E-cadherin、MCP-1和MIP-1β在B16黑色素瘤荷瘤鼠中的表达及意义

目的检测皮肤B16黑色素瘤小鼠体内E-cadherin、MCP-1、MIP-1β的表达,探讨其与树突状细胞在体内迁移过程中的调控的关系。方法取C57纯系小鼠30只,分为12d肿瘤组,25d肿瘤组及正常对照组,每组10只。肿瘤组将B16黑色素瘤细胞人工植入C57小鼠背部皮下,制荷瘤鼠模型,采用免疫组织化学SABC法检测肿瘤病变中心区及交界区皮肤中E-cadherin、MCP-1、MIP-1β表达。结果肿瘤接种后第12天的MCP-1和MIP-1β在淋巴结和肿瘤中心区和交界区表达的面密度和数密度明显增高,分别与对照组和肿瘤第25天组比较差异有显著性(P<0.01)。肿瘤组的E-cadherin在淋巴结和肿瘤组织中表达降低,第25天组尤其明显;第25天组与第12天组E-cadherin表达分布面密度和数密度比较差异有显著性(P<0.01),第12天组和对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论在肿瘤状态下,E-cadherin、MCP-1和MIP-1β有促进树突状细胞向淋巴组织和肿瘤局部迁移和聚集的作用。E-cadherin、MCP-1、MIP-1β的异常表达在皮肤黑色素瘤的恶性进展过程中起重要作用。

B16黑色素瘤组织中上皮型钙黏附分子和S-100蛋白的表达及意义

目的:探讨B16黑色素瘤小鼠体内上皮型钙黏附分子与S-100蛋白的表达在肿瘤侵袭及转移过程中发挥的作用。方法:C57纯系小鼠分为12d和25d肿瘤组和正常对照组。肿瘤组将B16黑色素瘤细胞人工植入C57小鼠背部皮下,制荷瘤鼠模型,免疫组织化学法检测肿瘤病变中心区及交界区皮肤上皮型钙黏附分子和S-100的表达。结果:12d肿瘤组肿瘤组织中S-100蛋白表达的面密度和数密度明显增高,与正常对照组和25d肿瘤组比较差异有统计学意义;肿瘤组织中上皮型钙黏附分子表达的面密度和数密度较正常对照组明显降低。结论:上皮型钙黏附分子和S-100蛋白的异常表达在皮肤黑色素瘤的恶性进展过程中起重要作用,其表达程度可作为判断黑色素瘤恶性程度及预后的指标之一。

结肠恶性黑色素性神经鞘瘤1例并文献复习

目的 探讨恶性黑色素性神经鞘瘤的病理形态学特征及鉴别诊断要点。方法 应用光镜、免疫组化及电镜等方法对1例结肠恶性黑色素性神经鞘瘤进行组织学观察并复习文献。结果 组织形态主要由大小较一致的圆形、多边形细胞和束状、编织状排列的梭形细胞构成,细胞异型性明显。免疫组化以MBP、NSE、HMB45、S-100和vimentin阳性为特点。电镜下细胞内可见Ⅱ-Ⅳ期黑色素小体,细胞外有不完整的基底膜及长间距胶原。结论恶性黑色素性神经鞘瘤少见,发生于结肠尤为罕见。病理诊断应结合病史、形态学特征、免疫组化及超微结构。超微结构特点是确诊的最重要依据。

低剂量激光治疗黑色素瘤的实验研究

目的:研究氦氖激光和半导体激光对黑色素肿瘤的抑制效果。方法:用B16BL6细胞接种在昆明小白鼠的小腿上作为实验模型,分别用波长为632.8nm的氦氖激光和波长为650nm的半导体激光进行照射,观察它们对小鼠黑色素肿瘤的抑制情况。结果:氦氖激光照射有58%的瘤体消退了;半导体激光照射100%死亡。结论:波长等于632.8nm左右的氦氖激光对黑色素瘤有抑制作用;波长为650nm的半导体激光对黑色素肿瘤不起作用。

Nm23与RANTES在B16荷瘤鼠的表达和意义

目的检测荷瘤鼠体内Nm23(肿瘤转移抑制因子)与RANTES(T细胞特异性趋化因子)的表达,探讨其与肿瘤发生、转移的关系。方法将B16恶性黑色素瘤细胞人工植入C57小鼠体内,待肿瘤形成后,处死,取肿瘤病变组织皮肤,用4%多聚甲醛固定、切片,作免疫组化染色。结果正常对照组与早期肿瘤Nm23与RANTES表达的比较差异显著(P<0.05),早期肿瘤与晚期肿瘤Nm23与RANTES表达的差异显著(P<0.05)。结论在B16黑色素瘤荷瘤鼠Nm23与RANTES的表达与肿瘤的发生、转移呈负相关。

复方红花酊对白癜风豚鼠模型TNF-α和IL-10表达的影响

目的探讨复方红花酊对TNF-α和IL-10的影响及促进黑色素形成作用。方法实验动物随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(复方卡力孜然酊)、复方红花酊高剂量组、中剂量组、低剂量组。建立白癜风皮损模型,并应用相对应药物涂擦治疗,测量其TNF-α和IL-10平均光密度及黑色素颗粒细胞数目,比较其作用。结果复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组对皮损有复色作用;与正常对照组比较,模型组TNF-α的表达显著增高,IL-10的表达明显减少,黑色素含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组中TNF-α的表达明显降低,IL-10的表达明显增高,各组黑色素含量均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组中的TNF-α表达水平与黑色素含量呈显著负相关(P<0.05),IL-10表达水平与黑色素含量呈显著正相关(P<0.05)。结论复方红花酊通过调节TNF-α和IL-10的表达水平可影响黑色素的生成,进而对白癜风产生一定的治疗作用。

口腔婴儿黑色素神经外胚瘤的诊断要点及治疗原则

目的分析口腔婴儿黑色素神经外胚瘤（MNTI）的诊断要点与治疗原则。方法回顾性分析我院2011年7月至2013年7月期间收治的15例口腔婴儿黑色素神经外胚瘤患者的临床资料，研究其病理切片等。结果在15例MNTI患儿中11例发病位置在上颔骨、2例在下颌骨、2例位于面颊部，在随访2-18个月以后，有3例患儿确定在术后1个月复发，其中2例为可疑复发，1例因肿瘤局部扩散无法进行手术而死亡。结论在临床诊断检查口腔婴儿黑色素神经外胚瘤的发病部位、发病年龄时，要认真观察肿物颜色。婴儿的肿瘤生长速度较快，有局部侵袭性。同时手术后对患者定期随访，病理诊断需要和婴儿小圆细胞恶性肿瘤互相区别，首选治疗方式为保守的手术治疗。

干扰MITF表达对恶性黑素瘤细胞B16F10增殖及黑素生成的影响

目的验证小眼畸形相关转录因子(MITF)高表达在恶性黑素瘤细胞中的关键作用。方法利用RNA干扰技术特异性抑制MITF基因及其蛋白表达水平,研究该基因对B16F10细胞增殖活性的影响,验证MITF对黑素瘤细胞内外黑素分泌水平的影响及对与该分泌水平密切相关的酪氨酸酶(TYR)活性的影响。结果 RNA干扰技术在B16F10细胞中能显著抑制MITF基因及蛋白表达水平,分别为82.7%、50.0%,干扰MITF表达能抑制B16F10增殖活性达49.5%,能抑制黑素瘤细胞内、外黑素分泌水平,分别为49.7%、43.8%,能抑制TYR活性达48.0%。结论 MITF对黑素瘤细胞增殖活性具有重要作用,对黑素瘤细胞中的TYR活性及黑素生成具有重要作用,与黑素瘤细胞中的黑素功能密切相关。

富含黑色素的胰腺血管周上皮样细胞肿瘤1例临床病理观察

目的探讨1例伴显著黑色素的胰腺血管周上皮样细胞肿瘤(PEComa)的临床病理学特征、诊断与鉴别诊断。方法回顾性分析1例罕见的胰腺PEComa,结合光镜、免疫组化及特殊染色进行观察,并复习相关文献。结果肿瘤位于胰体,镜下示肿瘤内丰富血管网,血管周成巢、成片或器官样排列的上皮样细胞;细胞质透明至弱嗜酸性,部分可见色素颗粒;细胞核小,圆形、卵圆形,核分裂罕见。免疫组织化学显示肿瘤细胞HMB-45(+),PR、E-cadherin、TFE3局灶(+)。特殊染色(Fontana-Masson’s Stain for Melanin)证实肿瘤细胞胞质内可见棕褐色黑色素颗粒沉着。结论胰腺PEComa是一种生物学行为仍存争议的间叶源性肿瘤,有其独特的组织学形态及免疫组织化学表型,目前尚无明确的良、恶性诊断标准。

三氧化二砷对A375人恶性黑素瘤细胞株酪氨酸酶活性及黑素生成的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对A375人恶性黑素瘤细胞株酪氨酸酶活性及黑素生成的影响。方法利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法测定细胞活力,采用酶学方法测定酪氨酸酶活性,465nm比色法测定黑素含量。结果As2O3浓度<0.01μmol/L时,随As2O3浓度的增加,促进黑素瘤细胞的增殖、黑素的合成及上调酪氨酸酶的活性;As2O3浓度等于0.01μmol/L时作用最强。0.1～1μmol/L则表现为抑制作用;>1μmol/L则出现细胞毒性作用。结论经As2O3处理后A375人恶性黑素瘤细胞株的细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素的生成与As2O3浓度呈双相性变化。

珍稀中药资源金平人参的研究与利用

金平人参Panax vietnamensis是一种珍贵的药用资源植物,分布于我国云南金平县一带以及越南的玉玲山和黄连山地区,野生资源稀缺,人工栽培初具规模。金平人参的化学成分主要为三萜皂苷类,目前已报道的皂苷类成分涉及奥克梯隆醇型、原人参二醇型、原人参三醇型、齐墩果酸型、C-17侧链变化型等共63个结构,其中奥克梯隆醇型皂苷珠子参苷R2含量最高,达5.3%。除此之外还有甾体皂苷、聚炔类、脂肪酸和氨基酸等成分。药理活性研究表明金平人参具有抗炎、抗肿瘤、抑制黑色素生成、肝肾保护、镇静安神等作用。对金平人参的资源现状、化学成分以及药理活性研究进行综述,以期为该植物的进一步开发利用提供依据。

N-乙酰氨基葡萄糖对酪氨酸酶活性及小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的探讨N-乙酰氨基葡萄糖对体外酪氨酸酶活性、小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶和黑素合成的影响。方法取对数生长期小鼠B16黑素瘤细胞，分别加入不同浓度N-乙酰氨基葡萄糖（1．5、3、6．25、25、50和100mmol／L）共孵育，MTT法测定培养的小鼠B16黑素瘤细胞的增殖活性，NaOH法测定黑素生成量，体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性；免疫细胞化学测定小鼠B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶的表达。结果与阴性对照（0．8183±0．0326）相比，1．5、3、6．25、25和50mmol／LN-乙酰氨基葡萄糖显著抑制蘑菇酪氨酸酶活性（分别为0．7380±0．0254、0．7293±0，0382、0．7247±0．0389、0．7233±0．0186、0．7043±0．0166）（P〈0．05或P〈0．01）；25、50和100mmol／LN-乙酰氨基葡萄糖显著抑制小鼠B16黑素瘤细胞增殖（分别为0．5410±0．0496、0．4480±0．0246、0．1273±0．0137）和黑素生成（0．0070±0．0008、0．0049±0．0012、0．0015±0．0014），50和100mmol／LN-乙酰氨基葡萄糖显著抑制B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性（分别为0．1003±0．0404、0．0130±0．0053）及酪氨酸酶蛋白的表达（13．2700±0．9741、8．5667±2．0345，P〈0．05或P〈0．01）。结论N-乙酰氨基葡萄糖抑制培养的小鼠B16黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成。

全反式维A酸对UVB照射的A375细胞酪氨酸酶代谢及铜锌超氧化物歧化酶的影响

目的 探讨全反式维A酸（ATRA）对中波紫外线（UVB）照射的人A375黑素瘤株细胞黑素含量、酪氨酸酶及铜锌超氧化物歧化酶（Cu/ZnSOD）的影响.方法 将培养的A375细胞分为6组：ATRA＋UVB组：A375细胞照射UVB后加入全反式维A酸；氢醌＋UVB组：照射UVB后加入氢醌；UVB组：仅照射UVB;ATRA组：A375细胞加入ATRA；氢醌组：A375细胞加入氢醌；阴性对照组：A375细胞只加入相应溶媒,既不照射UVB,也不加入药物.分别培养,于24 h、48 h和72 h测定黑素含量及酪氨酸酶活性；于培养24 h,Western印迹检测酪氨酸酶蛋白的变化,实时定量PCR法分别检测酪氨酸酶和Cu/Zn SOD在mRNA水平的变化.结果 UVB照射的A375细胞加入全反式维A酸后24 h、48 h、72 h黑素含量及酪氨酸酶活性均下降.UVB照射A375细胞后24 h酪氨酸酶蛋白及mRNA测定值分别为0.72±0.070、1.400±0.135,加入全反式维A酸24 h后酪氨酸酶蛋白及mRNA值分别为0.42±0.056（P＜ 0.01）、0.810±0.062（P＜ 0.01）；UVB照射A375细胞后24 h Cu/ZnSOD mRNA水平为0.323±0.066,加入全反式维A酸后Cu/ZnSOD在mRNA水平增高为0.625±0.103（P＜ 0.01）.结论 全反式维A酸能够通过酪氨酸酶途径抑制UVB辐射导致的A375细胞黑素含量增加,并可提高Cu/ZnSOD水平.