皮肤基底细胞癌及鳞状细胞癌中Cx43、Cx43 mRNA的表达

目的探讨连接蛋白43在皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法对18例皮肤基底细胞癌和20例鳞状细胞癌标本,用免疫组织化学方法(S-P法)检测Cx43,用原位杂交技术检测Cx43mR-NA。利用计算机图像分析系统采集、分析图像,并对数据进行统计学处理。结果Cx43、Cx43mRNA在基底细胞癌中的表达水平均明显高于鳞状细胞癌(P<0.01)。结论Cx43及其mRNA的高表达与基底细胞癌的生物学表现具有相关性。

人肝细胞生长因子mRNA实时荧光PCR定量标准的构建

目的:构建实时荧光定量PCR(FQ-PCR)标准以定量检测人肝细胞生长因子mRNA的表达。方法:采用RT-PCR法利用肝组织提取的总RNA制备肝细胞生长因子cDNA目的片段。与pGEM-T Easy Vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α。联合用直接PCR、α互补和氨苄青霉素筛选法、EcoRⅠ限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性。测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备FQ-PCR梯度浓度参考标准。结果:HGF cDNA目的片段成功制备并获得稳定的重组质粒,保持了目的片段的特异性和序列完整性。结论:成功构建了实时FQ-PCR定量参考标准。