错配PCR对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecI基因点突变的分析

目的建立用于检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)上mecI常见突变位点的错配聚合酶链反应(PCR),并用该方法分析上海地区分离MRSA中mecI G→T突变的发生情况。方法用头孢西丁纸片扩散法、mecA基因PCR法检测MRSA,用琼脂稀释法检测细菌的最低抑菌浓度(MIC),用PCR检测mecI基因,建立错配PCR并用20株mecI基因和mec启动子区分析清楚的菌株对该方法进行评价,用错配PCR分析111株MRSA中mecI基因的突变情况。结果111株mecI阳性的MRSA中,mecI43位突变的5株,mecI202位突变的102株,另有4株MRSA的mecI43位和202位碱基均无突变。结论就其简便易行和准确性而言,错配PCR可用于检测mecI上已知的突变。

MecI基因缺失在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中的检测情况

金黄色葡萄球菌（staphylococcus aureus）是人类一种重要的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎,甚至败血症、脓毒症等全身感染. 但随着耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的不断出现,金黄色葡萄球菌引起感染的治疗成为临床一个重大的难题. MRSA主要的耐药机制是因为获得了外源性的耐药基因MecA.MecA基因的表达受多种因素的影响,其中MecI基因为负性调节因子,其产物可以抑制MecA基因的表达. 在临床分离的MRSA中往往会出现MecI基因的缺失、碱基的置换、插入、丢失等突变,使MecI基因不能正常表达,从而解除了对MecA基因表达的抑制作用[1],表现为对甲氧西林的耐药.本文通过分析MRSA中MecI基因检测情况, 初步探讨山西地区MRSA主要流行的耐药分子机制.

聚合酶链反应检测mecA和mecI及其对葡萄球菌甲氧西林耐药的影响

目的了解葡萄球菌甲氧西林耐药基因mecA和调节基因mecR中的抑制基因mecI在葡萄球菌中的分布,探讨mecA、mecI和β-内酰胺酶对甲氧西林耐药性的影响。方法琼脂稀释法测定158株葡萄球菌苯唑西林MIC;聚合酶链反应检测mecA和mecI;用内切酶TrulⅠ进行mecI酶切分型。结果 158株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌(SA)66株,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)92株,葡萄球菌对苯唑西林的总耐药率达44.3%(70/158)。158株葡萄球菌中,检出mecA阳性70株,其中SA 8株,CNS 62株。70株mecA阳性葡萄球菌中,检出mecI阳性12株,其中SA7株,CNS 5株;88株mecA阴性葡萄球菌中未检出mecI。对mecA阴性、苯唑西林MIC≥4μg/mL的菌株进行抑制实验后,再测定苯唑西林MIC,抑制后MIC下降8倍以上。结论耐甲氧西林葡萄球菌以mecA为其主要的甲氧西林耐药决定子;β-内酰胺酶和mecI基因对葡萄球菌甲氧西林耐药有一定的影响。

mecA、mecI和mecR1基因在耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌中的分布与变异

目的检测126株临床分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌中mecA、mecI和mecR1基因分布与变异。方法采用多重PCR的方法,使用11条特异性的引物,分别检测mecA、mecI和mecR1基因最易发生突变的位点。结果126株临床分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌均检测到mecA基因,阳性率100.0%,3株发现在与引物P1退火的区域发生突变,2株在mecA基因的内切酶ClaI区域发生变异,39株未发现在mecI和mecR1基因内发生突变,42株发现在mecR1基因的跨膜区(PB domain)发生突变,mecR1基因青霉素结合区发生突变18株,27株发生mecI基因的缺失,9株同时发生mecI和mecR1基因缺失。结论研究结果表明,mecA基因在耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌中比较稳定,较少发生突变,mecI和mecR1基因容易发生缺失,检测临床分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌中mecA、mecI和mecR1基因的分布和变异对于正确分析和解释耐药性的结果、追踪耐药菌株来源有重要意义。

MRSA mecI基因和mec启动子的多态性研究

目的本研究的目的在于了解上海地区分离耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)中mecI基因和mec启动子的多态性分布状况。方法收集上海地区分离的金黄色葡萄球菌143株,用头孢西丁纸片扩散试验、苯唑西林MIC(最小抑菌浓度)测定和mecA基因检测等方法进行MRSA的筛选,RAPD法进行细菌的同源性分析,最后通过PCR和序列分析技术研究分布状况。结果头孢西丁筛选试验、苯唑西林MIC试验与mecA基因PCR扩增相比有100％的一致性,均证实这些菌株为MR SA,RAPD法证实这些菌株分为4个型,在21株菌中有20株有mecI基因,所有的菌株有mec启动区,所有MRSA都有mecI或mec启动子的改变,其中mec的改变有mecI缺失、mecI 43位碱基G→T和mecI 202位碱基C→T。mec启动子的改变有G→T和C→A。结论mecI或mec启动子突变在临床分离的MRSA中普遍存在,上海地区MRSA以mecI 202位碱基突变最常见。

极端气候事件综合危险性等级指标构建及近60年来长江流域极端气候综合分析

本文利用经过均一化订正的长江流域共669个气象站近60年(1961—2020年)逐日观测资料,采用相对阈值和绝对阈值相结合的极值分析方法,对长江流域近60年极端高温事件、极端低温事件、极端干旱事件和极端降水事件进行识别,分析了年发生频率和线性变化趋势.在此基础上,考虑到全国极端气候事件发生情况,构建了多个极端气候事件综合危险性等级指标,比较客观地给出了长江流域极端气候事件综合危险性等级.研究结果表明,相对于全国其他地区,长江流域大部分地区极端气候综合危险性等级较高,虽然自1961年以来综合年发生频率呈现弱的线性减少趋势,但自20世纪90年代以来,长江流域极端气候事件发生的危险性相对于全国其他地区明显偏高.通过对不同极端气候事件危险性和变化规律研究,结果表明:长江流域近60年极端干旱事件年发生频率呈现线性减少趋势,与全国他其区域相比较,长江流域大部分地区极端干旱发生的危险性等级都在中级以上,说明长江流域容易发生极端干旱事件;长江流域近60年极端降水事件年发生频率呈现弱的增加趋势,危险性等级指数分析表明,高危险区主要位于长江中下游地区,湖南西部、江西大部、湖北南部等地发生极端降水事件的危险性很高;近60年长江流域大部分地区极端高温事件显著增加,尤其进入21世纪以来发生更加频繁,但相对于全国其他地区,危险性等级较低;近60年长江流域极端低温事件显著减少,但相对于全国其他地区,极端低温事件发生的危险性增加明显.进入21世纪以来,长江流域极端气候事件的综合危险性不断增加,极端高温和极端干旱相伴而生的高温干旱复合型事件频繁发生,极端降水事件和极端低温事件在全国的占比不断升高,造成的社会经济影响越来越严重,说明长江流域加强极端气候事件风险防范的重要性和紧迫性.

确定投资组合权重的MC^2线性规划方法

任何投资者都希望在投资中获取大的回报 ,但较大的回报通常伴随着较大的风险。为了分散风险或减少风险 ,投资组合是一种常用的投资技术。本文提出一种新的投资组合方法 ,可以同时概括投资项目的多种预测结果和多位投资专家的观点 ,在综合多方面投资建议的基础上 。

耐甲氧西林葡萄球菌耐药特点及其分子生物学基础

耐甲氧西林葡萄球菌是医院内和社区感染的重要致病菌,所致感染治疗困难,因此成为各国学者关注与研究的热点。本文就耐甲氧西林葡萄球菌的耐药特点以及介导其耐药性的葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)中的mec DNA、mecA、mecI、mecRI基因进行综述。

俯卧人字位微创经皮肾镜联合输尿管软镜处理肾鹿角状结石

目的俯卧人字位微创经皮肾镜联合输尿管软镜(MECIS)治疗肾鹿角状结石的临床应用价值。方法回顾性分析我院2016年5至8月俯卧人字位MECIS治疗肾鹿角状结石的30例患者的临床资料。平均年龄(42.4±10.9)岁,男/女比10/20。体重指数(BMI)23.1~30.1。左/右比12/18,结石最大直径3.4~5.4cm。结果所有患者均在该体位下,采用单F20经皮肾镜结合输尿管软镜完成手术,平均手术时间(116±9.83)min。术后结石清除率(SFR)83.3%;5例结石残留,其中2例行二期微创经皮肾镜取石术(mPCNL),1例行体外冲击波碎石术(ESWL),2例临床随访。术后1月SFR87%。术中无肠道损伤、感染性休克等并发症,术后1例输血,3例发热,保守处理治愈。结论俯卧人字位微创经皮肾镜联合输尿管软镜治疗肾鹿角型结石,技术可行,结石清除率高,能有效减少穿刺通道和降低并发症率。软镜操作者体位舒适,经皮肾镜操作者对体位熟悉,俯卧人字位是操作两镜联合的理想体位。