高效凝胶渗透色谱法检测马初乳中的免疫球蛋白G

建立了高效凝胶渗透色谱(HPGPC)测定马初乳中免疫球蛋白G(IgG)含量的方法。采用TOSOH TSK-G4000PWXL色谱柱(300 mm×7.8 mm,5μm)分离,以0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.9)为流动相,流速0.8mL/min,检测波长280 nm,温度25℃。结果表明:免疫球蛋白G的线性范围为0.2～3.0 g/L(r2=0.999 5),平均回收率为97.47%,相对标准偏差(RSD)为1.22%,检出限(信噪比为10)为0.08 mg/L,方法的稳定性、精密度和重现性(以峰面积的RSD计)分别为2.86%、1.62%、1.82%。在优先满足小马哺育的前提下,采集新疆昭苏马场中两个不同品种马匹的马乳,于低温保存,在4℃和12 000 r/min下30 min内离心两次,制得乳清,测得第一次泌乳时,IgG含量在2 h时高达35.0～50.0 g/L,而在72 h后,马乳中IgG含量迅速下降为2.0～4.0 g/L。该方法前处理过程简单、快速,方法简便、准确、重现性好、精密度高,适合作为马初乳中IgG的检测方法。

饲粮不同营养水平对伊犁马妊娠后期体重、消化代谢及分娩后初乳成分的影响

本试验旨在研究饲喂不同消化能(DE)、粗蛋白质(CP)饲粮对妊娠后期伊犁马的体重、营养物质表观消化代谢、初乳成分及乳脂脂肪酸组成的影响,以确定妊娠后期伊犁马对DE、CP的需要量。选取年龄12~13周岁、体重为(380±48)kg、胎次为5到6胎,处于妊娠后期的伊犁马25匹,经完全随机试验设计分为5组(组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ和Ⅴ),每组5匹马。从组Ⅰ~Ⅴ,能量饲喂水平分别为91.28、96.72、102.16、107.61和113.05 MJ·d-1;粗蛋白质饲喂水平分别为0.92、0.99、1.06、1.13和1.20kg·d-1。预饲期10d,正饲期20d。消化代谢试验结束后及分娩后分别称量体重,采集初乳测定乳成分和脂肪酸的组成。结果表明,饲喂不同营养水平饲粮对妊娠后期伊犁马体重、平均日增重、营养物质的表观消化率、氮、磷和能量的代谢、初乳中脂肪、蛋白质、总固形物含量及体细胞数均无显著影响(P>0.05)。但是,随饲粮DE、CP水平的增加,可消化Ca利用率呈显著的线性和二次升高(P<0.05)。饲粮Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组乳糖含量显著高于饲粮Ⅱ组(P<0.05)。此外,研究发现伊犁马初乳中主要的饱和脂肪酸为棕榈酸,主要的不饱和脂肪酸为油酸和亚油酸。随着DE、CP水平增加,初乳中多不饱和脂肪酸呈极显著的线性升高(P<0.01)。由此可见,DE和CP饲喂水平为91.28 MJ·d-1和0.92kg·d-1已能满足伊犁马妊娠后期的营养需要,增加饲粮DE、CP水平可提高初乳中多不饱和脂肪酸含量。

饲粮钙磷水平对伊犁马初乳成分、乳脂脂肪酸组成、产后血液钙磷及激素的影响

旨在研究妊娠后期饲喂不同钙磷水平饲粮对产后伊犁马初乳成分、乳脂脂肪酸组成、血液钙磷及钙磷代谢激素、繁殖及生长代谢激素等生理生化指标的影响,为明确伊犁马在妊娠后期对钙磷的适宜需要量提供参考。本试验选取健康、无亲缘关系、12~13周岁、体重为(380±32) kg、胎次为4~5胎、处于第10妊娠月左右的伊犁马25匹,随机分为5组,每组5个重复。各组饲粮钙饲喂水平分别为36.00、39.00、42.00、45.00和48.00 g·d-1,磷饲喂水平分别为26.30、28.30、30.30、32.30和34.30 g·d-1。试验预试期10 d,正试期从第11天至母马分娩后第2天结束。母马分娩后12 h内采集初乳用于测定乳成分和乳脂脂肪酸含量,空腹血液用于测定Ca、P、甲状旁腺素(PTH)、降钙素(CT)、骨钙素(OC)、胎盘催乳素(PL)、垂体催乳素(PRL)、雌酮(E1)、雌二醇(E2)、血清孕酮(PROG)、甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-1)等激素浓度。结果表明:1)饲粮钙磷水平对初乳中钙、磷、乳脂率、乳糖率均无显著影响,组间乳蛋白率、总固形物、体细胞数、乳脂中饱和脂肪酸(SFA)和不饱和脂肪酸(UFA)比例存在显著差异(P<0.05)。随着饲粮钙、磷水平的增加,乳磷浓度、乳蛋白率和UFA比例呈显著线性增加(P<0.05),总固形物呈显著二次增加(P<0.05),而乳糖率、SFA及肉豆蔻酸比例呈显著线性降低(P<0.05)。2)饲粮钙磷水平显著影响血液中OC和PROG浓度(P<0.05),随着饲粮钙磷水平的增加,血液中离子钙、CT和OC浓度呈显著的线性降低(P<0.05),而PTH和PROG水平呈显著的线性升高(P<0.05)。饲粮钙、磷水平对PL、PRL、E1、E2等生殖激素以及T3、T4、GH和IGF-1等生长代谢激素浓度均无显著影响。由此可见,在本试验条件下,饲粮钙磷通过提高初乳中乳蛋白率和总固形物来改变乳脂中饱和脂肪酸含量和不饱和脂肪酸比例影响初乳成分;通过降低血液中OC浓度影响钙磷代谢;通过提高血液中PROG浓度影响繁殖状况。