甘蔗茎尖脱毒组织培养技术研究进展

文章从危害甘蔗的主要病害、甘蔗茎尖脱毒技术的发展及原理、甘蔗茎尖脱毒技术在生产上的应用、影响甘蔗茎尖脱毒效率的因素等方面介绍了甘蔗茎尖脱毒组培技术,提出培养基中植物生长调节剂的绝对浓度和配比、培养基的状态及如何解决培养中的酚污染等问题仍是甘蔗茎尖脱毒培养研究的热点。由于碱性孔雀绿、2,4-D、硫尿嘧啶、TS制剂(一种病毒钝化剂)等在其他作物组织培养脱毒培养中可以提高脱毒效率,因此,今后需研究这些化学制剂在甘蔗组培脱毒中的应用效果,并继续深入研究间歇浸没式反应器和植物无糖组培快繁技术等先进技术体系在甘蔗中的应用,运用新技术新设备提高甘蔗组培生产效率并降低生产成本。

甘薯茎尖脱毒研究

本文报道了应用甘薯茎尖分生组织培养技术获得脱毒苗的研究结果。试验表明切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的负相关（ｒ＝－０．９８７５），表明病毒距茎尖呈递减分布，越接近茎尖顶端带病毒越少或不带病毒。分生组织带１～２个叶原基脱毒效果较好，添加适量的病毒钝化剂可提高脱毒率，但抑制茎尖生长，成苗率有所降低。选用无症状、生长健壮的薯苗作脱毒材料，可以得到较高脱毒率的组培苗。

甘薯茎尖分生组织培养及快速繁殖技术研究

以徐薯１８、豫薯８号等品种为试材，对添加不同生长调节剂培养基的４个品种甘薯茎尖进行分生组织培养和脱毒苗快速繁殖研究。结果表明，甘薯茎尖采用体积分数为００５的次氯酸钠溶液消毒１０ｍｉｎ，切取０３～０５ｍｍ长的茎尖分生组织，在附加ＢＡ２２２μｍｏｌ·Ｌ－１，ＩＡＡ０５７μｍｏｌ·Ｌ－１和ＧＡ３０２９μｍｏｌ·Ｌ－１的ＭＳ培养基中，４个品种的茎尖培养成苗率为６８１％～８６６％，成苗期４６～６４ｄ转入第二培养基的时间以１８～２１ｄ较好，ＭＳ＋ＮＡＡ２６９μｍｏｌ·Ｌ－１培养基对甘薯无毒苗的快速繁殖更有利。以蛭石为移栽基质。

热处理对大葱茎尖脱毒效果的影响

利用章丘大葱茎尖进行脱毒效果研究。结果表明,当茎尖大小为0.15￣0.3mm或茎尖大小为0.3￣0.5mm,75℃高温处理10min后,脱毒率均达100%。细胞学观察结果表明,该途径能保持遗传稳定性。

超低温保存法去除马铃薯X病毒和马铃薯纺锤块茎类病毒

病毒病严重危害马铃薯生产,是造成马铃薯减产和品质下降的主要因素。PVX和PSTVd属于危害马铃薯最主要的病毒。本文尝试用超低温保存法和常规方法(茎尖分生组织培养、温热疗法以及温热疗法结合茎尖分生组织培养)来去除马铃薯试管苗中的PSTVd和PVX。结果显示马铃薯茎尖经过超低温保存后,存活率和成苗率分别为83.64%和72.04%,高于茎尖分生组织培养(46.67%和31.49%)、温热疗法(72.22%和44.44%)以及温热疗法结合茎尖分生组织培养(50.54%和30.38%)。4种方法都可以去除PVX,其中超低温保存法的脱毒率最高,为59.13%,温热疗法结合茎尖分生组织培养为56.02%,温热疗法和茎尖分生组织培养较低,为42.61%和35.83%。但是4种方法都未能有效地去除PSTVd类病毒,只能通过严格检疫来控制。

马铃薯茎尖脱毒培养方法优化研究

以甘肃省主栽品种陇薯6号为材料,研究了茎尖大小及培养基中激素和活性炭对马铃薯茎尖培养成活的影响。结果表明,叶原基数为2的茎尖脱毒效果最好;MS培养基中加入0.5 mg·L^(-1)6-BA、0.1mg·L^(-1)GA_3和0.1 mg·L^(-1) NAA有助于陇薯6号茎尖分生组织分化;加入0.05%活性炭,茎尖成苗时间提前了13 d,成苗率增加了7.5%。

热处理结合茎尖组织培养脱除唐菖蒲病毒的研究

应用热处理与茎尖组织培养相结合的方法，对唐菖蒲携带的ＣＭＶ，ＢＹＭＶ，ＴＭＶ进行脱病毒研究。脱毒试管苗进行了生物测定和电镜观察，对流免疫电泳测定，间接酶联免疫吸附法测定．结果表明，热处理结合茎尖组织培养的方法脱病毒效果优于单独进行茎尖组织培养的效果。４２℃处理５ｄ的茎尖组织培养试管苗脱病毒的综合效果最佳。同时改进了唐菖蒲组织培养中的脱分化及生根培养基，缩短了培养周期，使一个茎尖外殖体一年内可扩繁３００００余倍。并提出了商品化生产脱毒种球的程序．

果蔗Badila花叶病茎尖脱毒技术的研究

本文利用热带种 (Badila)茎尖培养进行脱毒研究。试验结果表明 :细胞分裂素是茎尖成苗所必需的激素 ,萘乙酸则不是 ,0 .5- 1 .0 mm外植体在附加 2 .0 mg/ L BA和 0 .2 mg/ L NAA的 MS液体培养基中进行离体培养 ,成苗率可达 30 %以上 ;采用液体培养和在培养基中添加少量的活性炭均能有效地防止酚污染 ,提高成苗率 ;茎尖培养结合热处理能有效地脱除花叶病毒 ,侧芽培养无法进行脱毒。田间调查表明 ,茎尖脱毒苗在光合速率、株高、茎径方面显著优于未脱毒的侧芽苗 。

风信子鳞茎带毒率测定及无毒苗繁殖方法

用指示植物对４２份风信子病样进行病毒分离和带毒率测定。病样平均带毒率为４７．６％。初步看出上海地区危害风信子的病毒主要是ＣＭＶ，其次是ＴＭＶ。进行了茎尖培养，经检测确认不带毒鳞茎的鳞片培养是目前获得风信子无毒或少毒苗的有效方法。

激素及光照对甘薯茎尖分生组织培养的影响

根据不同基因型甘薯茎尖分生组织在不同激素水平的生长反应，将４个河南主栽甘薯品种分为３类：激素不敏感易成苗型、激素敏感易成苗型和激素不敏感难成苗型。光照时数不是甘薯茎尖培养成苗的限制因素，以不低于１４ｈ／ｄ为好。

玻璃化法──园艺作物茎尖和分生组织超低温保存的新途径──文献综述

总结了玻璃化法超低温保存的基本原理、程序和主要优点，综述了该技术在冻存园艺作物茎尖和分生组织中的最新成就，并对其应用前景作了展望。

马铃薯茎尖分化成苗的培养基优化研究

通过调节固体和液体MS培养基中的激素浓度,研究了不同浓度IAA,NAA,6-BA,GA3及其组合的12种培养基对鄂马铃薯3号茎尖成苗的诱导作用,结果表明,MS培养基中加入IAA0.1mg/L,NAA0.05mg/L及GA30.1mg/L均有助于鄂马铃薯3号茎尖分生组织分化,且以液体MS+IAA0.1mg/L+GA30.1mg/L的激素配比的成苗效果最好。

野葛(Pueraria lobata)愈伤组织诱导及组织培养

以野葛茎尖分生组织为外植体,通过不同激素与MS培养基配比试验,筛选出野葛茎尖分生组织愈伤组织诱导与植株再生的最适培养基,建立野葛植株再生体系。试验结果表明:茎尖分生组织在MS+2,4-D 0.5 mg/L培养基上启动诱导愈伤组织,再转移到MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L继续诱导,愈伤组织诱导率高,繁殖能力旺盛。在MS+6-BA 1 mg/L培养基上愈伤组织分化率100%,生长能力较强。在MS+NAA 0.1 mg/L培养基上,诱导生根率达到60%。

泡桐微茎尖培养脱除泡桐丛枝病原（MLO）的研究

以感染丛枝病原（ＭＬＯ）的泡桐组培苗为试材，大量切取长度在０．３ｍｍ～０．５ｍｍ范围内的微茎尖，在ＭＳ和附加０．１ｍｇ／ＬＩＢＡ和１～７ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的培养基上进行脱毒试验。根据外植体培养过程的病状有无．病源ＭＬＯ的ＤＡＰＩ荧光显微镜和电子显微镜检查结果，证明微茎炎培养能够获得脱除泡桐丛枝病原ＭＬＯ的试管苗，其脱毒率在１４．２９～２８．５７％之间。脱毒的两个无性系试管苗经连续继代培养一年以上，其生长性状正常且稳定。试验还显示了微茎炎培养脱毒率受采用的茎尖大小、切割技术、培养基中的激素比例及无性系的不同等因素的影响较大。

甘薯茎尖分生组织培养的研究进展

综述了甘薯茎尖分生组织培养的原理、方法、影响因素及其研究进展,指出了茎尖组织培养存在的未被广泛认识、由于品种差异造成的培养基成分不同、病毒再侵染、生产成本高等问题。茎尖组织培养前景广阔,具有繁殖系数高、增产幅度大等特点。

罗汉果无花叶病苗的培育

在ＭＳ附加ＢＡ０．５—１．０ｍｇ·Ｌ－１、ＩＡＡ１．０ｍｇ·Ｌ－１及Ａｄ８０ｍｇ·Ｌ－１培养基上建立罗汉果试管株系．分别用热处理和微茎尖进行脱除花叶病毒培育无病苗的研究．结果表明；用０．８—１．０ｍｍ微茎尖培养和用３８．５℃热处理１周后再切取２ｍｍ茎尖培养，脱毒效果最好，其脱毒率和成活率均达１００％．采用植物形态特征比较法、黄瓜作指示植物的生物学鉴定法及电镜观察法进行了小苗脱毒鉴定．研究还对带毒苗与经鉴定为脱毒苗的叶片氨基酸进行测定，结果显示两者间游离氨基酸含量差异显著．

两种苹果潜隐病毒脱毒技术研究

该文应用热处理、热处理加茎尖组织培养以及在培养基中加入抗病毒药剂等方法，脱除了苹果优系短枝富士的苹果褪绿叶斑病毒（ＣＬＳＶ）和苹果茎沟病毒（ＳＧＶ），从而获得无潜隐病毒苗木。

银条茎尖培养快繁及离体根状茎的诱导

以银条‘二细一粗’品种为试材 ,研究了蔗糖浓度、激素组合对茎尖培养和快速繁殖的影响及温度、光照、蔗糖浓度等因素对根状茎离体诱导的影响。结果表明 :茎尖培养较理想的培养基为MS +蔗糖 4 % +6 BA 0 5mg·L-1+NAA 0 1mg·L-1,成苗率可达 74 0 %。茎尖增殖较适培养基为MS +6 BA 3 0mg·L-1+NAA 0 5mg·L-1,每个外植体平均可产生 5 6个芽。根状茎诱导以MS +蔗糖 10 % +6 BA 5 0mg·L-1+CCC 5 0 0mg·L-1培养基 ,2

不同浓度NAA对甘薯茎尖诱导植株再生的影响

[目的]研究不同浓度NAA对甘薯茎尖诱导植株再生的影响。[方法]以甘薯品种烟薯25号、烟薯26号和烟紫薯3号的茎尖为材料,采用不同浓度NAA处理,对甘薯茎尖组织的诱导培养及高效植株再生进行了研究。[结果]烟薯25号较适宜的茎尖诱导培养基为1.0 mg/L NAA+MS,植株再生率为91%;烟薯26号和烟紫薯3号较适宜的茎尖诱导培养基为1.5 mg/L NAA+MS,植株再生率分别为88%和80%。[结论]该研究可为今后开展规模化甘薯脱毒苗生产提供基础资料。

真盐生植物盐地碱蓬茎尖组织培养和植株再生

以盐地碱蓬茎尖为外植体,探讨了不同激素浓度配比对植株再生的影响.结果表明,以盐地碱蓬茎尖为外植体,在附加1.0mg/L6-BA和0.5mg/LIAA的MS培养基上培养30天可诱导出不定芽,不定芽的诱导频率达到100以上,每个外植体的平均出芽数达到3.63,60天后形成丛生芽.不定芽转至MS培养基中培养10天生根形成完整植株.本文建立了真盐生植物盐地碱蓬高效的再生体系,为遗传转化体系的创建奠定了基础.