Research on Comparison of Gas Chromatography and Liquid Chromatogram Detecting Pesticide Residue

The existing methods of detecting pesticide residue include gas chromatography, high performance liquid chromatography, gas chromatograph-mass, liquid chromatograph-mass, capillary electrophoresis, radioimmunoassay, biosensor and rapid detection on the spot. The paper analyzes the comparison of gas chromatography and liquid chromatogram detecting pesticide residue, for achieving the development tendency and the future goal of analyzing pesticide residue.

HPLC Fingerprint Chromatogram of Tetracera asiatica Produced in Guangxi

[Objectives] To establish fingerprint chromatogram of Tetracera asiatica and provide basis for controlling and assessing the quality of Tetracera asiatica.[Methods] The high-performance liquid chromatography( HPLC) method was used. Phenomenex C18( 5 μm,4. 6 ×250 mm),acetonitrile-0. 1% phosphoric acid water,gradient elution,flow rate 1 m L/min,detection wavelength 214 nm,and column temperature 25 ℃. The fingerprint chromatogram of 10 batches of samples of Tetracera asiatica was determined for similarity comparison. [Results] It established HPLC fingerprint chromatogram of Tetracera asiatica produced in Guangxi,determined a total of 13 common fingerprint peaks. The similarity of 10 batches of Tetracera asiatica was > 0. 9.[Conclusions] The method is rapid and accurate and can provide references for assessing the quality of Tetracera asiatica.

溶剂提取-高效液相色谱法测定大气颗粒物中18种多环芳烃

建立大气颗粒物PM2.5中18种多环芳烃的样品快速溶剂提取结合高效液相色谱的测定方法。将1/2玻璃滤膜剪碎后加入2.0 mL乙腈,于20℃水浴超声提取30 min,提取液经0.22μm有机相滤膜过滤,多环芳烃C18专用柱分离,以乙腈-水作为流动相进行梯度洗脱,采用紫外串联荧光检测器-高效液相色谱仪检测,以色谱峰面积外标法定量。18种PAHs的质量浓度在0.01~0.50μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数不小于0.999,检出限为0.03~0.47 ng/m^(3),样品加标平均回收率为75.6%~114.7%,相对标准偏差为0.09%~3.78%(n=7)。该方法简便、快速、准确、灵敏,可应用于大气颗粒物PM2.5中18种多环芳烃的测定。

石香薷水提物HPLC特征图谱的研究

石香薷药材用于精油提取后的水提液中仍含有大量生物活性物质,具有开发为饲料添加剂的价值,从而实现石香薷资源的综合利用。采用HPLC法,按照优化后的色谱条件对24批石香薷水提取物样品的化学成分进行测定分析。建立了不同产地石香薷水提物的HPLC特征图谱,共确定8个特征峰,经对照品比对确定特征峰5、7、8分别为野黄芩苷、迷迭香酸和黄芩素-7-甲醚,设定迷迭香酸为参照峰(S峰),特征峰1~8的相对保留时间的规定值分别为0.176、0.444、0.495、0.676、0.765、0.954、1.000、1.618,精密度、重复性和稳定性考察中各特征峰相对保留时间的相对标准偏差(RSD)分别为0.03%~0.57%、0.01%~0.31%、0.04%~0.15%,相对峰面积的RSD分别为0.88%~2.60%、1.39%~3.33%、1.95%~4.54%。该研究建立的HPLC特征图谱具有良好的精密度、稳定性和重复性,为石香薷水提物作为饲料添加剂开发的质量控制提供了依据。

基于HPLC特征图谱对消炎灵胶囊的质量评价研究

目的:建立消炎灵胶囊的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)特征图谱法,通过相似度评价及聚类分析研究,为消炎灵胶囊的质量评价提供新思路。方法:使用HPLC,选择Waters Xselect C_(18)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长280 nm。以甘草苷峰作为S峰,将32批消炎灵胶囊特征图谱文件导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012.1版),进行相似度计算,通过SPSS 26.0软件对结果进行聚类分析。结果:32批消炎灵胶囊HPLC特征图谱有14个共有特征峰,除5批样品外,其余样品相似度均大于0.900,相似度结果与聚类分析结果基本一致。结论:该研究方法及分析结果可为消炎灵胶囊的鉴别与质量控制提供新思路。

液相色谱-串联质谱法快速检测速冻调制食品中7种甜味剂与防腐剂含量

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectroscopy,LC-MS/MS)快速检测速冻调制食品中7种甜味剂与防腐剂的分析方法。方法采用Phenomenex Kinetex F5色谱柱(50 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.05%甲酸-10 mmol/L乙酸铵和乙腈进行梯度洗脱,电喷雾离子源(electrospray ionization,ESI)负离子模式、多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式进行测定。结果在0.01~0.20 mg/kg质量浓度范围内,目标物的线性关系良好,相关系数均大于0.99,方法检出限(S/N=3)为0.01~0.10 mg/kg;在不同添加浓度(1.0、2.0、10.0 mg/kg)下,其回收率为81.2%~105.3%、相对标准偏差均不大于10%。结论该方法具有操作简便、快速、准确、灵敏等优点,可满足速冻调制食品中7种甜味剂与防腐剂的定性定量分析,为速冻调制食品中防腐剂与甜味剂的快速筛查和风险分析奠定基础。

液相色谱串联质谱法和化学发光微粒子免疫法测定人血清中卡马西平血药浓度的一致性评价

目的比较液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)与化学发光微粒子免疫法(CMIA)两种方法检测人血清中卡马西平浓度的一致性。方法收集118例临床血清样本,分别用LC-MS/MS和CMIA两种方法检测卡马西平。采用Passing-Boblok回归分析两种方法之间的相关性,采用Bland-Altman及Mountain plot评估两种方法的一致性,使用Kappa分析判断两种方法检测卡马西平浓度是否在有效范围的符合率。结果LCMS/MS与CMIA法检测卡马西平结果分别为(5.68±2.36)μg/mL和(6.45±2.69)μg/mL,Passing-Bablok回归分析显示两种方法检测卡马西平浓度的回归方程为yCMIA=-0.04885+1.1538xLC-MS/MS,斜率为1.1538(95%CI:1.0887~1.2244)不包含1,截距为-0.04885(95%CI:-0.4559~0.2792)包含0,P>0.1,线性度无明显偏差。Bland-Altman图显示两种方法差值的均值为-0.77,界外点数(比率)为5.08%;山形图的山顶值为-0.74μg/mL,偏离0较小,表明两种方法测量的结果一致性较好。两种方法判断卡马西平治疗浓度水平Kappa系数为0.693,诊断符合率为89.93%。结论CMIA与LC-MS/MS两个检测系统检测结果一致性较好。

加味藿香正气丸特征图谱建立及3种成分测定

目的基于HPLC法建立加味藿香正气丸特征图谱,并测定3种成分含量。方法样品甲醇提取液采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分析,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm和284 nm;柱温为30℃。结果橙皮苷、厚朴酚、和厚朴酚分别在2.715~434.400μg/mL、2.760~176.600μg/mL、2.623~167.900μg/mL范围内呈现良好的线性(r=1.0000),平均加样回收率分别为99.2%,96.3%,95.9%,RSD分别为1.5%,1.3%,1.8%(n=9)。建立的特征图谱对制剂中7味主要药材进行了控制,为整体上评价不同企业的原药材、投料、工艺以及制剂的质量情况提供了依据。结论该方法准确可靠、重复性好,可用于加味藿香正气丸的质量控制。

四妙勇安汤的高效液相色谱指纹图谱及含量测定

采用高效液相色谱法测定四妙勇安汤物质基准的指纹图谱及含量。使用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸为流动相,梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃。建立15批四妙勇安汤物质基准的高效液相色谱指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(国家药典委员会2012 A版)进行相似度评价,对共有峰进行药味归属,建立了绿原酸、哈巴苷、哈巴俄苷的含量测定方法。15批四妙勇安汤物质基准相似度均大于0.90,指纹图谱中含有11个共有峰,其中归属于金银花5个,玄参2个,当归2个,甘草2个。绿原酸、哈巴苷、哈巴俄苷平均质量分数分别为2.24%、0.59%、0.14%。建立的15批四妙勇安汤高效液相色谱指纹图谱精密度、稳定性良好,能够较好的反映其化学成分组成,可用于四妙勇安汤物质基准的质量控制与评价。

参葛颗粒HPLC特征图谱及含量测定研究

目的采用高效液相色谱(HPLC)法创建参葛颗粒特征图谱及含量测定方法。方法色谱柱Kromasil 100-5-C_(18)(4.6 mm×250.0 mm,5μm);流动相乙腈-水;柱温30℃;流速为1.0 ml/min;进样量10μl;检测波长为220 nm,采用对照品比对、超高压液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用技术对特征峰进行化学成分指认及药味归属,并检测10批参葛颗粒的特征图谱和含量。结果建立了参葛颗粒的HPLC图谱,标记8个特征峰并进行了指认,10批颗粒批间一致性良好,10批颗粒葛根素的含量范围为10.6611~11.9936 mg/g。结论建立的参葛颗粒特征图谱及含量测定方法操作简单,具有良好的稳定性、重现性,对参葛颗粒中所含的化学成分进行了较全面的展示,也可为其他相关中药复方制剂的质量控制研究提供参考。

九味羌活丸UPLC指纹图谱的建立及化学模式识别

目的:建立九味羌活丸的超高效液相色谱(UPLC)指纹特征图谱并开展化学模式识别。方法:采用Waters Acquity UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%磷酸-乙腈进行梯度洗脱,进样量1μL,柱温为40℃,流速为0.35 mL·min^(-1),检测波长为254 nm。通过中药指纹图谱相似度分析软件及化学模式识别技术对12批九味羌活丸样品进行分析。结果:通过比对12批样品,识别出24个共有峰,建立九味羌活丸的UPLC指纹对照图谱并指认出其中13个成分;12批样品相似度均在0.90以上。聚类分析和主成分分析将12批样品分为3类,通过正交偏最小二乘法-判别分析推测其中2个成分是引起批间差异的关键因素,可作为本品的质量标志性组分。结论:建立的九味羌活丸UPLC指纹图谱能较为全面地评价本品的内在质量,同时结合化学模式识别分析可为九味羌活丸的质量标准制定提供参考依据。

经典名方清金化痰汤基准样品HPLC指纹图谱及量值传递研究

基于建立的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱结合多指标成分含量的测定方法,研究了清金化痰汤(QJHTD)的量值传递规律。制备15批QJHTD基准样品,建立其HPLC指纹图谱并进行相似度评价,确定共有峰;对QJHTD基准样品中4种指标性成分(栀子苷、芒果苷、黄芩苷、甘草酸)进行含量测定,分析饮片-基准样品的量值传递规律。结果表明,15批QJHTD基准样品指纹图谱的相似度均大于0.98。标定了26个共有峰,并对各共有峰进行药材归属。指标性成分栀子苷、芒果苷、黄芩苷、甘草酸的含量分别为44.60~76.82mg·g^(-1)、98.04~145.25 mg·g^(-1)、46.82~75.64 mg·g^(-1)、81.60~126.63 mg·g^(-1),转移率分别为32.91%~62.42%、21.78%~35.93%、29.98%~57.12%、27.51%~49.34%。15批QJHTD基准样品的出膏率为16.98%~25.19%,平均出膏转移率为67.19%。结合指纹图谱、多成分含量测定以及出膏率,研究经典名方QJHTD基准样品的量值传递规律,可为后续制剂质量控制提供参考。

高效液相色谱测定水中痕量亚硝基二甲胺

采用反相高效液相色谱法，以甲醇：水=5：95（体积比）为流动相，用C18柱和紫外检测器对亚硝基二甲胺（NDMA）进行了分离和测定。结果表明：选择固定波长为228nm，流动相流量为1．0mL／min，测定NDMA线性范围为0．5—20．0ug/L时，标准偏差为0．07—0．076ug/L，相对标准偏差≤12．9％，水样加标回收率为85．9％-109％，方法检出限为5．2—5．6ng／L；该方法具有较好的线性关系、精密度和准确度，可用于快速分析饮用水中的消毒副产物亚硝基二甲胺。

左氧氟沙星片剂绝对生物利用度研究

目的在中国健康志愿者中进行左氧氟沙星(可乐必妥)500mg片剂药代动力学研究,并以左氧氟沙星500mg(100ml)注射液为对照,研究口服片剂的绝对生物利用度。方法10名受试者分别单剂空腹口服左氧氟沙星500mg片剂和单次静脉滴注500mg(100ml)注射液。以高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定血、尿样中左氧氟沙星药物浓度。结果受试者单剂空腹口服左氧氟沙星500mg片剂后平均Cmax实测值为(6.20±2.51)mg/L,Tmax为(0.91±0.54)h,t1/2为(6.71±0.88)h,AUC0-∞为(41.88±5.72)mg·h/L,24h内尿中平均累积排出率为(69.40±7.27)%,其与注射液相比绝对生物利用度几何均数比为107.5%(以AUC0-∞计),90%可信区间为(97.72～118.25)%。结论左氧氟沙星500mg片剂单次口服给药后吸收迅速,且吸收完全。提示临床可以每日一次,500mg顿服,用于左氧氟沙星先静脉给药,继以口服的序贯疗法。

除草剂扑草净在海参中的生物富集与消除效应研究

本文采用超高效液相色谱-串联质谱法对进行了扑草净在海参中的生物富集规律的进行了研究。采用半静态水质接触曝污法,在15.0±1.0℃水温条件下,将海参分别浸浴于扑草净浓度1.00μg/L、10.00μg/L和200.00μg/L水中进行富集试验。结果表明,在所研究的三个浓度中,扑草净在海参中的富集速度较快,随曝污质量浓度的增加,富集量逐渐增加,呈正相关关系;分别在第1 d、3 d和4 d达到富集最大值,富集最大值分别为4.70μg/kg、43.80μg/kg和674.00μg/kg;最大富集系数分别为4.70、4.38和3.37。富集系数随曝污质量浓度的增加而减小,呈负相关关系。将达到稳定状态的海参转移至洁净水中进行消除试验,低质量浓度下,均在第2 d降至未检出,在高曝污质量浓度下,从第7 h至46 d共取样14次,测定海参中扑草净含量,其浓度范围为23.70±3.07μg/kg。本研究所得的药时曲线可为海参扑草净污染的净化提供数据支持。

采油微生物发酵液中有机酸(醇)的GC-MS分析

为探索微生物采油的机理, 对预处理后的微生物发酵液进行分步蒸馏, 有效提取发酵液中的低相对分子质量有机酸和有机醇。选用FFAP石英毛细管色谱柱, 采用GC-MS直接进样法定性和定量分析了HP和HT (两种以原油为唯一碳源的采油微生物菌种) 发酵液中的低相对分子质量有机酸和有机醇的种类和含量。HP发酵液中分析出四种低碳有机酸 (乙酸、丙酸、丁酸和异戊酸 ) 和一种低碳醇 (乙醇), 总酸含量为 9 915 8mmol/L, 醇含量为 16 52mmol/L; HT发酵液中分析出三种低碳有机酸 (乙酸、丙酸、丁酸), 没有检出低碳醇, 总酸含量为 0 109 1mmol/L。定量分析的标准偏差小于 1, 变异系数小于 8%。

白鲜皮抗内毒素活性物质的分离提取与活性研究

提要:目的筛选与类脂A(lipidA)具有较高结合活性的中药,从中提取具有拮抗内毒素(lipopolysaccharide,LPS)活性的物质。方法采用生物传感技术,以lipidA为靶点,检测42种中药的水提物与lipidA的结合活性;以白鲜皮为研究对象,通过大孔吸附树脂、溶剂萃取、聚酰胺柱层析和高效液相色谱(HPLC)法,分离提取与lipidA结合活性较高的组分;动态比浊法鲎试验检测HPLC产物DPR-1～3对LPS(0.1ng/ml)的中和作用;ELISA法检测DPR-2对LPS(100ng/ml)刺激的RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的影响。结果8种中药水提物与lipidA具有较高的结合活性(RU>100arc/s);从白鲜皮中逐步分离出与lipidA结合活性较高的组分,经HPLC法获得3种物质DPR-1～3;DPR-2对LPS具有一定的中和作用,在8μg/ml浓度以上可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞释放TNF-α和IL-6(P<0.05),并具有剂量效应关系。结论从42种中药中筛选出与lipidA具有较高结合活性的中药白鲜皮,并从中分离提取出抗LPS活性物质DPR-2,其抗LPS活性可能与DPR-2对LPS的中和活性有关。

四逆汤大孔树脂精制物的实验研究

目的 :对四逆汤大孔树脂精制物 (以下简称四逆汤精制物 )进行实验研究。方法 :用D10 1大孔吸附树脂分离精制四逆汤 ,运用化学与药效学指标对精制物进行讨价。结果 :四逆汤精制物薄层层析图谱及HPLC图谱与四逆汤基本一致 ,并且能显著升高间羟胺处理小鼠血清一氧化氮含量。结论

基于UPLC-Q-TOF MS技术的三七中皂苷类成分质谱裂解规律研究

采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)法快速分析三七中17种化合物,包括4对人参皂苷同分异构体,即三七皂苷R_1、R_2,人参皂苷Rg_1,人参皂苷Rg_3、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Re、Rf、Rc、Ro、Rd、Rk_1、Rh_1和拟人参皂苷_(F11)。采用Waters Acquity UPLC^(TM)BEH C18色谱柱(2.1mm×150mm×1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾负离子模式下采集数据。结果表明,17种常见的三七皂苷和人参皂苷化合物对照品(包含多种同分异构体皂苷)可被液相色谱完全分离,通过归纳总结质谱全裂解信息,探讨了其裂解规律和特征离子。该方法可为快速鉴定和分析含有三七皂苷和人参皂苷类成分的化合物提供参考,并为全面表征三七指纹图谱提供依据。

盐酸伐昔洛韦在人体内的药动学和相对生物利用度

目的研究伐昔洛韦在正常人体内药动学和相对生物利用度。方法20名健康志愿者单剂量交叉口服伐昔洛韦300mg和参比片,用高效液相色谱(HPLC)法检测受试者血药浓度,并计算两者的药动学参数。结果受试药与参比药的血药浓度水平一致。其主要药动学参数t1/2分别为(3.81±0.66)h和(4.15±0.74)h;Tmax分别为(1.48±0.58)h和(1.38±0.56)h,Cmax分别为(1.86±0.50)mg/L和(2.07±0.62)mg/L,AUC分别为(7.51±1.71)mg.h/L和(7.03±0.98)mg.h/L,两制剂的药动学参数相近。用AUC估算的伐昔洛韦试验药相对生物利用度为98.0%±11.8%。结论伐昔洛韦片和参比片的AUC、Cmax经方差分析和双向单侧t检验表明两制剂生物等效;Tmax经非参数法检验表明两种制剂差异无统计学意义(P>0.05)。