葡萄糖糖基化对蓝圆鲹分离蛋白限制性酶解产物结构及功能特性的影响

为拓展蓝圆鲹(Decapterus maruadsi)分离蛋白的应用范围,促进其高值化利用,以蓝圆鲹分离蛋白限制性酶解产物(Brown-striped mackerel scad protein isolate limited enzymatic hydrolysate,BPILH)为原料,采用葡萄糖对其进行糖基化反应,考察不同反应时间对BPILH结构与功能特性的影响。结果表明,葡萄糖与BPILH的糖基化反应程度与反应时间和色度呈正相关。结构表征结果显示,糖基化反应使α螺旋和无规则卷曲含量减少,并降低糖基化产物的内源荧光强度。此外,长时间的高温使蛋白质分子内部的疏水基团暴露,使其表面疏水性增加。溶解度在酸性、碱性条件下随着反应时间的延长呈现先升高后降低的趋势,其中,第8小时糖基化产物的溶解度在pH 10时达到最高值(90.49±0.01)%。乳化性随着反应时间的延长而增加,与第0小时相比,第12小时糖基化产物的乳化性提升了24.28%,乳化稳定性和持油性均随着反应时间的延长呈现先增加后减少的趋势,在第1小时乳化稳定性达到最高值(17.51±0.13)min,在第2小时持油性达到最高值(2.19±0.21)g·g^(-1)。因此,反应时间过长会对功能特性产生一定的负面影响,研究结果可为蓝圆鲹分离蛋白在食品配料蛋白中的应用提供一定的理论参考。

基于深度酶解花生蛋白制备增咸酶解液的工艺优化

目的 基于深度酶解花生蛋白制备增咸酶解液,并探究其最佳制备工艺。方法 采用复合酶分步酶解法制备花生蛋白增咸酶解液,以单因素实验和响应面法确定最佳酶解条件,并通过对酶解产物的相对分子量分布、氨基酸含量、游离氨基酸含量和电子舌结果进行分析,解析酶解产物的增咸特性。结果 花生蛋白增咸酶解液的最佳工艺参数为:花生蛋白混合料液(料液比1:10, g:mL), 95°C下热处理20 min,调节pH 6.5,木瓜蛋白酶加酶量:3020 U/g底物, 55°C酶解2.8 h,风味蛋白酶加酶量:610 U/g底物, 55°C继续酶解3.8 h。在此条件下花生蛋白水解度高达16.65%。经感官评价和电子舌分析结果表明:当0.5%(m/m)的花生蛋白酶解物加入到0.5%(m/m) NaCl溶液时,咸味增强率可达76.21%。结论 经深度酶解作用后,酶解产物分子量均在3000 Da以下,同时鲜味氨基酸占比较高,赋予酶解产物增咸的呈味特性,此研究为花生蛋白在减盐食品的应用提供了理论依据。

超声对高浓度大豆分离蛋白结构和酶解产物抗氧化活性的影响

本文探究超声技术对高浓度大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)结构及其酶解产物抗氧化活性的影响。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、傅里叶变换红外光谱、荧光光谱和荧光探针分析超声对高浓度下大豆分离蛋白分子结构的影响,以及对酶解产物中多肽含量和分子量、游离氨基酸组成及抗氧化活性的影响。结果表明,在一定超声条件下,SPI一级结构不变,但高浓度(16%)SPI经超声处理后会引起蛋白其他结构特性的改变。二级结构中β-折叠含量增加,α-螺旋含量减少;内源荧光发射波长发生了明显红移,表面疏水性显著(P<0.05)增加,进而影响超声对SPI酶解效果。随着SPI浓度增加,与未超声相比,超声处理提高了酶解产物中多肽含量,当浓度16%时,多肽含量最高达84.27%,且浓度8%~16%时,分子量为200~2000 Da多肽占比增加。此外,超声处理显著(P<0.05)提高了SPI酶解产物中游离疏水性氨基酸的含量,并且当浓度16%时,酶解产物的DPPH自由基清除率、羟自由基清除率显著(P<0.05)提升,还原能力明显增强,表现出更高地抗氧化活性。可见,超声处理对高浓度SPI的改性效果有助于制备具有高抗氧化活性酶解产物,在制备多肽方面具有良好应用前景。

花生蛋白酶水解产物抗氧化活性研究

利用蛋白酶水解花生蛋白并对水解产物的抗氧化活性进行研究。采用中性蛋白酶AS1 398和低温高碱性蛋白酶水解花生蛋白,AS1 398 的水解条件为:温度55℃,pH6 5,底物浓度5 0%,酶用量1 0%,水解时间6 h;碱性蛋白酶的水解条件为:温度40℃,pH7 5,底物浓度5 0%,酶用量2 0%,水解时间6 h。在此条件下进行水解、灭酶、离心除去不溶性的成分,水解产物冷冻干燥。酶水解产物的抗氧化活性用油脂的过氧化值进行评价。产物添加到猪油中,65℃恒温保存30 d,每隔一定时间取样测定其过氧化值。Rancimat也用于评价花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性,添加不同的酶水解产物后测定样品的氧化诱导期,用诱导期作为花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性的评价指标。研究结果表明,花生蛋白酶水解产物具有一定的抗氧化性能。

冷榨花生饼制备花生多肽的研究

对影响花生蛋白水解制备花生多肽的各种影响因素 ,如酶制剂的筛选 ,酶解工艺参数等进行了系统地研究。通过正交实验 ,得到最佳工艺参数是pH值 7.0、温度 4 2℃、加酶量 6 5 0 0U/g原料、酶水解时间 8h、底物浓度 10 %。

花生蛋白酶解条件及活性肽抗氧化特性研究

花生蛋白经过碱性蛋白酶ALCALASE、复合蛋白酶PROTAMEX水解得到活性肽溶液.通过单因素试验及正交试验得到各个因素的优化组合,并进一步研究活性肽的抗氧化特性.结果表明,ALCALASE对花生蛋白的水解能力优于PROTAMEX;花生肽具有较强的抗氧化性及有效清除羟自由基的能力,在本试验范围内随水解度的增加而提高.

双酶分步水解制备花生多肽工艺优化

为了开发和利用花生蛋白资源,生产高附加值蛋白产品,以花生分离蛋白为原料,采用Alcalase和Flavourzyme分步水解法制备花生多肽。通过单因素试验和响应面中心组合设计试验,研究Flavourzyme水解花生分离蛋白过程中加酶量、底物质量分数、酶解温度、酶解时间和酶液pH值等因素对水解的影响。建立水解液中可溶性氮质量浓度与各种影响因素的回归模型;确定Flavourzyme酶解反应的最佳工艺参数为pH7.0、加酶量1714U/g底物、底物质量分数5%、酶解温度55℃、酶解时间90min。在此条件下,酶解产物中可溶性氮质量浓度为19.44mg/mL。

多酶协同作用生产大豆多肽的研究

以大豆多肽饮料的研制为着眼点,根据单酶水解大豆分离蛋白的研究,从中选择合适的酶复配组合成多酶,然后在多酶水解的基础上,分别采取分步加酶和同时加酶方式,对比Flavourzyme和 Kojizyme这两种复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的特点,最终确定了大豆分离蛋白用于多肽生产时的酶解工艺条件。

内肽酶与端解酶水解花生粕蛋白的研究

利用内肽酶与端解酶对花生粕蛋白的水解作用进行了研究，并分析了不同水解时间氨基酸含量的变化。

菠萝蛋白酶水解醇法大豆浓缩蛋白的研究

用菠萝蛋白酶对醇法大豆浓缩蛋白进行酶法改性,提高醇法大豆浓缩蛋白的溶解性.在单因素分析的基础上采用响应面分析方法对酶解条件进行优化,酶解的最佳条件为pH6.5,反应温度48℃,底物浓度6%,加酶量607 U/g.此条件下水解4 h,水解度可达11.07%.

酶解花生蛋白制备功能性短肽条件优化研究

为优化Alcalase蛋白酶酶解花生蛋白制备功能性多肽的工艺条件,采用响应面分析法,以水解度、短肽得率为响应值,研究温度、pH值、底物质量分数、酶底比对制备功能性多肽工艺的影响。综合考虑成本和工艺要求等问题,最终确定酶解花生蛋白制备功能性多肽的工艺条件为温度55℃、pH8.4、底物质量分数4.31%、酶底比3.39%、时间4h。该条件下水解度(DH)及三氯乙酸可溶性氮溶解指数(TCA-NSI)分别为23.40%和74.88%,与理论值的相对误差在0.5%以内,优化工艺稳定,DH及TSA-NSI较高,实验结果与模型预测值相符。

有限酶解米渣蛋白的乳化功能特性表征

讨论了米渣蛋白经碱性内切蛋白酶Alcalase 2.4L FG水解后,水解度(DH)分别为3、4、5、6、10的有限酶解米渣蛋白的乳化活性、乳化稳定性、溶解性、表面张力、粘度、样品乳状液粒度分布等特性,并与米渣蛋白、大米分离蛋白、国外进口酪朊酸钠进行比较。结果表明,有限酶解米渣蛋白的乳化功能特性大大优于大米分离蛋白和米渣蛋白,并且得到有限酶解米渣蛋白(DH=4)的乳化性比国外进口的酪朊酸钠佳,但乳化稳定性次于酪朊酸钠。综合结果表明,DH=4的有限酶解米渣蛋白的乳化功能特性很好。

限制性酶解乳清蛋白功能性质研究

探究乳清蛋白在碱性蛋白酶限制性水解下功能性质变化。以乳清蛋白的溶解性,乳化性、乳化稳定性,起泡性、起泡稳定性为考察指标,确定乳清蛋白的等电点及分析不同水解度下乳清蛋白功能性质在p H调控下的变化。结果表明:乳清蛋白的等电点为4.8。乳清蛋白进行限制性酶解后功能性质有了很大提高,其中溶解性在DH14、p H10下达到最大值,较原蛋白提高了14.55%;起泡性在DH14、p H4下达到最大值,较原蛋白提高了107.5%;起泡稳定性在DH4、p H4下达到最大值,比原蛋白提高了8.66%;乳化性在DH14、p H12下达到最大值,比原蛋白提高了56.1%;乳化稳定性DH4、p H12下达到最大值,比原蛋白提高了50.42%。

醇法大豆浓缩蛋白酶法改性研究

为提高醇法大豆浓缩蛋白的溶解性 ,采用Alcalase蛋白酶对醇法大豆浓缩蛋白进行酶法改性试验。试验表明 ,酶法水解能显著提高大豆浓缩蛋白的溶解性。酶解的最佳条件是pH8.5、温度 6 2℃、底物浓度 5 % ,酶浓度 2 % (E/S) ,在此条件下酶解 4h ,大豆浓缩蛋白的水解度在 12 %以上 ,大豆浓缩蛋白的NSI从 10 %提高到 85 %左右 ,有较好的溶解性。并利用浊度法测定了不同水解度条件下酶解大豆浓缩蛋白的乳化特性 ,结果表明水解度约为 8%时乳化性最大 ,水解度约为6 %时乳化稳定性最好。

酶法水解花生蛋白制备短肽及其降血压活性试验

对酶法水解花生蛋白制备高水解度短肽的工艺进行研究。选用碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶分别对单酶水解工艺、复合酶水解工艺及前处理条件进行考察。研究发现：单酶水解优化工艺虽可达到较高水解度（27.85%、23.40%）,但水解时间长（386.25、382.68 min）、底物质量浓度低（1.09、1.07 g/100 mL）;所考察的前处理技术中除亚硫酸钠前处理外,热处理、超声处理条件对水解度无显著影响。研究得到理想的酶法水解条件为：以花生蛋白（质量浓度为5 g/100 mL）为原料,先用亚硫酸钠（质量浓度为0.07 g/100 mL）进行前处理;随后进行复合酶酶法水解,调整料液体系至pH 8.0、温度50℃,按加酶量为7 429.79 U/g加入碱性蛋白酶,水解120 min,随后将料液体系调至pH 6.8、温度45℃,按加酶量为7 642.50 U/g加入菠萝蛋白酶,水解120 min,测得蛋白质水解度为（33.21±0.70）%。通过对原发性高血压大鼠的作用试验表明,灌胃剂量在1 000-1500 mg/kg（按体重计）时,给药4 h后,大鼠收缩压显著降低,降压效果可持续8 h,表明酶法水解产物（花生短肽）有明显的降血压效果。

酶解程度对花生蛋白理化性质及功能特性的影响

研究了不同酶解程度对花生蛋白理化性质(包括分子质量、表面疏水性、巯基含量)及功能特性(溶解性、乳化性、抗氧化性)的影响。研究发现:花生蛋白进行不同酶解处理后,分子质量变小、表面疏水性变小、总巯基及暴露巯基呈现先减小后增大的趋势,同时酶解物的功能性质也发生了较大改变,如所有酶解物的溶解性提高,水解产物的乳化稳定性降低,DH5的乳化活性较PPI强,深度水解后DH10、DH15的乳化活性较PPI均明显下降,多酚含量跟DPPH自由基清除率正相关。研究结果为花生蛋白的改性提供了一定的数据支持。

花生乳状液体系中蛋白质的酶解动力学研究

采用碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L水解花生乳状液体系中蛋白质,研究了蛋白酶在乳状液体系中的水解特性。结果表明:蛋白质水解度随着初始酶浓度的增加而提高,在酶浓度一定的情况下水解度随着初始底物浓度的提高而降低。蛋白质水解度与乳状液的破乳率存在显著正相关(r=0.983)。在花生乳状液体系中Alcalase 2.4 L的水解动力学参数K m=0.069 8 mol/L,V max=3.71×10-4mol/(min·L)。由实验数据推导出蛋白质酶解初级阶段的动力学方程,确定蛋白质水解和乳状液破乳的临界初始底物质量浓度为8.73 g/L(加酶量为0.05%)。在酶和底物初始浓度以及反应时间确定的前提下,通过动力学方程可预测破乳过程中蛋白质的水解度及破乳率。

甘薯热变性蛋白限制性酶解产物的乳化特性研究

采用5种酶(Alcalase 2.4L,As1.398,Neutrase,Pepsin,Trypsin)对甘薯热变性蛋白(SPHP)进行限制性酶解。将各酶解产物离心后分别取上清和沉淀测定和观察其乳化液的乳化颗粒平均粒径(D4,3)、乳化活性指数(EAI)、乳化稳定性指数(ESI)、乳化液的微观结构和表观黏度。结果显示:酶解产物上清和沉淀中蛋白的溶解度均有增加,但沉淀增加的幅度小于上清。SPHP的D4,3是71.96μm,而酶解产物上清和沉淀乳化液的D4,3均减小,且上清的D4,3小于沉淀的。在5种酶解产物中,Pepsin酶解物上清的D4,3最小,为14.94μm。SPHP酶解后上清的乳化颗粒大小较为均一,且沉淀的乳化颗粒酶解前后变化不大。SPHP的EAI为11.21m2/g,酶解产物上清和沉淀的EAI均有显著提高(P<0.05),其中Pepsin酶解物上清的EAI最高为70.32m2/g。此外,酶解产物上清和沉淀乳化液的ESI增大。与沉淀相比,5种酶解产物的上清具有较低的表观黏度,且酶解产物上清和沉淀的乳化液均呈剪切变稀的非牛顿流体特性。

限制性酶水解-超滤法生产改性大豆蛋白

通过限制性酶解和超滤的方法制得富含11S亚基的改性大豆蛋白。脱脂豆粕经过碱提得到可溶性蛋白溶液,粗蛋白液经过选择性水解、超滤,截留液冷冻干燥得到改性大豆蛋白,产物经SDS-PAGE分析,表明其成分主要是11S亚基,蛋白质含量大于70%,产率在80%以上。

低限度酶水解对醇法大豆浓缩蛋白分散性的影响

以大豆浓缩蛋白的分散时间和分散稳定时间为主要指标,研究了大豆浓缩蛋白经过Alcalase酶低限度水解后,分散时间和分散稳定时间的变化情况,并考察了低限度酶水解对分子量分布的影响。