基于RNA-Seq技术的山羊嘴唇黏膜色素沉积相关差异表达基因筛选及初步分析

【目的】通过RNA-Seq技术筛选不同颜色山羊嘴唇色素代谢相关的候选基因,初步揭示山羊嘴唇黏膜颜色差异形成的分子机理,为动物黏膜色素代谢研究提供理论依据。【方法】以嘴唇等面部可视黏膜颜色存在差异的酉州乌羊(乌黑色)和板角山羊(粉色)为研究对象,采用Illumina Hiseq 2000测序平台对嘴唇黏膜组织进行转录组测序,所得序列经质控、组装后,以|log_(2)(Fold Change)|>1且q value<0.05为标准筛选差异表达基因,并对差异表达基因进行功能注释和富集分析。【结果】利用RNA-Seq技术共筛选出249个基因差异表达,其中与粉色嘴唇黏膜组织相比,乌黑色嘴唇黏膜组织中上调基因有218个,下调基因有31个。23个差异表达基因被划分在9种TFs家族中,其中14个基因属于含有锌指结构域的转录因子家族。GO功能富集分析结果显示,差异表达基因主要参与离子转运相关生物学过程和分子功能。KEGG代谢通路富集结果显示,差异表达基因显著富集于催产素、钙、cGMP-PKG信号通路,以及肥厚性心肌病、心脏肌肉收缩等7个与肌肉组织功能相关的信号通路,其中钙和cGMP-PKG信号通路与色素代谢密切相关;此外,ASIP等12个基因富集到MAPK信号通路、cAMP信号通路、黑色素合成信号通路(Melanogenesis)等色素代谢核心通路中;CALML6、OXTR、ATP1A2、ATP1B44个差异表达基因同时富集到多条与色素代谢相关的通路。qRT-PCR结果与测序结果一致,表明测序结果可靠。【结论】初步确定ASIP基因为山羊嘴唇色素代谢的候选基因,CALML6、OXTR、ATP1A2、ATP1B44个基因参与了山羊嘴唇黏膜色素沉积过程,为研究山羊黏膜色素代谢的分子机制提供理论基础,也为探究人类黏膜异常着色的分子机制提供参考。

颊、腭粘膜移植修复硬腭裸露骨面的组织学观察

目的 :研究硬腭裸露骨面和应用颊、腭粘膜移植覆盖裸露骨创面后的组织学愈合过程。方法 :选用 32只日本大耳白纯种兔 ,随机分为正常对照组、裸露骨面组、颊粘膜移植组、腭粘膜移植组。裸露骨面组 ,用外科手术形成一恒定大小的矩形裸露骨面 ;颊、腭粘膜移植组 ,则在裸露骨面的基础上 ,分别用相同面积的颊、腭粘膜移植覆盖裸露骨面。术后定期处死动物 ,切取硬腭制作组织学切片 ,观察不同处理措施的腭部组织学愈合过程。结果 :裸露骨面组 ,术后 2周出现致密纤维结缔组织 ;术后 4周 ,软组织与骨组织之间出现Sharpey′s纤维 ,并存在至观察期结束。采用颊、腭粘膜移植组 ,结缔组织较疏松 ,无Sharpey′s纤维形成 ,组织结构类似于正常组织。结论 :采用颊、腭粘膜移植修复硬腭裸露骨面 。

改良Millard法修复单侧重度完全性唇裂

目的:探讨一种修复重度完全性单侧唇裂的方法。方法:应用改良Millard法与裂隙缘粘膜瓣联合应用修复单侧重度完全性唇裂,笔者自2000年始应用此法对单侧完全性重度唇裂的鼻槛修复及口、鼻瘘口封闭、鼻堤重建效果满意。21例患者创口均Ⅰ期愈合。所有病例经术后复查效果满意。结果:该组病例在唇裂修复的同期行口、鼻瘘口之完善封闭。结论:此方法适用于单侧重度完全性唇裂且齿槽骨裂隙较宽大者。

无牙颌患者口腔黏膜及面部皮肤颜色测量及其相关性初步分析

目的:对在上海长海医院就诊的无牙颌患者牙槽黏膜、唇红、面部皮肤的色度值进行采集,研究无牙颌患者牙槽黏膜、唇红、面部皮肤色度学分布及其相关性。方法:用CM-700d分光测色计采集47例无牙颌患者牙槽黏膜、唇红、面部皮肤色度值,用SPSS13.0软件进行统计分析。结果:牙槽黏膜色度值范围L*(42.14-64.18),a*(3.27-14.03),b*(2.4-12.57);唇红色度值范围L*(34.23-58.26),a*(5.24-15.89),b*(2.64-13.18);皮肤色度值范围L*(46.63-65.65),a*(4.53-13.01),b*(6.04-17.57);唇红L值越大则皮肤L值越大,唇红a值越大则牙槽黏膜a值越大,皮肤b值越大则牙槽黏膜b值越大。结论:通过此项研究初步得出无牙颌患者牙槽黏膜、唇红、皮肤色度值范围及其相关性:唇红与皮肤明度L值、牙槽黏膜与唇红a值、皮肤与牙槽黏膜b值呈正相关。

自体唇黏膜固有层在唇裂手术中的应用

目的观察唇裂手术中,将自体唇黏膜固有层移植于皮肤创口内的可行性和效果。方法自2003年1月至2006年12月,选择年龄为3～5个月的单侧唇裂伴腭裂患儿28例,在下三角瓣法唇裂修复术中,将切下的唇红黏膜制成固有层后,自体移植于患侧鼻槛区的表皮下。结果术后7d,28例患儿的鼻槛区切口无红肿及异常渗出,甲级愈合。术后12～17个月,随访其中的19例患儿,鼻槛区的瘢痕平坦且较窄,肤色与周围皮肤相近;在移植较大固有层的6例患儿中,鼻槛区较丰满、微隆起者4例,较丰满、无隆起者2例。结论在唇裂修复术中,唇黏膜固有层自体移植于皮肤切口内的方法是可行的,并可用于表皮下填充。

下唇粘膜淋巴流向的观察

作者用普鲁士蓝氯仿液在下唇粘膜下行间接注射,观察了30具新鲜胎儿及新生儿尸体下唇粘膜淋巴流向,淋巴管的行程及注入的淋巴结。对下唇癌转移途径的分析和手术治疗提供了解剖学依据。

应用羊膜修复下唇黏膜烧伤的初步报道

目的:探讨应用羊膜治疗下唇黏膜烧伤的可行性。方法:收治1例广泛性口腔黏膜烧伤患者,其下唇黏膜烧伤后第14d仍被脓痂覆盖,故行下唇切痂术,去除坏死组织,应用羊膜覆盖创面。结果:术后第1d,羊膜形成干性结构;术后第5d,羊膜自行脱落,上唇创面明显缩小。结论:羊膜可作为一种暂时覆盖物,用于下唇黏膜烧伤的治疗。

婴幼儿唇黏膜血管瘤的液氮冷冻治疗

目的:评价液氮冷冻治疗婴幼儿唇黏膜血管瘤的可靠性。方法:对63例婴幼儿患者确诊的唇黏膜血管瘤进行液氮冷冻治疗,其中,男20例,女43例,年龄3～18个月,平均年龄3.5个月。肿瘤主要集中于3个部位,上唇19例,下唇40例,口角4例。术前、术后及每次复诊,拍照记录。随访8～14个月,对治疗结果进行评估。结果:77.8%患者完全有效,15.9%患者显著有效,6.3%患者部分有效。所有病例均未出现严重并发症。结论:唇黏膜血管瘤液氮冷冻治疗是安全、有效、可靠的。

红唇粘膜瓣修复单侧唇裂术后继发红唇畸形

目的:探求一种新的矫正单侧唇裂术后继发畸形的手术方法。方法:应用红唇粘膜瓣技术矫正单侧唇裂术后继发畸形中的红唇畸形。结果:所有病例术后全部一期愈合,无粘膜瓣坏死,术后红唇形态满意。结论:红唇双叶瓣技术可以同时矫正口哨样畸形,加强唇珠形态,减薄裂隙外侧红唇粘膜厚度等多种红唇畸形,术后效果确切,值得推广。

唇、舌微循环变化与胃脘痛血瘀证关系之初探

对胃脘痛血瘀证５５例、无瘀证４２例及正常人４０例进行唇粘膜及舌尖微循环的联合检测发现，唇、舌微循环在胃院痛血瘀证中均有异常变化，且唇粘膜微循环变化较舌尖微循环更加明显。

亲体口唇黏膜移植治疗儿童眼表烧伤的护理

严重的眼部化学伤或热烧伤在急性期常遗留显著的并发症,如角膜混浊、假性翼状胬肉、睑球粘连、眼睑畸形、睑内外翻、倒睫、眼睑缺损、瘢痕收缩等,严重影响眼外观和患者生活质量。2008年9月～2009年4月我病房共收受治9例眼表烧伤儿童并对其进行亲体口唇黏膜移植治疗睑球粘连，取得良好效果，现报告如下。

二期义眼台植入并唇粘膜移植治疗结膜囊狭窄的疗效观察

目的 探讨二期义眼台植入并唇粘膜移植治疗结膜囊狭窄手术的临床效果.方法 回顾性分析2006年3月～2011年4月我院眼科二期行义眼台植入并唇粘膜移植治疗结膜囊狭窄的患者18例（18眼）,术后1个月安置义眼片,观察结膜囊形成、义眼活动度及外观改善情况,随访6～16个月.结果 18例患者均手术成功,除1例再次发生结膜囊狭窄外,无义眼台暴露及唇粘膜坏死,义眼片安置后活动度好.结论 二期义眼台植入并唇粘膜移植治疗结膜囊狭窄手术是矫正眼窝凹陷的一种安全有效的手术方式.

眼表热化学烧伤后重度睑球粘连的疗效观察

目的观察羊膜和唇黏膜移植,必要时联合口腔修复膜移植治疗眼表热化学烧伤后严重睑球粘连和结膜穹窿再建的临床疗效。方法 15例眼表热化学烧伤后重度睑球粘连病例,均为严重睑球粘连,视力丧失,所有病例均在分离睑球粘连后,形成结膜穹窿,采用唇黏膜及羊膜移植必要时植入口腔修复膜修复睑结膜和球结膜缺损;术后放入义眼片,上下睑缘临时缝合,并加压包扎2周限制眼睑活动。观察移植唇黏膜的成活情况,结膜囊深度及眼球活动度。结果术后随访6~12个月,15例患者中,13例结膜穹窿解剖深度与对侧健眼对称,无粘连和瘢痕形成;2例患者经多次术后睑球仍粘连,穹窿消失,疗效差。结论羊膜和唇黏膜移植必要时移植口腔修复膜能有效矫正眼表热化学烧伤后严重睑球粘连并重建结膜穹窿,能较好的满足患者的外观需求。

上皮生长因子在口腔粘膜放射性损伤中作用的探讨

探讨了上皮生长因子（ＥＧＦ）在口唇放射性损伤过程中的作用。用ＥＧＦ每天１００μｇ／ｋｇ口服或皮下注射，记录放射后口唇粘膜反应。同时应用长春花碱观察了上皮细胞的时间节律变化。结果表明：ＥＧＦ并不能对粘膜放射性损伤产生保护作用，但ＥＧＦ却能刺激细胞的增殖，并呈时间节律性改变。文中对ＥＧＦ的应用并不能促使细胞放射性损伤修复而达到保护粘膜的原因和机制进行了讨论。

1.5岁阿尔巴斯绒山羊在不同饲养条件下瓣胃帆形态学变化的研究

用大体解剖和组织切片方法观察研究了不同饲养条件下9只1.5岁的阿尔巴斯绒山羊在不同饲养条件下瓣胃帆的形态学变化.研究结果表明:瓣胃帆的粘膜是介于前胃黏膜与真胃黏膜之间的过度结构.三种不同饲养条件下,阿尔巴斯绒山羊左右瓣胃帆的大小差异(除干草组与青草组外)不显著.瓣胃帆下面的粘膜固有层内分布有管状的贲门腺,腺细胞内夹有少量的壁细胞.瓣胃帆粘膜的固有层和粘膜下层内有发达的淋巴小结.

羊膜移植和唇粘膜移植治疗重度义眼座暴露的疗效比较

目的比较羊膜移植和唇粘膜移植在治疗重度义眼座暴露中的疗效。方法选取重度义眼座暴露患者12例12眼,随机分为2组,每组6例,分别用羊膜移植和唇粘膜移植来进行义眼座暴露修复手术,观察2组病例手术疗效并进行比较。结果羊膜移植组6例中有2例结膜能沿羊膜移行生长至完全遮盖义眼座,达到义眼座无暴露、无感染、结膜囊无狭窄的治愈标准,其余4例分别在术后1-3周内羊膜脱落,手术失败。而唇粘膜移植组6例移植的唇粘膜全部存活,均达到治愈标准。结论唇粘膜移植治疗重度义眼座暴露,组织新鲜,血运丰富,易存活,效果明显优于羊膜移植。

液氮冷冻治疗婴幼儿唇黏膜静脉畸形的效果观察

目的探讨液氮冷冻治疗婴幼儿唇黏膜静脉畸形的效果。方法57例唇黏膜静脉畸形患儿采用液氮冷冻治疗。男35例，女22例，平均年龄7．4个月。术前、术后及每次复诊拍照记录，对治疗结果进行评估。结果随访2～16个月，71．9％（41／57）完全有效，19．3％（11／57）明显有效，8．8％（5／57）部分有效。所有病例均未出现严重并发症。结论液氮冷冻治疗唇黏膜静脉畸形安全、有效。

唇裂上唇黏膜的组织病理研究

目的:本研究通过对唇裂患儿上唇黏膜的组织学研究,探讨现代红唇整复技术的理论依据。方法:对18例单侧唇裂患儿的上唇组织标本进行组织学观察,并对上皮细胞中角蛋白的表达进行研究。结果:干性黏膜和湿性黏膜除具有唇黏膜的共同特点之外,两者在组织学上有一定差异。干性黏膜上皮表面有角化层,基底细胞层较薄,上皮钉突不明显,黏膜下结缔组织中无粘液腺;湿性黏膜上皮表面为不全角化,基底细胞层较厚,上皮钉突明显,湿性黏膜下结缔组织中有粘液腺。免疫组化显示,皮肤鳞状上皮细胞角蛋白的表达明显强于黏膜,但在干性黏膜及湿性黏膜的鳞状上皮表达未见明显差别。结论:干性黏膜和湿性黏膜在组织学上属于不同的黏膜组织,在唇裂的整复过程中要分别进行整复,以达到最理想的效果。

上唇黏膜移植治疗结膜囊狭窄的疗效观察

目的观察应用上唇黏膜移植治疗结膜囊狭窄的临床应用效果,并探讨其临床意义。方法回顾性分析57例(57只眼)接受上唇黏膜移植的结膜囊狭窄患者的临床资料,其中男性35例,女性22例,年龄21~75岁。轻度狭窄5例,中度19例,重度26例,复发7例。所有患者均采用上唇黏膜移植,结膜囊内薄壳支撑,加压包扎1个月。术后6个月行睑缘融合切开,1周后佩戴义眼片,平均随访6.5个月。结果 57例均移植成功,唇黏膜与球结膜融合,结膜囊形态良好,均可配戴适合的义眼。其中2例发生了睑缘融合缝线脱落,1例发生在术后2个月,给予再次睑缘融合后加压包扎1周,6个月后切开融合处,结膜囊形态良好;另1例发生在术后5个月,因结膜囊形态良好,未予处理,6个月时义眼片佩戴正常,其他病例随访期内未见其它并发症。结论上唇黏膜移植是治疗结膜囊狭窄的理想方法,它具有患者进食早,供区恢复快,患者外观影响小等优点,上唇黏膜可作为结膜囊狭窄治疗取材的首选。

唇黏膜移植修复睑缘缺损术后眼表状况的研究

目的·分析唇黏膜移植重建睑缘术后的眼表及泪膜状态。方法·选择2017年11月至2019年12月在上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科就诊的15例睑缘缺损患者为研究对象。均行唇黏膜移植术重建上睑缘,术后6~8周行眼表综合分析仪检查,包括:泪河高度(tear meniscus height,TMH)、泪膜破裂时间(tear film breakup time,BUT)和泪液分泌试验。术后复查时测量双眼睑裂高度(palpebral fissure height,PFH)和提上睑肌功能(levator function,LF)。术眼相关数据与自身健眼对应数据比较。患者在术后6~8周时填写眼表疾病指数(Ocular Surface Disease Index,OSDI)量表。结果·健眼TMH(0.24±0.07)mm,术眼TMH(0.23±0.11)mm,差异无统计学意义(P=0.316);健眼BUT(10.75±2.31)s,术眼BUT(7.75±2.05)s,差异无统计学意义(P=0.065);泪液分泌试验中健眼(10.20±1.96)mm/5 min,患眼(9.33±2.04)mm/5 min,差异无统计学意义(P=0.376);健眼PFH(10.16±1.18)mm,患眼PFH(10.11±2.11)mm,差异无统计学意义(P=0.761);健眼LF(9.59±0.93)mm,患眼LF(9.03±1.02)mm,差异无统计学意义(P=0.552)。患者OSDI量表平均得分为26.44±3.88。结论·唇黏膜移植重建睑缘术后6~8周可获得较为满意的泪膜稳定性和双眼对称度;OSDI量表提示患者术后6~8周时可能存在干眼。