长,命名为LjCab(GenBank号:JQ621945.1).基因全长为960bp,开放阅读框为798bp,其编码265个氨基酸,基因不含内含子属于光系统II的Cab基因.对LjCab基因核苷酸序列进行亲缘关系分析发现其与烟草和五彩椒的Cab基因亲缘关系较近.金银花在不同条件处理下,对LjCab基因进行定量PCR检测分析,结果显示:LjCab基因受光、6-BA、GA3和NAA诱导表达,但是黑暗和ABA激素处理对LjCab基因的表达没有明显的影响.本研究为进一步解析金银花光合作用机理及其相关基因的诱导表达特性提供了参考. 展开更多
关键词 金银花 叶绿素a/b结合蛋白 Ljcab基因 表达特性
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毛竹cab-PhE11基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 刘颖丽 高志民 彭镇华 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期19-23,共5页
采用RT-PCR技术和RACE-PCR技术,从毛竹(Phyllostachys edulis)中分离了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因cDNA编码区全长,命名为cab-PhE11(GenBank登记号:EU327783)。该基因全长1154 bp,编码区cDNA全长753 bp,编码250个氨基酸。生物信息学分析... 采用RT-PCR技术和RACE-PCR技术,从毛竹(Phyllostachys edulis)中分离了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因cDNA编码区全长,命名为cab-PhE11(GenBank登记号:EU327783)。该基因全长1154 bp,编码区cDNA全长753 bp,编码250个氨基酸。生物信息学分析表明,在cab-PhE11编码的蛋白第62~239位包括典型的捕光叶绿素a/b结合蛋白功能域,还包含1个N-糖基化位点、1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点、5个N-肉豆蔻酸化位点以及1个丙氨酸富集区。序列相似性分析结果表明,cab-PhE11编码的氨基酸序列与玉米、绿豆、拟南芥、烟草等的cab基因有较高的相似性,都在80%以上,该基因属于lhcb6类基因。 展开更多
关键词 毛竹 捕光叶绿素a/b结合蛋白基因 序列分析
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光捕获叶绿素a/b结合蛋白基因在植物逆境胁迫中的研究进展 被引量:1
8
作者 韩艺 赵继发 +4 位作者 蔡璨 彭疑芳 张梅娟 沙伟 马天意 《高师理科学刊》 2023年第6期79-83,共5页
光合作用是植物最基本的生命活动之一,逆境胁迫可通过影响光合作用抑制植物生长.光捕获叶绿素a/b结合蛋白(light-harvesting chlorophyll a/b-binding proteins,Lhc)是光合作用中的一个重要成员,有大量研究表明,Lhcs及其编码基因在植物... 光合作用是植物最基本的生命活动之一,逆境胁迫可通过影响光合作用抑制植物生长.光捕获叶绿素a/b结合蛋白(light-harvesting chlorophyll a/b-binding proteins,Lhc)是光合作用中的一个重要成员,有大量研究表明,Lhcs及其编码基因在植物的抗逆性方面起到了不可忽视的作用,如在干旱胁迫下使抗氧化酶活性增加,通过激活脱落酸信号通路来促进耐寒性,在不同的逆境胁迫下通过表达量上调或者下调影响相关功能的蛋白质以达到最终的抗逆效果.因此,Lhc基因对于植物的生长乃至生存具有重要的意义.对近年来Lhc基因在分类、功能以及在环境胁迫中的作用等方面的研究结果进行概括总结,为进一步研究Lhc基因提供理论基础. 展开更多
关键词 光捕获叶绿素a/b结合蛋白基因 植物逆境胁迫 光系统
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竹子捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长的克隆和序列分析 被引量:14
9
作者 高志民 李雪平 +1 位作者 彭镇华 岳永德 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期34-38,共5页
采用RT-PCR技术与RACE技术,从绿竹中克隆到捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长eDNA,命名为cab-BO1(GenBank登记号:EF061137)。该基因长1102bp,从第64—861bp含有1个开放阅读框,编码265个氨基酸。cab-BO1编码的氨基酸中第64-232位包... 采用RT-PCR技术与RACE技术,从绿竹中克隆到捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长eDNA,命名为cab-BO1(GenBank登记号:EF061137)。该基因长1102bp,从第64—861bp含有1个开放阅读框,编码265个氨基酸。cab-BO1编码的氨基酸中第64-232位包括典型的捕光叶绿素a/b结合蛋白功能域,第9—11位为蛋白激酶c的磷酸化位点,第27~52位为泛素结构功能域信号,第55~58位为酪氨酸激酶(CK2)磷酸化位点O序列相似性分析结果表明:cab-BO1 DNA序列和编码的氨基酸序列与玉米、小果野蕉、小麦、水稻等的cab基因及其氨基酸序列的相似性分别在85%和89%以上,显示了cab家族基因在进化过程中的保守性。 展开更多
关键词 绿竹 叶绿素a/b结合蛋白基因(cab) 基因克隆 序列分析
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绿竹光系统Ⅰ捕光叶绿素a/b结合蛋白基因的cDNA全长克隆及分析 被引量:6
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作者 李雪平 彭镇华 +1 位作者 高志民 牟少华 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期643-648,共6页
为了从分子水平研究竹子光合作用的机理,采用RT-PCR及RACE方法从绿竹中分离了cab家族的一个基因,命名为BoLhca4-1(GenBank注册号为EF690303)。BoLhca4-1的cDNA序列全长931 bp,含有一个735 bp的开放阅读框,编码了一个244 aa的蛋白,分子... 为了从分子水平研究竹子光合作用的机理,采用RT-PCR及RACE方法从绿竹中分离了cab家族的一个基因,命名为BoLhca4-1(GenBank注册号为EF690303)。BoLhca4-1的cDNA序列全长931 bp,含有一个735 bp的开放阅读框,编码了一个244 aa的蛋白,分子量大小约为26.8 ku。序列分析结果表明,BoLhca4-1是光系统Ⅰ的一个捕光叶绿素复合蛋白基因,编码肽链与禾本科植物水稻的cab蛋白有着很高的同源性,达到86.1%。系统进化树分析表明,BoLhca4-1编码蛋白与水稻的cab蛋白亲缘关系较近。另外,对绿竹不同组织中BoLhca4-1基因的表达进行RT-PCR检测发现,其在叶片中的表达量较鞘和茎中要高。 展开更多
关键词 绿竹 光系统Ⅰ 捕光叶绿素a/b结合蛋白 基因克隆 表达分析
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甘蔗捕光叶绿素a/b结合蛋白基因ScLhca3的克隆及表达 被引量:9
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作者 翟玉山 邓宇晴 +5 位作者 董萌 徐倩 程光远 彭磊 林彦铨 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1332-1341,共10页
捕光叶绿素a/b结合蛋白是植物光系统I(photosystem I,PSI)中与色素分子结合的膜蛋白,由Lhca基因家族编码,主要参与光合作用中光能的捕获与传递。本研究对甘蔗叶片cDNA文库测序,获得甘蔗PSI中Lhca3基因的cDNA序列,命名为ScLhca3(Gen Ban... 捕光叶绿素a/b结合蛋白是植物光系统I(photosystem I,PSI)中与色素分子结合的膜蛋白,由Lhca基因家族编码,主要参与光合作用中光能的捕获与传递。本研究对甘蔗叶片cDNA文库测序,获得甘蔗PSI中Lhca3基因的cDNA序列,命名为ScLhca3(Gen Bank登录号为KU215669)。生物信息学分析表明,ScLhca3的开放读码框(opening reading frame,ORF)长度为804 bp,编码267个氨基酸,分子量为28.91 k D,等电点为8.96;ScLhca3被定位于叶绿体,无信号肽,存在3个明显的跨膜区域,含有典型的捕光叶绿素a/b结合蛋白功能域(chlorophyll a/b binding domain),为亲水性非分泌蛋白。多序列比对和进化分析表明,ScLhca3在不同物种间具有较强的保守性,具有种属特性。构建原核表达载体p GEX-6P-1-ScLhca3,通过IPTG诱导表明,ScLhca3蛋白与预测大小一致。亚细胞定位试验显示,ScLhca3与报告基因GFP的融合蛋白定位于叶绿体中。实时定量PCR分析表明,ScLhca3在成熟叶片中的相对表达量最高,根中几乎不表达,具有明显的组织特异性;在Cd Cl2、ABA和H2O2外源胁迫下,ScLhca3均上调表达;在黑暗、Na Cl和PEG胁迫下则下调表达。 展开更多
关键词 甘蔗 光系统I 捕光叶绿素a/b结合蛋白 实时定量PCR
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东南景天捕光叶绿素a/b结合蛋白基因SaLhcb2的分离及功能 被引量:7
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作者 李真 刘明英 +4 位作者 韩小娇 乔桂荣 蒋晶 邢世岩 卓仁英 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期838-846,共9页
LHCB基因对植物适应各种环境胁迫的过程中起着重要作用。序列分析显示:东南景天Sedum alfredii的Sa Lhcb2基因全长929 bp,其中开放阅读框(ORF)为798 bp,含有1个74 bp的内含子。通过蛋白序列比对,Sa Lhcb2基因编码的蛋白与多种植物的蛋... LHCB基因对植物适应各种环境胁迫的过程中起着重要作用。序列分析显示:东南景天Sedum alfredii的Sa Lhcb2基因全长929 bp,其中开放阅读框(ORF)为798 bp,含有1个74 bp的内含子。通过蛋白序列比对,Sa Lhcb2基因编码的蛋白与多种植物的蛋白序列同源性都很高(92%以上)。分析400μmol·L-1镉离子(Cd2+),铜离子(Cu2+)和铅离子(Pb2+)胁迫处理后的东南景天,结果显示:镉处理后Sa Lhcb2基因在茎、叶中表达量快速上升(12.0h内),根中表达量到48.0 h后才上调。铜处理后0.5 h根中表达显著上调,胁迫6.0 h后茎中表达量显著上调,随后一直降低,叶片中该基因表达量一直较低。铅处理后,根中表达量降低,96.0 h左右比对照略微上调,而茎中96.0 h内表达量相比对照都上调,叶片中96.0 h内都降低。研究结果表明:Sa Lhcb2与东南景天的镉、铜、铅胁迫抗性有密切的相关性。 展开更多
关键词 植物学 镉、铜、铅 叶绿素a/b结合蛋白(LHCb) 荧光定量PCR 东南景天
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胡杨叶绿素a/b结合蛋白基因的克隆及序列特性分析 被引量:9
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作者 未丽 徐秉良 +4 位作者 雷江丽 刘水 唐益雄 阴翠翠 吴燕民 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2008年第4期63-69,共7页
采用RT-PCR和RACE-PCR技术,首次从胡杨中克隆到捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长cDNA,命名为PeCab(GenBank序列号:EU078170)。序列分析表明:该基因全长为992bp,开放阅读框为792 bp,编码263个氨基酸,属于光系统Ⅱ类型ⅠCab基因,与植物Cab... 采用RT-PCR和RACE-PCR技术,首次从胡杨中克隆到捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长cDNA,命名为PeCab(GenBank序列号:EU078170)。序列分析表明:该基因全长为992bp,开放阅读框为792 bp,编码263个氨基酸,属于光系统Ⅱ类型ⅠCab基因,与植物Cab家族基因具有较高同源性,并且与双子叶植物的Cab家族基因的亲缘关系更近。半定量RT-PCR分析表明,该基因受光诱导表达,对6-BA、GA3和NAA三种激素的诱导均有应答,但在黑暗和ABA激素处理下,PeCab基因在转录水平上的表达基本没有变化。本研究丰富了Cab家族基因库资源,对揭示胡杨光保护及对各种环境适应性机理的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胡杨 叶绿素a/b结合蛋白 序列特性分析 半定量RT-PCR
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YGL9, encoding the putative chloroplast signal recognition particle 43 kDa protein in rice, is involved in chloroplast development 被引量:3
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作者 WANG Zhong-wei ZHANG Tian-quan +10 位作者 XING Ya-di ZENG Xiao-qin WANG Ling LIU Zhong-xian SHI Jun-qiong ZHU Xiao-yan MA Ling LI Yun-feng LING Ying-hua SANG Xian-chun HE Guang-hua 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第5期944-953,共10页
The nuclear-encoded light-harvesting chlorophyll a/b-binding proteins(LHCPs) are specifically translocated from the stroma into the thylakoid membrane through the chloroplast signal recognition particle(cp SRP) pa... The nuclear-encoded light-harvesting chlorophyll a/b-binding proteins(LHCPs) are specifically translocated from the stroma into the thylakoid membrane through the chloroplast signal recognition particle(cp SRP) pathway. The cp SRP is composed of a cp SRP43 protein and a cp SRP54 protein, and it forms a soluble transit complex with LHCP in the chloroplast stroma. Here, we identified the YGL9 gene that is predicted to encode the probable rice cp SRP43 protein from a rice yellow-green leaf mutant. A phylogenetic tree showed that an important conserved protein family, cp SRP43, is present in almost all green photosynthetic organisms such as higher plants and green algae. Sequence analysis showed that YGL9 comprises a chloroplast transit peptide, three chromodomains and four ankyrin repeats, and the chromodomains and ankyrin repeats are probably involved in protein-protein interactions. Subcellular localization showed that YGL9 is localized in the chloroplast. Expression pattern analysis indicated that YGL9 is mainly expressed in green leaf sheaths and leaves. Quantitative real-time PCR analysis showed that the expression levels of genes associated with pigment metabolism, chloroplast development and photosynthesis were distinctly affected in the ygl9 mutant. These results indicated that YGL9 is possibly involved in pigment metabolism, chloroplast development and photosynthesis in rice. 展开更多
关键词 Oryza sativa yellow-green leaf gene cpSRP43 light-harvesting chlorophyll a/b-binding protein
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ShRNA-LDH纳米颗粒的制备及薇甘菊生物防治
15
作者 莫亦琳 陈伟钊 +4 位作者 黄丽娟 吴飞燕 肖念 于宇 刘学东 《深圳大学学报(理工版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期163-170,共8页
核糖核酸干扰(ribonucleic acid interference,RNAi)技术在植物保护中具有高效、安全和环保的特点.外源喷施短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)可以有效沉默薇甘菊(Mikania micrantha)叶绿素a/叶绿素b结合蛋白相关基因.为提高喷施shRN... 核糖核酸干扰(ribonucleic acid interference,RNAi)技术在植物保护中具有高效、安全和环保的特点.外源喷施短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)可以有效沉默薇甘菊(Mikania micrantha)叶绿素a/叶绿素b结合蛋白相关基因.为提高喷施shRNA对薇甘菊的防治效果,制备直径为10~100 nm的层状双氢氧化物(layered double hydroxide,LDH)黏土纳米片为shRNA的载体,该载体具有良好的生物相容性,具环境友好.研究发现,LDH结合shRNA的最佳质量比为1∶10.shRNA喷施实验表明,有轻微创伤的薇甘菊叶片对shRNA更敏感,并且LDH直接喷施对薇甘菊的生长几乎没有任何影响.为比较LDH-shRNA和单独的shRNA对薇甘菊的控制效果,利用分别搭载了6个shRNA的LDH纳米颗粒或单独的shRNA喷施薇甘菊叶片,在喷施6 d后观察到叶片喷施LDH-shRNA有更加明显的坏死表型.研发的基于LDH的shRNA携带系统可显著提高RNAi在防控薇甘菊中的有效性. 展开更多
关键词 核糖核酸干扰 植物保护 薇甘菊 叶绿素a/b结合蛋白 黏土纳米片 短发夹核糖核酸
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小麦TaLhca基因的克隆及表达分析 被引量:4
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作者 张蕾 于永昂 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期394-402,共9页
为了从分子水分研究小麦的光合作用,该研究采用RT-PCR方法,从小麦品种‘百农207’的叶中克隆到1个捕光叶绿素a/b结合蛋白基因,命名为TaLhca。序列分析结果表明,TaLhca的编码区序列(coding DNA sequence,CDS)长810 bp,编码269个氨基酸,... 为了从分子水分研究小麦的光合作用,该研究采用RT-PCR方法,从小麦品种‘百农207’的叶中克隆到1个捕光叶绿素a/b结合蛋白基因,命名为TaLhca。序列分析结果表明,TaLhca的编码区序列(coding DNA sequence,CDS)长810 bp,编码269个氨基酸,推测分子量为29.31 kD,等电点为8.69。TaLhca被定位于叶绿体,无信号肽,存在3个明显的跨膜区域,预测其蛋白结构含有典型的捕光叶绿素a/b结合蛋白功能域(chlorophyll a/b binding domain),为亲水性非分泌蛋白。蛋白序列比对和进化树分析表明,小麦与二穗短柄草(Brachypodium distachyon)和水稻(Oryza sativa)中的Lhca序列相似性最高,亲缘关系最近。启动子顺式作用元件预测表明,启动子区域包含多个光响应元件及逆境响应元件。实时荧光定量PCR分析表明,TaLhca基因在小麦根、茎、叶中均有表达。其中在叶中表达量最高,在根中表达量最低,且受NaCl、干旱、ABA、H2O2和低温胁迫表达增强,受黑暗胁迫表达降低。该研究结果为进一步解析小麦光合作用机理及其相关基因的诱导表达特性提供了依据。 展开更多
关键词 小麦 光系统Ⅰ 捕光叶绿素a/b结合蛋白 基因克隆
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盐藻LHCB3蛋白的表达纯化及抗体制备
17
作者 赵锐 金楠 +4 位作者 陈卫民 马根 徐青锐 乔代蓉 曹毅 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期847-850,共4页
为了解盐生杜氏藻(Dunaliella salina)主要光捕获蛋白LHCB蛋白的功能,将已获得的盐藻Lhcb3基因构建到原核表达载体pET32a-DsLhcb3,通过优化表达条件,建立了高效的重组系统.pET32a-DsLhcb3在大肠杆菌中的优化表达条件为1 mmol/L IPTG在3... 为了解盐生杜氏藻(Dunaliella salina)主要光捕获蛋白LHCB蛋白的功能,将已获得的盐藻Lhcb3基因构建到原核表达载体pET32a-DsLhcb3,通过优化表达条件,建立了高效的重组系统.pET32a-DsLhcb3在大肠杆菌中的优化表达条件为1 mmol/L IPTG在37℃下诱导4 h.采用镍离子亲合层析纯化获得LHCB3蛋白,并以此为抗原制备了多克隆抗体,经琼脂糖扩散检测效价,在1:16处有明显沉淀.提取盐藻总蛋白,经过制备的LHCB3抗体杂交,在29 000处获得两条明显的杂交条带,为进一步研究盐藻LHCⅡ蛋白表达机理奠定了基础. 展开更多
关键词 盐生杜氏藻 光系统Ⅱ 光捕获蛋白 表达纯化 抗体
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