期刊文献+
共找到130篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
Inhibition of Japanese Encephalitis Virus Infection by Flavivirus Recombinant E Protein Domain Ⅲ 被引量:3
1
作者 Jingjing Fan Yi Liu +2 位作者 Xuping Xie Bo Zhang Zhiming Yuan 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2013年第3期152-160,共9页
Japanese encephalitis virus (JEV) is a mosquito-borne flavivirus closely related to the human pathogens including yellow fever virus, dengue virus and West Nile virus. There are currently no effective antiviral therap... Japanese encephalitis virus (JEV) is a mosquito-borne flavivirus closely related to the human pathogens including yellow fever virus, dengue virus and West Nile virus. There are currently no effective antiviral therapies for all of the flavivirus and only a few highly effective vaccines are licensed for human use. In this paper, the E protein domain III (DIII) of six heterologous flaviviruses (DENV1-4, WNV and JEV) was expressed in Escherichia coli successfully. The proteins were purified after a solubilization and refolding procedure, characterized by SDS-PAGE and Western blotting. Competitive inhibition showed that all recombinant flavivirus DIII proteins blocked the entry of JEV into BHK-21 cells. Further studies indicated that antibodies induced by the soluble recombinant flavivirus DIII partially protected mice against lethal JEV challenge. These results demonstrated that recombinant flavivirus DIII proteins could inhibit JEV infection competitively, and immunization with proper folding flavivirus DIII induced cross-protection against JEV infection in mice, implying a possible role of DIII for the cross-protection among flavivirus as well as its use in antigens for immunization in animal models. 展开更多
关键词 Japanese encephalitis virus e protein domain III CROSS-PROTeCTION ANTIBODY
下载PDF
Receptor-binding domain of SARS-Cov spike protein: Soluble expression in E.coli, purification and functional characterization 被引量:2
2
作者 Jing Chen Lin Miao +5 位作者 Jia-Ming Li Yan-Ying Li Qing-Yu Zhu Chang-Lin Zhou Hong-Qing Fang Hui-Peng Chen 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第39期6159-6164,共6页
AIM: To find a soluble and functional recombinant receptor-binding domain of severe acute respiratory syndrome-associated coronavirus (SARS-Cov), and to analyze its receptor binding ability. METHODS: Three fusion ... AIM: To find a soluble and functional recombinant receptor-binding domain of severe acute respiratory syndrome-associated coronavirus (SARS-Cov), and to analyze its receptor binding ability. METHODS: Three fusion tags (glutathione S-transferase, GST; thioredoxin, Trx; maltose-binding protein, MBP), which preferably contributes to increasing solubility and to facilitating the proper folding of heteroprotein, were used to acquire the soluble and functional expression of RBD protein in Escherichia coli (BL21(DE3) and Rosetta-gamiB (DE3) strains). The receptor binding ability of the purified soluble RBD protein was then detected by ELISA and flow cytometry assay. RESULTS: RBD of SARS-Cov spike protein was expressed as inclusion body when fused as TrxA tag form in both BL21 (DE3) and Rosetta-gamiB (DE3) under many different cultures and induction conditions. And there was no visible expression band on SDS-PAGE when RBD was expressed as MBP tagged form. Only GST tagged RBD was soluble expressed in BL21(DE3), and the protein was purified by AKTA Prime Chromatography system. The ELISA data showed that GST.RBD antigen had positive reaction with anti-RBD mouse monoclonal antibody 1A5. Further flow cytometry assay demonstrated the high efficiency of RBD's binding ability to ACE2 (angiotensin-converting enzyme 2) positive Vero E6 cell. And ACE2 was proved as a cellular receptor that meditated an initial-affinity interaction with SARS-Cov spike protein. The geometrical mean of GST and GST.RBD binding to Vero E6 cells were 77.08 and 352.73 respectively. CONCLUSION: In this paper, we get sufficient soluble N terminal GST tagged RBD protein expressed in EcoliBL21 (DE3); data from ELISA and flow cytometry assay demonstrate that the recombinant protein is functional and binding to ACE2 positive Vero E6 cell efficiently. And the recombinant RBD derived from E.coli can be used to developing subunit vaccine to block S protein binding with receptor and to neutralizing SARS-Cov infection. 展开更多
关键词 Receptor-binding domain SARS-COV Spike protein expression e.COLI
下载PDF
Expression of Major Antigen Domains of E2 Gene of CSFV and Analysis of its Immunological Activity 被引量:1
3
作者 Hong TIAN Xiang-tao LIU Jing-yan WU You-jun SHANG Tao JIANG Hai-xue ZHENG Qing-ge XIE 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2008年第4期247-254,共8页
E2 is an envelope glycoprotein of Classical swine fever virus (CSFV) and contains sequential neutralizing epitopes to induce virus-neutralizing antibodies and mount protective immunity in the natural host. In this stu... E2 is an envelope glycoprotein of Classical swine fever virus (CSFV) and contains sequential neutralizing epitopes to induce virus-neutralizing antibodies and mount protective immunity in the natural host. In this study, four antigen domains (ABCD) of the E2 gene was cloned from CSFV Shimen strain into the retroviral vector pBABE puro and expressed in eukaryotic cell (PK15) by an retroviral gene expression system, and the activity of recombinant E2 protein to induce immune responses was evaluated in rabbits. The results indicated that recombinant E2 protein can be recognized by fluorescence antibodies of CSFV and CSFV positive serum (Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou, China) using Western blot, indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) and ELISA, Furthermore, anti-CSFV specific antibodies and lymphocyte proliferation were elicited and increased by recombinant protein after vaccination. In the challenge test, all of rabbits vaccinated with recombinant protein and Chinese vaccine strain (C-strain) were fully protected from a rabbit spleen virus challenge. These results indicated that a retroviral-based epitope-vaccine carrying the major antigen domains of E2 is able to induce high level of epitope-specific antibodies and exhibits similar protective capability with that induced by the C-strain, and encourages further work towards the development of a vaccine against CSFV infection. 展开更多
关键词 Classical swine fever virus (CSFV) e2 gene Antigen domains Retroviral vector Immunologicalactivity
下载PDF
Protein expression and antigenicity detection of hepatitis C virus envelope protein E2
4
《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第S1期331-,共1页
关键词 protein expression and antigenicity detection of hepatitis C virus envelope protein e2
下载PDF
鸭坦布苏病毒E蛋白功能的研究进展
5
作者 赵赛赛 唐熠 刁有祥 《中国家禽》 北大核心 2024年第10期165-172,共8页
鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)病是由DTMUV引起以病毒性脑炎(雏鸭、育成鸭)及产蛋下降(产蛋鸭)为主要特征的传染性疾病,该病的暴发和传播给水禽养殖业造成了巨大的经济损失。包膜蛋白E(Envelope,E)作为DTMUV关键的免疫原性蛋... 鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)病是由DTMUV引起以病毒性脑炎(雏鸭、育成鸭)及产蛋下降(产蛋鸭)为主要特征的传染性疾病,该病的暴发和传播给水禽养殖业造成了巨大的经济损失。包膜蛋白E(Envelope,E)作为DTMUV关键的免疫原性蛋白,在介导病毒与宿主细胞融合、侵入等方面发挥作用。文章总结了近年来DTMUV E蛋白结构特点、关键毒力位点、潜在抗原表位、蛋白互作及生物制品等最新研究进展,以期为鸭坦布苏病毒病的特异性诊断、疫苗研究和抗病毒药物的设计提供参考。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 e蛋白 毒力位点 抗原表位 生物制品
下载PDF
结肠癌患者癌组织ZEB1、血清CCSA-2的表达意义及预后转归的危险因素分析
6
作者 卢晓霞 王静喆 王佩 《临床和实验医学杂志》 2024年第20期2152-2156,共5页
目的探讨结肠癌患者癌组织锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)、血清直肠癌特异性抗原-2(CCSA-2)的表达意义及预后转归的危险因素。方法回顾性选取2020年1月至2022年12月武威市人民医院收治的86例结肠癌患者作为观察组,另选取同期收治的86例结肠良... 目的探讨结肠癌患者癌组织锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)、血清直肠癌特异性抗原-2(CCSA-2)的表达意义及预后转归的危险因素。方法回顾性选取2020年1月至2022年12月武威市人民医院收治的86例结肠癌患者作为观察组,另选取同期收治的86例结肠良性肿瘤患者作为对照组。取所有患者肿瘤组织进行免疫组织化学检验,检测组织中ZEB1表达水平,并应用酶联免疫吸附试验法检测血清CCSA-2表达水平,分析两组组织中ZEB1、血清CCSA-2表达水平。对比不同TNM分期结肠癌患者组织中ZEB1、血清CCSA-2表达水平。采用Spearman相关性分析法分析ZEB1、CCSA-2与结肠癌的临床分期的相关性。建立受试者操作特征(ROC)曲线分析ZEB1、CCSA-2对结肠癌的诊断价值。最后对所有患者进行复查随访,采用多因素Logistics回归模型分析结肠癌预后转归的独立危险因素。结果观察组CCSA-2水平为(97.74±7.47)ng/mL,高于对照组[(51.35±6.32)ng/mL],ZEB1阳性率为82.56%,高于对照组(48.84%),差异均有统计学意义(P<0.05)。TNMⅣ期患者CCSA-2水平为(116.25±9.35)ng/mL,高于TNMⅢ期、Ⅱ期和Ⅰ期患者[(88.36±5.36)、(79.65±8.47)、(72.53±6.34)ng/mL],ZEB1阳性率为100.00%,高于TNMⅢ期、Ⅱ期和Ⅰ期患者(91.67%、80.65%、65.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。ZEB1、CCSA-2与结肠癌临床分期呈正相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,ZEB1、CCSA-2对结肠癌的诊断价值,CCSA-2的诊断曲线下面积(AUC)为0.507,ZEB1的AUC为0.526,两者联合的AUC为0.682,敏感度、特异度为78.78%、89.37%,明显高于单一指标;预后良好组与预后不良组患者TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度、ZEB1阳性率及CCSA-2表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度、ZEB1阳性表达及CCSA-2升高为结肠癌预后独立影响因素(P<0.05)。结论组织ZEB1、血清CCSA-2对结肠癌患者具有重要检测价值,可考虑用于辅助诊断结肠癌的发生,判定结肠癌的发展程度,且可对其预后水平进行预测。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 诊断 锌指e盒结合蛋白1 直肠癌特异性抗原-2
下载PDF
长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭
7
作者 廖子龙 向国强 陈绘迦 《安徽医药》 CAS 2024年第4期794-799,I0006,共7页
目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测... 目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原复合体 细胞周期蛋白e 淋巴瘤 大B细胞 弥漫性 增殖细胞核抗原 BCL-2相关X蛋白质 基质金属蛋白酶9 微RNA-497-5p 增殖 侵袭
下载PDF
肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿血清维生素D、CD5L、补体C3、IgE水平变化及与病情和炎症反应程度的关系 被引量:3
8
作者 覃军 陈玲 +1 位作者 邓蓉蓉 胡荆江 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第23期10-15,共6页
目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)合并哮喘患儿血清维生素D、CD5抗原样蛋白(CD5L)、补体C3、免疫球蛋白E(IgE)的水平变化及其临床意义。方法回顾性选取2020年1月—2022年6月长江大学附属荆州医院确诊的55例MPP合并支气管哮喘患儿作为观察组... 目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)合并哮喘患儿血清维生素D、CD5抗原样蛋白(CD5L)、补体C3、免疫球蛋白E(IgE)的水平变化及其临床意义。方法回顾性选取2020年1月—2022年6月长江大学附属荆州医院确诊的55例MPP合并支气管哮喘患儿作为观察组,另随机选取同期来该院就诊的55例MPP但无支气管哮喘患儿作为对照组。比较两组维生素D、CD5L、补体C3、补体C4、IgG、IgM、IgE、用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、呼气流量峰值(PEF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9。结果观察组维生素D、CD5L低于对照组,补体C3、补体C4、IgG、IgM、IgE高于对照组(P<0.05)。观察组FVC、FEV1、PEF低于对照组,TNF-α、MMP-2、MMP-9高于对照组(P<0.05)。观察组与对照组TGF-β_(1)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高滴度组维生素D低于低滴度组,补体C3、IgG、IgM、IgE高于低滴度组(P<0.05)。高滴度组与低滴度组CD5L、补体C4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高滴度组FVC、FEV1、PEF低于低滴度组患者,TNF-α、MMP-2、MMP-9高于低滴度组(P<0.05)。高滴度组与低滴度组TGF-β_(1)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,MPP合并哮喘患儿的血清维生素D与TNF-α、MMP-2和MMP-9呈负相关(r=-0.471、-0.663和-0.682,均P<0.05);CD5L与TNF-α、MMP-2、MMP-9呈负相关(r=-0.502、-0.610和-0.634,均P<0.05);TNF-α与补体C3、补体C4、IgG、IgM、IgE测定值水平无相关性(r=0.201、0.114、0.238、0.217、0.226,均P>0.05);TGF-β_(1)与维生素D、CD5L、补体C3、补体C4、IgG、IgM、IgE无相关性(r=-0.083、-0.112、0.233、0.172、0.132、0.094和0.104,均P>0.05);MMP-2与补体C3、补体C4、IgG、IgM、IgE无相关性(r=0.182、0.158、0.192、0.216和0.171,均P>0.05);患儿MMP-9与补体C3、补体C4、IgG、IgM、IgE无相关性(r=0.169、0.134、0.207、0.236和0.185,均P>0.05)。结论MPP合并哮喘患儿维生素D、CD5L水平降低,补体C3、IgE水平升高,并与患儿病毒抗体滴度水平、炎症反应程度有一定的关系。 展开更多
关键词 肺炎支原体肺炎 哮喘 维生素D CD5抗原样蛋白 补体C3 免疫球蛋白e
下载PDF
鸭坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ与Ⅲ的反应原性和免疫原性比较 被引量:1
9
作者 曲哲会 鲁绍芳 +8 位作者 郭晓秋 陈敏 焦凤超 王梦瑶 魏星 马君钊 张茹 黄立 张喜文 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第20期89-95,100,共8页
为了比较鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ(EDⅠ-Ⅱ)与结构域Ⅲ(EDⅢ)的反应原性和免疫原性,试验将重组质粒pET-EDⅠ-Ⅱ[EDⅠ-Ⅱ基因插入表达载体pET-30a(+)构建的重组质粒]和pET-EDⅢ[EDⅢ基因插入表达载体pET-... 为了比较鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ(EDⅠ-Ⅱ)与结构域Ⅲ(EDⅢ)的反应原性和免疫原性,试验将重组质粒pET-EDⅠ-Ⅱ[EDⅠ-Ⅱ基因插入表达载体pET-30a(+)构建的重组质粒]和pET-EDⅢ[EDⅢ基因插入表达载体pET-30a(+)构建的重组质粒]分别转化至大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,采用亲和层析法纯化重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ,通过Dot-blot试验和间接ELISA试验比较二者的反应原性;将重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ免疫小鼠,通过测定免疫小鼠血清中特异性抗体、病毒中和(VN)抗体和细胞因子(IL-6、IFN-γ)水平比较两者的免疫原性;将DTMUV分离株感染重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ免疫小鼠,采用实时荧光定量PCR方法检测小鼠肺脏、肝脏和脑组织中DTMUV RNA相对表达水平,比较重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ对免疫小鼠的保护力。结果表明:含重组质粒pET-EDⅠ-Ⅱ和pET-EDⅢ诱导4 h的菌体蛋白经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定分别在分子量约33 ku和17 ku位置出现明显条带,可与鸡抗DTMUV多克隆抗体发生特异性免疫反应;经Dot-blot试验和间接ELISA试验分析发现,重组蛋白EDⅠ-Ⅱ比重组蛋白EDⅢ具有更好的反应原性;重组蛋白EDⅠ-Ⅱ免疫小鼠后第42天血清中特异性抗体水平、IFN-γ和IL-6水平均极显著高于重组蛋白EDⅢ(P<0.01或P<0.001),但VN抗体水平极显著低于重组蛋白EDⅢ(P<0.01);免疫小鼠感染DTMUV后,重组蛋白EDⅢ免疫小鼠肺脏、肝脏和脑组织中DTMUV mRNA相对表达水平均显著或极显著低于重组蛋白EDⅠ-Ⅱ免疫小鼠(P<0.05或P<0.01),即EDⅢ蛋白诱导小鼠产生的免疫应答较EDⅠ-Ⅱ蛋白对于抑制DTMUV复制的效果更好。说明EDⅠ-Ⅱ蛋白更适合作为以E蛋白及相关特异性抗体为基础的免疫学检测方法研究的目标蛋白,而EDⅢ蛋白更适合作为DTMUV新型疫苗研究的目标蛋白。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 e蛋白 结构域 反应原性 免疫原性
下载PDF
鸭坦布苏病毒E蛋白及其结构域Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对DEF细胞周期与凋亡的影响 被引量:5
10
作者 汪婷 汪威 +5 位作者 徐欢 殷世彬 孙敏华 江心月 徐静 汪招雄 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期205-211,共7页
【目的】探究鸭坦布苏病毒(Duck Tambusu virus,DTMUV) E蛋白全长及其结构域I、II和III (DI、DII和DIII)对鸭胚成纤维细胞(Duck embryo fibroblast,DEF)的细胞周期与凋亡的影响。【方法】本研究设计、合成DTMUV E蛋白全长及其DI、DII和D... 【目的】探究鸭坦布苏病毒(Duck Tambusu virus,DTMUV) E蛋白全长及其结构域I、II和III (DI、DII和DIII)对鸭胚成纤维细胞(Duck embryo fibroblast,DEF)的细胞周期与凋亡的影响。【方法】本研究设计、合成DTMUV E蛋白全长及其DI、DII和DIII真核表达质粒,并转染至DEF,用流式细胞仪检测不同蛋白引起的DEF细胞凋亡和细胞周期的变化。【结果】细胞凋亡结果显示:质粒转染细胞24 h后,E蛋白全长及DI、DII、DIII诱导的DEF早期凋亡率分别是16.4%、15.1%、14.0%和17.2%;质粒转染细胞36 h后,E蛋白全长及DI、DII、DIII诱导的DEF早期凋亡率分别是23.4%、18.5%、26.7%和29.4%。细胞周期检测结果显示:E蛋白全长及DI、DII、DIII的质粒转染细胞24、36 h后,DNA合成期(S期)细胞比例都明显高于pEGFP-N1空载体转染组。质粒转染24 h后,E蛋白及DI、DII、DIII的S期细胞比例分别为5.43%、22.58%、12.75%和12.80%;质粒转染细胞36 h后,E蛋白及DI、DII、DIII的S期细胞比例分别为9.98%、11.44%、10.44%和11.00%。【结论】DTMUV E蛋白全长及其3个结构域均能诱导早期细胞凋亡,引起细胞S期的停滞,但是各蛋白片段诱导细胞凋亡和引起细胞周期变化的能力存在一定差异。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 e蛋白 结构域 细胞周期 细胞凋亡
下载PDF
鸭坦布苏病毒E蛋白生物信息学分析 被引量:1
11
作者 胡怡 徐欢 +5 位作者 杜志强 朱玲玲 汪婷 殷世彬 汪威 汪招雄 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期192-199,共8页
鸭坦布苏病毒(DTMUV)是一种能造成蛋鸭产蛋下降的新型黄病毒,E蛋白是鸭坦布苏病毒主要的抗原蛋白。本试验利用Protparam、ProtScale等相关在线软件预测分析了E蛋白的理化性质、亲水性、跨膜螺旋区、信号肽、亚细胞定位、二、三级结构和T... 鸭坦布苏病毒(DTMUV)是一种能造成蛋鸭产蛋下降的新型黄病毒,E蛋白是鸭坦布苏病毒主要的抗原蛋白。本试验利用Protparam、ProtScale等相关在线软件预测分析了E蛋白的理化性质、亲水性、跨膜螺旋区、信号肽、亚细胞定位、二、三级结构和T、B细胞抗原表位以及翻译后的修饰位点。结果表明,DTMUV E蛋白的分子式为C2405H3757N649O723S32,由501个氨基酸组成,理论等电点为7.63。该蛋白是定位于病毒衣壳中有2个跨膜螺旋区的稳定性、亲水性蛋白。分别由41.52%、19.96%、32.34%、6.19%的氨基酸参与E蛋白的无规律卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角的形成。三级结构预测模型蛋白覆盖率为100%。该蛋白含有18个潜在的糖基化修饰位点,52个潜在的磷酸化修饰位点,20个潜在的抗原决定簇,其中含有4个连续氨基酸数量超过10个的B细胞抗原表位。选取HLA_DRB1_0801亚型时,CD4+抗原表位有15个强结合肽,43个弱结合肽。对DTMUV E蛋白序列分析显示该蛋白是一种没有信号肽,有跨膜区,具有良好免疫原性的亲水性蛋白,该结果为对E蛋白功能的进一步研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 e蛋白 修饰位点 抗原表位
下载PDF
Immune response modulation in inflammatory bowel diseases by Helicobacter pylori infection 被引量:2
12
作者 Gabriella Feilstrecker Balani Mariana dos Santos Cortez +3 位作者 Jayme Euclydes Picasky da Silveira Freitas Fabrício Freire de Melo Ana Carla Zarpelon-Schutz Kádima Nayara Teixeira 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2023年第30期4604-4615,共12页
Many studies point to an association between Helicobacter pylori(H.pylori)infection and inflammatory bowel diseases(IBD).Although controversial,this association indicates that the presence of the bacterium somehow aff... Many studies point to an association between Helicobacter pylori(H.pylori)infection and inflammatory bowel diseases(IBD).Although controversial,this association indicates that the presence of the bacterium somehow affects the course of IBD.It appears that H.pylori infection influences IBD through changes in the diversity of the gut microbiota,and hence in local chemical characteristics,and alteration in the pattern of gut immune response.The gut immune response appears to be modulated by H.pylori infection towards a less aggressive inflammatory response and the establishment of a targeted response to tissue repair.Therefore,a T helper 2(Th2)/macrophage M2 response is stimulated,while the Th1/macrophage M1 response is suppressed.The immunomodulation appears to be associated with intrinsic factors of the bacteria,such as virulence factors-such oncogenic protein cytotoxin-associated antigen A,proteins such H.pylori neutrophil-activating protein,but also with microenvironmental changes that favor permanence of H.pylori in the stomach.These changes include the increase of gastric mucosal pH by urease activity,and suppression of the stomach immune response promoted by evasion mechanisms of the bacterium.Furthermore,there is a causal relationship between H.pylori infection and components of the innate immunity such as the NLR family pyrin domain containing 3 inflammasome that directs IBD toward a better prognosis. 展开更多
关键词 Cytotoxin-associated antigen A oncoprotein Gut microbiota Helicobacter pylori Helicobacter pylori neutrophilactivating protein Immunological modulation Inflammatory bowel disease NLR family pyrin domain containing 3 inflammasome
下载PDF
Axonal growth inhibitors and their receptors in spinal cord injury:from biology to clinical translation 被引量:2
13
作者 Sílvia Sousa Chambel Célia Duarte Cruz 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第12期2573-2581,共9页
Axonal growth inhibitors are released during traumatic injuries to the adult mammalian central nervous system, including after spinal cord injury. These molecules accumulate at the injury site and form a highly inhibi... Axonal growth inhibitors are released during traumatic injuries to the adult mammalian central nervous system, including after spinal cord injury. These molecules accumulate at the injury site and form a highly inhibitory environment for axonal regeneration. Among these inhibitory molecules, myelinassociated inhibitors, including neurite outgrowth inhibitor A, oligodendrocyte myelin glycoprotein, myelin-associated glycoprotein, chondroitin sulfate proteoglycans and repulsive guidance molecule A are of particular importance. Due to their inhibitory nature, they represent exciting molecular targets to study axonal inhibition and regeneration after central injuries. These molecules are mainly produced by neurons, oligodendrocytes, and astrocytes within the scar and in its immediate vicinity. They exert their effects by binding to specific receptors, localized in the membranes of neurons. Receptors for these inhibitory cues include Nogo receptor 1, leucine-rich repeat, and Ig domain containing 1 and p75 neurotrophin receptor/tumor necrosis factor receptor superfamily member 19(that form a receptor complex that binds all myelin-associated inhibitors), and also paired immunoglobulin-like receptor B. Chondroitin sulfate proteoglycans and repulsive guidance molecule A bind to Nogo receptor 1, Nogo receptor 3, receptor protein tyrosine phosphatase σ and leucocyte common antigen related phosphatase, and neogenin, respectively. Once activated, these receptors initiate downstream signaling pathways, the most common amongst them being the Rho A/ROCK signaling pathway. These signaling cascades result in actin depolymerization, neurite outgrowth inhibition, and failure to regenerate after spinal cord injury. Currently, there are no approved pharmacological treatments to overcome spinal cord injuries other than physical rehabilitation and management of the array of symptoms brought on by spinal cord injuries. However, several novel therapies aiming to modulate these inhibitory proteins and/or their receptors are under investigation in ongoing clinical trials. Investigation has also been demonstrating that combinatorial therapies of growth inhibitors with other therapies, such as growth factors or stem-cell therapies, produce stronger results and their potential application in the clinics opens new venues in spinal cord injury treatment. 展开更多
关键词 chondroitin sulphate proteoglycans collapsin response mediator protein 2 inhibitory molecules leucine-rich repeat and Ig domain containing 1 leucocyte common antigen related myelin-associated glycoprotein neurite outgrowth inhibitor A Nogo receptor 1 Nogo receptor 3 oligodendrocyte myelin glycoprotein p75 neurotrophin receptor Plexin A2 Ras homolog family member A/Rho-associated protein kinase receptor protein tyrosine phosphataseσ repulsive guidance molecule A spinal cord injury tumour necrosis factor receptor superfamily member 19
下载PDF
Soluble programmed death-1 is predictive of hepatitis B surface antigen loss in chronic hepatitis B patients after antiviral treatment
14
作者 Ning Tan Hao Luo +7 位作者 Qian Kang Jia-Li Pan Ran Cheng Hong-Li Xi Hong-Yu Chen Yi-Fan Han Yu-Ping yang Xiao-Yuan Xu 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2021年第21期5812-5821,共10页
BACKGROUND Hepatitis B surface antigen(HBsAg)loss,a functional cure in patients with chronic hepatitis B(CHB)undergoing antiviral therapy,might be an ideal endpoint of antiviral treatment in clinical practice.The fact... BACKGROUND Hepatitis B surface antigen(HBsAg)loss,a functional cure in patients with chronic hepatitis B(CHB)undergoing antiviral therapy,might be an ideal endpoint of antiviral treatment in clinical practice.The factors that contribute to the functional cure remain unclear,and the predictors of functional cure are worth exploring.The concentration and kinetics of soluble programmed death-1(sPD-1)in patients with CHB may play an important role in elucidating the immune response associated with functional cure after nucleos(t)ide analogs therapy.AIM To investigate the factors associated with HBsAg loss and explore the influence of sPD-1 Levels.METHODS This study analyzed the data and samples from patients with CHB who underwent antiviral treatment in a non-interventional observational study conducted at Peking University First Hospital in Beijing(between 2007 and 2019).All patients were followed up:Serum samples were collected every 3 mo during the first year of antiviral treatment and every 6 mo thereafter.Patients with positive hepatitis B e antigen levels at baseline and with available sequential samples who achieved HBsAg loss during antiviral treatment served as the case group.This case group(n=11)was further matched to 44 positive hepatitis B e anti patients without HBsAg loss as controls.The Spearman’s rank correlation test and receiver operating characteristic curves analysis were performed.RESULTS The sPD-1 Levels were higher in patients with HBsAg loss than in those without HBsAg loss from baseline to month 96,and the differences were significant between the groups at baseline(P=0.0136),months 6(P=0.0003),12(P<0.0001),24(P=0.0007),48(P<0.0001),and 96(P=0.0142).After 6 mo of antiviral treatment,the sPD-1 levels were positively correlated with alanine transaminase(ALT)levels(r=0.5103,P=0.0017),and the sPD-1 levels showed apparent correlation with ALT(r=0.6883,P=0.0192)and HBV DNA(r=0.5601,P=0.0703)levels in patients with HBsAg loss.After 12 mo of antiviral treatment,the sPD-1 levels also showed apparent correlation with ALT(r=0.8134,P=0.0042)and HBV DNA(r=0.6832,P=0.0205)levels in patients with HBsAg loss.The sPD-1 levels were negatively correlated with HBsAg levels in all patients after 12 mo of antiviral treatment,especially at 24(r=-0.356,P=0.0497)and 48(r=-0.4783,P=0.0037)mo.After 6 mo of antiviral treatment,the AUC of sPD-1 for HBsAg loss was 0.898(P=0.000),whereas that of HBsAg was 0.617(P=0.419).The cut-off value of sPD-1 was set at 2.34 log pg/mL;the sensitivity and specificity were 100%and 66.7%,respectively.CONCLUSION The sPD-1 levels at 6 mo can predict HBsAg loss after 144 mo of antiviral treatment. 展开更多
关键词 Programmed cell death 1 protein Hepatitis B surface antigen Chronic hepatitis B ANTIVIRAL Nucleos(t)ide analogs Hepatitis B e antigen
下载PDF
CA72-4对单核细胞IL-1β和痛风急性发作的调控作用
15
作者 胡红蕾 郑宁宁 +1 位作者 聂宵 白雪山 《中外医学研究》 2024年第4期5-9,共5页
目的:探究糖类抗原(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)对单核细胞白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和痛风急性发作的调控作用。方法:收集淄博市中心医院痛风专病门诊收治的急性痛风患者外周血浆,分析CA72-4含量,获取CA72-4≥50 ... 目的:探究糖类抗原(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)对单核细胞白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和痛风急性发作的调控作用。方法:收集淄博市中心医院痛风专病门诊收治的急性痛风患者外周血浆,分析CA72-4含量,获取CA72-4≥50 U/mL的患者血浆,随机分为no-CA72-4组(n=37)和CA72-4组(n=38),no-CA72-4组采用DynaMag磁架去除血浆中的CA72-4,CA72-4组不做处理,将处理前后的血浆分别诱导THP1细胞,收集诱导后THP1细胞培养液和细胞,采用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测THP1细胞和培养液中IL-1β表达水平;将小鼠背部皮下注射灭菌过滤空气,造成皮下气囊,随后将尿酸盐(monosodium urate,MSU)结晶注入气囊,构建痛风性滑膜炎模型,将模型小鼠分成试验组(n=10)和对照组(n=10),试验组腹腔注射1.5×10^(10)PFU/mL腺病毒(adenovirus,Ad)-CA72-4,对照组注射照腺病毒Ad-ctr,收集小鼠血浆和滑膜液,采用CA72-4检测试剂盒检测小鼠血浆和滑膜液中CA72-4含量;采用ELISA法检测小鼠血浆中IL-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平,实时定量荧光聚合酶链反应和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组小鼠血浆IL-1β、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体基因和蛋白表达水平。结果:与CA72-4组相比,no-CA72-4组THP1细胞和培养液中IL-1β明显升高,差异有统计学意义(P<0.001);与对照组相比,试验组小鼠血浆和滑膜液中CA72-4表达水平显著高,差异有统计学意义(P<0.001);与对照组相比,试验组小鼠血浆中IL-1β和TNF-α表达均显著高,差异有统计学意义(P<0.001);与对照组相比,试验组小鼠血浆中IL-1β、NALP3基因和蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:CA72-4能增强单核细胞炎症因子分泌,加重痛风炎症反应,其具体的作用机制需进一步研究。 展开更多
关键词 CA72-4 痛风 单核细胞 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体
下载PDF
非洲猪瘟病毒CD2v蛋白胞内域与胞外域的原核表达及其抗原性分析
16
作者 李艳蕊 任静 +6 位作者 崔锦蔷 袁晨 王云霄 马亚娟 刘志昌 李永社 宋勤叶 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1660-1670,共11页
【目的】应用大肠杆菌表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)CD2v蛋白胞外域(N-端,CD2v-N)与胞内域(C-端,CD2v-C)并分析两者的抗原性,为ASFV检测方法的研发提供试验依据和指导。【方法】构建CD2v-N和CD2v-C的重组... 【目的】应用大肠杆菌表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)CD2v蛋白胞外域(N-端,CD2v-N)与胞内域(C-端,CD2v-C)并分析两者的抗原性,为ASFV检测方法的研发提供试验依据和指导。【方法】构建CD2v-N和CD2v-C的重组原核表达质粒,在体外表达并纯化CD2v-N和CD2v-C蛋白,通过Western blotting对表达蛋白进行鉴定;用表达的CD2v-N和CD2v-C蛋白分别肌内接种免疫新西兰大白兔,共免疫3次,每次间隔2周;每次免疫后14 d,应用ELISA方法测定CD2v-N或CD2v-C的特异性抗体水平;用纯化后的CD2V-N和CD2v-C蛋白作为包被抗原,通过ELISA方法检测95份ASFV感染猪的血清CD2v-N或CD2v-C特异性抗体,比较CD2v-N和CD2v-C在猪体内诱导的免疫反应水平。【结果】重组蛋白CD2v-N和CD2v-C分别以包涵体和可溶性形式表达,分子质量分别为22.9和34.0 ku,均能与猪抗ASFV血清特异性结合;用CD2v-N蛋白首免家兔后14 d,血清中未检测到特异性抗体,而在CD2v-C首免的家兔血清中检测到了高滴度的特异性抗体;三免后14 d,CD2v-N和CD2v-C蛋白免疫家兔的血清特异性抗体效价分别为1∶125000和1∶107;ELISA检测结果显示,ASFV感染猪的血清中CD2v-C特异性抗体水平显著高于CD2v-N(P<0.05)。【结论】本研究表达了ASFV CD2v蛋白胞内域和胞外域,前者的抗原性比后者高,CD2v胞内域作为ASFV免疫学检测技术研究与开发的靶标更具优势。该研究结果对ASFV检测方法的研究与开发具有重要指导意义。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) CD2v蛋白 胞外域 胞内域 蛋白表达 抗原性
下载PDF
鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ的原核表达及抗原性分析 被引量:3
17
作者 黄欣梅 赵冬敏 +3 位作者 刘宇卓 杨婧 韩凯凯 李银 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期150-154,共5页
【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入... 【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入Flag标签序列和酶切位点,采用PCR扩增GTMUV的E蛋白结构域III基因(EIII),然后与p ET32a原核表达载体连接构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导融合蛋白表达,并以Western blotting鉴定其免疫原性。【结果】PCR扩增获得携带Flag标签序列的EIII基因片段约430 bp,将其插入p ET32a载体可成功构建重组质粒p ET32a-EIII。阳性重组菌经IPTG诱导表达5 h即可得到融合蛋白,分子质量约33.0 k Da,主要以包涵体形式存在。Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与抗Flag标签单克隆抗体、小鼠抗坦布苏病毒多克隆抗体均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带。【结论】GTMUV E蛋白结构域Ⅲ能在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于研制GTMUV诊断抗原和亚单位疫苗。 展开更多
关键词 鹅坦布苏病毒 e蛋白 结构域Ⅲ 原核表达 免疫原性
下载PDF
马动脉炎病毒GL蛋白主要抗原域的表达及间接ELISA的初步建立 被引量:8
18
作者 梁成珠 曹瑞兵 +3 位作者 魏建超 朱来华 陈溥言 高宏伟 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期436-440,共5页
在分析马动脉炎病毒GL蛋白抗原性的基础上,设计一对引物克隆GL蛋白一段抗原性较好的抗原域编码基因。将克隆的基因插入pET-32a的BamHⅠ和XhoⅠ之间构建了GL蛋白主要抗原域原核表达载体pET-GL1。将pET-GL1质粒转化BL(21)宿主菌后,对培养... 在分析马动脉炎病毒GL蛋白抗原性的基础上,设计一对引物克隆GL蛋白一段抗原性较好的抗原域编码基因。将克隆的基因插入pET-32a的BamHⅠ和XhoⅠ之间构建了GL蛋白主要抗原域原核表达载体pET-GL1。将pET-GL1质粒转化BL(21)宿主菌后,对培养和表达条件进行了优化,实现了EAV GL蛋白主要抗原域的高效表达。免疫印迹试验表明获得的表达产物具有良好的反应原性。应用His.Bind亲和层析柱纯化重组EAV-GL1蛋白,以纯化的重组GL1蛋白作为检测抗原,初步建立了检测马动脉炎病毒抗体的iGL1-ELISA。结果表明,抗原的最佳包被浓度为9.65μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶80,阳性标准初步定为:待检血清OD490>0.4,且待检血清OD490/阴性血清OD490>2。应用iGL1-ELISA对马血清样品进行检测,结果表明iGL1-ELISA与病毒中和试验的符合率达到94.1%,与国外同类试剂盒的符合率达到95.6%。 展开更多
关键词 马动脉炎病毒 GL蛋白 主要抗原域 原核表达 间接eLISA
下载PDF
HMGB1对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬和I-A/E表达的影响 被引量:9
19
作者 王忠堂 姚咏明 盛志勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期771-773,共3页
目的:探讨HMGB1对巨噬细胞免疫功能的影响。方法:梯度浓度HMGB1处理小鼠腹腔巨噬细胞,或将小鼠随机分为生理盐水对照、24h和48h高与低剂量HMGB1注射组,腹腔注射0.2μg或20μg HMGB1,或生理盐水。检测巨噬细胞吞噬功能和I-A/E表达。结... 目的:探讨HMGB1对巨噬细胞免疫功能的影响。方法:梯度浓度HMGB1处理小鼠腹腔巨噬细胞,或将小鼠随机分为生理盐水对照、24h和48h高与低剂量HMGB1注射组,腹腔注射0.2μg或20μg HMGB1,或生理盐水。检测巨噬细胞吞噬功能和I-A/E表达。结果:10μg/L HMGB1刺激6-12h,巨噬细胞吞噬功能较其他剂量组明显增强(P〈0.05或P〈0.01)。HMGB1对培养巨噬细胞I-A/-E表达无影响。高剂量HMGB1攻击小鼠24h,其腹腔巨噬细胞吞噬能力明显降低(P〈0.05);低剂量HMGB1攻击48h,巨噬细胞I-A/-E表达明显上调(P〈0.05或P〈0.01)。结论:高剂量HMGB1抑制巨噬细胞吞噬功能,低剂量HMGB1增强巨噬细胞免疫功能。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 巨噬细胞 吞噬 I-A抗原 I-e抗原
下载PDF
坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白免疫保护效果 被引量:5
20
作者 赵冬敏 刘宇卓 +5 位作者 黄欣梅 韩凯凯 杨婧 刘青涛 毕可然 李银 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期-,共5页
为了探讨原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白对于坦布苏病毒感染的免疫保护作用,利用IPTG诱导重组大肠杆菌表达坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白,Anti-FLAG M2 Affinity Gel纯化后进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。经SDS-PAGE和We... 为了探讨原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白对于坦布苏病毒感染的免疫保护作用,利用IPTG诱导重组大肠杆菌表达坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白,Anti-FLAG M2 Affinity Gel纯化后进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。经SDS-PAGE和Western blot鉴定,纯化后坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白仅有单一目的条带。免疫组小鼠血清ELISA效价均达4.67±0.11(lg10)。攻毒保护试验结果表明,免疫组小鼠体质量在攻毒9 d后高于对照组,荧光定量RT-PCR检测结果显示,攻毒后免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏组织中坦布苏病毒核酸含量均低于对照组。表明使用原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白免疫可诱导产生高水平抗体,并提供良好的免疫保护力,为开发有效的坦布苏病毒亚单位疫苗提供依据。 展开更多
关键词 坦布苏病毒 e蛋白 结构域I/II 免疫保护
下载PDF
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部