lncRNA SNHG20表达与乳腺癌放疗敏感性及预后的关系

目的:通过检测lncRNA SNHG20在乳腺癌组织及正常乳腺组织中表达水平,分析其与乳腺癌放疗敏感性及患者预后关系。方法:选取2013年11月至2016年10月本院收治的乳腺癌患者119例作为研究对象,收集其活检癌组织,另选取同期本院病理库留存的正常乳腺组织119例作为对照。实时荧光定量(qRT-PCR)检测lncRNA SNHG20表达水平,并分析与乳腺癌患者临床病理特征、放疗敏感性关系,Cox回归模型分析乳腺癌患者预后独立危险因素。结果:乳腺癌组织中lncRNA SNHG20表达水平显著高于正常乳腺组织(P<0.05)。乳腺癌组织中lncRNA SNHG20表达水平与分化程度、TNM分期、淋巴结转移及辅助化疗有关(P均<0.05)。lncRNA SNHG20高表达组患者放疗后缓解率显著低于lncRNA SNHG20低表达组患者(P<0.05)。lncRNA SNHG20高表达组患者3年总生存率明显低于lncRNA SNHG20低表达组(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、lncRNA SNHG20高表达是影响乳腺癌患者不良预后独立危险因素(P均<0.05)。结论:lncRNA SNHG20在乳腺癌组织中高表达,与乳腺癌放疗敏感性低、TNM分期、淋巴结转移及患者总生存率有关,可能作为乳腺癌放疗敏感性及患者预后标志物,为提高乳腺癌临床治疗疗效及改善患者预后提供一定理论依据。

lncRNA SNHG20抑制结肠癌细胞化疗敏感性的机制

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)SNHG20抑制结肠癌细胞对5-FU化疗敏感性的调控机制。方法:利用结肠癌细胞株Lo Vo构建对5-FU抵抗的细胞株Lo Vo/5-FU,通过qRTPCR的方法检测Lo Vo/5-FU中lncRNA SNHG20的表达情况。进一步分别构建lncRNA SNHG20稳定过表达及表达沉默的结肠癌细胞株,利用CCK-8的方法检测lncRNA SNHG20对5-FU IC50的影响,通过平板克隆形成实验检测lncRNA SNHG20对克隆形成能力的影响。最后运用Western blot方法探讨lncRNA SNHG20抑制结肠癌对5-FU化疗敏感性的调控机制。结果:在对5-FU耐药的结肠癌细胞株Lo Vo/5-FU中,lncRNA SNHG20显著高表达(P<0.001)。lncRNA SNHG20高表达能明显提高5-FU的IC50,而沉默lncRNA SNHG20则显著提高Lo Vo/5-FU对5-FU的敏感性(P<0.001)。平板克隆形成实验结果显示lncRNA SNHG20显著提高细胞的克隆形成能力(P<0.001)。Western blot结果表明,lncRNA SNHG20能显著抑制结肠癌细胞株PTEN蛋白的表达,而p-AKT及p-PI3K表达水平明显上调。结论:lncRNA SNHG20通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制结肠癌细胞对5-FU的化疗敏感性。

LncRNA SNHG20通过抑制c-Fos转录调控认知功能

目的研究lncRNA SNHG20在神经元活化过程中的作用。方法通过对KCl激活的神经元数据库进行分析,筛选出变化明显的lncRNA;使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对在体外培养的KCl活化的神经元以及学习记忆模式刺激的实验动物的海马脑区进行结果验证;RT-qPCR以及Western blot检测过表达SNHG20的神经元中相关基因的表达;使用4-Thiouridine(4sU)标记新生成的RNA并通过RT-qPCR检测新生成的c-Fos mRNA水平;海马脑区AAV病毒脑注射后,对小鼠进行相关的行为学检测。结果SNHG20的表达水平在神经元活化后快速并且明显下降。SNHG20过表达后,抑制了早期响应基因c-Fos的RNA以及蛋白质水平,且新生成的c-Fos的mRNA水平较对照组明显下降。SNHG20也抑制了c-Fos通路下游靶基因,特别是Annexin A2(ANXA2)的水平。在体的海马脑区SNHG20过表达的小鼠表现出明显的学习记忆功能障碍。结论SNHG20能够通过抑制c-Fos的表达参与调控学习记忆过程。

长链非编码RNA SNHG20在恶性肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度超过200 nt的非编码RNA分子,大量研究报道其在恶性肿瘤的发生发展中发挥重要的生物学功能。近年来,多项研究发现lncRNA小核仁RNA宿主基因20(small nucleolar RNA host gene 20,SNHG20)在肺癌、肝癌、胃癌等多种肿瘤中高表达,促进肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化过程,抑制其凋亡,影响细胞周期进程,且与患者的预后不良相关。作为一个公认的致癌基因,lncRNA SNHG20是恶性肿瘤潜在的治疗靶点和评估预后的生物标志物。文章总结国内外相关研究报道,对lncRNA SNHG20在恶性肿瘤中的研究进展作一综述。

SNHG20对CIK细胞共培养的宫颈癌细胞Hela的杀伤作用

目的探讨SNHG20是否通过靶向微小RNA(miR)-217影响细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞对宫颈癌细胞Hela的杀伤作用。方法应用流式细胞仪分析诱导的CIK细胞表型。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CIK细胞共培养前后Hela中lncRNA小核仁RNA宿主基因(SNHG)20表达。在Hela中转染si-SNHG20或转染pcDNA-SNHG20并与CIK细胞共培养。四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测Hela细胞活性,克隆形成实验测定Hela细胞克隆形成,流式细胞仪评估Hela细胞凋亡,Western印迹检测凋亡蛋白pro-caspase-3、Cleaved-caspase-3表达。双荧光素酶报告实验检测SNHG20和miR-217的靶向关系。结果CIK细胞诱导14 d时,CD3+CD56+比例达到最高。CIK细胞与Hela细胞共培养24、48、72 h降低SNHG20表达水平,差异有统计学意义(P<0.01)。CIK细胞与Hela细胞共培养或转染si-SNHG20降低Hela细胞24、48、72 h细胞活性、克隆形成数、pro-caspase-3蛋白表达水平,提高miR-217表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.01)。转染pcDNA-SNHG20后,CIK细胞对Hela细胞的活性、克隆形成数、pro-caspase-3蛋白表达的抑制作用及对Hela细胞的凋亡、miR-217、Cleaved-caspase-3蛋白表达的促进作用被逆转。SNHG20靶向调控miR-217表达。结论CIK细胞通过下调宫颈癌细胞Hela中SNHG20靶向miR-217表达,从而抑制Hela细胞的增殖和诱导凋亡。