阻断肝再生增强因子的表达对人肝癌细胞株HepG2增殖的抑制作用

背景与目的:前期研究中已发现人肝再生增强因子(humanaugmenterofliverregeneration,hALR)在肝癌细胞中呈高表达,在正常肝细胞中几乎不表达,并在体外能刺激肝癌细胞株增殖,而对正常肝细胞无影响。本研究通过运用hALR的siRNA和hALR单克隆抗体阻断人肝癌细胞株HepG2表达,探讨hALR对细胞增殖的影响。方法:设计、构建siRNA表达质粒pSIALR-A及其阴性对照质粒pSIALR-B。将构建的pSIALR-A和pSIALR-B分别转染HepG2细胞。荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,以计算转染效率。转染48h后,免疫细胞化学及RT-PCR法检测HepG2细胞中hALR的表达。用3H-TdR掺入法检测hALR的siRNA和特异性单克隆抗体对HepG2细胞增殖的影响。结果:HepG2细胞中有hALR的表达。成功构建了针对hALR基因编码区的siRNA表达质粒pSIALR-A。转染入细胞后发现,pSIALR-A能明显抑制hALR的表达(mRNA的表达量减少83%),而随机序列的siRNA却无此作用。hALR的siRNA在体外能显著抑制人肝癌细胞株HepG2增殖,分别转染质粒pSIALR-A和pSIALR-B后HepG2细胞的cpm值为67687±6548和104807±5713(P<0.05)。抗hALR单克隆抗体特异性地阻断hALR的作用后,可部分抑制肿瘤细胞自主性生长(P<0.05)。结论:HepG2细胞高表达hALR;针对hALR的siRNA能显著、特异性地抑制hALR表达,进而抑制HepG2细胞的生长。抗hALR单克隆抗体也能部分抑制HepG2细胞自主性生长。

小檗碱抑制人子宫内膜癌细胞增殖及转移机制的研究

目的探讨小檗碱抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和转移的机制。方法四甲基偶氮唑蓝法检测小檗碱对人子宫内膜癌Ishikawa细胞株的抑制作用;流式细胞仪观察对细胞周期分布的影响;ELISA法检测细胞培养上清液中炎性因子白细胞介素-8(IL-8)的浓度变化;应用Western印迹法检测经小檗碱干预该细胞48 h后,细胞核因子-кB(NF-кB)信号途径中p65的变化。结果小檗碱可显著抑制Ishikawa细胞生长,呈时间剂量依赖性。小檗碱可阻滞细胞于G0/G1期。细胞培养上清液中IL-8的浓度随着干预时间延长而减少(P<0.05)。小檗碱作用48 h后,细胞中NF-кB p65表达明显下降(P<0.05)。结论小檗碱具有抗人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖作用,将细胞阻滞于G0/G1期,抑制细胞产生IL-8,并能够阻断NF-кB信号通路,从而抑制子宫内膜癌的转移。

苦参碱抑制人子宫内膜癌细胞增殖转移及机制研究

目的探讨苦参碱对人子宫内膜癌细胞增殖转移的抑制作用及机制。方法 MTT法检测苦参碱对人子宫内膜癌Ishikawa细胞株的抑制作用;流式细胞术观察对细胞周期的影响;ELISA法检测细胞培养上清液中炎性因子IL-8的浓度;Western印迹法检测经苦参碱干预该细胞48h后,NF-кB信号途径中p65的变化。结果苦参碱可显著抑制Ishikawa细胞生长,并呈时间和剂量依赖性。苦参碱使细胞阻滞于G0/G1期。细胞培养上清液中IL-8的浓度随着干预时间延长而减少(P<0.05)。苦参碱作用48h后,细胞NF-кBp65表达明显下降(P<0.05)。结论苦参碱具有抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的作用,使细胞阻滞于G0/G1期;抑制子宫内膜癌转移的作用,可能与抑制IL-8分泌及阻断NF-кB信号通路有关。

n－3多烯脂肪酸在创伤感染中的作用

为探讨ｎ－３多烯脂肪酸在创伤感染中所起的作用，采用盲肠结扎穿孔诱发大鼠脓毒血症，食道插管灌入液体鱼油治疗。研究结果，术前接受４ｗｋ鱼油治疗组与脓毒症组比较，前者动物枯否细胞释放的细胞因子，炎性介质及氧自由基产物明显减少，膜磷脂成分及花生四烯酸含量明显增加；同时观察到肝细胞膜脂流动性明显升高，相变温度明显降低，内皮素含量明显减少。提示，ｎ－３多烯脂肪酸有调节创伤感染动物巨噬细胞的生物学功能，减轻肝细胞和血管内皮细胞损伤的作用。

大型预焙阳极铝电解槽内衬结构优化

以电解槽内衬结构设计优化为突破口,开发一种新型曲面阴极结构电解槽,通过多物理场有限元数值仿真,研究新型结构槽的热平衡、物理场分布特征及在低极距下高效运行的稳定性。试验结果表明,新型结构槽能在保持高电流效率的前提下在低电压稳定运行,吨铝直流电耗为12 331 kW.h,并可有效延长电解槽使用寿命。

质子交换膜燃料电池温度的MPC控制

根据PEMFC热量传递机理建立电堆温度的simulink模型,由于实验模型属于非线性模型,很难对其设计控制器,因此在工作点附近将系统线性展开得到其线性模型。针对线性模型设计MPC控制器,调整得到合理参数后,利用此MPC控制器调节电堆温度模型的控制输入,得到对电堆温度的理想控制效果。

W型聚能装药射流形成及侵彻的实验和数值仿真研究

为了满足串联战斗部中一级弹开坑的要求 ,本文提出并设计了能够形成环形射流的W型聚能装药 ,运用带有网格线示踪点法 (MOCL)分界面跟踪算法的二维多流体欧拉程序 ,对环形射流的形成进行了数值仿真 ,比较数值仿真结果与试验结果 ,该聚能装药可以满足工程设计的要求。

姜黄素对LPS刺激RAW264.7细胞PGE_2和IL-10影响

目的:观察姜黄素对脂多糖刺激小鼠RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法:体外培养小鼠RAW264.7细胞,脂多糖刺激小鼠RAW264.7细胞分泌细胞因子,用不同浓度姜黄素进行干预,ELISA法检测培养上清液中抗炎细胞因子IL-10和炎症因子PGE2含量。结果:姜黄素可抑制脂多糖刺激小鼠RAW264.7细胞释放PGE2,促进抗炎因子IL-10表达,并呈一定量效关系,其影响细胞因子释放作用与细胞毒作用无关。结论:姜黄素呈浓度依赖性地抑制脂多糖刺激小鼠RAW264.7细胞释放PGE2,促进IL-10表达。

碱性BH_4^-在铜阳极上的电化学行为

用线性极化方法研究了铜对BH4-氧化的电化学行为。室温下,在2.0 mol/L NaBH4+2.0 mol/L NaOH的阳极电解液中,由铜阳极、铂阴极和NRE-212膜组成的直接硼氢化物燃料电池(DBFC)的最大电流密度和最大功率密度分别为235mA/cm2和46.14 mW/cm2;用恒流法以20 mA/cm2进行寿命测试,电压在0.6 V左右稳定达50 h。扫描电镜(SEM)及X射线衍射(XRD)测试的结果表明:实验中阳极表面形貌不断变化,但始终为铜单质。

同源重组在染色体DNA基因克隆中的应用方法

同源重组是生物界普遍存在的现象,从噬菌体、细菌到真核生物都有能发生同源重组的种类。如何把同源重组应用到基因克隆中成为近年来生物学家研究的热点。本文从宿主细胞的改造、重组功能的诱导、感受态细胞的制备、线性同源载体的获得及重组体的鉴定等几个方面具体叙述这种基因克隆的新方法,从分子水平上较为详尽地介绍了同源重组在染色体基因克隆中的应用、前景展望及存在的局限性。

mPer2在小鼠黑色素瘤细胞B16细胞凋亡中的作用研究

目的:研究mPer2在小鼠黑色素瘤细胞B16细胞凋亡中的作用机制。方法:将构pcDNA3.1-mper2和pcDNA3.1空质粒分别转染入小鼠黑色素瘤细胞B16中。提取两组细胞的总RNA和总蛋白,利用特异引物和抗体,分别检测两组细胞中p53和c-Myc基因在RNA和蛋白水平表达的变化。结果:RT-PCR和蛋白印迹检测均显示与转染pcDNA3.1(+)空质粒相比,转染pcDNA3.1-mPer2入B16细胞后,p53的表达增高,而c-Myc表达降低。结论:mPer2可能通过抑制细胞癌基因c-Myc的表达,促进抑癌基因p53的表达,从而抑制B16细胞生长,诱导细胞凋亡。

Si_3N_4结合SiC材料在稀土电解槽中的应用及效果

采用Si3N4结合SiC板作为3kA液态下阴极稀土金属电解槽的侧壁材料,进行了实际电解工艺试验,考察了Si3N4结合SiC材料在稀土熔盐电解槽上的使用效果,研究表明,Si3N4结合SiC材料在稀土熔盐中腐蚀较严重,尤其是靠近电解槽阴极位置,由于弥散在电解质中的金属雾和阳极产生的气体加剧了Si3N4结合SiC材料受腐蚀破坏;板材由于受热不均产生了开裂现象,且开裂位置会加剧材料的腐蚀破坏,进一步的分析表明,Si3N4结合SiC材料在稀土熔盐中主要受腐蚀的是含Si3N4的结合相。

小檗碱体外抗子宫内膜癌HEC-1A细胞的作用研究

目的研究小檗碱体外对非激素依赖型人子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、迁移、周期、凋亡的影响。方法 MTT法检测小檗碱对人子宫内膜癌HEC-1A[中分化腺癌,雌激素受体(ER)弱阳性,孕激素受体(PR)阴性]细胞株的抑制作用;倒置显微镜观察细胞形态变化;将实验组分成50、25、12.5 mg/L高、中、低剂量组。Transwell法测定细胞体外迁移能力,流式细胞仪观察细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染检测HEC-1A细胞凋亡。结果小檗碱可显著抑制HEC-1A细胞生长,在100、50、25、12.5、6.25 mg/L浓度范围内呈剂量依赖性(P<0.05)。小檗碱能明显改变细胞形态,小檗碱作用于子宫内膜癌HEC-1A细胞后,倒置显微镜下可见部分细胞体积改变,细胞内出现空泡,结构破坏,裂解成碎片,贴壁细胞减少,并散在排列。抑制子宫内膜癌HEC-1A细胞体外迁移的能力,高剂量组效果更佳,迁移细胞数明显减少。小檗碱低剂量组可以将HEC-1A细胞阻滞于G0/G1期。小檗碱作用24 h能提高HEC-1A细胞总凋亡率、早期凋亡率及晚期凋亡率,早期凋亡率更明显。结论小檗碱能够抑制非激素依赖型子宫内膜癌HEC-1A细胞株的增殖、迁移,并且促进HEC-1A细胞凋亡,低剂量小檗碱能将细胞阻滞在G0/G1期。

c—Jun氨基末端激酶信号通路在高氧诱导A549细胞凋亡中的作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路在高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞A549细胞凋亡中的作用。方法培养A549细胞，以1×105／ml密度接种于6孔板（1ml／孔）或10cm培养皿（5ml／lm），采用随机数字表法，将其随机分为4组（n=12）：空气对照组（C组）和空气＋JNK抑制剂组（C＋s组）、高氧组（O2组）和高氧＋JNK抑制剂组（01＋S组）。C＋S组和01＋S组均加入终浓度为5μmol／L的JNK抑制剂SP600125。将细胞分别放人空气或95％O2中进行培养，培养24h时测定细胞存活率、细胞裂解液中Fas—L和裂解caspase-3表达水平。结果与C组比较，C＋S组细胞存活率、Fas-L和裂解caspase-3表达差异无统计学意义（P〉0．05），O2组细胞存活率降低，Fas—L和裂解caspase．3表达上调（P〈0．05）；与01组比较，01＋S组细胞存活率升高，Fas—L及裂解caspase-3表达下调（P〈0．05）。结论JNK信号通路参与了高氧诱导A549细胞凋亡。