《动物分子遗传标记》实验教学设计与实践

基于“新农科”动物生产类专业创新型复合畜牧人才培养的需求,将CRISPR/Cas9介导的基因敲除小鼠模型引入动物分子遗传标记实验课程中,设计了基因缺失分子标记检测与分析实验,采用基于PBL的混合式教学模式,学生能系统掌握基因组DNA提取、PCR扩增技术、琼脂糖凝胶电泳分析、基因型判定等相关理论和实验技术,将多门专业课程的实践环节有机结合,促进了学生理论知识与实验技能的融会贯通,激发了学生的学习热情,提升了专业认同感,培养了综合素质和创新能力。

话语标记语理论对英语听力水平影响的统计研究

话语标记语对非英语专业学生英语听力水平是否具有明显影响,是需要进一步研究的问题,也是有效提高学生英语听力水平的关键问题。通过设计有效的统计实验,通过统计分析研究了话语标记语理论对学生的英语听力水平的影响,得出了话语标记语理论对学生英语听力水平具有显著影响,为有效的提高学生英语听力水平提供了依据。

女儿设计和孙女设计连锁分析效率的比较研究

在家畜的人工授精育种体制中，孙女设计和女儿设计是多数研究者所推崇的连锁检测方法。本研究采用ＬＯＤ值的数学期望（ＥＬＯＤ）和衡量参数估计精确性的Ｆｉｓｈｅｒ信息测度来比较两种试验设计的连锁分析效率。结果表明，在对连锁信息贡献方面（ＥＬＯＤ），孙女设计具有女儿设计无法比拟的优越性，重组率估计的准确性在连锁紧密时（ｒ＜０．１５），孙女设计要好些；连锁松散时，女儿设计的Ｆｉｓｈｅｒ信息要高。

分子遗传标记技术在兔遗传多样性分析中的应用

实验兔是重要的实验动物之一,在医药领域发挥重要作用。各种分子遗传标记的出现为实验兔系统发育、种群遗传结构分析以及质量控制等各个领域提供了更为简便、可靠的研究手段。但目前,国内实验兔遗传质量不稳定,遗传背景不明确,严重制约着实验兔的应用。本文对各种分子标记在兔遗传多样性中的应用进行综述,以为实验兔遗传检测方法的建立提供帮助。

DNA分子标记检测种子纯度法的实验设计和统计评价

对ＤＮＡ分子标记检测蔬菜作物种子纯度法的实验设计和统计评价进行了分析。结果认为，分子标记检验蔬菜作物种子纯度时，进行两次重复较为合适，每次重复检测用种子数量相同，且以５０～６０粒为宜。确定种子纯度时，可用点估计和区间估计；判定某一种子纯度是否属实时，应选用Ｕ检验法。

紫花苜蓿微卫星(SSR)标记技术在草学本科遗传学实验教学中的应用

科研与教学相结合,以科研促进教学,是高等教育教学改革的重要内容之一。目前,草学本科专业的遗传学实验教学仍然以传统的验证和示范性实验为主,而与草类植物研究相结合的综合性、设计性实验较少,使当前教学与科研实际相脱节,学生科研思维及实验技能得不到训练和提高。笔者以多年的草类植物分子标记研究为基础,将微卫星分子标记与紫花苜蓿(Medicago sativa)的遗传特性研究相结合,在实验过程中学生掌握了紫花苜蓿微卫星分子标记、DNA提取、PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳等的原理和方法,同时实验引入分子遗传学的相关概念和方法,研究了紫花苜蓿的遗传特性,从而达到了培养学生综合运用知识、分析、解决和探索科学问题的能力。

IRAP分子标记技术在遗传学实验教学中的应用

遗传学实验教学中,物种遗传多样性分析是对遗传学知识的实际应用。该实验利用IRAP分子标记对贵州火龙果核心种质遗传多样性进行评价,实验内容包括植物DNA提取和检测、PCR扩增、凝胶电泳检测和遗传多样性分析等,实验结果可揭示火龙果种质间的遗传关系。作为开放性综合实验,本实验训练了本科生分子遗传学实验技能,培养了学生综合运用遗传学知识探索科学问题的能力,提升了学生科研思维和创新能力。

糖肾宁对高糖诱导的足细胞损伤模型Rho/ROCK通路的影响

目的:基于Rho/ROCK信号通路研究中药糖肾宁对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。方法:高糖培养足细胞,以不同药物分组干预足细胞24 h,用罗丹明染色的鬼笔环肽法检测足细胞骨架,细胞免疫荧光检测足细胞标志蛋白Nephrin,Western Blotting检测RhoA、ROCK1、Nephrin蛋白的表达。比较不同药物或药物浓度对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。结果:糖肾宁可改善足细胞骨架结构,下调高糖诱导的足细胞损伤模型中异常升高的RhoA和ROCK1蛋白表达,上调Nephrin表达。结论:中药糖肾宁可抑制高糖诱导的足细胞损伤模型RhoA/ROCK1信号通路,减轻足细胞骨架重构,改善足细胞损伤。

ANCA相关性血管炎检测标志物研究新进展

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎(AAV)是一类由抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)介导的以寡免疫复合物沉积为特点的自身免疫性疾病。AAV的发病率较低,容易漏诊,而且病情复杂、进展迅速、预后较差,这些疾病特征均要求需对其进行准确诊断。本文综述了AAV的发病机制和实验诊断标志物的临床应用,以期为AAV的准确诊断提供理论支持,为临床治疗提供帮助。

新型眼科手术部位标记笔的设计及应用

目的设计新型眼科手术部位标记笔,探讨其应用的效果,为临床提供一种更安全、精准的手术部位皮肤标记工具。方法采用便利抽样法,选取2021年6月至7月拟准备手术的患者160例作为对照组,选取2021年8月至9月拟准备手术的患者160例作为观察组。对照组患者采用普通皮肤记号笔标记手术部位,观察组采用新型眼科手术部位标记笔进行标记。比较两组患者标识的规范性(包括标识的大小、形状、位置)。结果采用新型眼科手术部位标记笔后,观察组手术部位标记的大小、形状、位置的规范性均较对照组明显提升,组间比较,均P<0.001,差异具有统计学意义。结论新型眼科手术部位标记笔能提高手术部位标识的规范性,同时确保手术安全。

双音节词语中上声变调标注形式的教学实验研究

上声变调是第二语言学习者汉语学习中的一个难点。目前的教材往往只对上声变调规则作简单介绍,对于上声变调词语则一律采用"本调标注"方式。胡炳忠先生和陈亚川先生提议上声变调教学中采用上声"变调标注",用"■"表示半上,用"■"表示阳平。针对上声变调教学中的标注形式,我们以涉及上声变调的双音节词语作为语言材料,采用实验语音学和统计学相结合的方法对实验对象的语音样本进行语音数据分析和结果统计分析,最终得出结论:汉语学习者在学习双音节词语上声变调时主要受组别即不同标注形式的影响,调类组合、汉语水平和词语熟悉程度这三个因素对汉语学习者学习双音节词语上声变调并没有显著性影响。

语用意识增进教学与二语语用能力关系的实验研究——以传闻性据素为例

文章以传闻性据素为例,采用显性教学手段(即激发正确使用语用形式意识的学习手段),或称语用意识增进教学(Pragmatic Consciousness-Raising,以下简称为PCR教学),对中国英语学习者在PCR教学引导之下和传统的教学方式之下,学习者对于传闻性据素的使用的掌握结果进行了实验比较,探讨意识对于二语语用学习是否是必要的,是如何影响学习者使用传闻性据素的。实验结果表明:相对于传统教学的控制组,PCR教学组在实验中以及实验后对于传闻性据素的掌握都表现出更高的语用能力,通过PCR教学,他们的语用能力成功地得到提高。

话语标记语理论对文科与理工科学生英语听力水平影响的研究

话语标记语对文科和理工科学生的大学英语听力水平的影响是否一样,是需要我们进一步研究的问题。本文通过设计有效的统计实验,分析研究了在以英语为外语的环境中,融入话语标记语理论的大学英语听力教学对文科和理工科学生听力水平的影响,试图构建一个新的英语听力模式,从而有效地提高不同类型的英语学习者的听力水平。

多指标正交试验优选白花益肝排毒颗粒的醇提工艺

目的:正交优选白花益肝颗粒的最佳醇提工艺。方法:采用正交设计表安排试验,考察乙醇体积分数、加醇量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响,以提干膏率、五味子醇甲、大黄总游离蒽醌含量作为指标,综合评价,优选出科学,合理的提取工艺。结果:白花益肝排毒颗粒醇提的最佳工艺为6倍70%乙醇提取3次每次2 h。结论:验证试验表明优选出的提取工艺稳定,合理,可行。

正交设计优化青蒿SRAP-PCR反应体系及引物筛选

为了建立青蒿的SRAP最佳扩增体系,并筛选出SRAP多态性引物,本研究以青蒿叶片DNA为模板,采用正交试验设计,以Mg^2+、dNTP Mix、Taq DNA聚合酶、引物和DNA模板5种因素5个水平,对青蒿SRAP反应体系进行研究。结果表明,青蒿SRAP-PCR最佳反应体系为:引物0.6μmol/L、Mg^2+2.0 mmol/L、模板DNA 5.1 ng、Taq DNA聚合酶2.0 U、dNTPs 0.25 mmol/L,总体积为25μL。各因素对扩增反应均有不同影响,其中引物浓度的影响最大,dNTPs的影响最小。运用该体系对不同种质资源的青蒿进行验证,证明该体系稳定可靠,并在30个引物组合中筛选出了25对扩增条带清晰,多态性丰富的引物组合。这一结论为今后利用SRAP标记技术进行青蒿分子遗传学研究提供了科学依据。

基于深度信息的无标记手势分割与3D定位

基于Kinect深度信息提出一种精确稳定的无标记手势分割和3D定位方法.基于深度阈值方法在实验空间中检测出手部二值图像.根据一般手势行为特性,提出基于目标手势端点检测和动态阈值算法无标记地分割出精确手势.为避免不精确的分割结果,对分割手势基本形态阈值限定.选取精确目标手势的重心坐标和纵向平均深度灰度值对手势3D定位.实验表明:该手势分割方法比已有无标记方法更精确稳定,3D定位比Kinect SDK的骨骼点手势定位稳定可靠、无奇异点.

绞股蓝对胆固醇诱导的非酒精性脂肪性肝病兔肝纤维化血清标记物的影响

目的：探讨绞股蓝对非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）兔肝纤维化血清标记物的影响。方法将40只成年雄性兔按随机数字表法随机分为绞股蓝组、辛伐他汀组、模型组、正常对照组，每组10只。正常对照组给予标准饲料喂养，其余动物给予高脂饲料100 g/d喂养，建立NAFLD模型。绞股蓝组灌胃绞股蓝水煎液5 g/（kg·d），辛伐他汀组灌胃辛伐他汀溶液5 mg/（kg·d），空白组及模型组灌胃等体积蒸馏水。连续给药9周。检测血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、C-反应蛋白（CRP）、透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）水平及肝组织TG水平。结果与正常对照组比较，模型组血清TG[（1.72±0.61）mmol/L比（0.85±0.39）mmol/L]、TC[（60.50±9.77）mg/L比（1.30±0.44）mg/L]、CRP[（256.79±30.78）mg/L比（8.71±1.41）mg/L]、HA[（798.8±69.4）ng/ml比（121.2±6.8）ng/ml]、LN[（964.8±62.8）ng/ml 比（142.4±12.2）ng/ml]显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，绞股蓝组血清TG[（1.31±0.39）mmol/L 比（1.72±0.61）mmol/L]、TC[（36.44±6.57）mmol/L比（60.50±9.77）mmol/L]、CRP[（68.77±10.78）mg/L比（256.79±30.78）mg/L]、HA[（420.8±60.2）ng/ml比（798.8±69.4）ng/ml]、LN[（449.8±56.6）ng/ml比（964.8±62.8）ng/ml]以及肝组织TG[（0.52±0.10）mmol/L比（0.77±0.08）mmol/L]显著降低（P＜0.01）。绞股蓝组肝组织TG水平[（0.52±0.10）mmol/L比（0.59±0.09）mmol/L]较辛伐他汀组显著降低（P＜0.05），但血清TC、TG、CRP、HA和LN水平与辛伐他汀组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论绞股蓝可调节NAFLD兔血脂代谢，减轻炎症反应，降低肝纤维化血清血清标记物水平，可能对肝纤维化有保护作用。

Nrf2信号通路在各系统肿瘤中的研究进展

活性氧自由基(ROS)可以损伤细胞DNA和蛋白质,具有致癌作用。Nrf2可以激活人体内多种Ⅱ相解毒酶的表达,其活性主要由Keap1负性调节,当机体受到外界药物、射线等刺激时,Nrf2可激活ARE区域,介导氧化应激反应,起到保护细胞的作用,目前已有部分研究表明某些植物与药物通过Nrf2信号通路发挥抗癌作用。近期,大量的细胞及动物实验表明Nrf2同样具有致癌作用,肿瘤细胞通过Nrf2或Keap1突变与基因杂合性丢失,使Nrf2和Keap1不能正常结合,导致Nrf2在胞内积累,激活下游基因,增加肿瘤细胞内的解毒酶,从而增强细胞对放化疗的抵抗性。同时,研究发现Nrf2在人体的大部分消化系统、呼吸系统、生殖系统及神经系统肿瘤中均呈高表达,并与多种致癌基因如Ki67、K-Ras、B-Raf、Myc、BRCA1等基因表达相关,阻断Nrf2信号通路的抗癌药物研究已表明其能够减少肿瘤复发率并增加肿瘤对放化疗药物的敏感性。Nrf2参与着各个系统众多肿瘤的发生与发展,将成为未来肿瘤靶向治疗的重点目标。

四逆软肝方对高浓度乙醛培养的人肝星状细胞肝纤四项及MMP-1、TIMP-1的影响

目的:探讨四逆软肝方对高浓度乙醛培养的人肝星状细胞肝纤四项(CG、HA、LN、PCIII)及基质金属蛋白酶1(MMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的影响。方法:采用高浓度乙醛对人肝星状细胞LX-2株造成损伤后,随机分为四逆软肝方、清热解毒化浊片、扶正化瘀片和脱离乙醛4组;经给药24h后搜集各组细胞培养液上清,采用ELISA试剂盒检测肝纤四项及MMP-1、TIMP-1含量。结果:250mmol/L乙醛培养72h,细胞存活率最高;与正常组比,乙醛组CG、HA、LN、MMP-1、TIMP-1差异无统计学意义(P>0.05),PCIII升高(P<0.01)。与正常组比较,脱离乙醛组CG下降(P<0.01)、PCIII升高(P<0.01);与脱离乙醛组比较,四逆软肝方组HA、PCIII、TIMP-1均降低(P<0.01),CG、LN、MMP-1差异无统计学意义(P>0.05)。四逆软肝方组、清热解毒化浊片组、扶正化瘀片组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:四逆软肝方可降低受损的LX-2细胞HA、PCIII、TIMP-1指标的表达,可能对抗肝纤维化有一定的作用。