人胎肝中两种抑制肿瘤细胞生长活性成分的分离鉴定及功能研究

胎儿组织中存在低分子肿瘤抑制物。胎肝细胞的甲醇-丙酮提取物中保留有大部分抑瘤活性。用体外液体培养条件下对人急性粒系白血病细胞系（HL-60）的抑制作用为指标，跟踪分离过程。提取物经反相C18中压液相色谱、SephadexLH-20凝胶色谱及正相高效液相色谱分离得到两种活性物质，经NMR和HRMS鉴定为7-酮基胆固醇（7-ketocholesterol，7-KC）和7-β-羟基胆固醇（7-β-hydroxycholesterol，7-β-HC）。体外琼脂培养条件下7-KC对小鼠S-180细胞较对正常小鼠骨髓粒-巨噬系祖细胞有更强的抑制增殖及集落生成作用。7-KC在浓度15μg／ml之内对正常人骨髓CFU-GM基本无抑制作用，但对HL-60细胞却有明显的抑制增殖作用，7-β-HC对HL-60细胞增殖较对正常人骨髓CFU-GM有更强的抑制作用。

人胎肝中低分子抑瘤物的分离纯化、结构鉴定及其对肿瘤细胞生长的选择性抑制作用

在胎儿组织中存在一类低分子肿瘤抑制物。胎肝细胞的甲醇－丙酮提取物中保留有大部分抑瘤活性。用体外液体培养条件下对人急性粒系白血病细胞系（ＨＬ－６０）的抑制作用为指标，跟踪指导分离过程。提取物经反相Ｃ１８中压液相色谱、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０凝胶色谱及氨基键合相高效液相色谱分离得到一纯活性物质，经ＮＭＲ和ＭＳ鉴定为７－酮基胆固醇（７－ｋｅｔｏｃｂｌｅｓｔｅｒｏｌ，７－ＫＣ）。体外琼脂培养条件下７－ＫＣ对小鼠ＷＥＨ１－３和Ｓ－１８０细胞较对正常小鼠骨髓粒一巨噬系祖细胞有更强的抑制增殖及集落生成作用。７－ＫＣ对ＨＬ－６０细胞增殖较对正常人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ有更强的抑制作用。

人胎肝细胞分泌的低分子抑瘤物对白血病细胞的抑制作用

本工作证明了在胎儿组织中存在一类低分子天然肿瘤抑制物,它是胎儿组织细胞生成和分泌的,对瘤株细胞和原代白血病细胞有选择性抑制作用。初发期或复发期急性非淋巴细胞白血病患者的骨髓在体外液体培养条件下与肝细胞上清及其甲醇提取物共同孵育4d,可使所有病例的骨髓AML—CFU降低到不可检出的程度。因而,低分子天然抑瘤物是天然肿瘤免疫中的一个组成部分,它在肿瘤的诊断和治疗中有着深远的意义。

人胎肝中低分子天然抑瘤物对小鼠肉瘤S-180作用的研究

从人胎儿肝脏中分离出一种分子量较小的抑瘤物质(FLS-MeOH),观察了它对小鼠肉瘤S-180细胞生长的抑制效应。在体外琼脂培养中,当FLS-MeOH浓度达到300μg/ml时,可完全抑制S-180细胞的集落形成;给荷瘤小鼠每日注射FLS-MeOH8mg/g体重,共20d,可明显延长小鼠的存活时间,部分小鼠可以无病存活。这些结果说明FLSMeOH在体内外均有明显的抗肿瘤活性,而且具有分子量小、无组织和种系特异性,以及对肿瘤细胞不可逆的毒性作用等特性。

胎脑低分子抑瘤物对白血病细胞作用的研究

目的 :探讨人胎脑低分子肿瘤抑制物对白血病细胞的作用机制及其细胞内游离Ca2 +浓度 ([Ca2 +]i)的变化。方法 :通过超滤技术分段提取胎脑低分子抑瘤物 ,采用光镜、相差显微镜和流式细胞仪检测凋亡 ,Fura 2荧光负荷技术测 [Ca2 +]i。结果 :胎脑低分子抑瘤物可明显抑制K 5 6 2白血病细胞的增殖 ,作用 4h后可出现典型的凋亡改变。白血病细胞凋亡过程中 ,胞内 [Ca2 +]i明显升高。结论 :胎脑低分子抑瘤物可能是通过诱导白血病细胞凋亡而抑制其增殖 ,在白血病细胞凋亡过程中 [Ca2 +]i升高。

苦参联合胎肝低分子抑瘤物抗白血病及其机制

目的 :探讨苦参 (SF)、胎肝低分子抑瘤物 (LMW NTS)联合用药对正常人骨髓粒 巨噬系造血祖细胞(CFU GM )和急性髓性白血病细胞的影响及其作用机制。方法 :采用CFU GM集落培养、细胞液体培养、Wrigh giemsa染色、3H TdR掺入实验、DNA片段凝胶电泳和RT PCR等方法 ,观察SF和LMW NTS联用对白血病的作用。结果 :SF和LMW NTS联用 ,明显提高抑制白血病细胞增殖的能力 ,促进白血病细胞的凋亡 ,诱导白血病细胞中原癌基因c Myc的下调 ,抑制正常造血祖细胞CFU GM的作用明显低于抑制白血病细胞的作用。结论 :联合用药抗白血病的效果 。

人胎肝抑瘤物体外净化自体骨髓治疗急性白血病13例报告

用人类胎肝低分子天然抑瘤物（ＬＭＷ－ＮＴＳ）对１３例缓解期（ＣＲ）急性白血病休外净化后自体骨髓移植（ＡＢＭＴ），其中ＡＬＬ４例（ＣＲ１３例，ＣＲ２１例），ＡＮＬＬ９例（ＣＲ１７例，ＣＲ２２例）。１２例获造血重建，１例因霉菌败血症早期死亡。移植后持续缓解８例，缓解时间＞１２个月７例，＞６个月１例。４例移植后３月～６月复发。木文对该净化方法及ＡＢＭＴ近期疗效进行讨论。

犊牛脾脏低分子提取物抗肿瘤作用研究

[目的]研究犊牛脾脏提取物的体内抗肿瘤活性。[方法]采用超滤和离心技术制备脾脏提取物,选取移植型S180荷瘤小鼠为动物模型,腹腔注射脾提取物,观察小鼠存活时间,并计算抑瘤率。[结果]脾脏提取物显著增加S180荷瘤小鼠的存活率,并抑制肿瘤的生长,治疗第15天,最高抑瘤率达到61%。[结论]脾脏提取物是一种分子量小且安全有效的抗肿瘤活性物质。

新生牛肝抑瘤物对小鼠白血病预防效应的研究

新生牛肝脏中存在着一类低分子量的肿瘤抑制物,它对体外培养条件下的白血病细胞具有显著的选择性抑制作用,而对正常造血祖细胞(CFU-GM)的影响较轻。L801是小鼠粒系白血病细胞,可以诱发LACA小鼠发生白血病,作者利用L801白血病小鼠模型,观察了低分子抑瘤物(BLS)在体内对白血病发生的预防效应。对照组小鼠15d内均死于白血病,而实验组中有50％以上的小鼠能存活至100d,活杀后病理解剖未见白血病病变。实验巾还观察到BLS与环磷酰胺(CY)联合给药后,小鼠的存活率由50％提高到66％,其机理尚待研究。

低分子天然抑瘤物体外培养净化自体骨髓移植治疗急性白血病

用低分子天然抑瘤物体外培养净化自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）治疗急性白血病２６例，其中急性髓细胞白血病２１例，急性淋巴细胞白血病５例。移植时中位年龄２７．５岁。２６例中２４例为ＣＲ１，２例分别为ＣＲ２和ＣＲ３。移植后未用抗白血病药物治疗，中位无病生存期２０个月，预期５ａ无病生存率为５３．３％，复发率为３９．４％，移植相关死亡率为７．６％。

人胚胎脑组织中低分子肿瘤抑制物的实验研究

人胚胎脑组织提取液可以抑制人白血病细胞系的生长。分析表明:肿瘤抑制活性主要分布在小于10kDa组分,经Sephadex-G25凝胶过滤可初步分离为单一组分。这种低分子肿瘤抑制物具有广谱的抗肿瘤效应,在体外可以抑制人白血病、肝癌、胃癌细胞系和小鼠粒、单核和淋巴系白血病细胞,但对人骨髓CFU-GM和小鼠骨髓CFU-GM的抑制作用较弱,说明人胎脑低分子肿瘤抑制物对肿瘤细胞具有一定的选择性抑制作用。

新生牛肝中低分子抑瘤物体内抑瘤作用的研究

采用离子交换柱分离分子量小于1.0 kD的新生牛肝提取液,得到9份样品.在体外抑制肿瘤细胞增殖的基础上,选用体外抑瘤明显的离子交换柱层析获得的〈5〉组分进行体内对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长抑制实验.并从白细胞数、胸腺指数和脾指数三个角度分析了低分子抑瘤物对荷瘤小鼠免疫功能的影响;同时用斑点印记法,比较荷瘤前后重要脏器和肉瘤细胞内p27/k ip1细胞周期调控蛋白表达水平的变化.实验结果表明低分子新生牛肝提取液和经离子交换柱层析分离得到的〈5〉组分对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长有明显的抑制作用,实验同时发现来源于新生牛肝中的低分子抑瘤物,可通过增强荷瘤小鼠的免疫力,升高肉瘤细胞中的p27/k ip1蛋白表达水平的方式抑制肉瘤细胞的增殖,阻碍瘤细胞向正常组织的浸润和转移.

免疫组化CK7、CAM5.2、CEA、P63及AB/PAS在宫颈癌分型中的应用及相关性

目的观察免疫组化细胞角蛋白7(CK7)、低分子质量细胞角蛋白(CAM5.2)、癌胚抗原(CEA)、抑癌基因P63及阿利新蓝-过碘酸雪夫氏(AB/PAS)在宫颈癌分型中的应用及相关性。方法选取2014年1月~2016年10月本院收治的宫颈癌患者60例,患者行手术治疗获取宫颈癌组织,采用免疫组织化学法检测组织中CK7、CAM5.2、CEA、P63表达水平,对获取组织行AB/PAS特殊染色。结果 60例中鳞癌50例,腺鳞癌4例,腺癌6例。中、高分化鳞癌存在明显的分化现象;60例宫颈癌患者免疫组织中腺癌6例,腺鳞癌4例,低分化鳞癌35例,中分化鳞癌13例,高分化鳞癌2例。CK7阳性率为46.67%,P63阳性率为83.33%,CAM5.2阳性率为68.33%,CEA阳性率为100.0%;60例患者中,AB/PAS染色在腺癌中发生率为83.33%(50/60),腺鳞癌发生率为6.67%(4/60),低分化鳞癌发生率为8.33%(5/60),中分化鳞癌和高分化鳞癌发生率均为0。结论宫颈癌不同分型中CK7、CAM5.2、CEA、P63表达水平存在差异,联合AB/PAS染色在宫颈癌鉴别中有一定鉴别作用。