类风湿关节炎患者血清SAA、CCL20、MMP-3表达水平及临床意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清淀粉样蛋白A(SAA)、趋化因子配体20(CCL20)及基质金属蛋白酶3(MMP-3)水平变化及临床意义。方法回顾性选取2020年9月至2023年1月大同市第五人民医院收治的RA患者108例作为研究对象,依据28个关节的疾病活动度评分(DAS28)评分,将患者分为缓解期组(n=35,DSA28评分<2.6)与活动期组(n=73,DSA28评分≥2.6),并将活动期患者进一步分为轻度活动期(n=20,DSA28评分2.6~3.2)、中度活动期(n=29,DSA28评分>3.2~5.1)与重度活动期(n=24,DSA28为>5.1);另选取同期健康体检者80名作为对照组。所有受试者均检测血清SAA、CCL20、MMP-3水平。比较不同组别血清SAA、CCL20、MMP-3水平;使用Pearson相关分析血清SAA、CCL20、MMP-3水平与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)的相关性;使用受试者工作特征(ROC)曲线评价各指标对RA疾病活动度的诊断价值。结果RA组血清SAA、CCL20、MMP-3水平分别为(42.25±13.46)mg/L、(45.69±12.78)pg/mL、(85.41±25.14)ng/mL,均显著高于对照组[(7.14±2.12)mg/L、(18.12±5.47)pg/mL、(27.36±8.21)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。RA活动期组患者血清SAA、CCL20、MMP-3水平分别为(51.78±10.71)mg/L、(53.14±10.45)pg/mL、(106.10±20.39)ng/mL,显著高于缓解期组[(22.37±7.14)mg/L、(30.15±8.24)pg/mL、(42.25±13.64)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。重度活动度组血清SAA、CCL20、MMP-3水平均高于中度活动度组和轻度活动度组,差异均有统计学意义(P<0.05),随着疾病活动度提高,血清SAA、CCL20、MMP-3水平逐渐增高。Pearson相关分析显示,活动期RA患者血清SAA、CCL20、MMP-3水平与CRP、ESR均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析得出,血清SAA、CCL20、MMP-3区分RA轻度活动度与中度活动度的曲线下面积(AUC)分别为0.852、0.756、0.725,区分中度活动度与重度活动度的AUC分别为0.852、0.756、0.725,均显示出一定的诊断能力。结论RA患者血清SAA、CCL20、MMP-3水平均呈高表达,这3项指标可作为评估疾病活动度的生物标志物,可为临床预测病情进展提供参考。

三维20节点六面体和10节点四面体单元的高精度中节点集中质量矩阵

对于工程分析中常用的三维20节点六面体和10节点四面体单元,采用行求和法得到的集中质量矩阵由于包含负质量元素,难以直接用于动力分析.虽然常用的主对角元素放大法,即HRZ方法,可以有效规避负质量元素,但是该方法仍缺乏理论层面的精度分析.本文首先以三维20节点六面体单元为例,构造一种包含待定参数的广义集中质量矩阵,并将HRZ集中质量矩阵作为特例涵盖其中,进而建立了20节点六面体单元广义集中质量矩阵的频率精度表达式.然后,通过参数优化,提出20节点六面体单元的中节点集中质量矩阵构造方法,并从理论上证明其精度优于HRZ集中质量矩阵.该中节点集中质量矩阵形式简单,非常便于推广到10节点四面体单元.此外,利用中节点集中质量矩阵含有主对角零质量元素的特点,通过静力凝聚建立了相应的动力分析降阶模型,在保证计算精度的同时可大幅提升计算效率.自由振动和时程分析结果均表明,对于三维20节点六面体单元和10节点四面体单元,中节点集中质量矩阵的计算精度明显高于HRZ集中质量矩阵.

氟对大鼠成釉细胞中MMP-20、KLK4表达的影响

目的观察用含不同浓度氟饮水喂养的SD大鼠所产的子鼠成釉细胞中基质金属蛋白酶-20(MMP-20)、激肽释放酶(KLK4)的表达变化,探讨氟牙症的发病机制。方法给母体SD大鼠分别饮用氟质量浓度为0、50、100mg/L的饮水,待母鼠自然分娩后,取其子鼠下颌骨制作切片并提取牙胚组织,分别用免疫组化和实时定量PCR方法检测不同染氟组大鼠成釉细胞中MMP-20及KLK4的蛋白及基因表达,应用Image-Pro Plus 6.0和GraphPad Prism 5软件对免疫组化和PCR数据结果进行分析。结果①随着饮水氟质量浓度的增加,成釉细胞中MMP-20蛋白及其mRNA的表达量逐渐减少;②KLK4蛋白和KLK4mRNA的表达量在两实验组呈现了类似的变化,但高氟组与低氟组间的差别不明显。结论氟可使成釉细胞减少对MMP-20及KLK4的分泌。这可能是釉基质蛋白降解延迟、釉质矿化异常,最终导致氟牙症产生的机制之一。

TGF-β1调控基质金属蛋白酶-20(MMP-20)启动子转录活性的研究

目的:克隆MMP-20基因启动子序列,分析转化生长因子-β1对其转录活性的影响。方法:检索并分析MMP-20基因翻译起始点上游序列。利用PCR从小鼠基因组上扩增长度为2852bp的启动子序列,并与pMD18-T克隆载体连接。经酶切反应初步鉴定后,以pMD18-T-MMP-20为模板,利用PCR方法获得带酶切位点的MMP-20启动子片段(2842bp),并与pGL3-Basic载体连接。pGL3-MMP-20瞬时转染小鼠成釉细胞系(ALC)过夜后,在培养基中加入1ng/mLTGF-β1,12h后检测荧光素酶的活性。结果:经酶切反应和测序结果证实MMP-20启动子成功插入pGL3-Basic质粒。与pGL3-Basic质粒转染相比较,转染pGL3-MMP-20后荧光素酶活性明显增强;培养基中加入TGF-β1能促使pGL3-MMP-20荧光素酶活性进一步增强。结论:外源性MMP-20启动子在成釉细胞中被激活;TGF-β1能增强pGL3-MMP-20荧光素酶活性,提示釉质发育过程中,TGF-β1具有调节MMP-20基因表达的生物学功能。

Runx2介导TGF-β1调控成釉细胞MMP20基因表达的研究

目的:研究Runx2在TGF-β1调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloprotei-nase 20,MMP20)基因表达中的作用。方法:首先利用双荧光素酶基因报告系统分析TGF-β1对MMP20基因启动子转录活性的影响;然后利用染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)方法观察Runx2与MMP20特异性结合位点之间的相互作用,并利用基因定点突变和双荧光素酶基因报告系统分析Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;最后运用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默,实时定量RT-PCR技术观察TGF-β1诱导MMP20基因表达的改变。结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,MMP20启动子在-87～+23区域转录活性无明显变化外,其他各区域转录活性均增强。利用ChIP研究发现Runx2与MMP20基因核心启动子的特征性序列"TGTGGG"相互作用;将该特征性序列由"TGTGGG"突变为"TGTAAG"后,利用双荧光素酶基因报告系统发现Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响减弱;利用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默后,TGF-β1上调MMP20基因表达的作用减弱。结论:TGF-β1通过转录因子Runx2调控成釉细胞MMP20的表达。

过量氟对大鼠切牙基质金属蛋白酶-20及其组织抑制剂表达的影响

目的研究过量氟对大鼠切牙生长过程中基质金属蛋白酶-20(MMP-20)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响,探讨氟斑牙的发病机制。方法选择20只Wistar大鼠,随机分为对照组和给氟组。8周后处死动物,获取切牙标本,免疫组化染色观察MMP-20和TIMP-2在大鼠切牙中的表达定位和氟对二者表达的影响。结果MMP-20和TIMP-2在分泌期成釉细胞、成牙本质细胞以及成釉器均有阳性表达,给氟组MMP-20的表达明显弱于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);TIMP-2在两组的表达无显著性差异(P>0.05)。结论过量氟可抑制MMP-20的表达,MMP-20和TIMP-2表达失衡,TIMP-2的抑制作用加强,致使釉基质蛋白清除延迟,导致矿化不全和釉质缺损。

人参皂甙20(R)-Rg3对人胶质瘤U87侵袭的影响

目的探讨人参皂甙20(R)-Rg3体外对人胶质瘤系U87细胞侵袭的影响及可能机制。方法采用MTT法检测Rg3对U87细胞黏附纤维连接蛋白能力的影响。采用Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭实验检测Rg3对U87细胞侵袭能力的影响。采用明胶酶活性方法检测Rg3对U87细胞MMP-9和MMP-2蛋白表达的影响。结果 Rg3(12.5、25、50 ng/L)作用24 h后,U87细胞黏附纤维连接蛋白能力逐渐降低,呈显著的浓度依赖性(P<0.05)。体外侵袭实验显示不同浓度Rg3作用24 h后,U87细胞侵袭能力逐渐降低。明胶酶活性检测表明增殖,不同浓度Rg3作用24 h后,U87细胞中基质金属蛋白酶MMP-2蛋白酶原及其活性片段的表达逐渐减少,呈显著的浓度依赖性。结论 Rg3能显著抑制U87细胞的黏附和侵袭能力,可能与Rg3降低MMP-2蛋白酶原及其活性片段表达减少有关。

子宫颈鳞癌组织中MMP-7和CK20的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和细胞角蛋白20(CK20)在子宫颈鳞癌中的表达特点及其相互关系,以及它们在子宫颈鳞癌侵袭转移中的作用。方法采用RT-PCR法检测33例子宫颈鳞癌和12例正常宫颈组织中MMP-7mRNA和CK20 mRNA的表达水平,分析其表达水平与临床病理特征的关系。结果MMP-7mRNA在子宫颈鳞癌组织中的表达水平显著高于正常宫颈组织(P=0.018),与子宫颈鳞癌分化程度、淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与临床分期、年龄等因素无关(P>0.05);CK20 mRNA在子宫颈鳞癌组织中的表达水平高于正常宫颈组织(P=0.002),与子宫颈鳞癌分期、分化程度、淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与年龄等因素无明显相关(P>0.05)。在子宫颈鳞癌中MMP-7mRNA与CK20 mRNA的表达之间存在正相关关系(r=0.42735,P=0.0262)。PCR法检测MMP7和CK20 mRNA阳性率显著高于免疫组化法(P<0.05)。结论MMP-7mRNA及CK20 mRNA的高表达与子宫颈鳞癌的侵袭转移有关,可作为检测早期宫颈鳞癌淋巴转移的生物学指标。

AKT-Foxo3a信号通路调控小鼠MMP-20基因表达的研究

目的:本研究旨在探讨AKT-Foxo3a信号通路在基质金属蛋白酶-20(matrix metalloproteinase-20,MMP-20)基因表达中的作用。方法:分别通过免疫组化技术、实时定量RT-PCR技术以及双荧光素酶报告基因检测系统分析AKT-Foxo3a信号通路对MMP-20启动子转录活性的影响。结果:免疫组化染色结果显示,AKT及磷酸化Foxo3a(P-Foxo3a)均在分泌期成釉细胞核中呈阳性表达;RT-PCR检测结果显示,AKT阻断剂可显著抑制Foxo3a诱导的MMP-20基因的表达(P﹤0.05);双荧光素酶分析结果显示,AKT阻断剂亦可显著抑制Foxo3a调控MMP-20基因启动子的转录活性(P﹤0.05)。结论:转录因子Foxo3a可能通过AKT-Foxo3a信号通路调控MMP-20基因的表达,从而参与釉质发育过程。

核基质蛋白22、细胞角质素20和存活素mRNA对膀胱癌诊断价值的研究

目的探讨核基质蛋白22(NMP22)、细胞角质素20(CK20)和存活素mRNA在膀胱癌诊断中临床应用价值。方法选择因血尿和膀胱刺激症状到该院泌尿外科诊治的患者107例,分为对照组(44例)和观察组(63例)。观察组中按照肿瘤TNM分期和WHO分级,包括T1s^T1 44例,T2~T4 19例;G1 14例,G2 31例,G3 18例;另外选择45例健康志愿者作为健康组。通过ELISA方法检测所有志愿者尿液中NMP22水平,通过RT-PCR方法检测对照组和观察组受试者尿液中CK20和存活素mRNA表达量,比较这3种检测方法的灵敏度和特异度,以评估对膀胱癌诊断的价值。结果观察组患者尿液中NMP22的水平(37.92U/mL)显著高于健康组(4.31U/mL)和对照组(7.04U/mL),差异有统计学意义(P<0.05)。NMP22检测指标的灵敏度和特异度分别为82.54%和61.36%,与肿瘤分期和分级无明显相关性;CK20和存活素mRNA检测指标的灵敏度和特异度分别为83.70%、63.64%和85.71%、90.91%,与肿瘤分期有显著的相关性;T2~T4亚组患者CK20和存活素mRNA检测灵敏度高于T1s^T1亚组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论尿液NMP22、CK20和存活素mRNA检测对膀胱癌的诊断均有较高的灵敏度和特异度,是诊断膀胱癌较好的无创性手段。

精化8-20节点块体元的综合一致质量阵及几种质量阵构成方法的讨论

针对精化８－２０节点块体元构造了几种不同类型的质量阵，通过对几种支撑条件下的梁进行的振动特性分析，对其进行了比较研究，提出了构造精化８－２０节点块体元质量阵的新途径—综合一致质量阵法。结果表明，这种综合一致质量阵方法是几种质量阵形成方法中对提高动力分析精度最为有效的方法。

EGF/EGFR/ErbB2调控成釉细胞MMP-20基因表达的研究

目的:研究EGF/EGFR/ErbB2信号通路对小鼠成釉细胞中基质金属蛋白酶-20(matrixmetalloproteinase-20,MMP-20)基因表达的调控作用。方法:用定时定量RT-PCR、双荧光素酶报告基因检测系统分析EGF/EGFR/ErbB2调控MMP-20基因的表达、EGF调控MMP-20启动子的主要区域、MAPK信号通路阻断剂对EGF调控MMP-20转录活性的影响、转录因子Jun家族介导EGF/ErbB2对MMP-20转录活性的调控;用基因定点突变和双荧光素酶基因检测报告系统分析EGF/ErbB2、C-Jun对MMP-20基因启动子转录活性的影响。结果:成釉细胞经20 ng/mL EGF刺激后,MMP-20的基因表达上调(P<0.05),MMP-20启动子在(-157～+23)之前的区域转录活性增强(P<0.05);EGFR、ErbB2、ERK阻断剂均能抑制EGF对MMP-20基因表达的调控(P<0.05);转录因子C-Jun介导EGFR/ErbB2上调MMP-20基因的表达(P<0.05);突变MMP-20启动子的AP1结合位点后,MMP-20基因表达的水平下降(P<0.05),同时EGF/ErbB2也失去上调MMP-20基因表达水平的作用。结论:在成釉细胞中EGF通过EGFR/ErbB2～ERK～C-Jun信号通路对MMP-20基因的表达起到调控作用。

Foxo3a调控小鼠釉质发育过程中MMP-20基因的表达

目的:探讨转录因子Foxo3a在釉质发育过程中调控基质金属蛋白酶-20(MMP-20)基因表达的分子机制。方法:分别利用免疫组织化学技术、免疫荧光、RT-PCR法、双荧光素酶报告基因检测系统检测转录因子Foxo3a与MMP-20启动子区域的转录调控水平,分析Foxo3a调控MMP-20的转录活性的机制。结果:免疫组织化学染色发现Foxo3a在成釉细胞核中呈阳性表达,并且随着釉质的分泌表达逐渐增强,晚期变弱;RT-PCR证实Foxo3a促进MMP-20基因表达(P<0.05);双荧光素酶检测显示,Foxo3a促进MMP-20表达(P<0.05);特定序列定点突变后的Foxo3a对MMP-20基因的转录活性无显著的影响(P>0.05)。结论:转录因子Foxo3a可能通过与特定序列结合而调控MMP-20的表达,从而在釉质分泌过程中发挥重要作用。

转录因子Dlx1和Dlx2在成釉细胞中调控MMP20启动子转录活性的研究

目的:观察Dlx家族转录因子Dlx1和Dlx2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20(matrix metallo proteinase20,MMP20)基因的调控作用,初步确定Dlx家族在釉质发育中的作用。方法:构建Dlx1和Dlx2真核表达载体重组质粒,用双荧光素酶报告基因检测系统分析不同剂量的Dlx1和Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;确定Dlx1和Dlx2有明显作用的启动子区段,用基因定点突变和双荧光素酶报告基因检测系统分析Dlx1、Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响,以及Dlx1、Dlx2在调控MMP20基因时的相互作用;最后观察Dlx1与Dlx2共转染时MMP20基因活性表达的变化。结果:Dlx1转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达上调,Dlx2转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达抑制;突变MMP20启动子的Dlx结合位点后,MMP20启动子的转录活性下降,而且Dlx1失去上调MMP20启动子转录活性的作用;当Dlx1与Dlx2共转染后,在Dlx1转染剂量不变的前提下,随着Dlx2转染量的增加,小鼠成釉细胞MMP20启动子转录活性显著增加。结论:Dlx1和Dlx2在釉质发育过程中有重要的生物学意义,对MMP20基因表达具有重要的调节作用。

转录因子c-fos/c-jun调控成釉细胞基质金属蛋白酶20基因的表达

背景:基质金属蛋白酶20是在成釉细胞中特异性表达的一种蛋白酶,其在牙齿釉质发育过程中具有重要作用。从分子角度研究基质金属蛋白酶20可受到的调控机制,为进一步做动物实验奠定基础。目的:通过研究转录因子c-fos/c-jun对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20基因的调控作用,初步确定c-fos/c-jun在牙釉质发育中的作用。方法:首先构建c-fos真核表达载体重组质粒,分别利用双荧光素酶基因检测报告系统和定时定量RT-PCR法分析c-jun、c-fos转染成釉细胞对基质金属蛋白酶20基因活性的影响;并利用基因定点突变和双荧光素酶基因检测报告系统进一步分析c-jun、c-fos对基质金属蛋白酶20基因活性的影响。结果与结论:双荧光素酶基因检测报告系统和定时定量RT-PCR法分析显示c-jun、c-fos转染转染小鼠成釉细胞后,基质金属蛋白酶20基因表达显著上调;突变基质金属蛋白酶20启动子的AP1结合位点后,c-fos/c-jun失去上调基质金属蛋白酶20启动子的转录活性的作用。结果提示c-fos/c-jun对基质金属蛋白酶20基因表达具有重要的调节作用,表明其在釉质发育过程中有其重要的生物学意义。

20-羟二十烷四烯酸对人胎盘绒毛膜滋养细胞生物学行为的影响

目的探讨20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)对人胎盘绒毛膜滋养细胞生物学行为的影响。方法体外培养人胎盘绒毛膜滋养细胞,分成正常对照组、药物介质组、20-HETE组、HET0016组,分别加入细胞培养基、二甲基亚砜、20-HETE及20-HETE抑制剂HET0016作用48h;采用ELISA法检测人胎盘绒毛膜滋养细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)浓度,RT-PCR法检测人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL m RNA表达。结果与正常对照组比较,药物介质组人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA相对表达量差异均无统计学意义(均P>0.05),20-HETE组人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA相对表达量均明显降低(均P<0.05),HET0016组人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA相对表达量均明显升高(均P<0.05)。结论 20-HETE可抑制人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA表达,而其抑制剂HET0016起促进作用。

宫颈鳞癌中CK20、MMP9、HMGB1表达与临床病理特征的关系研究

目的:探讨宫颈鳞癌中细胞角蛋白20(CK20)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达及与临床病理特征的关系。方法:选取行手术治疗的62例宫颈鳞癌患者,取手术切除宫颈鳞癌组织标本作为观察组,正常宫颈组织标本作为对照组。用免疫组化技术检测CK20、MMP9、HMGB1的表达情况,比较两组CK20、MMP9、HMGB1的阳性表达率及其表达与临床病理特征之间的关系。结果:观察组CK20、MMP9、HMGB1阳性表达率均高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);CK20、MMP9、HMGB1阳性表达率与宫颈鳞癌淋巴结转移、组织学分级、临床分期均呈正相关(P<0.05)。结论:CK20、MMP9、HMGB1在宫颈鳞癌中呈高表达,其表达与临床分期、淋巴结转移、组织学分级关系密切。

釉基质蛋白酶与氟牙症的发病机制

目前认为,釉原蛋白降解延迟和清除障碍是氟牙症形成的关键。一些研究表明,氟可减少在釉原蛋白被水解、清除过程中发挥重要作用的釉基质蛋白酶的表达。釉基质蛋白溶解酶包括基质金属蛋白酶(MMP-20)和丝氨酸蛋白酶(KLK4)。本文从分子结构和生物学功能等方面对两种酶的研究现状进行了系统回顾,同时分析了氟对釉基质蛋白酶的可能影响及其与氟牙症发病机制间的关系。

珠光体基体灰铸铁在硫酸中的腐蚀研究

采用浸泡试验对珠光体基体灰铸铁、20钢和ND钢在硫酸溶液中的腐蚀行为进行了研究。分析了试验温度和硫酸浓度对三种材料腐蚀速率的影响规律,并通过扫描电镜对灰铸铁、20钢和ND钢试样的腐蚀形貌进行了分析。结果表明,灰铸铁在硫酸溶液中的腐蚀速率最小,ND钢的腐蚀速率次之,20钢的腐蚀速率最大;随试验温度或硫酸浓度的变化,灰铸铁、20钢和ND钢试样呈现出不同的腐蚀形貌。

基于C语言的钻柱有限元单元刚度矩阵计算

单元刚度矩阵的建立是有限元分析中的一个重要步骤。就实际钻柱受力与变形分析中出现的20节点六面体单元进行研究,给出了计算单元刚度矩阵的方法和步骤,并运用C语言编写了相应程序,为解决大型三维有限元问题提供了较好的思路。