pH、离子强度和介电常数对低分子量有机酸在红壤中吸附行为的影响

通过一次平衡法考察了pH、离子强度和溶剂介电常数对红壤吸附低分子量有机酸的影响。研究结果表明,随着溶液pH值的升高有机酸的吸附量降低,其中草酸和酒石酸的吸附量在pH3.5～5.0范围内随着pH值的升高而急剧下降,之后缓慢下降（pH5.0～7.0）。柠檬酸、酒石酸和苹果酸的吸附量在1～2mmol/L初始浓度范围内随着离子强度的增加没有明显变化,但在2～20mmol/L初始浓度范围内却随着离子强度的增加而增加。红壤对草酸、柠檬酸、酒石酸和苹果酸的吸附量均随着溶剂介电常数的减小而增加。当溶剂中含6%的乙醇时,草酸、柠檬酸、酒石酸和苹果酸的吸附量分别是对照（不含乙醇）的1.05、1.05、1.11和1.31倍。

硫酸葡聚糖对低离子强度下罗非鱼肌球蛋白热变性聚集的抑制及其机制

以罗非鱼背部白肉为原料提取肌球蛋白,分析在低离子强度(1,50,150 mmol/L KCl)下,硫酸葡聚糖(dextran sulfate,DS)的添加对热处理(40～80℃,1℃/min)过程中肌球蛋白(2.0mg/mL)溶解度和分子结构的影响,探讨DS对肌球蛋白热变性聚集的抑制效果及机理。结果表明,在1mmol/L KCl条件下,肌球蛋白溶解度极低,热处理后分子头部聚集,尾部交联;在50,150mmol/L KCl条件下,肌球蛋白纤丝逐渐解离变粗,热处理后丝状体消失,头部聚集,溶解度、α-螺旋含量明显下降。添加0.4mg/mL DS后,热处理过程中体系浊度、溶解度和α-螺旋含量无明显变化,与未添加DS的体系相比,相同温度条件下肌球蛋白的溶解度明显增大(P<0.05),表面电势升高。DS与肌球蛋白分子间强的静电相互作用能有效抑制低离子强度下肌球蛋白的热变性聚集。

赖氨酸诱导低离子强度下罗非鱼肌球蛋白增溶及机制

以罗非鱼肉为原料提取肌球蛋白,研究5 mmol/L赖氨酸对低离子强度(1~150 mmol/L KCl)条件下肌球蛋白(蛋白质量浓度为2.0 mg/m L)体系浊度、溶解度及分子结构和形态的影响,分析赖氨酸诱导肌球蛋白增溶机理。结果表明,在低离子强度下,肌球蛋白分子聚集成纤丝,溶解度低,赖氨酸的添加能显著降低肌球蛋白体系的浊度(P<0.05),抑制蛋白分子间的聚集,增溶效果明显,增溶后分子的表面疏水性增大,α-螺旋含量减小(P<0.05),且与酸碱处理组比较,在1~40 mmol/L KCl范围内,赖氨酸增溶效果更好。增溶后的肌球蛋白Zeta-电位的绝对值增大,丝状体解离。

低离子强度盐溶液在交叉配血试验和不规则抗体检测中的应用

目的研究一种低离子强度盐溶液的配方,并探讨其在微柱凝集法交叉配血试验和不规则抗体检测试验中的应用及影响因素。方法利用生理盐水、低离子强度盐溶液,分别对2015年10月—2016年12月在新疆医科大学第一附属医院昌吉分院住院与门诊申请输血和手术备血的3 125例受血者和3 125例供血者用长春博迅生物技术有限责任公司提供的抗人球蛋白检测卡进行凝集配血试验,并与瑞士达亚美2号稀释液(ID-Diluent 2)对相同的受血者和供血者在达亚美提供的微柱凝胶卡进行凝集配血试验对比;同样利用生理盐水、低离子强度盐溶液分别对6 250例不规则抗体筛选标本用长春博迅生物技术有限责任公司提供的抗人球蛋白检测卡进行不规则抗体筛查,并与瑞士达亚美2号稀释液对相同的样本在达亚美提供的微柱凝胶卡进行不规则抗体筛查结果对比。结果用低离子强度盐溶液配制的红细胞悬液进行交叉配血,其中阳性58例(1.9%),阴性3 067例(98.1%),与达亚美的检测结果完全相同;用生理盐水配制的红细胞悬液进行交叉配血,其中阳性33例(1.1%),阴性3 092例(98.9%)。用低离子强度盐溶液配制的红细胞悬液进行不规则抗体筛查,其中阳性62例(0.992%),阴性6 188例(99.008%),与达亚美的检测结果完全相同;用生理盐水配制的红细胞悬液进行不规则抗体筛查,其中阳性42例(0.672%),阴性6 208例(99.328%)。低离子强度盐溶液介质的红细胞悬液与生理盐水介质的红细胞悬液交叉配血及抗筛检测的反应强度比较,差异均有统计学意义[交叉配血:反应强度1+占6.9%(4/58)比42.4%(14/33),反应强度2+占24.1%(14/58)比33.3%(11/33),反应强度3+占41.4%(24/58)比9.1%(3/33),反应强度4+占27.6%(16/58)比15.2%(5/33);不规则抗体筛查:反应强度1+占9.7%(6/62)比38.1%(16/42),反应强度2+占22.6%(14/62)比33.3%(14/42),反应强度3+占41.9%(26/62)比9.5%(4/42),反应强度4+占25.8%(16/62)比19.0%(8/42),均P<0.05]。结论低离子强度盐溶液用于微柱凝集法交叉配血试验的敏感性高、特异性强、结果稳定,适用于临床输血前交叉配血试验及抗筛试验的血清学检测。

低离子强度盐溶液与生理盐水作为红细胞稀释液在输血前不规则抗体筛查中的应用效果对比

目的:分析并比较在输血前采用微柱凝胶间接抗人球蛋白法对患者进行不规则抗体筛查时用低离子强度盐溶液与生理盐水作为红细胞稀释液的效果。方法:选择近年来在安顺市人民医院进行输血治疗的2156例患者作为研究对象。在对这些患者进行输血治疗前,均采用微柱凝胶间接抗人球蛋白法对其进行不规则抗体筛查。在筛查过程中,分别采用低离子强度盐溶液与生理盐水作为红细胞稀释液,然后比较用这两种溶液作为红细胞稀释液对这些患者进行不规则抗体筛查时其不规则抗体的阳性检出率。结果:用低离子强度盐溶液与生理盐水作为红细胞稀释液对这2156例患者进行不规则抗体筛查时其不规则抗体的阳性检出率分别为0.79%和0.32%,二者相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在输血前采用微柱凝胶间接抗人球蛋白法对患者进行不规则抗体筛查的过程中,与用生理盐水作为红细胞稀释液对其进行不规则抗体筛查相比,用低离子强度盐溶液作为红细胞稀释液对其进行不规则抗体筛查能提高其不规则抗体的阳性检出率。

自制增强剂在间接抗球蛋白试验中的临床应用

目的探索低离子强度盐溶液-聚乙二醇(LISS-PEG)、低离子强度盐溶液-牛血清白蛋白(LISS-BSA)这2种自制增强剂在间接抗球蛋白试验(IAT)中的临床应用。方法将较常见的标准红细胞IgG不规则抗体(抗-D、抗-M、抗-N、抗-S、抗-s、抗-Jk^(a)、抗-Jk^(b)、抗-Fy^(a)、抗-Fy^(b)、抗-Di^(a)、抗-K)与对应抗原的红细胞反应,在反应中分别添加LISS-PEG、LISS-BSA增强剂,选择5 min和15 min 2种不同的孵育时间进行试管法间接抗球蛋白增强试验,与常规IAT作比较。选择100例血液标本中含红细胞IgG不规则抗体的患者,将同样的反应条件应用于患者标本的IAT试验,观察自制增强剂的效果。用AABB评分法记录其凝集强度。结果 LISS-PEG孵育5 min与孵育15 min应用于临床标本IAT凝集强度分值(8.65±0.58 vs 8.7±0.68)比较无差异(P>0.05);LISS-BSA孵育5 min与孵育15 min、常规IAT应用于临床IAT凝集强度分值(5.12±0.34 vs 5.03±0.29 vs 4.78±0.68)比较无差异(P>0.05);LISS-PEG孵育5 min与常规IAT凝集强度分值(8.65±0.58 vs 4.78±0.68)比较有差异(P<0.05)。结论自制的LISS-PEG增强剂应用于IAT中,抗原抗体孵育时间仅需5 min,凝集强度即可达到明显的增强效果,此方法为救治急诊输血患者缩短了交叉配血时间,值得推广使用。

PCR-LIS-SSCP快速分析非缺失型α-地中海贫血点突变

目的建立一种简便快速的筛查非缺失型α－地中海贫血点突变的ＳＳＣＰ分析方法。方法在选择性扩增α２珠蛋白基因的基础上，巢式ＰＣＲ扩增突变热点区域，低离子强度（ＬＩＳ）条件下将ＰＣＲ产物热变性，用非变性胶电泳分析其ＳＳＣＰ。结果ＬＩＳ条件下处理样品，ＰＣＲ产物变性效率明显提高，电泳结果可检出区别于野生型对照的３种含基因突变的电泳带型，且电泳时间仅需３小时。结论ＰＣＲ－ＬＩＳ－ＳＳ－ＣＰ可用于快速筛查非缺失型α－地中海贫血点突变。