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发光酶基因luxAB标记硅酸盐细菌NBT菌株的研究 被引量:8
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作者 何琳燕 黄为一 《应用生态学报》 CAS CSCD 2004年第7期1241-1244,共4页
外源基因标记技术为研究土壤引入细菌的生态行为提供了有效的检测手段 .通过选择不同的碳源和降低碳氮比筛选获得 0 2 5 %麦芽糖作为碳源的菌体制备培养基 .对硅酸盐细菌BT菌株进行紫外诱变和抗生素抗性驯化获得一株抗利福平 2 0 0 μg... 外源基因标记技术为研究土壤引入细菌的生态行为提供了有效的检测手段 .通过选择不同的碳源和降低碳氮比筛选获得 0 2 5 %麦芽糖作为碳源的菌体制备培养基 .对硅酸盐细菌BT菌株进行紫外诱变和抗生素抗性驯化获得一株抗利福平 2 0 0 μg·ml-1的NBT R2 0 0菌株 ,含发光酶基因luxAB的质粒pTR10 2∷luxAB在辅助质粒 pRK2 0 13的帮助下转入该菌株中 ,从而赋予NBT菌株以发光活性和利福平、卡那霉素、四环素三种抗生素抗性 .以对数生长期的菌体制备受体细胞 ,发现对数生长前期的细胞转移频率最高 ,可达 6 70× 10 -5,杂交比例以 1∶1∶1适宜 .标记菌株RL85的释钾能力没有丧失且有提高 ,发光特性稳定 ,连续转接 2 0次后仍具有发光活性和 3种抗生素抗性 ,适用于根际微生态学研究 . 展开更多
关键词 硅酸盐细菌 发光酶基因 标记
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Survival of Pseudomonas fluorescence X16(luxAB)Strain in Soils Accumulated with Mixed Rare Earth Elements 被引量:4
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作者 唐欣昀 孙亦阳 +2 位作者 温崇庆 甘旭华 张自立 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2004年第6期904-908,共5页
Rare earth elements(REE)are applied as micro-fertilizer in large scale in China and there is growing concern about the environmental effects of REE accumulation in soils. Accumulation of REE was simulated in lab by ad... Rare earth elements(REE)are applied as micro-fertilizer in large scale in China and there is growing concern about the environmental effects of REE accumulation in soils. Accumulation of REE was simulated in lab by adding REE to three soils and the survival of Pseudomonas fluorescence X16 strain marked with luxAB gene in soils was detected. Curvilinear regression method was applied to analyze the survival pattern. The stimulation values, EC_(50) and NOEC values for X16 strain were calculated to compare the toxic intensity of REE in different soils. The stimulation(peak)values in red soil, yellow fluovo-aquic soil and yellow cinnamon soil, are 11.55~18.08,(0~2.13), 2.37~4.62 mg·kg^(-1) , respectively. EC_(50) values are 13.47~39.12, 6.59~56.18, 372~1034 (mg·kg^(-1)), respectively.NOEC values are 5.62 ~21.41, 0.00~4.53, 133.3~327.1 mg·kg^(-1), respectively. Tangents values of regression equation of the survival of X16 strain in red soil are the maximum ones indicating that REE accumulation in red soil has stronger inhibitory effects than in other two soils. The soil order, reflecting toxic intensity of REE is as follows: red soil>yellow fluovic-aquic soil>yellow cinnamon soil. 展开更多
关键词 Pedotogy simulated accumulation Pseudomonas fluorescence lux gene marker ecotoxicity evaluation rare earths
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小麦根圈荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的发光酶基因标记 被引量:8
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作者 王平 胡正嘉 李阜棣 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期220-225,共6页
采用2亲本杂交的方法将Tn5-luxAB标记基因系统成功地转入了分离自小麦根圈的PGPR菌株荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)Xl6菌株中。与亲本菌株相比,携有发光酶基因luxAB的标记菌株... 采用2亲本杂交的方法将Tn5-luxAB标记基因系统成功地转入了分离自小麦根圈的PGPR菌株荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)Xl6菌株中。与亲本菌株相比,携有发光酶基因luxAB的标记菌株Xl6L2生理生化特征的变化很小,而且仍保留有在小麦根圈的定殖能力。Tn5-luxAB片段在Xl6L2中的稳定性很强,在没有卡那霉素选择压力的情况下,luxAB也能稳定表达。即使在40℃温度下。 展开更多
关键词 荧光假单胞菌 PGPR 发光酶基因标记 小麦
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发光酶标记基因在微生物分子生态学研究中的应用 被引量:13
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作者 王平 胡正嘉 李阜棣 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期26-34,共9页
1 前言随着分子生物学向微生物生态学的渗透,微生物生态学的研究内容和水平正不断深化和提高,一门新的分支学科——微生物分子生态学也已日趋成熟[1]。对释放至环境中的遗传改良微生物(genetically modified microorganisms,简称GMMs)... 1 前言随着分子生物学向微生物生态学的渗透,微生物生态学的研究内容和水平正不断深化和提高,一门新的分支学科——微生物分子生态学也已日趋成熟[1]。对释放至环境中的遗传改良微生物(genetically modified microorganisms,简称GMMs)进行风险评估(risk assessment)、测量引入细菌在植物根部、叶面的定殖动态、容量或土壤中的群体数量则是微生物分子生态学的主要研究内容之一。但是,由于大多数细菌并不具有足以与同类土著细菌区分的特征而无法做到特异性的检测与回收。因此,通过遗传重组将外源基因(标记基因,marker gene)导入供试菌株,从而在检测或回收释放至土壤中的该种菌株时可以将其与同类土著细菌分开的方法(亦即标记基因技术) 展开更多
关键词 微生物 分子生态学 发光酶标记基因
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用Tn5标记带发光酶基因的华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakui)7653R质粒 被引量:2
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作者 郭先武 张忠明 +3 位作者 胡福荣 莫才清 李阜棣 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期147-150,共4页
在pRK2073的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Tn5(sacB-luxAB)插入华癸根瘤菌7653R菌株基因组中。将3200个Tn5标记菌株影印到含有8%蔗糖的YMA平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性。... 在pRK2073的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Tn5(sacB-luxAB)插入华癸根瘤菌7653R菌株基因组中。将3200个Tn5标记菌株影印到含有8%蔗糖的YMA平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性。共获得8个菌株,其选择标记消失。质粒检测发现其共生质粒有不同程度的缺失甚至消除。结瘤实验证明,所有共生质粒部分缺失(有的缺失达1/3)的菌株依然结瘤。经用luxAB探针的分子杂交证实,8个菌株中有3个对应的标记菌株其Tn5插在共生质粒上。 展开更多
关键词 华癸根瘤菌 共生质粒 分子标记 发光酶基因
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华癸根瘤菌在非豆科植物根圈定殖能力的研究 被引量:22
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作者 王平 王勤 冯新梅 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期238-241,共4页
本文首次报道了华癸根瘤菌在水稻、小麦、油菜和棉花4种非豆科作物根圈的定殖能力。分别通过盆栽试验并采用外源标记基因(luxAB和gusA)特异性检测技术进行检测,研究发现华癸根瘤菌不但可以在这4种非豆科植物根圈定殖,而... 本文首次报道了华癸根瘤菌在水稻、小麦、油菜和棉花4种非豆科作物根圈的定殖能力。分别通过盆栽试验并采用外源标记基因(luxAB和gusA)特异性检测技术进行检测,研究发现华癸根瘤菌不但可以在这4种非豆科植物根圈定殖,而且还能进入根内,其数量可达103个/g以上。接种华癸根瘤菌对油菜和棉花根系的生长有一定影响,并能显著促进水稻的生长,为扩大华癸根瘤菌的应用范围展示了诱人的前景。 展开更多
关键词 华癸根瘤菌 非豆科植物 根圈定殖 土壤 根瘤菌
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