中华绒螯蟹大颚器激素生物合成与性早熟的关系

运用放射化学方法跟踪测定中华绒螯蟹早熟个体和正常发育个体的大颚器合成和分泌的激素—甲基法尼酯(methylfarnesoate,MF),发现早熟雌、雄蟹当年9月的MF合成速率约为正常蟹的2倍,早熟蟹的MF在当年秋季(10月或11月)均达到峰值,之后MF合成速率显著降低,而成熟系数继续升高。正常发育的雌、雄幼蟹,当年至翌年4月的MF合成速率始终维持较低水平,翌年6月开始,MF合成速率迅速增大,至翌年10月的MF合成速率已超过早熟蟹的峰值,11月的MF合成速率明显降低,性腺发育至Ⅳ期末。研究结果表明:早熟蟹大颚器的提早发育,大量合成和分泌促性腺激素—MF,刺激卵巢或精巢发育成熟是导致性早熟的内分泌因素。

克氏原螯虾大颚器对卵巢发育的影响

采用埋植和离体方法进行克氏原螯虾的大颚器（ＭＯ） 对卵巢发育作用的研究。埋植大颚器７ 次能显著提高成熟系数和促进卵径增大。处于不同卵巢发育时期的克氏原螯虾大颚器提取物（ ＭＯＥ） 的离体研究发现，卵黄发生期的ＭＯＥ对初级和次级卵黄发生期卵径增大均有极显著的作用，而对卵黄发生前期的卵径增大无作用。处于卵巢发育早期的ＭＯＥ对卵黄发生期卵巢小块总ＲＮＡ含量升高无显著作用；处于卵黄发生前期、卵黄发生期和恢复期卵巢的ＭＯＥ对卵黄发生期的卵巢小块总ＲＮＡ含量升高均有极显著作用。ＭＯＥ的作用基本与保幼激素类似物－ ＺＲ５１５ 相似。研究结果表明卵黄发生期卵巢对ＭＯＥ较敏感；卵黄发生期的ＭＯＥ 的生物效应最强；ＭＯ 的功能性物质具有促进卵母细胞发育的作用。

中华绒螯蟹大颚器官超微结构的研究

用透射电镜对中华绒螯蟹 ( Eriocheir sinensis)大颚器官 ( MO)的超微结构及眼柄切除后 MO的变化进行了研究 .中华绒螯蟹具大颚器官一对 ,位于大颚正后方大颚腱的基部 .MO由许多细胞团组成 ,细胞团间广布血淋巴通道和血淋巴窦 .细胞核内密集的异染色体聚集在核质的外缘 ,细胞质内有两种不同类型的无颗粒内质网及大量形状各异的线粒体 .与血淋巴通道相连的细胞膜 ,呈现不同程度的内陷和皱褶 .眼柄切除后 ,MO中无颗粒内质网数量减少 ,线粒体膨大 ,空泡数量增多 .

锯缘青蟹大颚器对卵巢发育的调节作用:离体实验

器官联合培养研究表明,锯缘青蟹大颚器对卵黄发生前期和卵黄发生期卵母细胞的发育具有促进作用.随着大颚器的发育,其生物活性逐步增强.

克氏原螯虾大颚器的超微结构研究

克氏原螯虾的大颚器为一对，位于左右大颚的背面，大颚几丁质腱外侧基部。大颚器含丰富的血淋巴管和血窦，大颚器细胞围绕血窦成短束状排列。典型大颚器细胞超微结构最显著的特征：①线粒体和光面内质网广泛分布于胞质中，光面内质网明显分成小池状和小管状两种类型；②细胞质膜内陷并作不同程度的卷绕；③质膜外侧的基膜增厚，富含微丝。在泡状化的大颚器细胞中，光面内质网几乎消失，线粒体形态变异，胞核中的异染色质沿核膜形成一圈，显示细胞合成能力改变，呈现细胞产物分泌后的状态。

克氏原螯虾大颚器合成甲基法尼酯的研究

利用放射化学方法测定了克氏原螯虾大颚器中甲基法尼酯合成速率。结果发现，同一尾克氏原螯虾的左、右侧大颚器中甲基法尼酯的合成速率无明显差异（Ｐ＞０．０５）；雄螯虾甲基法尼酯的合成速率比雌螯虾大（Ｐ＜０．０５）；处于精巢发育期的雄螯虾甲基法尼酯合成速率明显大于发育前期的雄螯虾（Ｐ＜０．０５）；在雌螯虾卵巢发育周期中，甲基法尼酯的合成速率依次为：次级卵黄发生期＞初级卵黄发生期＞成熟期＞卵黄发生前期＞恢复期，表明大颚器合成甲基法尼酯与促进卵黄发生密切相关。

锯缘青蟹大颚器发育的组织学研究

采用组织学方法对锯缘青蟹 (Scyllaserrata )大颚器进行研究。大颚器位于大颚肌几丁质腱的后侧基部 ,发育过程可分为4期 :Ⅰ期大颚器很小 ,肉眼难以辨认 ,腺细胞数量少 ,细胞界限不清晰 ;Ⅱ期大颚器形状不确定 ,腺细胞开始形成腺泡 ;Ⅲ期大颚器通常呈肾形 ,腺泡多 ;Ⅳ期大颚器体积最大 ,呈柱状 ,腺细胞发达 ,未见退化现象。锯缘青蟹体长、卵母细胞直径、生精小管直径与大颚器腺细胞直径具有良好的线性关系。实验结果提示了锯缘青蟹大颚器与生长、生殖活动密切相关。

锯缘青蟹大颚器对精巢发育的调节作用:离体研究

器官联合培养表明,锯缘青蟹大颚器对精巢发育的调节作用主要表现为促进精母细胞期生精小管的生长和促进生精细胞的发育和精子成熟.随着锯缘青蟹大颚器的发育,其生物效应逐步增强.本研究首次证实了精巢组织是甲壳动物大颚器分泌物的靶器官.

孕酮对克氏原螯虾大颚器激素生物合成的体外调控

运用体外放射化学方法研究孕酮对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)大颚器官(MO)生物合成甲基法尼酯(MF)的调控作用。结果表明,低浓度孕酮(10 pmol/L,100 pmol/L)对MO生物合成MF的抑制作用不明显;高浓度孕酮(1 nmol/L,5 nmol/L,10 nmol/L)对MF生物合成具有极显著的抑制作用(P<0.01)。表明较高的血淋巴孕酮水平对克氏原螯虾MO合成MF产生反馈抑制作用。研究中对涉及MF合成的眼柄-大颚器官-卵巢轴的调节机理作了探讨。

克氏原螫虾大颚器在卵巢发育周期中的组织结构变化

在克氏原螫虾的卵巢发育周期中，大颚器的组织结构呈现周期性变化：大颚器逐渐增大，颜色由白色透明变为淡土黄色；细胞数目增多，细胞直径和细胞间隙增大；基膜逐渐形成并增厚；颗粒血细胞逐渐增多。到卵黄发生期，大颚器的这些形态结构变化到达顶峰。产卵后大颚器细胞解体；随着卵巢的重新发育，大颚器也重新发育。同时，在卵巢发育周期中，卵黄发生期大颚器细胞直径与卵母细胞直径的线性关系最为显著，相关系数最大，r＝0．926；大颚器细胞直径也最大，与其它时期相比都具有极显著性差异。

克氏原螯虾大颚器促性腺发育作用研究

[目的]研究克氏原螯虾(Procambarus clarkia)大颚器的组织学特点,探讨其大颚器在性腺发育过程的作用。[方法]采用大颚器和性腺组织的离体联合培养法,用卵黄发生期的克氏原螯虾大颚器刺激不同发育期的克氏原螯虾性腺。[结果]2处理组卵巢的最大卵径为(0.32±0.05)mm和(0.27±0.06)mm,2对照组卵巢的最大卵径为(0.24±0.05)mm和(0.20±0.05)mm;2处理组精巢的精母细胞直径为(13.09±0.75)μm和(12.93±0.98)μm,2对照组精巢的精母细胞直径为(10.29±1.00)μm和(10.02±0.68)μm。[结论]数据显示处理组的性腺细胞均比对照组的性腺细胞显著增大(P<0.05),表明大颚器的功能性物质具有促进性腺细胞发育的作用,支持大颚器作为促性腺生长发育腺体的观点。

克氏原螯虾卵黄发生过程中卵巢和大颚器孕酮含量的变化

运用放射免疫测定法，研究克氏原螫虾卵黄发生过程中卵巢和大颚器的孕酮含量变化。其中次级卵黄发生早期的卵巢孕酮含量最高，卵黄发生前期卵巢孕酮含量次之，次级卵黄发生中期的卵巢孕酮含量显著降低，产后期卵巢检测不出孕酮含量。表明随着卵巢的成熟和产卵，卵巢中的孕酮含量逐渐下降，推测孕酮与卵黄发生的启动有关。而在不同发育时期的大颚器中均未能测到孕酮。

锯缘青蟹大颚器的显微和超微结构

采用组织切片和电镜技术,对锯缘青蟹大颚器的形态结构进行了观察.大颚器位于大颚肌几丁质腱的后侧基部.腺细胞胞质丰盈,质膜大量内陷和作不同程度的卷绕,内含大量具管状脊的线粒体和滑面内质网.卵巢成熟时大颚器腺细胞内线粒体增多,少数线粒体形态异样,高尔基体易见,散布的小管状滑面内质网(tSER)少,高度汇合的tSER增多,大小形状不同的空泡数量明显增加,且近质膜分布,质膜内陷和卷绕程度加剧.表明此时锯缘青蟹大颚器的合成与分泌能力增强,其生理功能与卵巢发育密切相关.

早熟和正常中华绒螯蟹大颚器官发育及超微结构

对早熟和正常发育的中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)大颚器官(mandibularorgan,MO)进行解剖学和组织学研究,发现早熟蟹的MO在当年秋季已充分发育,MO细胞直径在当年11月达到最大值;而正常发育幼蟹的MO在当年细胞排列紧密,直到翌年秋季才充分发育。正常发育成蟹(二秋龄蟹)的MO细胞直径在10月达到最大值,明显大于早熟蟹(P<0.05)。表明早熟蟹MO较正常发育蟹提早一年发育,但是,秋季早熟蟹MO的发育速度和发育良好程度均不及二秋龄蟹MO的发育,这可能是早熟蟹卵黄发生过程较缓慢,较二秋龄蟹滞后约一个月达到次级卵黄发生末期的原因。中华绒螯蟹MO细胞超微结构的显著特征是丰富而形态多样的光面内质网和具小管状内嵴的线粒体,以及丰富的游离核糖体。

中华绒螯蟹大颚器分泌物的HPLC分析

利用三相提取法和高效液相色谱(HPLC)对中华绒螯蟹血淋巴及大颚器(MO)提取物进行了定性、定量的分析。结果发现在血淋巴及MO提取物中基本都可检测到三种物质:保幼激素Ⅲ(JHⅢ)、A和B。A物质的分泌受到眼柄因子的抑制调控,可能就是中华绒螯蟹MO的分泌物—法呢酸甲酯(MF)。

保幼激素拮抗物KK-42对凡纳滨对虾HMGR表达的抑制

为研究保幼激素拮抗物KK-42促生长的分子机制,实验克隆出甲基法呢酯(MF)合成的关键酶——3-羟-3-甲基-戊二酰还原酶A(HMGR)部分mRNA序列,并研究该基因时空表达以及KK-42对其表达的影响。将体长3.5～5.0cm凡纳滨对虾幼虾随机分为2组,分别用1.95×10-4mol/L的KK-42溶液或不含KK-42的溶液浸泡处理1min,之后在相同条件下常规饲养。不同组织中HMGR mRNA水平定量分析采用real-timePCR,血淋巴中MF滴度测定采用正相高效液相色谱法。结果显示,HMGR mRNA水平在大颚器官(MO)最高,其次是眼柄,肌肉和肝胰腺水平最低。在实验观察期间,眼柄与MO两种组织中HMGR的表达模式明显不同,前者各时间点mRNA水平变化较小,无统计学差异(P>0.05);后者mRNA含量分别在第1、7天显著高于第0天;实验期间血淋巴MF滴度逐渐升高。KK-42处理可显著抑制HMGR表达,但眼柄和MO中HMGR转录的下调模式仍不相同,前者mRNA水平在各时间点之间没有明显差异(P>0.05);而在MO下调幅度出现明显波动,其中在第1和7天,mRNA含量分别下降了82.5%和90.7%;血淋巴MF滴度逐渐下降。结果表明,KK-42可显著抑制凡纳滨对虾多种组织(尤其是MO和眼柄)HMGR转录,降低血淋巴MF滴度,这可能是其促生长的机制之一。

中华绒螯蟹大颚器官及眼柄因子对其影响的研究

透射电镜观察了中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）大颚器官及眼柄切除后对其超微结构的影响。大颚器官由许多细胞团组成，细胞团间有血淋巴通道和血淋巴窦。细胞团内的细胞呈放射状排列，细胞核位于向心端，密集的异染色体聚集在周边核质，细胞质内有两种不同类型的无颗粒内质网及大量形状各异的线粒体。细胞膜和血淋巴通道连接时，呈不同程度的内陷和褶皱。这些超微结构特点明显与合成甾类化合物的细胞特点一致。眼柄切除后，其结构出现了几种变化：无颗粒内质同数量减少，线粒体膨大，空泡数量增多，可能是大颚器官分泌活动增强所致。