桔梗皂苷-D抑制非小细胞肺癌H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用机制研究

目的探究桔梗皂苷-D(platycodin-D,PD)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用及其作用机制。方法细胞黏附实验、划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力。RT-PCR检测H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达。同时,Western blot法检测MMP-2和MMP-9蛋白、其上游ERK信号通路相关蛋白和p-Akt的表达水平。结果PD有效抑制H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移能力,并呈浓度依赖性(P<0.05)。PD降低H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达(P<0.01);同时,PD下调H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达,并抑制其上游Ras、p-c-Raf、p-ERK 1/2和p-Akt的表达,并呈浓度和时间依赖性。结论 PD抑制NSCLC细胞黏附、侵袭和迁移,并且此作用与下调MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达,抑制其上游ERK信号通路和p-Akt表达有关。

麦冬皂苷B对A549细胞株体外黏附、侵袭及迁移的抑制作用及机制研究

目的探究麦冬皂苷B(ophiopogonin-B,OP-B)抑制非小细胞肺癌细胞株A549黏附、侵袭、迁移的作用及其机制。方法细胞黏附实验、Transwell小室实验分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力。通过荧光实时定量反转录PCR(qRT-PCR)检测OP-B对A549细胞中MMP-2/9 mRNA表达水平的调控,Western blot法检测细胞中MMP-2/9蛋白及其上游调控蛋白Akt及其磷酸化水平的变化。结果 10μmol·L-1浓度的OP-B能明显抑制A549细胞黏附、侵袭和迁移,同时能抑制其MMP-2/9 mRNA及蛋白水平的表达,并抑制其上游p-Akt的表达。结论 OP-B有效抑制A549细胞黏附、侵袭和迁移,其作用与下调MMP-2/9 mRNA和蛋白水平的表达及抑制其上游Akt的磷酸化有关。

氯沙坦对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性和MMP-9表达的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ受体阻断药氯沙坦对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法采用血管内栓线阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,于脑缺血2 h、再灌注24 h后测定脑组织含水量、伊文斯蓝(EB)含量,免疫组织化学方法测定MMP-9表达。结果脑缺血2 h、再灌注24 h,大鼠脑组织含水量及EB含量增加,MMP-9呈现高表达。而氯沙坦组脑组织含水量、EB含量及MMP-9表达明显低于脑缺血再灌注组(P<0.05)。结论氯沙坦通过降低脑缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9的活性及血脑屏障通透性,从而发挥其脑缺血再灌注损伤的保护作用。

西洛他唑对老年下肢动脉硬化闭塞症患者超敏C反应蛋白、血脂及基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨西洛他唑对老年下肢动脉硬化闭塞症患者超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、血脂及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响。方法选择老年下肢动脉硬化闭塞症患者60例,随机分为基本治疗组和西洛他唑组,同时以30例健康体检人员作为对照组。观察治疗后各组Hs-CRP、血脂及MMP-9的变化。结果治疗后基本治疗组血脂变化不明显,西洛他唑组总胆固醇(TC)水平明显下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著上升。治疗后2组Hs-CRP、MMP-9水平均明显下降,西洛他唑组下降幅度大于基本治疗组。结论西洛他唑通过降低炎性因子浓度,调解血脂,降低Hs-CRP、MMP-9等途径改善下肢血管病变患者症状。

TSP-1和MMP-9在乳腺癌组织中的表达意义

目的探讨乳腺癌组织中凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及其与肿瘤微血管生成、患者预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测131例乳腺癌患者组织中TSP-1、MMP-9的表达情况,比较研究指标的表达情况和肿瘤组织中微血管密度(MVD)及其与患者临床病理特征、预后的关系。结果 131例中,肿瘤间质中TSP-1的表达和肿瘤的MVD呈负相关(Spearman相关系数=-0.241,P=0.006);肿瘤细胞中MMP-9与肿瘤间质中TSP-1共同高表达与乳腺癌组织大小、淋巴结转移、病理分期密切相关(P<0.05);生存分析发现二者共同高表达的患者相对于二者非共同高表达的患者预后不佳。结论乳腺癌组织中MMP-9联合TSP-1共同高表达可作为评价乳腺癌预后有价值的标记物。

丁苯酞预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1和血脑屏障的影响

目的：探讨丁苯酞预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）和血脑屏障的影响.方法：90只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,NBP预处理低剂量组、中剂量组、高剂量组.采用线栓法制作大脑中动脉栓塞（MCAO）模型,缺血2h再灌注24 h后以干湿重法测定脑组织含水量,伊文思蓝（EB）评估血脑屏障的破坏程度,实时PCR检测MMP-9及TIMP-1 mRNA的表达水平.结果：脑缺血再灌注后,脑组织含水量及EB含量明显增加,MMP-9和TIMP-1表达均增强,与假手术组比较差异有统计学意义.丁苯酞预处理各组脑组织含水量及EB含量较模型组明显下降,MMP-9表达显著减少,TIMP-1表达明显增加,丁苯酞预处理中、高剂量组差异无统计学意义.结论：丁苯酞预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠可通过调节MMP-9/TIMP-1的表达,降低血脑屏障通透性,减轻脑水肿,发挥预防性保护作用.

不同抗氧化剂对胎膜组织MMP-9表达的影响

目的:检测不同抗氧化剂α-硫辛酸(α-LA)和维生素C(Vit C)+维生素E(Vit E)对体外培养的胎膜早破(PROM)胎膜组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法:选取发生胎膜早破的孕妇8例,未临产,剖宫产终止妊娠,其中未足月胎膜早破组(PPROM)和足月胎膜早破组(TPROM)各4例。每例胎膜组织分成3组,分别加入磷酸盐缓冲液(PBS,即对照组)、0.5 mmol/Lα-LA和28.8 g/L Vit C+1.8 g/L Vit E后进行体外培养24h,采用免疫组化染色方法和Western blotting技术检测胎膜组织中MMP-9蛋白表达。结果:(1)免疫组化结果显示:TPROM组织中MMP-9定位于绒毛膜细胞和中性粒细胞的胞浆,且3组间MMP-9平均积分吸光度值无显著差异(P>0.05),而PPROM组织中MMP-9除在绒毛膜细胞和中性粒细胞的胞浆中表达外,在羊膜上皮细胞的胞浆中也强阳性表达,α-LA组及Vit C+Vit E组MMP-9积分吸光度值(0.0212±0.0057和0.0107±0.0009)低于对照组(0.0618±0.0098),Vit C+Vit E组较α-LA组更低(P<0.01)。(2)Western blotting结果显示,TPROM组织中,3组中pro-MMP-9表达水平均无显著差异(P>0.05),但α-LA组及Vit C+Vit E组active MMP-9蛋白相对表达水平(0.64±0.07和0.28±0.13)低于对照组(0.99±0.22),Vit C+Vit E组较α-LA组更低(P<0.05)。在PPROM组织中,α-LA组和Vit C+Vit E组pro-MMP-9/active MMP-9蛋白相对表达水平(0.69±0.08/0.35±0.07和0.38±0.03/0.16±0.05)低于对照组(1.00±0.20/1.00±0.10),Vit C+Vit E组较α-LA组更低(P<0.05)。结论:抗氧化剂可使胎膜早破胎膜组织的MMP-9表达水平下调,且28.8 g/L Vit C+1.8 g/L Vit E作用后的MMP-9表达水平较0.5 mmol/Lα-LA下调更明显,这为胎膜早破胎膜组织的防治提供理论依据。

丹参多酚酸盐对肺癌模型小鼠肺组织中VEGF和MMP-9表达的影响

目的:研究丹参多酚酸盐对肺癌模型小鼠肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法:取C57BL/6小鼠随机分为模型组(生理盐水)、阳性对照组(环磷酰胺50 mg/kg)和丹参多酚酸盐低、中、高剂量组(20、40、80 g/kg),每组10只。小鼠ip乌拉坦1 000 mg/kg,每周2次,连续4周建立肺癌模型;建模后各组小鼠ip相应药物,每日1次,连续给药14 d。比较各组小鼠行为、体征、体质量、抑瘤率、脾脏系数、胸腺系数及肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。结果:模型组小鼠活动度消失,毛色暗淡无光泽,喜扎堆;阳性对照组和丹参多酚酸盐各剂量组小鼠上述现象均好转。阳性对照组和丹参多酚酸盐低、中、高剂量组小鼠的体质量分别为(21.01±2.95)g、(20.89±3.14)g、(21.03±3.02)g、(21.24±3.17)g,抑瘤率分别为(41.12±15.42)%、(36.92±10.42)%、(39.41±12.39)%、(37.19±10.39)%;与模型组比较,其余4组小鼠的脾脏系数、胸腺系数、VEGF(阳性对照组除外)和MMP-9表达均明显降低(P<0.05)。结论:丹参多酚酸盐对肺癌模型小鼠有明显的抑瘤作用,其作用机制可能与抑制VEGF和MMP-9表达相关。

乌司他汀联合甲基泼尼松龙治疗百草枯中毒的临床疗效及对MMP-9的影响

目的评价乌司他汀联合甲基泼尼松龙治疗百草枯中毒的临床疗效及对MMP-9的影响。方法对48例百草枯中毒患者分成常规治疗组和联合治疗组,联合治疗组在常规治疗基础上联用乌司他汀及甲基泼尼松龙,检测两组的MMP-9水平,并比较两组ALI/ARDS、MODS、死亡例数及死亡存活天数。结果联合治疗组的ALI/ARDS、MODS、死亡例数及死亡存活天数显著优于常规治疗组,MMP-9显著降低(P<0.05)。结论早期联合应用乌司他汀及甲基泼尼松龙治疗百草枯中毒能显著降低MMP-9水平,减缓肺间质纤维化的形成,提高百草枯中毒救治的成功率。

苦参碱抑制人肝癌HepG2细胞增殖及其对VEGF、MMP-9表达的影响

目的研究苦参碱(matrine,Ma)抑制人肝癌HepG2细胞增殖及其对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix meta-lloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,探讨其抗肝癌作用可能的分子机制。方法设Ma组和阴性对照组,Ma组设5个药物梯度,采用0.2 mg/ml、0.4 mg/ml、0.8 mg/ml、1.6mg/ml、3.2mg/ml浓度的苦参碱分别作用于对数生长期的HepG2细胞,MTT法检测苦参碱对细胞生长的抑制作用,Real-time PCR检测VEGF mRNA表达,蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测VEGF和MMP-9蛋白的表达。结果苦参碱能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,呈时间和剂量依赖性。苦参碱能下调VEGF mRNA表达(P<0.05)和VEGF、MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。结论苦参碱在体外能抑制肝癌细胞增殖,呈时间和剂量依赖性,其可能的分子机制是通过下调VEGF和MMP-9蛋白表达,抑制肝癌血管生成,进而起到抗肝癌作用。

MMP-2、MMP-9在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的观察膀胱移行细胞癌组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达情况,并探讨其表达的临床意义。方法选取海南省农垦三亚医院2012年1月至2015年1月收治的30例膀胱移行细胞癌组织标本作为观察组,另选取非膀胱肿瘤手术中切术的正常膀胱组织标本30例作为对照组,对所有标本黏膜中MMP-2、MMP-9的表达情况与表达强度通过免疫组化SP法联合高清晰度彩色医学图文分析系统进行检测,分析其表达的临床意义。结果观察组标本中的MMP-2、MMP-9的表达比对照组标本的表达明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且MMP-2、MMP-9在正常膀胱上皮呈阴性表达;观察组标本中的MMP-2、MMP-9呈现高表达状态,且表达强度随着疾病分期、分级的增高而逐渐增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在膀胱癌侵袭转移过程中,存在MMP-2、MMP-9的参与,在膀胱移行细胞癌中MMP-2、MMP-9的表达对其预后判断具有非常重要的参考价值。

老年单纯收缩期高血压颈动脉重构与脉压及基质金属蛋白酶-9的相关性研究

目的探讨老年单纯收缩期高血压(ISH)患者颈动脉内膜-中层厚度(IMT)与脉压(PP)及血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)之间的相关性。方法收集ISH患者52例(ISH组)、混合性高血压(SDH)患者48例(SDH组)以及老年健康体检组50例(健康对照组),分别检测脉压(PP)、血MMP-9及IMT,分析三者之间的关系。结果 ISH组、SDH组PP、MMP-9水平及IMT均高于健康对照组(P<0.01),且ISH组较SDH组高(P<0.05),IMT与SBP、DBP、PP及MMP-9呈正相关(r=0.333,r=0.263,r=0.573,r=0.742,P<0.01)。多元逐步回归分析表明,PP、MMP-9为IMT的独立危险凶素(P<0.05)。结论 ISH组患者颈动脉重构程度较SDH组重,PP及MMP-9水平升高与IMT增厚呈正相关,PP及MMP-9升高可能是造成动脉粥样硬化的重要因素。

尿激酶溶栓治疗对急性脑梗死出血患者血清基质金属蛋白酶-9水平的影响

目的 探讨尿激酶溶栓治疗对急性脑梗死出血患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的变化及其临床疗效。方法 选择2012年10月-2015年10月在我院诊治的急性脑梗死出血患者80例,根据随机数字表法分为治疗组与对照组各40例。常规基础治疗基础上,对照组应用重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓治疗,治疗组应用尿激酶溶栓治疗,观察两组患者神经功能缺损、临床疗效、并发症及血清MMP-9水平的变化,治疗观察时间为7d。结果 治疗后治疗组与对照组NIHSS评分分别为（6.35±1.33）分和（9.18±1.83）分,明显低于治疗前的（14.25±1.55）分和（14.28±1.86）分（P〈0.05）,同时组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。经过治疗,对照组和治疗组的有效率分别为82.5%、95.0%。治疗组治疗期间的再出血、颅内感染、迟发脑积水等并发症发生情况明显少于对照组（P〈0.05）。治疗后治疗组与对照组血清MMP-9含量分别为（82.33±12.83）ng/mL和（182.33±11.44）ng/mL,明显低于治疗前的（534.25±16.12）ng/mL和（531.28±21.23）ng/mL（P〈0.05）,同时组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论尿激酶溶栓治疗能缓解急性脑梗死出血患者神经功能障碍,降低并发症的发生,从而提高治疗疗效,其作用的发挥可能与有效促进血清MMP-9含量降低有关。

高血压和动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶-9水平的检测及临床意义

目的探讨高血压和动脉粥样硬化患者中基质金属蛋白酶9(MMP9)的水平及临床意义。方法采用ELISA方法对高血压(208例)和动脉粥样硬化(48例)患者、健康对照者(50例)血清MMP9水平进行测定。结果高血压患者、动脉粥样硬化患者、对照组MMP9水平分别为(368.19±48.83)ng/ml、(544.33±50.71)ng/ml、(255.82±25.10)ng/ml,高血压患者血清MMP9水平与动脉粥样硬化患者相比有极显著性差异(P<0.01),且两组与对照组比均有极显著性差异(P<0.01)。结论血清MMP9水平可作为高血压患者向动脉粥样硬化发展的预警指标。

氟伐他汀对早期糖尿病肾病患者Hcy、APN、MMP-9和mAlb的影响

目的观察氟伐他汀对早期糖尿病肾病(DN)患者尿微量白蛋白(m Alb)、同型半胱氨酸(Hcy)、脂联素(APN)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法 58例早期糖尿病肾病患者随机分为氟伐他汀组30例和饮食治疗组28例,两组患者疗程均为8周,同时选取55例血糖正常人群作为对照组,分别检测对照组和早期DN组患者治疗前后的m Alb、Hcy、APN、MMP-9、ALT水平,并对检测结果进行统计学分析。结果氟伐他汀组、饮食治疗组治疗前的m Alb、Hcy、MMP-9水平均显著高于对照组,APN水平显著低于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01),而ALT水平比较则差异无统计学意义(P>0.05);饮食治疗组治疗后m Alb水平与治疗前比较显著下降(P<0.01),而Hcy、APN、MMP-9水平变化不明显(P>0.05);氟伐他汀组治疗后Hcy、MMP-9、m Alb水平与治疗前比较均显著下降,APN水平显著升高,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论 Hcy、APN、MMP-9水平与糖尿病肾病密切相关,氟伐他汀有降低Hcy、MMP-9、m Alb及升高APN的作用。

慢性肾衰竭患者血清MMP-9和TIMP-1表达及意义

目的检测慢性肾衰竭（CRF）患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达状况，拟在探讨其与肾脏纤维化的关系。方法采用ELISA法测定60例CRF患者（氮质血症期15例，肾衰竭期24例，尿毒症终末期21例）和20例正常对照组血清MMP-9、TIMP-1水平，同时收集患者临床资料，分析血清MMP-9、TIMP-1水平和MMP-9／TIMP-1比值与肾功能损害等临床指标之间的相关性。结果CRF患者各期血清MMP-9、TIMP-1水平明显升高，MMP-9／TIMP-1比值显著降低，随着肾小球滤过率（GFR）下降，MMP-9、TIMP-1呈降低趋势，而MMP-9／TIMP-1比值却逐渐上升。血清TIMP-1水平和MMP-9／TIMP-1比值与血肌酐、GFR及血红蛋白呈高度相关性。结论血清MMP-9、TIMP-1参与了CRF的进展，血清TIMP-1水平或MMP-9／TIMP-1比值能较好地反映肾脏纤维化的程度。

基质金属蛋白酶-2、-9在恶性腹水中的表达

目的通过定量检测腹水中MMP-2、MMP-9（Matrix metalloproteinase-2,-9）的含量,为临床良恶性腹水性质的鉴别工作提供理论依据。方法选择2004-07-2004-12间,哈尔滨医科大学附属第二医院住院患者腹水标本37例。其中,男性患者30例,女性患者7例。年龄平均为45岁±6岁。分为3组：肝硬化腹水组12例,结核性腹膜炎腹水组13例,消化系统恶性肿瘤腹水组12例。采用ELISA法分别检测腹水中MMP-2、MMP-9的含量。结果消化系统恶性肿瘤组中MMP-2含量为161.85 ng/mL±85.88 ng/mL,明显高于肝硬化组93.00 ng/mL±31.69 ng/mL和结核性腹膜炎组107.11 ng/mL±38.70 ng/mL。MMP-9在肝硬化腹水、消化系统恶性肿瘤腹水、结核性腹膜炎腹水中依次升高,分别为9.02 ng/mL±2.18 ng/mL,18.36 ng/mL±8.26 ng/mL,48.90 ng/mL±16.37 ng/mL。结论MMP-2、MMP-9,对鉴别良恶性腹水具有重要意义。

普伐他汀对不稳定型心绞痛患者血清白介素-6、10和基质金属蛋白酶-9水平的影响及疗效观察

目的探讨普伐他汀对不稳定型心绞痛患者IL-6、IL-10和MMP-9水平的影响及疗效观察。方法选择不稳定型心绞痛患者80例,随机分为观察组及对照组,两组患者均予以阿司匹林、肝素、硝酸酯类、β-受体阻滞剂及血管紧张素转换酶抑制剂等治疗,观察组患者加用普伐他汀片20 mg,1次/d,连用8周。结果治疗8周后,观察组患者TC、TG和LDL-C水平较前明显下降、HDL-C水平较前明显上升(P<0.05)。而对照组治疗前后血脂水平无明显变化(P>0.05);同时两组患者血清IL-6和MMP-9水平较前明显下降,IL-10水平较前明显上升(P<0.05或P<0.01),且观察组下降或上升幅度较对照组更明显(P<0.05);观察组患者的临床总有效率明显高于对照组(χ2=4.22,P<0.05)。结论普伐他汀治疗不稳定型心绞痛临床效果较好,能明显降低血脂水平,调节血清炎症介质水平,减轻斑块炎症反应,增强冠脉粥样硬化稳定性。

阿托伐他汀对大鼠颈动脉粥样硬化易损斑块及hs-CRP和MMP-9表达的影响

目的研究阿托伐他汀对大鼠颈内动脉粥样硬化易损斑块面积、数目及对基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达和血清hs-CRP的影响。方法将48只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、常规剂量组、强化剂量组,14 w后采血测量hs-CRP,光镜下观察颈内动脉粥硬化易损斑块病理学变化,计数易损斑块数目及面积,采用免疫组织化学法检测易损斑块中MMP-9的表达。结果与模型组相比,常规剂量组和强化剂量组易损斑块计数、面积大小、MMP-9表达均明显降低(P<0.01),强化剂量组又低于常规剂量组(P<0.05),强化剂量组和常规剂量组血清hs-CRP测定结果均明显低于模型组(P<0.01),强化剂量组又低于常规剂量组(P<0.05)。结论阿托伐他汀能够稳定及减少颈内动脉粥样硬化易损斑块的形成和进展,对血清hs-CRP及MMP-9的表达具有抑制作用,并且其抑制作用与剂量具有量效关系。

MMP-9和TIMP-1在肝门胆管癌中的表达和临床意义

目的 研究肝门胆管癌组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的表达特征及临床病理意义.方法 应用免疫组化S-P法检测MMP-9,TIMP-1在54例肝门胆管癌组织及15例正常胆管组织中的表达,对MMP-9和TIMP-1的表达与肝门胆管癌的临床病理参数进行分析.结果 MMP-9和TIMP-1的表达阳性率分别是79.6%和72.2%,均高于正常胆管组织中的表达（P〈0.01）.MMP-9和TIMP-1的表达与肝门胆管癌患者性别、年龄、肿瘤大小无关（P〉0.05）,而与分化程度、有无转移、手术方式、生存期相关（P〈0.05）.MMP-9在肝门胆管癌中的表达与TIMP-1的表达呈密切正相关.结论 MMP-9和TIMP-1 表达可以反映肝门胆管癌的临床病理特征、生物学行为、侵袭、转移及预后,可以作为判断肝门胆管癌恶性程度、转移及预后的重要参考指标.