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力生长因子对牙周膜干细胞增殖分化的影响 被引量:1
1
作者 屠腾 刘艳丽 +2 位作者 王惠 赵萤 张旻 《口腔疾病防治》 2023年第2期86-93,共8页
目的探讨力生长因子(mechano⁃growth factor,MGF)对牙周膜干细胞增殖、分化的影响及其作用的分子机制。方法采用免疫磁珠法分选人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),流式细胞仪检测表面标志物,并观察分选细胞的克... 目的探讨力生长因子(mechano⁃growth factor,MGF)对牙周膜干细胞增殖、分化的影响及其作用的分子机制。方法采用免疫磁珠法分选人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),流式细胞仪检测表面标志物,并观察分选细胞的克隆形成能力及多向分化能力;CCK8法检测不同浓度MGF功能肽段(MGF⁃Ct24E肽)作用下PDLSCs的增殖活性;Western blot检测MGF⁃Ct24E肽作用下PDLSCs中的增殖细胞核抗原(pro⁃liferating cell nuclear antigen,PCNA)、碱性螺旋环螺旋转录因子Scleraxis、Ⅰ型胶原ɑ1(collagen type I alpha 1,COL1A1)、成骨细胞特异性转录因子Osterix、Yes相关蛋白(Yes⁃associated protein,YAP)、磷酸化YAP(phosphory⁃lation yes⁃associated protein,P⁃YAP)蛋白表达量;免疫荧光观察YAP的表达情况;siRNA干扰YAP表达后,观察PDLSCs中MGF⁃Ct24E作用下PCNA、Scleraxis和COL1A1的表达。结果免疫磁珠分选的PDLSCs高表达干细胞表面标志物CD29、CD90、CD105,低表达造血细胞表面标志物CD34、CD45;细胞具有较强的克隆形成能力,成骨诱导茜素红染色后可见红色钙结节,成脂诱导油红O染色后可见红色脂滴;50 ng/mL和100 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,PDLSCs的增殖活性增强(P<0.05);细胞中PCNA、Scleraxis和COL1A1蛋白表达上调,而Osterix蛋白表达量下调(P<0.05);50 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,YAP蛋白357位点磷酸化水平增强(P<0.05),免疫荧光染色观察发现,YAP蛋白在胞核聚集;MGF⁃Ct24E肽作用下,siRNA抑制YAP表达后,细胞中PCNA、Scler⁃axis蛋白表达量下调(P<0.05)。结论MGF通过激活YAP促进PDLSCs增殖及成纤维分化。 展开更多
关键词 力生长因子 牙周膜 牙周膜干细胞 牙周膜成纤维细胞 Yes相关蛋白 P⁃Yes相关蛋白 细胞增殖 成纤维分化 成骨分化 再生修复
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Expression and subcellular localization of mechano-growth factor in osteoblasts under mechanical stretch 被引量:10
2
作者 ZHANG BingBing, XIAN ChengYu, LUO YanFeng & WANG YuanLiang Research Center of Bioinspired Materials Science and Engineering, Bioengineering College, Chongqing University, Chongqing 400030, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2009年第10期928-934,共7页
Mechano-growth factor (MGF) is a stretch sensitive factor in myocytes, and it might also be produced by other mechanocytes under mechanical stimulation. In this study, both the mRNA and protein expression of MGF were ... Mechano-growth factor (MGF) is a stretch sensitive factor in myocytes, and it might also be produced by other mechanocytes under mechanical stimulation. In this study, both the mRNA and protein expression of MGF were detected in stretched osteoblasts. Quantitative analysis showed that a cyclic stretching stimulation caused a quick and sharp increase of MGF mRNA and protein expression from a low basal level under no stretch; the mRNA and protein levels respectively peaked in 6 and 12 h to 5 and 5.2 fold over the basal level and returned to normal by 24 h. The subcellular distribution of MGF protein was revealed by immunofluorescence analysis to be restricted to the nucleus. We concluded that cyclic stretching stimulation could induce MGF expression in osteoblasts in a pulsing fashion; and the nuclear distribution of MGF suggested that MGF might act in mechanocytes as an autocrine growth factor. 展开更多
关键词 mechano growth factor (MGF) INSULIN-LIKE growth factor-1 (IGF-1) OSTEOBLASTS stretching SUBCELLULAR localization
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尾吊损害大鼠认知功能并下调海马学习记忆相关蛋白表达(英文) 被引量:12
3
作者 陈海龙 吕柯 +6 位作者 曲丽娜 张永亮 毕蕾 钟萍 冀国华 曹宏卿 李莹辉 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期426-432,共7页
目的探讨模拟微重力环境对记忆功能和学习相关蛋白表达的影响。方法研究采用7 d尾吊模拟微重力环境,利用水迷宫和跳台检测记忆能力,利用免疫印迹技术检测记忆相关蛋白、神经保护蛋白和抗氧化酶蛋白表达,利用RT-qPCR检测基因表达。结果 S... 目的探讨模拟微重力环境对记忆功能和学习相关蛋白表达的影响。方法研究采用7 d尾吊模拟微重力环境,利用水迷宫和跳台检测记忆能力,利用免疫印迹技术检测记忆相关蛋白、神经保护蛋白和抗氧化酶蛋白表达,利用RT-qPCR检测基因表达。结果 SD大鼠尾吊7 d后,空间记忆能力和位置记忆能力均减弱。尾吊降低了大鼠海马学习相关蛋白NR1/2B-CaMKⅡ-CREB通路的活化,机械生长因子MGF及其下游Nrf2介导的神经保护蛋白HO-1表达也明显减少。另外,尾吊抑制了抗氧化酶SOD2和GPx的基因和蛋白表达。这些结果提示,模拟微重力环境明显抑制了海马NR1/2B和MGF信号途径。结论 NR和MGF可能分别作为尾吊介导的认知障碍的调节因子和保护因子,这为微重力环境下认知障碍的学习记忆相关蛋白调节理论奠定了基础。 展开更多
关键词 微重力 空间学习 NMDA受体 机械生长因子
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力生长因子在大肠杆菌中的表达及活性分析 被引量:10
4
作者 张兵兵 江鹏 +4 位作者 鲜成玉 李玉筱 李大军 唐丽灵 王远亮 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1180-1185,共6页
MGF(Mechano-growth factor)是一种IGF-1变体形式,研究发现该因子具有应力敏感性,并且具有促进肌肉肥大、再生以及神经损伤修复的功能。通过RT-PCR从拉伸刺激的人成骨细胞中克隆MGF cDNA序列,并去除5'端9bp的序列,使N端缺少对肠激酶... MGF(Mechano-growth factor)是一种IGF-1变体形式,研究发现该因子具有应力敏感性,并且具有促进肌肉肥大、再生以及神经损伤修复的功能。通过RT-PCR从拉伸刺激的人成骨细胞中克隆MGF cDNA序列,并去除5'端9bp的序列,使N端缺少对肠激酶(Enterokinase,EK)具有抑制作用的脯氨酸,将截短型MGF(des(1-3)MGF)cDNA序列克隆入pET32a(+)质粒,构建重组表达质粒。重组质粒转化E.coli BL21(DE3),在30oC培养下以可溶形式表达融合蛋白Trx/des(1-3)MGF,采用离子交换层析和Ni2+金属亲和层析,获得纯度95%以上的融合蛋白。再对融合蛋白EK酶切,rpHPLC分离获得纯度达98%的des(1-3)MGF,SDS-PAGE及质谱分析蛋白分子量与理论值相符。生物活性实验显示,所制备的des(1-3)MGF比des(1-3)IGF-1更显著的促进MC3T3-E1细胞的增值和迁移。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 力生长因子 原核表达 增殖 迁移
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力生长因子及其E肽对成骨细胞分化的影响 被引量:6
5
作者 张兵兵 王远亮 +4 位作者 杨力 潘长江 傅亚 邓墨渊 李玉筱 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第3期304-312,共9页
力生长因子(mechano growth factor,MGF)是新近发现的一种生长因子,由Igf-1基因剪接变异产生,拉伸刺激会促使成骨细胞表达力生长因子.比较分析了MGF及其羧基端E肽(MGF-Ct24E)对成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分化的影响.结果显示:MGF和MGF-Ct... 力生长因子(mechano growth factor,MGF)是新近发现的一种生长因子,由Igf-1基因剪接变异产生,拉伸刺激会促使成骨细胞表达力生长因子.比较分析了MGF及其羧基端E肽(MGF-Ct24E)对成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分化的影响.结果显示:MGF和MGF-Ct24E具有显著激活胞外信号调节激酶1/2(Erk1/2)的作用,并降低了成骨细胞碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达,促进了骨桥蛋白(OPN)的表达,减少了核心绑定因子(corebinding factor1,Cbfα-1)的核转运量,对成骨细胞的分化具有延迟效应,这种效应通过抑制剂PD98059抑制Erk1/2的活化得到逆转;MGF还能显著激活磷脂酰肌醇3-激酶信号通路中的蛋白激酶B(Akt),该活化作用对成骨细胞分化是必需的,钙沉积分析显示长期培养下的细胞MGF促进了矿化节结的形成.这些结果说明,MGF-Ct24E对成骨细胞的分化具有抑制作用,这种作用与Erk1/2的活化有关,MGF因为包含E肽和IGF-1部分,能分别激活Erk1/2和Akt,因此对成骨细胞分化表现出双重效用,在成骨细胞分化早期,具有一定的延迟效应,而在分化晚期对成骨细胞分化表现出促进作用. 展开更多
关键词 力生长因子 胰岛素样生长因子-1 成骨细胞 分化
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不同时间电刺激训练对大鼠骨骼肌IGF-1不同拼接体mRNA表达的时序性影响 被引量:5
6
作者 黄力平 曹龙军 +2 位作者 周石 李庆雯 向珩 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期399-402,I0001,共5页
目的:观察不同时间电刺激训练对肌肉组织IGF-1不同变构体mRNA表达的时序变化,探讨电刺激促进肌肉生长和修复的机制。方法:SD大鼠30只,随机分为5组,每组6只,分别为对照组和1、2、3、4周电刺激组,刺激部位为右侧腓肠肌。训练后采用实时荧... 目的:观察不同时间电刺激训练对肌肉组织IGF-1不同变构体mRNA表达的时序变化,探讨电刺激促进肌肉生长和修复的机制。方法:SD大鼠30只,随机分为5组,每组6只,分别为对照组和1、2、3、4周电刺激组,刺激部位为右侧腓肠肌。训练后采用实时荧光定量PCR法对腓肠肌IGF-1Ea和MGF mRNA表达进行检测。结果:各电刺激组MGF mRNA表达较对照组分别增长了3.97±0.86、4.05±0.71、4.13±0.80、4.24±0.77倍(P<0.01),但MGF mRNA表达在4个实验组间依序比较没有显著性差异(P>0.05),呈现训练后迅速升高并达平台;而IGF-1Ea的mRNA表达比对照组分别增长了1.55±0.29、3.99±0.83、5.11±0.82、5.27±0.86倍(P<0.01),1、2、3、4周训练的实验组依序比较显示,随刺激时间延长,表达量逐渐升高,在第3周达平台。3周后两者都达到较高水平。结论:①MGF的mRNA受外界机械刺激迅速大量表达至高峰,没有时序性变化,表明MGF在启动肌肉生长修复早期事件中起关键性作用;②IGF-1Ea在促进肌肉生长修复中与MGF有序贯性作用;③IGF-1生长因子变构体是电刺激训练引起的肌肉适应性肥大的分子生物学机制之一,在电刺激训练中需要至少3周才能发挥两者共同的功效。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1Ea 机械力生长因子 电刺激 肌肉肥大
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胰岛素样生长因子-I对骨骼肌生长和修复研究进展 被引量:9
7
作者 曹龙军 黄力平 周石 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2006年第3期242-245,共4页
生长激素(GH/)胰岛素样生长因子-I(IGF-I)轴是肌肉生长的重要调节因子之一。虽然许多组织都能表达IGF-I,但它们各自的功能不同。骨骼肌是IGF-I的靶器官,同时也分泌IGF-I。骨骼肌组织表达的IGF-I对骨骼肌损伤后的再生、修复非常重要,也... 生长激素(GH/)胰岛素样生长因子-I(IGF-I)轴是肌肉生长的重要调节因子之一。虽然许多组织都能表达IGF-I,但它们各自的功能不同。骨骼肌是IGF-I的靶器官,同时也分泌IGF-I。骨骼肌组织表达的IGF-I对骨骼肌损伤后的再生、修复非常重要,也是通过适当干预保持肌肉质量的重要调节因素。主要讨论GH/IGF-I在促进骨骼肌再生和修复中的作用,并讨论其在运动康复中的应用前景。 展开更多
关键词 生长激素 胰岛素样生长因子-I 力生长因子
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不同频率张应变刺激对骨骼肌卫星细胞生长的影响 被引量:7
8
作者 危小焰 史仍飞 卞玉华 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2008年第6期52-56,共5页
目的:探讨不同频率机械张应变刺激对骨骼肌卫星细胞形态及细胞增殖指标的影响,为寻找适宜的机械刺激负荷提供实验依据。方法:应用Fx-4000T细胞应变加载系统,时体外培养的大鼠骨骼肌卫星细胞施加15%张应变,频率分别为0 Hz、0.5 Hz、1 Hz... 目的:探讨不同频率机械张应变刺激对骨骼肌卫星细胞形态及细胞增殖指标的影响,为寻找适宜的机械刺激负荷提供实验依据。方法:应用Fx-4000T细胞应变加载系统,时体外培养的大鼠骨骼肌卫星细胞施加15%张应变,频率分别为0 Hz、0.5 Hz、1 Hz和2 Hz,加栽时间为每天6 h,连续4 d;以静置培养的卫星细胞作为对照组。采用流式细胞术检测卫星细胞周期变化,采用RT-ICR技术检测不同频率张应变下膏骼肌卫星细胞MGF mRNA表达水平的变化。结果:张应变刺激后的细胞形态为典型长梭形,且排列呈方向性和规律性。结果:与对照组相比,0.5 Hz、1 Hz和2 Hz组的G_0/G_1期细胞数量显著降低,而0.5 Hz和1Hz组的S+G_2/M期细胞数量显著增加(P<0.05);与0 Hz组相比,0.5 Hz、1 Hz和2 Hz组的G_0/G_1期细胞数量显著降低,而S+G_2/M期细胞数量显著增加(P<0.05)。RT-PCR结果显示,与对照组相比,各实验组的MGF mRNA的表达量均增加。但仅有1 Hz组显著高于对照组(P<0.05)。结论:机械张应变刺激促进骨骼肌卫星细胞的增殖能力和MGF mRNA表达,且与张应变刺激的频率有关,其中1Hz的刺激频率最适宜。 展开更多
关键词 刺激 卫星细胞 细胞周期 频率 机械生长因子 动物实验
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外力作为信号诱导基因的选择性剪接与力生长因子表达 被引量:7
9
作者 唐丽灵 李大军 王远亮 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期454-459,共6页
许多种类的细胞都响应力信号,人们将这些细胞称为力效应细胞(mechanocyte).应力可引起细胞在基因水平或表达水平的调控,其中胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGFⅠ)是力学敏感因子.对骨骼肌的长期拉伸实验发现,IGF-... 许多种类的细胞都响应力信号,人们将这些细胞称为力效应细胞(mechanocyte).应力可引起细胞在基因水平或表达水平的调控,其中胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGFⅠ)是力学敏感因子.对骨骼肌的长期拉伸实验发现,IGF-Ⅰ不仅表达量受到拉伸刺激的调控,而且存在多种变异体形式,其中一种对力刺激敏感,只在拉伸作用下产生,命名为力生长因子(mechano growth factor,MGF).进一步研究发现,MGF能激活卫星细胞、促进成肌细胞增殖,在治疗肌损失、预防心肌损伤和修复神经损伤等方面有重要的作用.机械拉伸也可以使成骨细胞表达MGF,研究表明,对成骨细胞施加应变为15%的周期性拉伸刺激,细胞的IGFⅠ表达量增加,同时表达MGF剪接变异体.对MGF的深入研究可望在疾病治疗和组织工程修复领域取得广泛的应用. 展开更多
关键词 力刺激 胰岛素样生长因子Ⅰ 力生长因子 选择性剪接
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大负荷运动及其恢复期间大鼠骨骼肌超微结构及MGF的变化 被引量:4
10
作者 潘同斌 王晓雪 +3 位作者 唐芳 左伟 刘跃兵 温慧霞 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期868-871,共4页
目的:观察大负荷运动及其恢复期间大鼠骨骼肌超微结构及机械生长因子(MGF)的变化。方法:36只8周龄健康雄性SD大鼠随机分为6组,每组6只:安静对照组(C组)和力竭运动后即刻组(E0组)、12h组(E12组)、24h组(E24组)、48h组(E48组)、72h组(E72... 目的:观察大负荷运动及其恢复期间大鼠骨骼肌超微结构及机械生长因子(MGF)的变化。方法:36只8周龄健康雄性SD大鼠随机分为6组,每组6只:安静对照组(C组)和力竭运动后即刻组(E0组)、12h组(E12组)、24h组(E24组)、48h组(E48组)、72h组(E72组)。各力竭运动组尾部负重为3%体重,进行1周负重力竭性游泳运动,每天1次,并于末次力竭后不同时间点取材。采用ELISA方法检测大鼠血清及腓肠肌MGF表达,电镜下观察大鼠股直肌超微结构变化。结果:(1)1周大负荷游泳运动之后,骨骼肌超微形态结构发生了程度不同的改变,具体表现为肌间隙增宽,内质网、线粒体可见轻度变形,肌原纤维疏松变细,出现Z线扭曲等。E0组和E24组上述改变更加明显。(2)与安静对照组相比,力竭运动各组骨骼肌MGF均明显增加(P<0.05),其中E24组与安静对照组相比有极显著性差异(P<0.01)。血清MGF也有相似变化,E0组与安静对照组相比有极显著性差异(P<0.01)。结论:1周大负荷游泳运动可引起一定程度的骨骼肌微损伤,大负荷运动及其恢复期间,大鼠骨骼肌和血清MGF明显增加,提示MGF可能与肌肉组织的微损伤修复有关。 展开更多
关键词 大负荷运动 骨骼肌超微结构 MGF
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力生长因子E肽与应力刺激对成骨细胞基因表达的影响 被引量:3
11
作者 林福春 张兵兵 +5 位作者 辛娟 向燕 鲜成玉 邓墨渊 彭琴 王远亮 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第1期65-71,共7页
目的应用基因芯片技术分析在力生长因子E肽(MGF-Ct24E)和应力作用下成骨细胞基因表达的差异。方法体外培养原代成骨细胞,分别对细胞施加周期性拉伸刺激(应变12%,频率0.5 Hz)和MGF-Ct24E(50 mg/L)直接作用,基因芯片技术分析力学刺激和MGF... 目的应用基因芯片技术分析在力生长因子E肽(MGF-Ct24E)和应力作用下成骨细胞基因表达的差异。方法体外培养原代成骨细胞,分别对细胞施加周期性拉伸刺激(应变12%,频率0.5 Hz)和MGF-Ct24E(50 mg/L)直接作用,基因芯片技术分析力学刺激和MGF-Ct24E作用对原代成骨细胞基因表达谱的影响,并用定量PCR验证基因芯片实验结果。结果与对照组相比,力学加载组共发现差异表达基因1 866个,其中上调基因1 113个,下调基因753个;MGF-Ct24E处理组共发现差异表达基因1 178个,其中上调基因796个,下调基因382个。GO分析发现两者的差异基因表达谱具有一致性,并且差异表达基因主要涉及细胞增殖与分化调节、细胞对应力刺激的响应和力学转导通路等。定量PCR实验结果验证的差异表达基因与芯片实验结果一致。结论基因表达谱分析显示应力刺激和MGF-Ct24E作用对成骨细胞的基因表达具有类似的调控效应,为后续使用MGF-Ct24E治疗骨修复以弥补应力刺激不足的研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 成骨细胞 力生长因子 应力刺激 基因芯片 基因表达 细胞培养
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机械生长因子对骨骼肌卫星细胞激活的影响及与其增殖的量效关系 被引量:13
12
作者 吴嵽 陆耀飞 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2011年第2期64-69,共6页
目的:通过离体实验,观察机械生长因子(MGF)对于骨骼肌卫星细胞(SC)的激活作用及促进其增殖的量效关系,探讨MGF对SC在细胞水平的调节机制,为骨骼肌损伤的修复提供理论依据。方法:原代SC取自4周龄雄性SD大鼠双侧的腓肠肌与比目鱼肌。使用... 目的:通过离体实验,观察机械生长因子(MGF)对于骨骼肌卫星细胞(SC)的激活作用及促进其增殖的量效关系,探讨MGF对SC在细胞水平的调节机制,为骨骼肌损伤的修复提供理论依据。方法:原代SC取自4周龄雄性SD大鼠双侧的腓肠肌与比目鱼肌。使用不同浓度的MGF干预第三代细胞后测定增殖效果。血清饥饿后通过MGF和DMEM干预骨骼肌卫星细胞,使用流式细胞仪检测其所处细胞周期,判断激活情况。结果:干预48h后,25ng/ml组、50ng/ml组A值显著高于对照组(P<0.01),100ng/ml组、200ng/ml组与对照组之间差异没有显著性(P>0.05);96h后25ng/ml组、50ng/ml组、100ng/ml组、200ng/ml组之间差异没有显著性(P>0.05)。25ng/mlMGF干预G0期的SC24h后MGF组低于对照组(P<0.01)。结论:MGF可以促进SC增殖;MGF可以激活4周龄SD大鼠的G期SC。 展开更多
关键词 骨骼肌卫星细胞 机械生长因子 细胞培养 细胞增殖 细胞激活 动物实验
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TNF-α、IL-1β通过PKA通路诱导成纤维样滑膜细胞中力生长因子表达 被引量:3
13
作者 黄杨河 罗自维 +5 位作者 李海滨 吴双迟 吕永钢 刘万钱 钟莉 杨力 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期276-280,共5页
目的探讨炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6对力生长因子(mechano growth factor,MGF)表达的影响。方法实验组细胞用浓度为25、50、100 ng/mL的TNF-α、IL-6或者是2.5、5.0、10 ng/mL的IL-1β处理12 h,抑制剂组在因子处理前用1.0 mmol KT572... 目的探讨炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6对力生长因子(mechano growth factor,MGF)表达的影响。方法实验组细胞用浓度为25、50、100 ng/mL的TNF-α、IL-6或者是2.5、5.0、10 ng/mL的IL-1β处理12 h,抑制剂组在因子处理前用1.0 mmol KT5720预处理1 h,然后添加炎症因子刺激12 h,对照组细胞保持与实验组培养条件一致的情况下不添加因子刺激。因子刺激后,用定量PCR方法检测细胞中MGF表达量。结果 25 ng/mL TNF-α和10 ng/mL IL-1β因子刺激滑膜成纤维细胞诱导MGF表达显著增加(P<0.05)。IL-6对MGF表达无影响。1.0 mmol PKA通路抑制剂KT5720处理显著降低TNF-α和IL-1β诱导的MGF表达(P<0.05)。结论炎症因子TNF-α和IL-1β在浓度分别为25和10 ng/mL时能显著诱导滑膜成纤维细胞中MGF表达,其表达是通过PKA通路介导的。本研究对于促进MGF用于改善膝关节相关组织修复中的应力刺激不足有一定的现实意义。 展开更多
关键词 力生长因子 成纤维样滑膜细胞 应力刺激
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IGF-1和MGF在过度训练抑制大鼠腹膜巨噬细胞吞噬功能中的作用研究 被引量:7
14
作者 肖卫华 陈佩杰 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2011年第10期67-71,78,共6页
目的:观察过度训练对大鼠腹膜巨噬细胞吞噬功能的影响及胰岛素样生长因子1(IGF-1)和机械生长因子(MGF)在其中所起的作用。方法:8周龄健康雄性Wistar大鼠16只,随机分为安静对照组(control)和过度训练组(overtraining)。过度训练组进行11... 目的:观察过度训练对大鼠腹膜巨噬细胞吞噬功能的影响及胰岛素样生长因子1(IGF-1)和机械生长因子(MGF)在其中所起的作用。方法:8周龄健康雄性Wistar大鼠16只,随机分为安静对照组(control)和过度训练组(overtraining)。过度训练组进行11周递增负荷跑台训练。最后1次训练后36h,记录体重变化并测定血液中血红蛋白和睾酮含量。断头处死大鼠并分离纯化腹膜巨噬细胞,中性红法测定巨噬细胞吞噬功能,荧光定量PCR技术测定IGF-1和MGF基因表达。离体状态下用不同浓度的IGF-1或MGF与巨噬细胞孵育2h,观察IGF-1和MGF对巨噬细胞吞噬功能的影响。结果:与安静对照组相比,过度训练组大鼠体重、血红蛋白和睾酮含量均显著降低,分别下降了约19.3%(P<0.01)、13.5%(P<0.01)、55.3%(P<0.01)。过度训练组巨噬细胞摄取中性红能力显著低于安静对照组,下降约27%(P<0.05);过度训练组巨噬细胞IGF-1mRNA水平约为安静对照组的21倍(P<0.01),MGF mRNA水平约为安静对照组的92倍(P<0.01);IGF-1对巨噬细胞吞噬功能无显著影响,各浓度组与未加药组相比均无显著性差异(P>0.05);MGF呈浓度依赖性的抑制巨噬细胞吞噬功能,与未加药组相比,10ng/ml、50ng/ml组有显著性差异(P<0.05),100ng/ml、200ng/ml组有极显著性差异(P<0.01),各浓度组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论:过度训练抑制巨噬细胞吞噬功能;过度训练诱导产生的MGF可能在过度训练抑制巨噬细胞吞噬功能中发挥关键作用。 展开更多
关键词 过度训练 巨噬细胞 吞噬功能 胰岛素样生长因子1 机械生长因子 动物实验
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骨骼肌损伤后修复过程中机械生长因子作用研究 被引量:7
15
作者 肖卫华 陆耀飞 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2008年第6期34-38,共5页
目的:通过观察小鼠骨骼肌损伤后修复过程中机械生长因子(MGF)、M-cad基因表达,探讨MGF在伤后修复过程中所起作用;方法:健康雄性C57BL/6小鼠49只,按体重随机分为7组。其中1组不做任何处理作为对照组(C组),另6组均于同一天损伤,即损伤组(i... 目的:通过观察小鼠骨骼肌损伤后修复过程中机械生长因子(MGF)、M-cad基因表达,探讨MGF在伤后修复过程中所起作用;方法:健康雄性C57BL/6小鼠49只,按体重随机分为7组。其中1组不做任何处理作为对照组(C组),另6组均于同一天损伤,即损伤组(injury,1组)。小鼠腓肠肌钝挫伤后不同时期处死取材,对MGF、M-cad基因表达水平做实时定量RT-PCR分析;结果:骨骼肌损伤后1天MGF表达水平即显著升高(P<0.01),第4、第7天持续升高,第7天达峰值,第11天仍显著高于对照组。非损伤腿中MGF表达无显著变化。M-cad在非损伤腿中的表达与损伤腿相似,均在第7天表达达峰值(P<0.01);结论:MGF可能是激活肌卫星细胞的因子之一,但非惟一因子。MGF也可能与多肽合成有关。 展开更多
关键词 骨骼肌 损伤 机械生长因子 胰岛素样生长因子-I 肌卫星细胞 M-钙粘蛋白 动物实验
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外源性机械生长因子对大鼠骨骼肌卫星细胞生物学特性的影响 被引量:6
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作者 孙婧瑜 陆耀飞 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期330-335,共6页
目的:研究机械生长因子(MGF)促离体培养的骨骼肌卫星细胞增殖的最佳浓度,并观察该浓度对细胞生长曲线、总蛋白及凋亡情况的影响。方法:选用雄性SD大鼠1只,无菌条件下取后肢肌肉,采用改进的两步酶消化法结合差速贴壁技术,分离及纯化骨骼... 目的:研究机械生长因子(MGF)促离体培养的骨骼肌卫星细胞增殖的最佳浓度,并观察该浓度对细胞生长曲线、总蛋白及凋亡情况的影响。方法:选用雄性SD大鼠1只,无菌条件下取后肢肌肉,采用改进的两步酶消化法结合差速贴壁技术,分离及纯化骨骼肌卫星细胞。取第3代骨骼肌卫星细胞,分别采用终浓度为15、25、50、100、200 ng/ml的MGF进行干预,作为实验组;另以单纯加入100μl生长培养基作为对照组,以加入100μl DMEM作为阴性对照组。同步化后,于培养24 h后加入CCK-8溶液。采用CCK-8比色法检测不同浓度MGF下细胞的增殖情况并筛选出最佳浓度后,绘制生长曲线,同时运用BCA法及Hoechst 33342、PI双染法测定最佳增殖浓度的MGF对卫星细胞蛋白合成及细胞凋亡的影响。免疫细胞化学法鉴定骨骼肌卫星细胞。结果:①终浓度为15、25、50、100 ng/ml的MGF均有促进骨骼肌卫星细胞增殖的作用(P<0.01),其中25 ng/ml MGF促增殖作用最佳。②与对照组相比,MGF组细胞生长曲线左移,倍增时间、平台期均缩短。③与对照组相比,25 ng/ml MGF作用48 h即对骨骼肌卫星细胞有明显的增殖效果(P<0.05);与对照组相比,25 ng/ml MGF作用骨骼肌卫星细胞48 h和72 h时,其总蛋白含量显著增加(P<0.05);与对照组相比,25 ng/ml MGF作用72h、96h,骨骼肌卫星细胞的平均凋亡指数显著减小(P<0.05)。结论:①机械生长因子可促进体外培养的大鼠骨骼肌卫星细胞增殖,最佳浓度为25 ng/ml;②25 ng/ml MGF可以使骨骼肌卫星细胞提前进入平台期,缩短生长周期;③25 ng/ml MGF可以抑制骨骼肌卫星细胞的凋亡。 展开更多
关键词 机械生长因子 骨骼肌卫星细胞 增殖 生长曲线 凋亡指数
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机械生长因子实时荧光定量RT-PCR检测方法研究 被引量:4
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作者 肖卫华 陆耀飞 《上海体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2010年第6期43-45,共3页
目的:建立机械生长因子(MGF)基因表达的实时荧光定量RT-PCR方法。方法:应用实时定量RT-PCR法检测腓肠肌中MGF基因表达。结果及结论:荧光定量RT-PCR法能绝时定量MGF兴奋剂基因表达水平,相关系数大于0.99。
关键词 机械生长因子 信使核糖核酸 荧光定量RT—PCR 检测方法
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机械生长因子对骨骼肌卫星细胞增殖及MGF mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 史仍飞 刘子青 +3 位作者 袁海平 王顺利 魏安奎 张平 《临床医学工程》 2012年第1期18-21,共4页
目的骨骼肌卫星细胞是肌源性干细胞,该细胞的增殖受一系列生长因子的影响。而机械生长因子(mechano growth factor,MGF)是近年来发现的一种对力学信号敏感的自分泌局部生长因子,可以激活肌卫星细胞的增殖。本研究采用不同浓度的MGF干预... 目的骨骼肌卫星细胞是肌源性干细胞,该细胞的增殖受一系列生长因子的影响。而机械生长因子(mechano growth factor,MGF)是近年来发现的一种对力学信号敏感的自分泌局部生长因子,可以激活肌卫星细胞的增殖。本研究采用不同浓度的MGF干预体外培养的骨骼肌卫星细胞,探讨促进卫星细胞增殖的适宜浓度。方法用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶两步酶消化法分离骨骼肌卫星细胞,待细胞同步化后,分别应用不同浓度的MGF(0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml和150ng/ml)干预原代培养的骨骼肌卫星细胞96小时,采用RT-PCR技术检测肌卫星细胞MGF mRNA的表达,用CCK-8检测卫星细胞的增殖情况,并检测细胞总蛋白含量。结果与0ng/ml MGF组相比,25ng/ml和50ng/ml组OD值在各时间点均显著性增加,其中25ng/ml组在24h至96h内OD值具有高度显著性(P<0.01),50ng/ml组在24h至72h内也有高度显著性的增加(P<0.01);25ng/ml和50ng/ml组MGF mRNA的表达量均显著高于对照组(P<0.05),其它组的表达与对照组无显著性差异。总蛋白含量也显示,与0ng/ml MGF组相比,25ng/ml和50ng/ml组均有显著性升高(P<0.05)。结论适宜浓度的MGF具有促进肌卫星细胞增殖的作用,其中浓度为25ng/ml和50ng/ml时具有较强的促增殖作用,但有一定的时间差异。 展开更多
关键词 骨骼肌卫星细胞 机械生长因子 细胞原代培养 细胞增殖
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机械生长因子在失重性肌萎缩中的作用研究 被引量:1
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作者 吴峰 戴钟铨 +3 位作者 阚广悍 万玉民 杨慧 李莹辉 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期437-440,共4页
目的研究模拟失重效应条件下大鼠肌组织机械生长因子(mechano-growth factor,MGF)的表达变化,探讨MGF在失重性肌萎缩中的作用。方法采用大鼠尾部悬吊模型模拟失重效应,尾吊1、4、7、10、14天后,分离并分析肌肉相对重量变化,并通过实时定... 目的研究模拟失重效应条件下大鼠肌组织机械生长因子(mechano-growth factor,MGF)的表达变化,探讨MGF在失重性肌萎缩中的作用。方法采用大鼠尾部悬吊模型模拟失重效应,尾吊1、4、7、10、14天后,分离并分析肌肉相对重量变化,并通过实时定量PCR分析模拟失重效应对比目鱼肌(soleus,SOL)与趾长伸肌(extensor digitorum longus,EDL)中胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF-I)两个选择性剪接体MGF、IGF-IEa及M-钙粘附分子(M-cadherin,M-Cad)mRNA表达水平的影响,同时分析IGF-IEa和MGF在两种肌肉中的表达差异。结果尾吊4 d后,SOL相对重量开始显著下降,而EDL相对重量只有轻微下降趋势。尾吊不同时间后,比目鱼肌的MGF、IGF-IEa和M-Cad等基因表达都表现出显著性下降;而在趾长伸肌中,只表现出轻微的下降趋势。结论在尾部悬吊处理条件下,不同肌肉类型MGF的表达变化不同。推测MGF表达的减少与SOL失重性肌萎缩的发生有关。 展开更多
关键词 失重性肌萎缩 力学生长因子 比目鱼肌 趾长伸肌
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补充谷氨酰胺对过度训练大鼠腹膜巨噬细胞IGF-1和MGF基因表达的影响 被引量:2
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作者 肖卫华 陈佩杰 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期634-638,共5页
目的:了解补充谷氨酰胺对过度训练大鼠腹膜巨噬细胞胰岛素样生长因子1(IGF-1)和机械生长因子(MGF)基因表达的影响。方法:8周龄健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为安静对照组(C)、过度训练组(E)、过度训练补充谷氨酰胺组(EG)。后两组根据... 目的:了解补充谷氨酰胺对过度训练大鼠腹膜巨噬细胞胰岛素样生长因子1(IGF-1)和机械生长因子(MGF)基因表达的影响。方法:8周龄健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为安静对照组(C)、过度训练组(E)、过度训练补充谷氨酰胺组(EG)。后两组根据取材时间不同分为2组:运动后36 h取材组(E1、EG1),运动后7天取材组(E2、EG2)。总计5组,每组8只,除C组外,其他4组进行11周递增负荷跑台训练。EG组从第5周开始至第8周灌胃补充谷氨酰胺(0.8 g/kg/d),以后几周加至饮用水补充,剂量逐周加大到1.1 g/kg/d。断头处死大鼠并分离纯化腹膜巨噬细胞,采用荧光定量PCR技术测定IGF-1和MGF基因表达。结果:安静状态下巨噬细胞即可表达IGF-1和MGF。11周过度训练后36 h,巨噬细胞IGF-1、MGF表达量显著增加,分别约为安静对照组的21倍和92倍(P<0.01)。EG1组IGF-1、MGF表达显著增加,分别约为安静对照组的10倍和37倍(P<0.01),但显著低于E1组(P<0.01)。停训后恢复7天,E2组、EG2组IGF-1、MGF表达量分别与E1组、EG1组相比均显著下降(P<0.01),但与C组相比差异无统计学意义。结论:静息态巨噬细胞可表达IGF-1和MGF;过度训练可增强巨噬细胞IGF-1和MGF表达,MGF表达对运动应激更敏感;补充谷氨酰胺可部分抑制巨噬细胞IGF-1和MGF对过度训练的应答。 展开更多
关键词 巨噬细胞 过度训练 谷氨酰胺 胰岛素样生长因子1 机械生长因子
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