结直肠癌组织中HMGB2、MAGE-A9、MMR蛋白表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌组织中高迁移率族蛋白B2(HMGB2)、黑色素瘤相关抗原-A9(MAGE-A9)、DNA错配修复基因(MMR)蛋白表达情况,以及其在评估患者预后中的临床价值。方法选取52例结直肠癌患者作为研究对象,术中采集所有患者肿瘤标本及癌旁组织标本,检测HMGB2、MAGE-A9、MMR蛋白表达水平,并分析各指标表达情况与病理特征、预后间的关系。结果肿瘤组织内HMGB2、MAGE-A9、MMR阳性表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤分期Ⅲ期、分化程度低分化、淋巴结转移患者HMGB2、MAGE-A9、MMR阳性表达率高于Ⅰ期、Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。随访3年,52例患者存活率为71.15%(37/52);HMGB2阳性组存活率[61.76%(21/34)]低于HMGB2阴性组[88.89%(16/18)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.219,P=0.040);MAGE-A9阳性组存活率[58.62%(17/29)]低于MAGE-A9阴性组[86.96%(20/23)],差异有统计学意义(χ^(2)=5.018,P=0.025);MMR阳性组存活率[52.00%(13/25)]低于MMR阴性组[88.89%(24/27)],差异有统计学意义(χ^(2)=8.606,P=0.003)。结论HMGB2、MAGE-A9、MMR在结直肠癌中呈高表达状态,其表达与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移关系密切,且不同表达患者存活率存在较大差异,可作为评估预后的重要指标。

Cloning of human melanoma antigen MAGE-A9 and its expression in hepatocellular carcinomas

Objective：To express the melanoma associated gene MAGE-A9 recombinant protein, obtain the anti-MAGE-A9 monoclonal antibody and to examine the expression of MAGE-A9 in hapatocellular carcinoma specimens. Methods：MAGE-A9 cDNA was cloned from human hepatocellular carcinoma tissue by using RT-PCR, and then subcloned into the plasmid pMD18-T. After sequencing, the MAGE-A9 was cloned into the prokaryotic expression vector pBAD/gⅢ to construct the recombinant expression vector pBAD/gⅢ - MAGE-A9, and was transformed into E. coli TOP10. The recombinant MAGE-A9 protein was expressed under induction of L-Arabinose, and was purified through Hitrap column. The anti-MAGE-A9 monoclonal antibody was generated. The expression of MAGE-A9 in hepatocellular carcinoma specimens was examined through ABC assay. Results：The cDNA sequence of the cloned MAGE-A9 gene was consistent with the reported sequence. By affinity column and SDS-PAGE, the purified MAGE-A9 fusion protein displayed a band of Mr 35,000, and subsequently the anti-MAGE-A9 monoclonal antibody was obtained. We found that MAGE-A9 expressed in the cytoplast of positive cells and MAGE-A9 antigen was detected in 8 cases out of 39 （21%） hepatocellular carcinoma specimens. Conclusion：MAGE-A9 antigen was expressed in a fair proportion of hepatocellular carcinoma specimens, these patients might be suitable candidates for immune involving antigen, encoded by the MAGE-A9 gene.

黑素瘤相关抗原-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨黑素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析其与食管癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2010年9月至2010年11月住院手术切除的食管癌组织及距癌组织边缘5 cm以上且病理诊断证实为正常组织的癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9和-A11蛋白的表达。结果:食管鳞状细胞癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的阳性表达率分别为45%(27/60)和66.67%(40/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-A9和-A11蛋白的表达。MAGE-A9蛋白的表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与组织学分级相关(P<0.05);MAGE-A11蛋白表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、组织学分级、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与临床分期、肿瘤大小呈正相关(P<0.05)。Log-Rank检验显示,MAGE-A9(P=0.037)和-A11(P=0.039)蛋白表达阳性的食管鳞状细胞癌患者和贲门腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者。Cox多因素分析提示,MAGE-A9(P=0.026)和MAGE-A11(P=0.038)蛋白表达、组织学分级(P=0.026)、临床分期(P=0.008)及淋巴结转移(P=0.010)可作为整体生存的独立预后因素。结论:MAGE-A9和-A11蛋白是食管鳞状细胞癌的特异性抗原,似可作为食管鳞状细胞癌预后不良的预测指标。

MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)、MAGE-A11-和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达,并分析其与喉鳞状细胞癌患者临床病理学特征及预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2012-2014年住院手术切除的喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织标本各73例,同时选取该院3例前列腺癌住院患者去势治疗术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67蛋白的表达水平。结果:喉鳞状细胞癌组织中MAGE-A9、MAGE-A11蛋白和Ki67的表达率[47.94%(35/73)]、[49.32%(36/73)]和[46.58%(34/73)]均显著高于相应的癌旁组织[0(0/75)(P<0.01)],MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期和淋巴转移有关(P<0.05),Ki67LI表达与喉鳞状细胞癌患者的肿瘤大小、临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。相关性分析显示,MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表达均与Ki67指数呈正相关(r=0.258,P=0.027;r=0.672,P=0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67LI蛋白高表达阳性患者的生存率均显著低于低表达的患者,而且MAGE-A9和Ki67LI均高表达或MAGE-A11和Ki67LI均高表达患者的生存期均显著低于其单一高表达或均低表达的患者(P<0.05或P<0.01)。单因素和多因素Cox回归模型分析进一步提示,MAGE-A9蛋白和MAGE-A11蛋白是喉鳞状细胞癌患者总体生存的独立预后因素(P<0.05)。结论:MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67是喉鳞状细胞癌的肿瘤相关抗原,其可作为预测喉鳞状细胞癌患者的预后指标。

CD147对成纤维细胞MMP-9的产生和恶性黑色素瘤细胞浸润的作用

目的:探讨CD147分子对成纤维细胞中金属基质蛋白酶9(MMP9)产生和恶性黑色素瘤细胞浸润的可能作用。方法:将表达CD147的恶性黑色素瘤细胞与成纤维细胞共同培养,通过酶谱法检测成纤维细胞中MMP9的表达;并运用体外浸润模型观察恶性黑色素瘤细胞在不同实验条件下的浸润能力。结果:共同培养实验发现,随着黑色素瘤细胞数的增加,培养上清液中MMP9的表达量逐渐增加,CD147抗体可抑制成纤维细胞产生MMP9。当将成纤维细胞放入浸润模型下室底部培养时,黑色素瘤细胞的浸润数量显著增加;在浸润模型上室中加入CD147抗体可显著抑制黑色素瘤细胞的重组基底膜浸润。结论:表达于黑色素瘤细胞的CD147分子可通过刺激成纤维细胞产生MMP9进而在黑色素瘤细胞浸润中发挥作用。

肉桂醛对黑素瘤A375细胞凋亡和VEGF MMP-9表达的影响

目的研究肉桂醛对体外培养的人黑素瘤细胞株A375凋亡和血管内皮细胞生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 A375细胞在体外二维和三维培养后,在培养基中加入不同浓度(0,10,20和40μmol/L)肉桂醛,24小时后流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,Western blot法检测VEGF蛋白水平,明胶酶谱法检测MMP-9分泌情况。结果肉桂醛能促进A375细胞凋亡,降低细胞增殖指数。40μmol/L肉桂醛作用后的A375细胞增殖指数最低(53.38±4.25%vs35.13±3.24%),细胞凋亡百分比最高(4.37±0.25%vs10.50±0.37%),各浓度间作用差异具有统计学意义(P<0.05)。肉桂醛作用后二维和三维培养的人黑素瘤细胞VEGF的表达下降(1.193±0.195vs0.204±0.017;1.549±0.214vs0.392±0.019),MMP-9的分泌也减少(24885.83±865.80vs14150.77±555.63;29408.50±817.62vs15121.43±497.95),各浓度肉桂醛间的抑制强度差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肉桂醛能促进人黑素瘤细胞凋亡,抑制其增殖,并通过降低VEGF和MMP-9的表达来抑制人黑素瘤细胞的侵袭,其抑制强度与药物浓度成正比。

组织蛋白酶D和基质金属蛋白酶-9在皮肤恶性黑色素瘤中的表达

目的检测Cath-D和MMP-9和在皮肤恶性黑色素瘤、交界痣及正常皮肤中表达情况,及其与皮肤恶性黑色素瘤的临床分期,淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化S-P法对分别检测Cath-D和MMP-9在44例皮肤恶性黑色素瘤、22例皮肤交界痣及20例正常皮肤中的表达水平。结果 Cath-D和MMP-9在皮肤恶性黑色素瘤中的阳性表达率(79.55%和75.00%)均高于交界痣(45.45%和40.91%)及正常皮肤组织(15.00%和30.00%)(P<0.05),Cath-D和MMP-9在皮肤恶性黑色素瘤中的阳性表达率随肿瘤浸润深度的增加而增高,且有淋巴结转移者阳性表达率大于无淋巴结转移者(P<0.05)。皮肤恶性黑色素瘤中Cath-D和MMP-9的表达呈正相关(rs=0.488,P<0.05)。结论 Cath-D和MMP-9在皮肤恶性黑色素瘤的发生、发展中可能起着重要作用,且与CMM的浸润转移密切相关,且二者之间可能具有协同作用。联合检测两者的表达情况可为CMM的早期诊断及预后提供新的靶点。

上皮性钙黏附蛋白及基质金属蛋白酶-9在皮肤黑色素瘤及色素痣中的表达及意义

目的:探讨皮肤黑色素瘤及色素痣中上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及意义。方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测48例皮肤黑色素瘤及20例色素痣组织中E-cadherin与MMP-9的表达,研究其与黑色素瘤进展转移的关系。结果:E-cadherin及MMP-9在皮肤黑色素瘤与色素痣中表达比较,差异均有统计学意义(P<0.01),E-cadherin和MMP-9的表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),二者在黑色素瘤中的表达呈显著负相关(r=-0.45,P<0.01)。结论:MMP-9及E-cadherin表达与黑色素瘤发生、发展有关,MMP-9上调可能与E-cadherin下调共同促进了黑色素瘤的浸润及淋巴结转移。

皮肤恶性黑色素瘤患者瘤组织中MMP-9、Nm23-H1和MTA1蛋白表达水平及临床意义

目的探讨皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中基质金属蛋白酶(MMP)-9、Nm23-H1和肿瘤转移相关基因蛋白1(MTA-1)表达水平及其临床意义。方法收集2013年10月—2015年12月收治的CMM 64例存档的蜡块标本作为CMM组,选取同期外科切取的28例皮肤交界痣标本及18例正常皮肤分别作为皮肤交界痣组与正常对照组。检测3组MMP-9、Nm23-H1和MTA-1蛋白的表达水平。结果 MMP-9、MTA-1蛋白在CMM组中阳性表达率最高,在皮肤交界痣组及正常对照组中阳性表达率逐渐降低(P<0.05);CMM组Nm23-H1蛋白阳性率低于正常对照组及皮肤交界痣组(P<0.05);MMP-9、MTA-1蛋白在CMM组中阳性表达率随Clark分级的增高逐渐升高,有淋巴结转移者阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.01);Nm23-H1在CMM组中阳性表达率随Clark分级的增高逐渐降低,有淋巴结转移者阳性表达率低于无淋巴结转移者(P<0.01)。结论 MMP-9、Nm23-H1和MTA1的表达水平在一定程度反映了CMM的病情,联合检测MMP-9、Nm23-H1和MTA1表达水平可为临床评估患者病情提供准确资料。

皮肤恶性黑色素瘤组织中Kiss-1和MMP-9蛋白的表达

目的:检测皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中Kiss-1和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。方法:应用免疫组化SP法检测42例CMM、20例皮肤交界痣及20例正常皮肤组织中Kiss-1及MMP-9蛋白的表达,探讨其与CMM发生及浸润转移的关系。结果:3种组织中Kiss-1和MMP-9蛋白阳性表达率相比差异有统计学意义(χ2=14.474和12.866,P<0.05);CMM组织中Kiss-1的表达低于交界痣及正常皮肤组织,而MMP-9的表达高于交界痣及正常皮肤组织(P<0.017)。CMM组织中Kiss-1及MMP-9的表达均与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)。CMM组织中Kiss-1与MMP-9的表达呈负关联(rP=-0.342,P=0.026)。结论:Kiss-1和MMP-9在CMM的发生发展中起重要作用。

乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白在皮肤黑素瘤中的表达

目的探讨乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白在皮肤黑素瘤中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白在皮肤黑素瘤30例、交界痣30例及15例正常皮肤组织中的表达。结果皮肤黑素瘤中乙酰肝素酶(63.3%)和基质金属蛋白酶-9蛋白(73.3%)的阳性表达率明显高于交界痣(6.6%)和正常对照组(0)(P均<0.05),交界痣与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9蛋白的高表达可能与皮肤黑素瘤的发生发展有关,有望作为治疗黑素瘤的靶点。

肝细胞癌MAGE-A9基因的克隆、表达及特性鉴定

目的:扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE鄄A9(melanomaantigenA9)cDNA,构建原核表达载体,制备抗MAGE鄄A9单抗,观察其在肝细胞癌中的表达。方法:从人肝癌组织提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE鄄A9cDNA,插入载体pMD18鄄T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gIII鄄MAGE鄄A9,转化大肠杆菌TOP10株进行表达。重组蛋白经L鄄Arabinose诱导表达纯化后,制备抗MAGE鄄A9单抗,免疫组化检测MAGE鄄A9在肝细胞癌中的表达和定位。结果:获得MAGE鄄A9cDNA,测序结果与GenBank一致。成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,SDS鄄PAGE分析其相对分子质量为35kD。获得抗MAGE鄄A9单抗,MAGE鄄A9在肝细胞癌中的阳性表达率为21%(8/39),主要表达于胞浆,未见肿瘤异质性,统计学分析MAGE鄄A9的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性。结论:有相当部分肝癌患者的肿瘤表达MAGE鄄A9抗原,且其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性,MAGE鄄A9可能成为肝癌特异性免疫治疗的靶点。

MAGE-A9对人乳腺癌MDA-MB-231细胞中P53转录活性及功能的影响

目的:探讨黑素瘤相关抗原-A9(melanoma-associated antigen,MAGE-A9)对人乳腺癌细胞中P53转录活性及功能的影响。方法:通过LipofectamineTM2000体外转染质粒pcDNA3.0、pcDNA3.0-p53、pCMV6-MAGE-A9和pcDNA3.0-p53/MAGE-A9至人乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR和Western blotting检测细胞中p21WAF1mRNA和蛋白的表达,荧光素酶报告基因分析检测细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶表达活性,MTT法检测转染不同质粒对MDA-MB-231细胞增殖的影响。结果:转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞中p21WAF1mRNA和蛋白表达水平均明显低于pcDNA3.0-p53组[(0.15±0.01)vs(0.18±0.02),(0.03±0.00)vs(0.06±0.01);均P<0.05]。转染pcDNA3.0-p53质粒可以增强MDAMB-231细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶的表达[(58.56±3.47)vs(1.00±0.12),P<0.01],转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9后,MDA-MB-231细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶的表达较转染pcDNA3.0-p53组明显降低[(22.02±4.91)vs(58.56±3.47),P<0.05]。与pcDNA3.0组相比,pcDNA3.0-p53组MDA-MB-231细胞增殖率明显明显降低[(228.89±22.39)%vs(337.23±23.67)%,P<0.05];而pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞增殖率明显高于pcDNA3.0-p53组[(291.51±5.91)%vs(228.89±22.39)%,P<0.05]。结论:MAGE-A9可抑制MDA-MB-231细胞中P53的转录活性及细胞增殖。

MMP-2,MMP-9和E-cadherin在皮肤恶性黑素瘤中的表达及意义

目的检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)在皮肤恶性黑素瘤中的表达及在肿瘤侵袭转移过程中的作用。方法采用免疫组化SP法检测MMP-2、MMP-9和E-cadherin在32例恶性黑素瘤及10例色素痣中的表达。结果 MMP-2与MMP-9在恶性黑素瘤中阳性表达率分别为93.75%和87.50%,均明显高于色素痣,组间差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01);MMP-2与MMP-9在有淋巴结转移者中阳性表达率均高于无淋巴结转移者(P<0.05,P<0.01)。E-cadherin在恶性黑素瘤中阳性表达率为21.88%,明显低于色素痣,组间差异有统计学意义(P<0.01);E-cadherin在有淋巴结转移者中阳性表达率低于无淋巴结转移者(P<0.05)。结论 MMP-2、MMP-9在恶性黑素瘤中均呈高表达,E-cadherin却高表达于色素痣,对它们的检测可能成为预测恶性黑素瘤转移和预后的重要指标。

MAGE-A9基因原核表达系统的构建及其在肝细胞癌中的表达

目的扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE-A9(melanom a antigen A9)cDNA,构建原核表达载体,制备抗MAGE-A9单抗,观察其在肝细胞癌中的定位。方法从人肝癌组织提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-A9cDNA,插入载体pMD18-T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gI-II-MAGE-A9,转化大肠杆菌TOP10株进行表达。重组蛋白经L-Arabinose诱导表达纯化后,制备抗MAGE-A9单抗,免疫组化检测MAGE-A9在肝细胞癌中的表达和定位。结果获得AGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致。成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,SDS-PAGE分析其相对分子质量为35Kd。获得抗MAGE-A9单抗,MAGE-A9在肝细胞癌中的阳性表达率为21%(8/39),主要表达于胞浆,未见肿瘤异质性,统计学分析MAGE-A9的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性。结论有相当部分肝癌患者的肿瘤表达MAGE-A9抗原,且其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性,MAGE-A9可能成为肝癌特异性免疫治疗的靶点。

基质金属蛋白酶-9mRNA在皮肤恶性黑素细胞瘤中的表达及意义

目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在皮肤恶性黑素细胞瘤中的表达及其意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测26例皮肤恶性黑素细胞瘤、30例色素痣组织中MMP-9mRNA的表达。结果19例皮肤恶性黑素细胞瘤组织中均有MMP-9mRNA的表达(74.1%),5例色素痣组织中可见MMP-9mRNA的表达(15.6%),两者相比差异具有统计学意义(P<0.01),有淋巴结转移皮肤黑色素瘤组MMP-9mRNA表达显著高于无淋巴结转移皮肤黑素瘤组(P<0.05)。结论MMP-9在皮肤恶性黑色素细胞瘤表达增高,表明其在皮肤恶性黑色素瘤中的发生、发展及转移中可能起一定的作用,有望作为治疗皮肤恶性黑色素瘤的靶点。

AR与Mda9/syntenin在三阴性乳腺癌中的表达及其意义

目的探讨研究雄激素受体(AR)与黑色素瘤分化相关基因9/配体蛋白聚糖结合蛋白(Mda9/syntenin)在三阴性乳腺癌中的表达及其意义。方法 80例三阴性乳腺癌组织,采用免疫组织化学法对其AR与syntenin的表达情况检测,并探讨二者与临床病理特点的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线评价患者无病生存率,COX比例回归模型进行多变量分析。结果 AR阳性表达率为37.50%,syntenin阳性表达率为98.75%;AR与组织学分级呈负相关性(γs=-0.236,P<0.05),syntenin与淋巴结转移状态呈正相关性(γs=0.296,P<0.05),与肿瘤大小呈正相关性(γs=0.370,P<0.05),与组织学分级也呈现正相关性(γs=0.230,P<0.05);无病生存者占77.5%(62/80),AR阴性与AR阳性患者、不同程度AR表达程度与无病生存期(DFS)均无相关性(P>0.05),而syntenin不同表达程度与DFS存在相关性(P<0.05);单因素分析显示:淋巴结转移是影响DFS的重要因素(P<0.05),多因素分析显示淋巴结转移、肿瘤>5 cm均是DFS危险因素(P<0.05)。结论 AR与患者的组织学分级相关、syntenin与组织学分级、淋巴结转移情况、肿瘤大小呈正相关性,syntenin表达与DFS存在明显关联。

去整合素金属蛋白酶9和血管内皮生长因子蛋白在眼部恶性黑色素瘤中的表达

目的探讨去整合素金属蛋白酶9(A disintegrin and metallo-proteinase9,ADAM9)及血管内皮生长因子蛋白(vascular endothelial growth factor,VEGF)在眼部恶性黑色素瘤组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法检测49例眼部恶性黑色素瘤和9例正常眼组织中ADAM9与VEGF蛋白的表达,并观察ADAM9和VEGF蛋白表达的相关性。结果 ADAM9蛋白在眼部恶性黑色素瘤中的阳性表达率为77.6%(38/49),而在正常脉络膜组织中完全没有表达(0/9),组间比较差异有统计学意义(P=0.000);VEGF蛋白在眼部恶性黑色素瘤中的阳性表达率为73.5%(36/49),而在正常脉络膜组织中完全没有表达(0/9),组间比较差异有统计学意义(P=0.000)。ADAM9和VEGF蛋白表达均与眼部恶性黑色素瘤组织是否侵犯巩膜密切相关(均为P<0.05),而在不同性别、年龄、肿瘤大小及最大基底径间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。相关性分析表明,ADAM9和VEGF蛋白在眼部恶性黑色素瘤中的表达呈显著正相关(r=0.341,P<0.05)。结论 ADAM9和VEGF蛋白表达与眼部恶性黑色素瘤的发生、发展和转移密切相关,联合检测ADAM9和VEGF蛋白有望成为眼部恶性黑色素瘤早期诊断和判断预后的分子指标之一。

黑素瘤抑制性活性蛋白及基质金属蛋白酶-9在恶性黑素瘤的表达

目的:探讨黑素瘤抑制性活性蛋白(MIA)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在恶性黑素瘤中的表达以及作用。方法:应用SP免疫组化技术对38例恶性黑素瘤石蜡标本以及32例色素痣石蜡标本检测MIA及MMP-9表达水平。结果:MIA在所有色素痣中表达阴性,而在原位黑素瘤、侵袭性黑素瘤、有淋巴结转移恶性黑素瘤、无淋巴结转移恶性黑素瘤阳性表达率分别为21.4%,91.6%、94.1%、42.8%,MMP-9在恶性黑素瘤阳性表达率为71.1%,MIA的表达与MMP-9的表达呈正相关。结论:MIA在恶性黑素瘤的发生发展中起着重要作用,这种作用可能是通过上调MMP-9的表达来实现的。MIA有可能成为临床诊断、治疗恶性黑素瘤的有力靶点。

GM3通过MMP-9调节B16细胞的运动性

目的通过不同的方法来研究GM3对MMP-9的调节作用。并进一步验证了GM3对细胞运动性的调节。方法分别用RT-PCR,Zymography,HPTLC,western blotting和transwell的方法来检测MMP-9的mRNA表达水平,MMP-9的活性,GM3,Akt的磷酸化以及细胞的运动性。结果通过几种不同的方法来研究是否GM3参与MMP-9的调空:a.通过转染半乳糖转移酶的顺反序列来调节GM3的表达,从而初步证明GM3可以调节MMP-9的表达;b.通过外加GM3可以清楚的观察到MMP-9的表达量升高;c.神经节苷脂抑制剂D-PDMP的加入更进一步的证明了MMP-9的表达始终与GM3的表达相关;另外,通过PI3K抑制剂的试验进一步证明了GM3通过PI3K来调节MMP-9的表达。在此基础上,更进一步的证明了神经节苷脂可以调节细胞的运动性。结论GM3可以通过PI3K/Akt信号传导途径来正调控MMP-9的表达,并且调节细胞的运动性。