紫花牡荆素对肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨紫花牡荆素对肺癌A549细胞（简称肺癌细胞）增殖及凋亡的影响,为其用于临床治疗肺癌提供依据。方法取对数生长期的肺癌细胞,分别加入终浓度为0.1、0.5、1、5、10、25、50、100μmol/L紫花牡荆素溶液,分别作用24、48 h,采用SRB法检测增殖抑制率,计算50%抑制浓度（IC50）。取对数生长期的肺癌细胞,分别加入最终浓度为0、5、15μmol/L紫花牡荆素溶液,Hoechst33258染色后共聚焦显微镜下观察细胞凋亡形态;采用流式细胞术检测细胞周期时相分布。结果随紫花牡荆素浓度升高,作用24、48 h的肺癌细胞增殖抑制率均呈上升趋势。经0.5～100μmol/L紫花牡荆素作用48 h的肺癌细胞增殖抑制率均明显高于同一浓度作用24 h的肺癌细胞（P均〈0.05）。紫花牡荆素作用24、48 h时的IC50分别为14.74、8.16μmol/L。随紫花牡荆素浓度升高,作用24 h的肺癌细胞核染色质固缩偏向一边、核裂解和细胞碎片等细胞凋亡形态学改变越来越明显;与同浓度紫花牡荆素作用24 h比较,作用48 h的肺癌细胞凋亡形态学改变更明显。经0、5、15μmol/L紫花牡荆素作用24、48 h的肺癌细胞凋亡率均逐渐升高,处于G1、S期的比例均逐渐降低,处于G2/M期的比例均逐渐升高（P均〈0.05）。与同一浓度紫花牡荆素作用24 h的肺癌细胞比较,经5、15μmol/L紫花牡荆素作用48 h的肺癌细胞凋亡率均升高,处于G1、S期的比例均降低,处于G2/M期的比例均升高（P均〈0.05）。结论紫花牡荆素可将肺癌细胞阻滞于G2/M期,具有增殖抑制作用和凋亡促进作用,并呈时间、浓度依赖性。

鸦胆子苦醇抑制人非小细胞肺癌A549细胞转移的机制

目的探讨鸦胆子苦醇对人非小细胞肺癌A549细胞转移能力的抑制作用及其机制。方法采用Reed-Muench法计算鸦胆子苦醇对A549细胞的半数致死浓度(LC50);通过CCK-8测定细胞活力绘制增殖曲线和流式细胞周期测定鸦胆子苦醇对A549细胞增殖能力的影响;采用Transwell法检测鸦胆子苦醇对A549细胞株转移的抑制情况,以及在半数致死浓度的鸦胆子苦醇浓度下不同时间对细胞转移的抑制率;应用Western印迹法检测细胞转移相关蛋白的表达情况。结果非小细胞肺癌A549细胞的增殖能力在鸦胆子苦醇处理后基本没有变化;鸦胆子苦醇处理后A549细胞的转移能力与对照组相比明显下降,且在一定作用时间范围内有时间依赖性;肿瘤转移相关蛋白(BRF)2、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)、CD151的表达水平在鸦胆子苦醇处理后的细胞中明显下调。结论鸦胆子苦醇是潜在的抗非小细胞肺癌的药物,有必要进一步阐明其抗非小细胞肺癌的分子机制,为临床治疗提供一定的指导意义。

羟基喜树碱抑制肺癌A549细胞的体外增殖并下调Bcl-2基因的表达

目的研究羟基喜树碱对肺癌A549细胞生长抑制、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法羟基喜树碱处理A549细胞后用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色观察细胞形态学变化,琼脂糖凝胶检测DNA片段化,用流式细胞仪测定其对细胞周期影响。利用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2的表达变化。结果 A549细胞经羟基喜树碱作用,提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带。经AO/EB染色,荧光显微镜下观察到早期凋亡细胞细胞核被染成绿色,呈碎片状,晚期凋亡细胞核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状,细胞周期S期由20%升高到60%。经1μmol/L羟基喜树碱处理24 h后,流式细胞术显示A549细胞的凋亡率为18.11%,明显高于对照组细胞凋亡率(0.09%,P<0.05)。经羟基喜树碱作用后,A549细胞Bcl-2基因表达下调70%(P<0.05)。结论羟基喜树碱可以明显抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡,并下调Bcl-2基因表达,提示Bcl-2下调参与了羟基喜树碱对A549细胞的抑制作用。

肺岩宁方对A549裸鼠移植瘤VEGF与HIF-1α表达的影响

目的观察肺岩宁方对A549裸鼠移植瘤的抑制作用及对VEGF、HIF-1α表达的影响。方法将A549荷瘤鼠随机分为4组:模型组、化疗组、肺岩宁方组和综合治疗组,化疗组和综合治疗组DDP0.1mg腹腔注射3d,肺岩宁方组和综合治疗组中药灌胃21d。观察抑瘤率,RT-PCR和免疫组化法检测移植瘤VEGF和HIF-1α表达。结果肺岩宁方组抑瘤率为34.17%,低于模型组(P<0.05);RT-PCR结果显示,综合治疗组、肺岩宁方组和化疗组的VEGF mRNA的表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);综合治疗组HIF-1α mRNA的表达水平低于模型组(P<0.05),其余各组无显著差异。VEGF、HIF-1α光密度指数化疗组、肺岩宁方组和综合治疗组均明显低于模型组(P<0.01)。结论益气养精法为主的肺岩宁方有一定的抑制肺癌生长的作用,且与顺铂有协同作用,肺岩宁方可能通过对HIF-1α的抑制,达到对VEGF的表达调控,从而抑制血管生成,控制肿瘤生长。

miR-663通过靶向TGFB1对肺癌细胞A549增殖的调控

目的利用双荧光蛋白报告基因分析系统,验证miR-663的直接靶基因TGFB1,探讨miR-663促进肺癌细胞A549增殖的可能机制。方法实时定量RT-PCR检测10对肺癌组织和正常肺组织中miR-663的表达水平;利用细胞计数和集落形成实验来验证细胞转染miR-663 ASO后的A549细胞增殖。选取表达绿色荧光蛋白的质粒pcDNA3/EGFP,将TGFB1 3′UTR的一段特异性序列插入该质粒中,并与miR-663及表达红色荧光蛋白质pDsRed2-N1共同转染肺癌细胞系A549,转染后细胞提取的蛋白样品,荧光分光光度计进行定性和定量检测。结果 miR-663在肺癌组织中的表达高于在正常肺组织中的表达;miR-663表达明显促进了细胞A549的增殖;共转miR-663和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR质粒后,绿色荧光蛋白的表达量明显低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR共转组。结论 miR-663可能通过靶定靶基因TGFB1,促进了肺癌细胞A549的增殖。

Survivin和Bcl-2调节槲皮素诱导的A549细胞凋亡

目的研究槲皮素诱导肺腺癌细胞A549凋亡,探讨survivin和Bcl-2在槲皮素诱导A549细胞凋亡中的调节作用。方法分别采用MTT法、荧光染色、流式细胞仪和免疫细胞化学观察了槲皮素对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡、细胞周期和蛋白表达的影响。结果槲皮素抑制肺腺癌A549细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,槲皮素能使肺腺癌A549细胞周期阻滞于G0/G1期,且A549细胞survivin和Bcl-2蛋白表达同时下降,而caspase-3活性升高。结论槲皮素能诱导A549细胞凋亡,其机制可能是使肺腺癌A549细胞周期阻滞于G0/G1期,并同时下调survivin和Bcl-2蛋白的表达,直接激活caspase-3而诱导A549细胞凋亡。

南方红豆杉水提物联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究南方红豆杉水提物联合顺铂对肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法:将A549细胞分为不同浓度顺铂组、不同浓度南方红豆杉水提物组及空白组,用CCK-8法检测药物作用48 h后对细胞存活率的影响。根据上述结果,再将A549细胞分为低浓度顺铂联合不同浓度南方红豆杉水提物组、低浓度顺铂组、空白对照组,用CCK-8法检测药物作用48 h后对细胞存活率的影响,用RT-PCR检测细胞内Bcl-2、Bax、Survivin基因表达变化。结果:南方红豆杉水提物可增加顺铂对A549细胞的抑制作用,且随着药物浓度的增加,其抑制作用逐步增强;顺铂联和红豆杉通过下调Bcl-2,Survivin,并上调Bax的表达,而促进细胞发生凋亡,具有抗肿瘤作用。结论:南方红豆杉水提物联合顺铂能抑制A549细胞生长,其机制可能为凋亡相关基因Bcl-2,Survivin的降低,促凋亡基因Bax的增高有关。

青藤碱对肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的:研究青藤碱对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法:以不同浓度青藤碱分别处理体外培养的A549细胞,采用MTT法检测24h、48h、72h后A549细胞的增殖状态,流式细胞仪测定细胞凋亡;细胞免疫组化检测Cox-2蛋白表达量。结果:以0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、2.5、5.0、10.0mmol/L青藤碱作用于A549细胞后,细胞增殖明显受到抑制,呈时间和剂量依赖性。青藤碱处理组细胞早期凋亡率较对照组升高,呈时间和剂量依赖性;Cox-2蛋白表达明显抑制。结论:青藤碱在体外能有效抑制肺癌细胞增殖。

奥沙利铂对A549肺腺癌细胞系生长抑制作用和细胞凋亡的实验研究

目的 观察奥沙利铂对肺腺癌细胞系A5 4 9的药物敏感性和诱导细胞凋亡作用。方法 将不同浓度的奥沙利铂与A5 4 9作用 2 4、36、4 8h ,用MTT法计算细胞生长抑制率 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 奥沙利铂对A5 4 9的细胞生长抑制率随作用浓度和作用时间的增加而增大。 12 .5、2 5、5 0、10 0 μg/ml奥沙利铂对A5 4 9作用 2 4h ,细胞凋亡率分别为 35 %、13.6 %、2 .6 %、1.4 %。结论 奥沙利铂对A5 4 9细胞有生长抑制作用 ,呈剂量依赖性和时间依赖性 ;能引起细胞凋亡 ,细胞凋亡率呈剂量依赖性 ,与细胞生长抑制率呈正相关关系 (P <0 .0 1)。

加味当归补血汤含药血清对人肺癌细胞株A549增殖的影响

目的:探讨加味当归补血汤荷瘤鼠含药血清对人肺癌细胞A549增殖的影响。方法:应用加味当归补血汤灌胃荷瘤Wistar大鼠,10日后采集含药血清体外培养A549,MTT测细胞活性,流式细胞法测细胞周期、调亡。结果:加味当归补血汤荷瘤鼠含药血清能够显著抑制A549细胞增殖,且呈剂量时间依赖性,可阻滞A549细胞的细胞周期,使G2/M期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导A549细胞的凋亡。结论:加味当归补血汤含药血清体外具有抑制A549细胞生长,其抑制作用可能是通过使细胞周期抑制于G2/M期和诱导细胞凋亡而实现。

GPI-PLD过表达对肺癌细胞株A549生物学特征的影响

目的研究糖基化磷脂酰肌醇特异性磷酯酶D(GPI-PLD)基因转染并过度表达对肺癌细胞株A549生物学特征的影响。方法用脂质体转染法将GPI-PLD真核表达载体pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转入A549细胞,以未转染的A549细胞及转染空载体pcDNA3.1(+)的细胞为对照,筛选出阳性细胞克隆。以胎盘碱性磷酸酶(PLAP)为底物,定量检测GPI-PLD活性,RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平,细胞计数绘制生长曲线,锥虫蓝排斥法观察补体介导的细胞毒(CDC)杀伤率,分光光度法测定PLAP活性,ELISA检测癌胚抗原(CEA)的表达情况。结果阳性细胞克隆GPI-PLD酶活性水平比对照组升高约3倍,GPI-PLD mRNA表达水平显著增加;GPI-PLD基因过度表达可促进GPI锚定的蛋白质如CEA和PLAP等被大量水解释放入培养液,导致细胞增殖能力减弱,对补体杀伤的敏感性增强。结论成功将GPI-PLD基因转染入A549细胞,并在细胞中稳定表达。GPI-PLD过表达能抑制肿瘤细胞增殖,增强肿瘤细胞对补体杀伤的敏感性。

蛋白酶激活受体激活对A549细胞IL-28和IL-29 mRNA表达的影响

目的用蛋白酶和蛋白酶激活受体激动肽(PAR-AP)刺激A549细胞后检测细胞中白细胞介素IL-28和IL-29 mRNA表达情况以分析蛋白酶激活受体激活对人肺上皮细胞IL-28和IL-29基因表达的影响。方法用最佳工作浓度的凝血酶、胰蛋白酶、类胰蛋白酶及蛋白酶激活受体-1,2,3,4的激动肽刺激A549细胞后,分别在第2、8、16h收集细胞,用实时定量逆转录聚合酶链式反应(q-RT-PCR)方法分析A549细胞内IL-28和IL-29 mRNA表达。结果凝血酶作用A549后,细胞内IL-29 mRNA表达增强,高达对照组9.6倍;而细胞内IL-28 mRNA表达无明显变化。胰蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强,分别为对照组6.1倍和4.4倍。类胰蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强分别高达对照组的3.1倍和2.1倍。弹性蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29 mRNA表达增强高达对照组5.1倍而IL-28 mR-NA无明显变化。PAR-1AP(SFLLR)作用后,A549细胞内IL-29 mRNA表达增强为对照组1.7倍而IL-28 mRNA表达无明显变化。PAR-2AP(SLIGKV及tc-LIGRLO)作用后,A549细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强分别为对照组4.9倍和2.4倍。PAR-3AP(TFRGAP)作用后,A549细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达无明显变化。PAR-4AP(GYPGQV)作用后A549细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强高达对照组4.1倍和5.5倍。结论 A549细胞蛋白酶激活受体的激活可以上调细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达。

丹参酮ⅡA诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)抗人肺腺癌A549作用及其可能作用机制。方法通过细胞形态学和MTT法观察TanⅡA对A549细胞增殖的影响;应用Hoechest33258和PI双染法观察细胞凋亡;采用荧光分光光度计检测细胞内钙及线粒体膜电位;RT-PCR检测Bad和MT-1A mRNA的表达。结果 TanⅡA能抑制A549细胞增殖,且随TanⅡA剂量的增加和作用时间的延长而增强,TanⅡA作用A549细胞24、48和72h的IC50分别为117.85、14.87和6.89μmol·L-1。TanⅡA作用A549细胞24h后,A549细胞出现染色质聚集等典型的凋亡形态学改变,且随TanⅡA剂量的增加,A549细胞凋亡百分率逐渐增大。TanⅡA作用后,A549细胞的细胞内钙升高、线粒体膜电位降低、Bad mRNA表达增加、MT-1A mRNA表达下调。结论 TanⅡA具有抗A549作用,其诱导细胞凋亡可能与钙依赖性通路和MT-1A表达下调有关。

透明质酸诱导人肺腺癌A549细胞表达血管内皮生长因子-C

目的:研究透明质酸(HA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞表达血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的影响。方法:体外培养的A549细胞被随机分为三组,对照组:无血清培养基(FSM)培养;HA 10μg/ml组和HA 20μg/ml组:分别用HA 10μg/ml和20μg/ml的FSM培养,48h后,分别用RT-PCR、Western blot和免疫荧光方法检测A549细胞VEGF-C mRNA和蛋白表达。结果:对照组VEGF-C mRNA和蛋白表达为弱阳性;HA 10μg/ml和HA 20μg/m组lVEGF-C mRNA和蛋白表达皆呈强阳性。HA 20μg/ml组与HA 10μg/ml组相比,VEGF-C mRNA和蛋白表达皆显著增加(P<0.01)。结论:HA能呈剂量依赖性地诱导A549细胞表达VEGF-C。

肺腺癌A549细胞抗失巢凋亡相关基因的确认及C8orf4基因的表达

目的:比较抗失巢凋亡及正常贴壁生长肺腺癌A549细胞基因组表达差异,从中筛选肺癌抗失巢凋亡相关基因,并探讨C8orf4基因的高表达及其对失巢凋亡的正性调剂作用意义。方法:建立抗失巢凋亡肺癌A549细胞系;用基因芯片技术检测其与正常贴壁生长A549细胞的差异基因,利用NCBI Pubmed数据库筛选出肺癌细胞抗失巢凋亡相关的基因,找出差异表达倍数最大的基因,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术及蛋白质印迹技术测定其表达。结果:共检测到表达差异的基因745个,筛选出63个与肺癌细胞抗失巢凋亡相关的基因,C8orf4基因差异表达倍数最大,在脱落培养A549细胞中C8orF4基因及其编码蛋白表达明显高于贴壁培养A549细胞,P<0.02。结论:基因芯片技术为筛选肺癌抗失巢凋亡相关基因提供了有效方法,C8ORF4基因可能参与调控肺癌细胞抗失巢凋亡过程。

TGFB1抑制A549细胞增殖的分子机制研究

①目的构建并鉴定TGFB1真核表达载体pcDNA3.1/TGFB1,探讨TGFB1抑制A549细胞增殖的可能机制。②方法采用基因重组技术将TGFB1 CDS插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建TGFB1真核表达质粒。脂质体介导转染肺癌细胞A549,分为正常对照、空质粒及转染组。MTT和集落形成实验检测各组细胞活性和细胞增殖能力。Real-time-PCR及Western blot方法检测各组中TG-FB1、p53、Bax和Fas的mRNA和蛋白的表达水平。③结果酶切和测序结果证实TGFB1真核表达质粒构建成功。MTT和集落形成实验结果显示pcDNA3.1/TGFB1转染组、细胞活性和细胞增殖能力明显降低(P<0.01)。pcDNA3.1/TGFB1转染组与正常对照组、空质粒组比较:TGFB1、p53、Bax和Fas mRNA表达显著增加(P<0.01);TGFB1、p53、Bax和Fas蛋白的表达水平显著增加(P<0.01)。④结论TGFB1可能通过上调p53、Bax和Fas蛋白的表达抑制肺癌细胞A549的增殖。TGFB1有可能成为肿瘤生物治疗的靶点。

芬维A胺和硼替佐米联用调节内质网应激蛋白促进肺癌A549细胞凋亡

目的探讨芬维A胺[fenretinide,N-(4-hydroxyphenyl)retinamide(4-HPR),一种人工合成的维甲酸]与硼替佐米联合应用对非小细胞肺癌A549细胞的促凋亡作用。方法将非小细胞肺癌细胞株A549用不同浓度的4-HPR(2.5、5、10、20μmol/L)和硼替佐米(0.1、0.2、0.4、0.8μmol/L)单独或联合处理24h。应用MTT法检测4-HPR和硼替佐米单独或联合处理对细胞的生长抑制作用;碘化丙啶(PI)染色和流式细胞术检测细胞周期;AnnexinⅤ-FITC和PI双染检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测内质网应激相关凋亡蛋白CHOP的表达。结果 4-HPR和硼替佐米单独处理肺癌细胞株A549能够以剂量依赖性方式抑制细胞增殖,两药联用后抗增殖作用明显增强。细胞周期检测显示两药联用能导致细胞停滞于G0/G1期,S期细胞显著减少。与两药单独使用相比,4-HPR和硼替佐米联用能显著增强A549细胞凋亡,伴随内质网应激蛋白CHOP的mRNA和蛋白表达增强。结论 4-HPR和硼替佐米联用能促进肺癌A549细胞的凋亡,为药物联合治疗肺癌提供了实验基础。

PEI/ASON纳米组装体对肺腺癌A549细胞增殖活性及其hTERT基因表达的影响

目的以聚乙烯亚胺多聚阳离子纳米载体(polyethylenimine,PEI)作为端粒酶逆转录酶(human telomerasereverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的增殖活性及hTERT mRNA表达的影响。方法采用MTT法检测PEI/ASODN纳米组装体对细胞的增殖作用情况;激光共聚焦显微镜检测5'-FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后PEI/FASODN纳米组装体的细胞摄入情况;RT-PCR检测转染后hTERT mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测端粒酶hTERT蛋白的表达;流式细胞术Annexin-V-FITC和PI双标法检测细胞凋亡情况;PEI/ASON-PEG-CNGR组装体动物体内分布实验观察NGR的肿瘤靶向作用。结果 PEI/ASODN纳米组装体转染细胞后产生良好的生长抑制作用;FASODN转染细胞后,PEI/FASODN组细胞内有大量荧光物质,而单纯FASODN组细胞内无明显荧光;RT-PCR检测结果表明PEI/ASODN纳米组装体作用于A549细胞72 h时,hTERTmRNA水平明显降低,与空白对照组相比有显著差异(P<0.05);细胞hTERT蛋白的表达也显著降低;转染72 h后PEI/ASODN组出现明显早期凋亡和晚期凋亡,凋亡率分别为36.53%和54.28%;动物体内分布实验表明PEI/ASON-PEG-CNGR具有良好的肿瘤靶向作用。结论 PEI介导的hTERT ASODN能有效抑制A549细胞增殖,降低hTERT mRNA水平从而抑制hTERT蛋白的表达,使细胞产生凋亡,对该细胞生长有明显抑制作用。

呫吨酮并吡啶衍生物XP-16诱导人肺癌A549细胞凋亡

目的探讨呫吨酮并吡啶衍生物5,9-二(2-吡咯烷基乙酰氨基)-7H-吡啶并[4,3-c]呫吨-7-酮(XP-16)对人肺癌A549细胞的抗肿瘤作用及其可能作用机制。方法通过MTT法、细胞形态学和克隆实验观察XP-16对A549细胞增殖的影响;应用Hoechst 33258和PI双染法观察细胞凋亡;荧光分光光度计检测细胞内钙([Ca2+]i)及线粒体膜电位;qRT-PCR检测Bad和金属硫蛋白1A(metallothionein 1A,MT-1A)mRNA表达。结果 XP-16能抑制A549细胞增殖,呈剂量和时间依赖性。XP-16作用A549细胞24 h后,A549细胞出现染色质聚集、核碎裂等典型的凋亡形态学改变;随XP-16剂量的增加,A549细胞凋亡百分率逐渐增大。XP-16作用后,A549细胞的[Ca2+]i和线粒体膜电位降低、Bad和MT-1A mRNA的表达增加。结论 XP-16具有诱导A549细胞凋亡的作用,可能与其降低[Ca2+]i和线粒体膜电位有关。MT-1A表达的上调可能是[Ca2+]i降低的结果。

PKCα siRNAs有效序列的筛选及其对肺癌A549细胞的作用

目的探讨人蛋白激酶Cα(PKCα)小干扰RNA(siRNA)对肺癌A549细胞生长增殖及凋亡的影响。方法设计并化学合成6条PKCα siRNAs,转染A549细胞,通过改良MTT法及RT-PCR筛选;对3条效果较好的PKCα siRNAs,进一步采用克隆形成抑制实验、Hoechst 33258染色、PI单染和AnnexinⅤ/PI双染以及Western blot检测。结果6条PKCα siRNAs均显著下调了PKCα mRNA水平;除No.5siRNA外,其他5条siRNA均显著地抑制了A549细胞增殖(P<0.05)。3条效果较好的PKCα siRNAs转染组PKCα蛋白的表达显著下调,克隆形成抑制率、亚二倍体百分率和早期凋亡细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),并出现了核固缩、边聚和裂解等凋亡形态学变化。结论本实验发现3条能显著抑制A549细胞增殖并诱导其凋亡的PKCα siRNAs。