期刊文献+
共找到55篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
Thermally Evaporated ZnSe for Efficient and Stable Regular/Inverted Perovskite Solar Cells by Enhanced Electron Extraction 被引量:1
1
作者 Xin Li Guibin Shen +6 位作者 Xin Ren Ng Zhiyong Liu Yun Meng Yongwei Zhang Cheng Mu Zhi Gen Yu Fen Lin 《Energy & Environmental Materials》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第5期440-448,共9页
Electron transport layers(ETLs)are crucial for achieving efficient and stable planar perovskite solar cells(PSCs).Reports on versatile inorganic ETLs using a simple film fabrication method and applicability for both l... Electron transport layers(ETLs)are crucial for achieving efficient and stable planar perovskite solar cells(PSCs).Reports on versatile inorganic ETLs using a simple film fabrication method and applicability for both low-cost planar regular and inverted PSCs with excellent efficiencies(>22%)and high stability are very limited.Herein,we employ a novel inorganic ZnSe as ETL for both regular and inverted PSCs to improve the efficiency and stability using a simple thermal evaporation method.The TiO_(2)-ZnSe-FAPbl_(3)heterojunction could be formed,resulting in an improved charge collection and a decreased carrier recombination further proved through theoretical calculations.The optimized regular PSCs based on TiO_(2)/ZnSe have achieved 23.25%efficiency with negligible hysteresis.In addition,the ZnSe ETL can also effectively replace the unstable bathocuproine(BCP)in inverted PSCs.Consequently,the ZnSe-based inverted device realizes a champion efficiency of 22.54%.Moreover,the regular device comprising the TiO_(2)/ZnSe layers retains 92%of its initial PCE after 10:00 h under 1 Sun continuous illumination and the inverted device comprising the C_(60)/ZnSe layers maintains over 85%of its initial PCE at 85℃for 10:00 h.This highlights one of the best results among universal ETLs in both regular and inverted perovskite photovoltaics. 展开更多
关键词 high efficiency long-term stability planar regular/inverted perovskite solar cells thermal evaporation ZnSe electron transport layer
下载PDF
大肠杆菌多酚氧化酶的分子克隆及异源高效表达
2
作者 邓卉 余丹 +6 位作者 邹成义 范景胜 李斌 屈东 倪青松 郑钰嘉 陈瑾 《中国饲料》 北大核心 2024年第5期26-31,共6页
菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB... 菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB2多酚氧化酶基因,实现其高效表达,为SDB2多酚氧化酶在饲料工业上的规模化应用奠定基础。从大肠杆菌SDB2中克隆出多酚氧化酶基因,将其与质粒pET28a连接后转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中培养,通过PCR鉴定及质粒酶切验证方法构建重组菌株,同时对重组克隆基因进行生物信息学分析。采用“2×2”交叉试验设计,以温度和诱导剂IPTG浓度两个影响因素诱导SDB2多酚氧化酶基因在重组菌株中高效表达,经SDS-PAGE和WB双重验证后,确立最佳诱导条件,最终纯化出目标酶蛋白。结果表明:(1)成功克隆SDB2多酚氧化酶基因,构建出异源表达重组菌株。(2)克隆出的SDB2重组多酚氧化酶基因含目标核苷酸741个,总编码氨基酸263个(含标签氨基酸20个),氨基酸组成的蛋白相对分子质量为28499.0,理论等电点为6.94,据此预测出SDB2重组多酚氧化酶三维结构模型。(3)确立SDB2多酚氧化酶异源高效表达的最佳诱导条件为温度37℃,IPTG浓度1 mmol,该条件下表达出大量可溶性酶蛋白,有利于工业化生产。本试验条件下,大肠杆菌SDB2多酚氧化酶成功实现了分子克隆及异源高效表达,为我国非粮饲料资源实现高效利用提供了技术参考。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多酚氧化酶 克隆 高效表达
下载PDF
Multiple transition metals modulated hierarchical networks for high performance of metal-ion batteries
3
作者 Jie Liu Chenjie Lou +8 位作者 Jipeng Fu Xuan Sun Jingrong Hou Jiwei Ma Yongjin Chen Xiang Gao Ligang Xu Qi Wei Mingxue Tang 《Journal of Energy Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2022年第7期604-613,I0015,共11页
Searching anodes with excellent electrochemical performance has been in great demand for rechargeable metal ion batteries. In this contribution, Fe/Co co-doped Ni S with N-based carbon(Fe Co-NiS@NC) derived from trime... Searching anodes with excellent electrochemical performance has been in great demand for rechargeable metal ion batteries. In this contribution, Fe/Co co-doped Ni S with N-based carbon(Fe Co-NiS@NC) derived from trimetallic Prussian blue analogue is designed and synthesized. The composition can be easily adjusted and modulated by multi-metals. In addition, the well-designed carbon nanocubes effectively promote electronic conductivity and buffer the volume change upon charge and discharge cycling, resulting in good capacity and long-term cycle life for both lithium-ion batteries and sodium-ion batteries, with capacities of 1018 m Ah g^(-1)(vs. Li/Li^(+)) and 454 m Ah g^(-1)(vs. Na/Na^(+)), respectively, after 100 cycles.Kinetics studies indicate that the electrochemical behaviors are manipulated by both diffusion and pseudocapacitance processes. These strategies would open new opportunities and potention for novel energy storage. 展开更多
关键词 Multiple transition metallic synergy Li-ion batteries Solium-ion batteries In-situ XRD long-term cycling stability high coulumbic efficiency
下载PDF
Construction of High Level Expression Cell Lines of Erythropoietin
4
作者 李文君 张洪齐 +2 位作者 丛靖莉 李一勤 刘进元 《Tsinghua Science and Technology》 SCIE EI CAS 1998年第3期23-26,共4页
Human erythropoietin gene was ligated into the mammalian high efficiency expression vector pSV2 dhfr by standard procedures of filling in, trimming, ligation and transformation to construct a high efficiency expressi... Human erythropoietin gene was ligated into the mammalian high efficiency expression vector pSV2 dhfr by standard procedures of filling in, trimming, ligation and transformation to construct a high efficiency expression vector. After the expression vector pSEPO25 was transfected into CHO dhfr - cells, the cell line which could express high levels of EPO was successfully selected. The result lays the foundation for production of EPO by genetic biotechnology. 展开更多
关键词 ERYTHROPOIETIN vector construction high efficiency expression cell line
原文传递
金属硫蛋白突变体的植物高效表达载体的构建及其在烟草中的表达 被引量:11
5
作者 张晓钰 李伟 +2 位作者 张竞 何笃修 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期888-892,共5页
金属硫蛋白有α、β两个结构域(dom ain),其中α结构域优先结合Cd2+ 和Hg2+ .小鼠αα突变体在大肠杆菌中已经构建并得到表达,其转基因植株已得到,可在Cd300(300 μm ol/L)中生长.为了进一步提高... 金属硫蛋白有α、β两个结构域(dom ain),其中α结构域优先结合Cd2+ 和Hg2+ .小鼠αα突变体在大肠杆菌中已经构建并得到表达,其转基因植株已得到,可在Cd300(300 μm ol/L)中生长.为了进一步提高外源基因在烟草中的表达量,首先用PCR 的方法设计引物,在基因翻译起始密码子ATG 附近加入植物偏爱的碱基组合AACAATG.另外,将该突变体基因插入具有双35 S(CaMV35S)强启动子的植物双元表达载体pGPTVd35S-BAR中,获得了带有αα突变体的植物双元表达载体.通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草NC89,获得了抗除草剂的转基因植株.经PCR-Southern 和蛋白Dot-blotting 检测,证明了αα突变体在烟草中的嵌合与表达.抗重金属实验证明转基因烟草可以在Cd400(400 μm ol/L)中生长. 展开更多
关键词 突变体 烟草转基因 抗性育种 MT 重金属
下载PDF
植酸酶发展现状和研究趋势 被引量:17
6
作者 丁强 杨培龙 +2 位作者 黄火清 王亚茹 姚斌 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第3期27-33,共7页
植酸酶作为一种新型的饲料添加剂已经得到越来越多的重视和应用。其可以提高饲料中磷和其他成分的利用率,并减轻环境污染。综述了新型酶制剂的筛选、高效表达和应用等方面的进展,并对进一步的研究开发趋势进行了分析。
关键词 植酸酶 饲料 应用 高通量筛选 高效表达
下载PDF
基因工程酶法结合酵母能量耦联高效合成L-谷氨酰胺的研究 被引量:16
7
作者 陈群英 陈国安 +2 位作者 薛彬 张显久 殷志敏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期456-460,共5页
通过PCR方法从Bacillussubtilis基因组DNA中扩增出谷氨酰胺合成酶基因 (glnA) ,克隆至表达载体pET2 8b ,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,用IPTG及乳糖诱导表达。SDS PAGE分析表明 ,所表达的谷氨酰胺合成酶 (glutaminesynthetase ... 通过PCR方法从Bacillussubtilis基因组DNA中扩增出谷氨酰胺合成酶基因 (glnA) ,克隆至表达载体pET2 8b ,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,用IPTG及乳糖诱导表达。SDS PAGE分析表明 ,所表达的谷氨酰胺合成酶 (glutaminesynthetase ,简称GS)为可溶性蛋白 ,约占总菌蛋白的 80 %。利用表达的GS蛋白N端的 6×His Tag对GS进行亲和层析 ,将获得的纯蛋白进行酶活性测定。结果表明 ,纯化的GS合成反应的最适温度为 6 0℃ ,最适pH为 6 5 ,Mn2 + 能明显提高GS的活性和稳定性。工程菌BL2 1(DE3) pET2 8b glnA粗提物中GS的比活是宿主菌本身的 84倍。以谷氨酸、NH4 Cl和ATP为底物的转化实验表明谷氨酸的转化率达 95 %以上。经筛选获得一株高效能量耦联酵母菌株 ,命名为YC0 0 1;通过能量耦联表明 ,该系统对谷氨酸的转化率高达 80 % ,平均谷氨酰胺产量为2 2g L。 展开更多
关键词 谷氨酰胺合成酶 诱导表达 能量耦联 高效转化
下载PDF
玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因高效表达载体构建及其导入小麦的研究 被引量:18
8
作者 李艳 许为钢 +4 位作者 胡琳 张磊 齐学礼 张庆琛 王根松 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期741-746,共6页
为获得具有C4光合特征的高光效转基因小麦材料,利用从玉米中克隆的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因(pepc,GenBank接受号为FJ415327)构建高效双元表达载体,通过基因枪介导法将其导入小麦品种(系)中,利用Real-time PCR方法分析外源基因... 为获得具有C4光合特征的高光效转基因小麦材料,利用从玉米中克隆的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因(pepc,GenBank接受号为FJ415327)构建高效双元表达载体,通过基因枪介导法将其导入小麦品种(系)中,利用Real-time PCR方法分析外源基因在转基因植株中的拷贝数。PCR和双酶切鉴定表明,玉米PEPCcDNA序列已插入双元表达载体pCAMBIA3301中,命名为p3301-pepc;对获得的抗性再生植株进行PCR扩增,其中有342株扩增出目的条带;在选取的15株转基因植株中7株拷贝数为1,3株拷贝数为2,2株拷贝数为3,拷贝数为5、8和17的分别为1株。初步证明玉米pepc基因已整合到小麦基因组中,且外源基因在转基因植株中既有单拷贝插入,也有多拷贝插入,这为进一步研究该基因在小麦基因组中的功能表达提供了试验材料。 展开更多
关键词 小麦 玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 高效表达载体 转基因 拷贝数
下载PDF
鸡痘病毒通用高效表达载体的构建及其初步应用 被引量:7
9
作者 孙蕾 吴艳涛 +2 位作者 张体银 陈素娟 刘秀梵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期429-432,共4页
利用分子克隆技术对本室构建的高效鸡痘病毒表达载体 p1 1 S进行改造 ,在其人工合成禽痘病毒 ( FPV)强启动子 Ps的下游引入含 7个单一酶切位点的多克隆位点 ( MCS) ,构建了便于外源基因插入的通用性更强的高效单表达载体 p N1 1 S。然后... 利用分子克隆技术对本室构建的高效鸡痘病毒表达载体 p1 1 S进行改造 ,在其人工合成禽痘病毒 ( FPV)强启动子 Ps的下游引入含 7个单一酶切位点的多克隆位点 ( MCS) ,构建了便于外源基因插入的通用性更强的高效单表达载体 p N1 1 S。然后将 FPV早晚期启动子 PE/ L 及其启动的鹅源新城疫病毒 NDV ZJ1株的 F基因一并插入 p N1 1 S中 ,使PE/ L 与 Ps反向串联 ,从而构建出 1个含 NDV ZJ1株 F基因的重组 FPV高效双表达载体 p N1 1 SEF,其 MCS可以用于插入其他外源基因。在此基础上 ,将 NDV ZJ1株的 HN基因插入 p N1 1 SEF的 Ps启动子下游的 MCS中 ,构建了共表达 NDV ZJ1株 F和 HN基因的重组 FPV双表达载体 p N1 1 SEFHN。将 p H1 1 SEFHN质粒 DNA与 FPV2 82 E4株共转染 CEF,得到共表达 NDV ZJ1株和 HN基因的重组 FPV,间接免疫荧光实验初步证明外源基因得到了较好的表达。表明所构建的通用高效 FPV表达载体有利于高效基因工程活载体疫苗的研制 。 展开更多
关键词 鸡痘病毒 表达载体 新城疫病毒 F基因 HN基因 疫苗
下载PDF
高光效基因植物表达载体的构建 被引量:5
10
作者 罗素兰 陈如凯 +1 位作者 潘大仁 林俊芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第4期38-41,共4页
通过一系列中间载体的构建 ,将来自C4作物 (甘蔗 )光合作用中的关键酶基因 (高光效基因 )RbcS和PEPCase基因插入到植物表达质粒中 ,获得了具有卡那霉素抗性的RbcS植物表达载体 pC2 0SNR和具有PPT除草剂抗性的PEPCase基因的正义 (pC30SNP... 通过一系列中间载体的构建 ,将来自C4作物 (甘蔗 )光合作用中的关键酶基因 (高光效基因 )RbcS和PEPCase基因插入到植物表达质粒中 ,获得了具有卡那霉素抗性的RbcS植物表达载体 pC2 0SNR和具有PPT除草剂抗性的PEPCase基因的正义 (pC30SNP)和反义 (pC30SNPr)植物表达载体。再将这 3个载体分别转入农杆菌LBA4 4 0 4和A2 81或EHA10 5中 ,获得了适于C3 植物转化的农杆菌重组工程菌株。为进一步利用C4植物高光效基因转化C3 植物 ,以期提高光合效率提供基础。 展开更多
关键词 高光效基因 植物表达载体 构建 中间载体 光合作用 关键酶基因
下载PDF
高温和红光诱导的鱼腥藻7120短藻丝体中TNF-α基因表达效率的提高 被引量:4
11
作者 欧阳叶新 施定基 +3 位作者 钟晖 梁承邺 李振甲 胡鸿钧 《武汉植物学研究》 CSCD 2003年第4期301-307,共7页
目前解决外源基因在蓝藻中低效表达的主要策略是改进供体DNA元件。这项工作尝试改变受体系统生理状态,研究对外源基因表达效率的影响。以前已经报道用高温(45℃)和红光处理鱼腥藻7120(Anabaenasp.PCC7120)可以诱导其形成短藻丝体,这里... 目前解决外源基因在蓝藻中低效表达的主要策略是改进供体DNA元件。这项工作尝试改变受体系统生理状态,研究对外源基因表达效率的影响。以前已经报道用高温(45℃)和红光处理鱼腥藻7120(Anabaenasp.PCC7120)可以诱导其形成短藻丝体,这里报道以此作为受体细胞,将构建的含重组人肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因的穿梭表达载体pKT-TNF通过三亲接合转移法进行转化。红光和高温诱导形成的短藻丝体中,TNF-α基因接合转移效率为在正常营养藻丝中的5~6倍,Southern杂交结果证明pKT-TNF已在受体细胞中复制。Western印迹表明TNF-α基因已在受体系统中表达,放射免疫测定结果显示在短藻丝体中的表达效率提高到在正常营养藻丝中的4~5倍。这可能为提高外源基因在丝状蓝藻中的表达效率提供了一条新途径。此外,研究还分析了人TNF-α基因密码子使用偏向性对在鱼腥藻7120中表达效率的影响。 展开更多
关键词 人肿瘤坏死因子α基因 红光 高温 接合转移效率 表达效率 鱼腥藻7120
下载PDF
高比活木聚糖酶XYN-W及其突变体在酵母中的高效表达 被引量:3
12
作者 罗建杰 王亚茹 +5 位作者 袁铁铮 柏映国 黄火清 罗会颖 姚斌 范云六 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第5期80-85,共6页
将来源于瘤胃真菌Neocallimastix frontalis的高比活木聚糖酶基因xyn-w整合到毕赤酵母表达载体pPIC9上,通过电击转化得到重组转化子。SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,木聚糖酶基因xyn-w得到了高效分泌表达,在5 L发酵罐中木聚糖酶蛋... 将来源于瘤胃真菌Neocallimastix frontalis的高比活木聚糖酶基因xyn-w整合到毕赤酵母表达载体pPIC9上,通过电击转化得到重组转化子。SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,木聚糖酶基因xyn-w得到了高效分泌表达,在5 L发酵罐中木聚糖酶蛋白表达量达到1 mg/mL,酶活性达到13 000 IU以上。XYN-W的C端57个氨基酸序列为连接序列和锚定区域,利用PCR方法将此段序列去除,得到截短的木聚糖酶序列xyn-m。用相同方法构建高效表达XYN-M蛋白的毕赤酵母工程菌株,表达产物经纯化后进行酶学性质测定,结果表明,其比活为19 856.6 IU/mg,Kcat值为4 433.8 s-1,与纯化的XYN-W蛋白(比活性13 795.3 IU/mg、Kcat值2 717.1 s-1)相比,分别提高了43.9%和63.2%。 展开更多
关键词 木聚糖酶 毕赤酵母 XYN-W 高效表达 比活性改良
下载PDF
口蹄疫病毒P12A^*3C基因转化饲草玉米高效表达载体的构建 被引量:3
13
作者 张素芝 潘丽 +1 位作者 荣廷昭 张永光 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期549-554,共6页
为了研究饲草玉米可饲口蹄疫疫苗,将O型口蹄疫病毒的VP1和2A基因序列按照玉米的偏爱性密码子优化后,再与P1的其他基因及3C基因连接。同时,通过使用高效的Ubiquitin启动子以及在P1的起始密码子处添加Kozak序列和在3C基因3′末端添加内质... 为了研究饲草玉米可饲口蹄疫疫苗,将O型口蹄疫病毒的VP1和2A基因序列按照玉米的偏爱性密码子优化后,再与P1的其他基因及3C基因连接。同时,通过使用高效的Ubiquitin启动子以及在P1的起始密码子处添加Kozak序列和在3C基因3′末端添加内质网引导肽序列等措施提高免疫原基因的表达。结果显示,高效植物表达载体pC1300P12A*3C构建正确,可以用于后续的饲草玉米可饲口蹄疫疫苗的研究。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 饲草玉米 可饲疫苗 高效表达载体
下载PDF
外源基因在酵母中稳定表达的策略及研究进展 被引量:3
14
作者 侯爱华 鲍晓明 杨国梁 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期42-44,共3页
外源基因的稳定高效表达是重组酵母用于工业化生产的前提 。
关键词 酵母 基因表达体系 稳定高效
下载PDF
水动力转染基因在小鼠体内的长期高效表达 被引量:6
15
作者 贾帅争 王全立 《生物技术通讯》 CAS 2005年第3期307-309,共3页
水动力转染技术是近年新出现的一种体内基因转染方法,可以实现目的基因在小鼠体内的高效表达,有可能作为受精卵显微注射的一种简单替代技术。但该技术的缺点是转染基因多瞬时表达,外源基因在体内高效表达的时间通常不超过1周,而且局限... 水动力转染技术是近年新出现的一种体内基因转染方法,可以实现目的基因在小鼠体内的高效表达,有可能作为受精卵显微注射的一种简单替代技术。但该技术的缺点是转染基因多瞬时表达,外源基因在体内高效表达的时间通常不超过1周,而且局限于肝、肾等器官,从而限制了该技术广泛应用。为了延长水动力转染基因在小鼠体内长期高效表达的时间,从而能对目的基因的体内功能进行长期研究,国外研究者进行了广泛的探索,本文综述了相关研究的最新进展。 展开更多
关键词 高效表达 水动力 体内 小鼠 目的基因 基因转染 替代技术 显微注射 瞬时表达 外源基因 相关研究 受精卵 时间
下载PDF
禽流感抗原基因NA,HA的克隆及其表达载体的构建 被引量:3
16
作者 李进 阮颖 +5 位作者 龚剑 范亚丽 姚远頲 杜培粉 魏然 刘春林 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第3期449-452,共4页
HA和NA是禽流感病毒重要的保护性抗原基因,为了得到禽流感植物疫苗,本试验采用高保真PCR扩增方法得到目的基因,分别克隆到pMD18-T载体。经测序证实核酸序列正确后,克隆到含有GUS基因的高效植物双元表达载体pBl121上,获得含有HA/NA基因... HA和NA是禽流感病毒重要的保护性抗原基因,为了得到禽流感植物疫苗,本试验采用高保真PCR扩增方法得到目的基因,分别克隆到pMD18-T载体。经测序证实核酸序列正确后,克隆到含有GUS基因的高效植物双元表达载体pBl121上,获得含有HA/NA基因的植物双元表达载体pBI121-HA和pBI121-NA,采用冻融法将含HA/NA基因的植物双元表达载体转入根癌农杆菌LBA4404,菌液浸染生菜子叶,共培48小时后进行GUS基因表达检测,x-glue染色显蓝色,说明带有HA/NA的植物双元表达载体构建成功,为下一步的生菜转HA/NA基因研究奠定基础。 展开更多
关键词 禽流感抗原基因NA HA 植物高效表达载体 禽流感
下载PDF
黑曲霉植酸酶基因phyA的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:2
17
作者 闻雅男 王学英 +1 位作者 夏润玺 王媛媛 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期335-338,共4页
为获得大量、高活性植酸酶以及研究和开发新型微生物生物制剂,从自行筛选的黑曲霉中提取RNA,通过反转录合成模板cDNA,根据phyA成熟肽编码序列设计出一对引物,PCR扩增phyA,对扩增片段进行了克隆,通过限制性内切酶酶切分析、DNA测序证明p... 为获得大量、高活性植酸酶以及研究和开发新型微生物生物制剂,从自行筛选的黑曲霉中提取RNA,通过反转录合成模板cDNA,根据phyA成熟肽编码序列设计出一对引物,PCR扩增phyA,对扩增片段进行了克隆,通过限制性内切酶酶切分析、DNA测序证明phyA基因克隆成功。从pBS-T-phyA克隆中获取phyA编码序列,将其与pET28a+质粒连接,构建pET28a+-phyA重组质粒,并在大肠杆菌中获得高效表达。本研究成功克隆phyA,该基因全长1404bp,以ATG为起始密码子,TGA为终止密码子,编码467个氨基酸组成的多肽。SDS-PAGE电泳结果表明,phyA在大肠杆菌中成功表达,成熟植酸酶的分子量约为51kDa。在0.4g·L-1的IPTG的诱导下,植酸酶活性最大(1174U)。 展开更多
关键词 黑曲霉 PHYA基因 大肠杆菌 克隆载体 高效表达
下载PDF
蔗糖诱导型枯草杆菌工程菌高效表达条件研究 被引量:4
18
作者 李瑞芳 李慧琴 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2005年第6期13-16,共4页
为提高枯草杆菌工程菌外源基因的表达水平,探索了蔗糖诱导型枯草杆菌工程菌表达系统DB1342(pSCl8—66)的表达条件,筛选到蔗糖诱导型枯草杆菌工程菌最佳表达条件为:在枯草杆菌对数生长前期加蔗糖进行诱导表达,蔗糖的诱导剂量控制在... 为提高枯草杆菌工程菌外源基因的表达水平,探索了蔗糖诱导型枯草杆菌工程菌表达系统DB1342(pSCl8—66)的表达条件,筛选到蔗糖诱导型枯草杆菌工程菌最佳表达条件为:在枯草杆菌对数生长前期加蔗糖进行诱导表达,蔗糖的诱导剂量控制在2%~4%,诱导表达时间为20~24h. 展开更多
关键词 枯草杆菌 蔗糖诱导 高效表达
下载PDF
重组大肠杆菌生产海藻糖合酶发酵工艺优化 被引量:2
19
作者 张悦 宿玲恰 吴敬 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期913-919,共7页
为了实现来源于嗜热栖热菌的海藻糖合酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/p ET24a(+)-Tre S基因工程菌在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度32℃,当OD600达到50时以0.2 g/(L·h)的速率补加乳糖进行诱导产酶,... 为了实现来源于嗜热栖热菌的海藻糖合酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/p ET24a(+)-Tre S基因工程菌在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度32℃,当OD600达到50时以0.2 g/(L·h)的速率补加乳糖进行诱导产酶,在该条件下发酵35 h时酶活达到472 U/m L,是优化前的2.3倍;进而采用该条件在30 L发酵罐进行了初步放大研究,酶活达到356 U/m L。由于该海藻糖合酶热稳定性好,因此尝试了高温处理破碎E.coli细胞以释放海藻糖合酶,结果表明,80℃处理30 min,海藻糖合酶的得率可达72.3%,具有工业化应用前景。 展开更多
关键词 海藻糖合酶 高效表达 基因工程菌 发酵罐 高温处理
下载PDF
超低阻高中效过滤器在健康快车通风空调系统改造中的应用 被引量:3
20
作者 张益昭 曹国庆 +3 位作者 梁磊 潘红红 郑岩 姜炯 《暖通空调》 北大核心 2009年第4期65-67,98,共4页
通过健康快车空调系统的改造实践,提出了空调系统中空气生物污染的一种控制方法,给出了超低阻高中效过滤器的性能参数及其在健康快车通风空调系统中的应用效果。
关键词 健康快车 通风空调系统 手术室 超低阻高中效空气过滤器
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部