“Naturally in Love” Fashion Night in Beijing Launching Limited Edition Line of Handkerchiefs

January 7, 2010, Beijing China–The COTTON USATM "Naturally in Love" Fashion Night was officially launched tonight at the

非法植入基因编辑、克隆胚胎罪的解释学审视——对立法批判论的回应

非法植入基因编辑、克隆胚胎罪设立后,学界存有部分反对观点认为本罪分则位置及实行行为的规定存在问题。基于解释论的立场,本罪保护法益为基因库安全、人性尊严以及公共卫生管理秩序,立法通过对形式法益的保护一并实现了对实质法益的保护,且公共卫生管理秩序是主要法益,故本罪在刑法分则中的体系位置无可厚非。因为“植入人或动物子宫”的行为是实现生殖系基因编辑或生殖性克隆目的的必经阶段,所以本罪实行行为的规定在技术层面上彻底断绝了被基因编辑、克隆的细胞发育成存活个体的机会,从而达到了对该犯罪行为规制的立法目的。

猪HBB基因中先导编辑效率研究

为了验证先导编辑(prime editing,PE)在猪细胞HBB基因中的编辑效率,并比较其在人细胞与猪细胞中的编辑效率,试验通过生物信息学分析,选择β珠蛋白生成障碍性贫血致病位点-28(A>G)、CD17(A>T)、CD41/42(-TCTT)设计并合成基因编辑质粒,通过脂质体Lipofectamine 2000转染人肾上皮细胞系(HEK293T)和猪肾上皮细胞系(PK-13)并进行药物筛选,提取细胞基因组进行PCR扩增,对PCR扩增产物进行TA克隆后测序,统计各位点的编辑效率;然后通过改进向导RNA骨架序列、添加小分子药物等方法对PK-13中的先导编辑进行优化。结果表明:先导编辑系统PEmax在PK-13中具有编辑作用,猪HBB基因-28(A>G)、CD17(A>T)、CD41/42(-TCTT)位点先导编辑的正确编辑效率分别为9.44%、8.89%和4.76%,较人HBB基因相应位点的正确编辑效率低33.89%、42.22%和26.11%,差异显著(P<0.05)。而经过优化pegRNA序列后猪细胞中正确编辑效率达到了12.78%[CD17(A>T)]、11.67%[CD41/42(-TCTT)],均显著高于pegRNA骨架序列优化前的7.22%和5.33%,是未优化前的1.8~2.2倍,差异显著(P<0.05)。说明先导编辑在猪细胞中具有编辑效率,且可以通过改进pegRNA的策略进一步提高正确编辑效率。

基于传递路径影响消除的滚动轴承故障特征增强

受到复杂传递路径的影响,滚动轴承故障产生的周期性冲击成分常被强背景噪声所淹没,进而给故障特征的有效提取带来极大难度。对此,研究了一种基于传递路径影响消除的滚动轴承故障特征增强方法。首先,分析了激励信号、传递函数和响应信号之间的关系,提出一种基于趋势线的传递路径影响消除方法,提高了故障特征成分占比;其次,利用频谱编辑方法,在保证趋势线提取准确性的同时,抑制信号中谐波成分的干扰,进一步突出了信号中的故障特征;最终借助包络分析处理特征增强后的信号,在频域范围内实现滚动轴承故障特征的准确提取。借助仿真和实测信号对方法的有效性进行验证,结果表明,该方法能够消除复杂传递路径的影响,有效增强滚动轴承故障特征,验证了方法的可行性。

论国际科技期刊线图(line graph)的编排规范

科技期刊不仅仅应立足国内,还要走向世界。要加快国内科技期刊国际化的步伐,就必须注重国际学术期刊的编排规范。通过对科技期刊论文中必不可少的线图(line graph)的编排进行分析研究,总结了国际期刊线图的编排规范,并针对国内科技期刊的线图存在的问题提出了解决问题的方法。

应用C-to-G碱基编辑器对PCSK9基因靶向敲除的研究

目的:使用C-to-G碱基编辑器(CGBE)Td-CGBE-NG靶向敲除huh-7肝癌细胞系前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因,以CBE(AncBE4max)为参照,评价Td-CGBE-NG对该基因的敲除效果。方法:使用引入终止密码子的策略敲除huh-7肝癌细胞系PCSK9基因。构建碱基编辑器Td-CGBE-NG和AncBE4max,构建重组质粒sg386和sg555,将Td-CGBE-NG和sg386,AncBE4max和sg555分别共转染huh-7细胞,实现c.1447C>G和c.1953C>T的转换,在两位点引入终止密码子S386X(TGA)和Q555X(TAG),使用sanger测序和T载体克隆验证编辑效率;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PCSK9基因mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:sanger测序和T载体克隆结果显示,Td-CGBE-NG和AncBE4max的编辑效率分别为c.1447C>G 33%和c.1953C>T 25%;RT-qPCR结果显示,Td-CGBE-NG使PCSK9 mRNA的表达量降低(t=17.29,P<0.0001);Western blot结果表明,两组huh-7细胞蛋白表达量均明显下降(AncBE4max:t=5.57,P<0.01;Td-CGBE-NG:t=4.912,P<0.01)。结论:Td-CGBE-NG可以有效敲除huh-7肝癌细胞系的PCSK9基因,抑制该基因mRNA和蛋白的表达,为后续Td-CGBE-NG的应用奠定基础。

先导编辑在鸡胚成纤维细胞系中的效率研究

为探究先导编辑在鸡细胞系中的基因编辑效率,研究通过点突变和重组连接的方式构建先导编辑的表达质粒,使用在线软件设计并化学合成靶向OVM、MSTN和NHE1基因的先导编辑引导RNA(pegRNA)质粒,脂质体转染上述质粒至鸡胚成纤维细胞系(DF-1)中并进行药物筛选,PCR产物TA克隆测序检测并统计各位点的编辑效率。结果显示:测序和PCR鉴定结果表明先导编辑表达质粒构建成功;DF-1中OVM基因经先导编辑后成功产生错义突变,其中精确编辑效率为41.10%、错误插入与缺失(indel)效率为6.67%,均显著优于对照组的常规基因编辑(P<0.05);MSTN基因的先导编辑精确编辑效率为10.24%、indel效率为13.57%,NHE1基因的先导编辑精确编辑效率为24.88%、indel效率为7.18%。结果验证了先导编辑在鸡细胞系中的有效性和普适性,为其进一步应用于基因编辑鸡的制备奠定基础。

冀南摄区正射影像的生产与质量控制方法研究

该文介绍了正射影像的生产技术流程,重点研究了正射影的生产过程和质量控制方法。综合运用Inpho、Photoshop和EPT等软件,针对数字正射影像生产过程中出现的扭曲变形、色调不均和几何错位等问题进行了详细的分析研究。阐述了正射影像生产全过程关键技术环节的质量控制方法,优化了生产流程,提高了生产效率,为自然资源调查监测和实景三维建设等重点领域提供优质的源影像。

元十行本注疏今存印本略説

元十行本注疏今存印本頗爲豐富,除數部元刻明修《十三經注疏》匯印本外,主要以單經流傳,各本補版印刷時間不一,不同傳本之間多有差異。本文搜羅網絡發佈的元十行本注疏全文影像及已出版影印本、書志、圖録等資料,以經爲單位,列舉元十行本各經不同時期代表性印本,梳理其版面特徵與印次關係,以供讀者選擇利用,並爲圖書館編目工作之參考。

CHO细胞多基因工程改造策略的建立及应用

近年来,中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞工程改造主要通过敲入或敲除基因来改变细胞某个单一功能,而敲入和敲除的基因往往无法在单次实验操作中同时发挥相应的功能,限制了多基因同步改造的应用。该研究选取细胞凋亡通路中抗凋亡蛋白即B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)基因为敲入基因、蛋白岩藻糖基化通路中岩藻糖合成关键酶即岩藻糖转移酶8(fucosyltransferase 8, FUT8)基因为敲除基因作为模型,利用CRISPR/Cas9技术建立定点同步敲入敲除基因编辑策略。利用该策略获得的单克隆细胞株Bcl-2蛋白过表达且FUT8蛋白酶功能缺失。经传代培养发现,由建立的定点同步敲入敲除基因编辑策略获得的细胞株在60 d内所编辑的基因表达稳定。相较于原野生型细胞,该细胞株表现出对血清剥夺的耐受度更高以及对死亡的抵抗能力更强。由此说明基于定点同步敲入敲除基因编辑策略具备一定可行性,可用于重组蛋白生产的CHO工程细胞株的构建。

教师自助式网络课程的设计与实现

传统的网络课程大多难以在线更新课程内容,教师参与制作的程度较低。为此,本文提出了基于ASP.NET的教师自助式网络课程。教师无需直接操作数据库或修改源程序,即可实现课程内容的动态更新。通过实例描述了该类课程的设计思想,详细阐述了"教师自助"的功能设计,并给出其技术实现。教师自助功能的实现借鉴了商业网站中自助建站系统的思想,并针对网络教学的特点做了改进。该类网络课程可在线修改页面,易于更新维护,提供了更强的教学支持功能。

基于版本管理的多用户并发编辑控制策略研究

基于ArcSDE的版本控制机制,研究了多用户状态下对存储于Oracle数据库中的空间数据及其属性信息进行并发编辑控制的策略。针对不同的工作环境,提出两种不同的处理策略,即在线编辑控制和离线编辑控制。实际工程项目中的实现和验证表明,这两种策略虽各自存在优缺点,但均为有效的解决方案。

Web环境下的在线协同编辑系统设计与实现

由计算机支持的协同工作应用系统,在网络环境下形成一个让用户相互沟通与协同编辑的虚拟学习课堂,提出了一个Web平台的在线协同编辑系统,通过网络建立合作工作环境,形成虚拟的合作学习群体,促使教师与学生、学生与学生经验共享、信息交流、研究问题,并探讨了该系统模型的推广价值。

FrontPage的设计模式下ActiveX控件的实地编辑功能的设计与实现

ActiveX控件技术是蒙古文网页制作技术中比较成熟的技术之一.但是在常用的网页制作软件,如FrontPage和Dreamweaver的设计模式下却不支持对ActiveX控件的实地编辑功能,制作蒙古文网页时是在其代码模式下手工编写代码编辑ActiveX控件的.这对蒙古文网页的制作工作带来了很大的难度.本文主要介绍利用自动化技术、VBA技术和钩子原理实现FrontPage设计模式下ActiveX控件的实地编辑功能的方法.

科技论文三线表中的常见问题分析

分析科技期刊普遍采用的三线表中出现的问题,提出了修改意见,并对错误出现的原因进行讨论。

元十行本《十三经注疏》明修丛考——以《论语注疏解经》为中心

元十行本在明代至少经历了正德六年补版、正德十二年补版、正德十六年补版、嘉靖三年补版和嘉靖重校修补五次修版,其中最大规模的一次是嘉靖重校修补。嘉靖重校修补不但大量更换原已破损的板片,而且对元十行本原版和正德年间的三次补版也进行了校对和修订,并由此在版式上作了更新和统一。嘉靖重校修补的时间介于嘉靖三年补版和李元阳刻本之间,李元阳刻本是以元刻嘉靖重校修补本为底本的。清阮元撰《论语注疏校勘记》和刊刻《十三经注疏·论语注疏解经》所依据的十行本是台湾"国图"所藏的元刻明正德修补本或类似此本者,其原文讹误与此有关。

石油化工企业实时生产调度监测管理系统的设计与实现

石油化工企业实时生产调度监测管理系统的设计与实现赵恒永，彭四伟，赵英，孝延忠（北京化工大学计算机系，北京，１０００２９）关键词：图形编辑；在线监测；系统核心中图分类号：ＴＰ２７８；ＴＱ０５６５．８１概述８０年代末，国际上发达国家兴起了计算机集成制造系...

字大如钱 墨光似漆——八行本《礼记正义》的刊刻、流传和价值

珍藏于国家图书馆的八行本《礼记正义》70卷,是目前所知最早的《礼记》经、注、疏合刊本,也是南宋浙江刻本中的代表作。文章通过对八行本《礼记正义》刊刻、流传及其收藏经过的考查,探讨了八行本的学术、版本和艺术价值,也说明了私家收藏在中国古籍流传中的重要地位。

网络编务系统中在线手写批注功能的设计与应用

当前期刊编辑部数字化逐渐普及,但对稿件进行手写批注更加形象、直接,符合人们的审阅习惯.以手写批注技术和ActiveX控件技术为基础,设计了网络编务系统中在线手写批注的功能,在解决了审稿受地域限制的同时,也改进了在线批阅稿件的方式.

慢病毒载体介导稳定表达Cas9基因的293T细胞系构建及其基因编辑效率验证

为通过慢病毒感染细胞构建稳定表达CRISPR/Cas9的293T细胞系,实现高效率基因编辑,PCR扩增Cas9基因片段,酶切后克隆到慢病毒载体pLent-EF1a-MF-CMV-GFP-P2A-Puro上,将该质粒与慢病毒包装质粒psPAX2、pMD2.G共感染293FT细胞,48 h后收集病毒并浓缩纯化测定其病毒滴度,最后用纯化后的病毒感染293T细胞,通过抗性和荧光标记筛选得到稳定表达Cas9的细胞系,并对单克隆细胞进行DNA、RNA特异性和反转录验证。针对ABCG4基因设计sgRNA并构建重组载体感染单克隆细胞,通过DNA特异性和T7E1酶切验证基因敲除效率。结果表明:成功构建了Cas9-pLent慢病毒载体,用构建成功的慢病毒载体对293FT细胞进行慢病毒包装(三质粒系统)并对包装成功的病毒进行了浓缩与纯化,最后通过病毒感染293T细胞,采用荧光观察的方式测定其病毒滴度均在106 TU·mL-1之上。用纯化后的病毒感染293T细胞并通过加药(Puro)进行抗性筛选,筛选出3株能稳定表达Cas9的293T细胞系,目的基因ABCG4的基因编辑功能验证表明其中1株T7E1酶切掉带明显,sgRNA靶向敲除效率较高,该株命名为Cas9-293T-10A。该研究建立了稳定表达Cas9的293T细胞系,可用于目的基因的高效敲除。