雌、孕激素通过腺苷A_(2B)R通路调节JEG-3绒癌细胞系上调MMP-2的表达

目的:观察雌、孕激素对人绒癌细胞系JEG-3腺苷受体表达的影响,探讨它对JEG-3侵袭性的影响。方法:JEG-3细胞在含雌、孕激素环境中培养24h,设MRS1706(A2BR阻断剂)干预组及空白对照组;用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达,RT-PCR技术检测JEG-3细胞腺苷受体mRNA水平。结果:RT-PCR结果显示,JEG-3细胞表达腺苷A1R、A2AR及A2BR3个亚型,未检测到A3R的表达;雌激素和(或)孕激素处理组A2BRmRNA含量显著高于对照组(P<0.05);明胶酶谱检测发现雌、孕激素联合处理显著上调JEG-3细胞MMP-2的分泌水平(P<0.05),但对MMP-9无显著影响;阻断A2BR信号途径显著下调JEG-3MMP-2表达,并能抑制雌、孕激素对MMP-2的上调效应(P<0.05)。结论:雌孕激素能改变JEG-3绒癌细胞腺苷受体的表达模式,呈A2BR优势表达,A2BR信号通路参与雌孕激素对JEG-3细胞侵袭性的调节。

糖尿病脑梗死患者血清中MMP-1、TIMP-2的测定及临床意义

目的研究糖尿病脑梗死患者血清中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)的水平变化,分析其与脑梗死发生发展的临床意义。方法选用2010年10月至2012年10月收治糖尿病脑梗死患45例、糖尿病非脑梗死患者47例、非糖尿病脑梗死患者61例以及健康体检者58例,依此将他们划分为A组、B组、C组和D组。采用酶联免疫分析法(ELISA法)检测四组受检者血清中的MMP-1和TIMP-2的水平。结果糖尿病脑梗死患者血清中的MMP-1和TIMP-2水平明显高于糖尿病非脑梗死患者、非糖尿病脑梗死患者和健康体检者(P<0.05)。结论糖尿病脑梗死患者血清中MMP-1、TIMP-2水平升高,而且和血糖水平正相关,MMP-1和TIMP-2可能在糖尿病脑梗死发生、发展中有十分重要的作用。

复方861对DMN损伤性大鼠肝纤维化肝脏中MMP-2表达的影响

目的研究抗肝纤维化中药复方861对DMN诱导的肝纤维化大鼠肝脏中MMP-2表达的影响。方法将大鼠随机分成正常对照组,模型组与861防治组。模型组以DMN腹腔内注射,第1周注射3次,随后每周2次,共注射6周;治疗组同法注射DMN同时每日灌胃861冲剂;正常对照组以生理盐水代替腹腔内注射。实验结束处死大鼠,留取的肝脏组织做HE与Masson染色按0～4期标准判定肝纤维化程度,应用半定量RT-PCR检测肝组织中MMP-2mRNA,用免疫组化检测肝组织中MMP-2的表达。结果模型组大鼠肝纤维化程度处于2～4期,其中大部分达3期以上,861防治组大鼠肝纤维化程度明显减轻,只有少部分达3期。模型组大鼠肝组织中MMP-2mRNA水平显著高于正常对照组(t=4.03,P<0.01),而861防治组大鼠肝组织中MMP-2mRNA水平显著低于模型组(t=3.43,P<0.01)。861防治组与正常组之间,肝组织中MMP-2mRNA水平无明显差别。模型组大鼠肝组织MMP-2的阳性表达显著强于正常对照组(t=4.56,P<0.01),861防治组肝组织中MMP-2的阳性表达虽明显强于正常组(t=2.71,P<0.05),但较模型组显著减弱(t=3.24,P<0.01)。结论中药复方861能有效抑制DMN诱导的肝纤维化大鼠肝脏中MMP-2的表达,可能有利于维持HSC处于静止状态所需要的细胞外基质环境,这对于抑制HSC的活化与肝纤维化的发展具有重要意义。

HER-2、MMP-2、IGF-1和VEGF在宫颈癌组织中的表达及意义

目的:探讨与肿瘤生长浸润和转移相关的表皮生长因子受体(HER-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中的表达及意义。方法:收集维吾尔族妇女浸润性宫颈鳞癌患者的宫颈癌组织38例,并收集正常宫颈组织32例作为正常对照。分别运用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测HER-2、MMP-2、IGF-1和VEGF在不同宫颈组织中的m RNA及蛋白表达水平。结果:Q-PCR检测结果显示,与正常对照组相比,HER-2、IGF-1、MMP-2和VEGF的m RNA表达水平在宫颈组织中均有不同程度的升高,差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01)。Western blot检测显示HER-2、MMP-2和VEGF蛋白表达水平在宫颈癌组中的表达亦均较正常对照组有不同程度的升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而IGF-1在两组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HER-2、MMP-2、IGF-1和VEGF在维吾尔族妇女宫颈癌组织中的过度表达可能与宫颈癌的发生密切相关。

维生素C对大鼠缺血再灌注肾组织MMP-2表达的影响

目的:观察维生素C(VitC)对大鼠肾脏缺血再灌注(RIR)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响,探讨其对RIR损伤保护的机制。方法:48只雄性大鼠随机分成假手术组、RIR组和VitC组,比色法测定各组血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平及肾组织丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;HE染色观察肾组织病理变化情况,并进行中性粒细胞计数;免疫组化法观察肾组织MMP-2蛋白表达。结果:与RIR组比较,VitC组血清BUN,Scr水平,肾组织匀浆MDA,LDH水平以及中性粒细胞计数均显著下降,而SOD活性显著升高;肾组织病理切片镜下显示RIR组大量肾小管结构缺损,变性,出血,坏死,VitC组较RIR组肾小管病变减轻明显;VitC预处理后,MMP-2表达较RIR组肾小管显著减少。结论:肾脏缺血再灌注时,MMP-2参与介导了中性粒细胞对肾组织的浸润和自由基的活化,VitC可能通过降低MMP-2在肾组织中的表达而减轻肾脏缺血再灌注损伤。

清热消积方对人肺腺癌细胞A549 VEGF及MMP-2表达的影响

目的:研究清热消积方对体外培养的人肺腺癌细胞A549 VEGF及MMP-2表达的影响。方法:将不同浓度清热消积方与人肺腺癌细胞A549作用,用Elisa法检测清热消积方对VEGF及MMP-2蛋白表达水平的影响;PCR法检测清热消积方对VEGF和MMP-2的mRNA水平的影响。结果:高、中浓度组清热消积方及清热消积方-5-FU联用组能够明显抑制VEGF及MMP-2蛋白表达,且对VEGF和MMP-2的mRNA水平有抑制作用,呈现一定的剂量依赖性。结论:清热消积方可抑制人肺腺癌细胞A549 VEGF及MMP-2生成,可能是其抗肿瘤血管形成效应的机制之一。

血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-2在乳腺癌中的表达及其相关性的意义

目的研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-2(matrix metal proteinase-2,MMP-2)在乳腺癌中的表达及其相关性,并探讨其意义。方法2006年1月至2006年12月在福建医科大学附属协和医院行乳腺癌改良根治术患者20例术后石蜡包埋组织,应用免疫组织化学方法检测VEGF、MMP-2的表达情况,另选取同期20例正常乳腺组织作为对照。结果乳腺癌组织中VEGF与MMP-2的阳性表达率分别为65%(13/20)与60%(12/20),与正常组织相比差异均有统计学意义(P<0.01);且VEGF与MMP-2的表达密切相关(kappa=0.894,P<0.01)。结论VEGF和MMP-2在乳腺癌组织中表达明显增高,且存在显著相关性,二者在乳腺癌发生发展中起着重要的作用。

二烯丙基三硫化物包被支架术后冠状动脉管壁基质金属蛋白酶2及其抑制物表达的变化

目的探讨二烯丙基三硫化物包被支架对犬冠状动脉基质金属蛋白酶2及基质金属蛋白酶组织抑制物2表达的影响。方法利用犬冠状动脉置入过大支架致内膜损伤,建立血管狭窄的动物模型。28个支架平分为基础对照组(单纯蛋白包被支架)和二烯丙基三硫化物治疗组(二烯丙基三硫化物包被支架),分别置入14只杂种犬的冠状动脉前降支或回旋支,未置入支架的另一支冠状动脉作为正常对照组(n=14)。在不同时点(5 h,1、7、14天和28天)处死动物,术后4周的血管标本做病理切片,部分组织抽提总RNA,应用RT-PCR方法测定不同时点冠状动脉壁内基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达。结果与基础对照组相比,4周后二烯丙基三硫化物包被支架组显著抑制新生内膜的形成(P<0.01),面积狭窄率显著降低(P<0.01);与基础对照组相比,在5 h、1、14天和28天二烯丙基三硫化物包被支架显著抑制冠状动脉壁内基质金属蛋白酶2 mRNA的表达(P<0.05)。在5 h、1天和14天3个时点,二烯丙基三硫化物组与基础对照组基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达差异无显著性;在7天和28天,二烯丙基三硫化物组基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达明显高于对照组(P<0.05)。结论二烯丙基三硫化物包被支架明显抑制基质金属蛋白酶2基因的表达和增加基质金属蛋白酶组织抑制物2基因的表达,这可能是二烯丙基三硫化物抑制内膜增生的机制之一。

基于免疫组织化学法分析基质金属蛋白酶2在喉鳞状细胞癌中表达及意义的Meta分析

目的系统评价基质金属蛋白酶2(MMP-2)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及意义。方法联机检索中国知网、万方、维普、Pubmed、Web of science等国内外数据库,辅以手工检索,检索时间跨度为建库后到2017年1月,收集有关MMP-2在LSCC中表达及其意义的独立病例-对照研究。根据纳入、排除标准(包括是否基于免疫组织化学法)筛选有关文献并抽取一系列指标数据,然后运用Review manager 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入符合标准的文献9篇。Meta分析显示:MMP-2在LSCC组的表达高于对照组,差异具有统计学意义(OR=8.88,95%CI:5.04~15.63,P<0.05)。MMP-2在LSCCⅢ~Ⅳ期的表达高于Ⅰ~Ⅱ期(OR=2.76,95%CI:1.39~5.51,P<0.05),T3~T4期高于T1~T2期(OR=3.46,95%CI:1.72~6.96,P<0.05),淋巴结转移组高于无转移组(OR=4.07,95%CI:1.60~10.32,P<0.05),中低病理分化组高于高病理分化组(OR=3.04,95%CI:1.35~6.85,P<0.05)。MMP-2在LSCC不同原发位置中的表达差异无统计学意义(OR=1.10,95%CI:0.38~3.13,P=0.86)。结论 MMP-2在LSCC组织中高表达,可能在喉癌的早期诊断、治疗等方面具有重要意义。

食管癌患者血清中MMP-2和MMP-9的含量及其临床意义

目的探讨食管癌患者血清中基质金属蛋白酶－2（MMP-2）及基质金属蛋白酶-9（MMP－9）的含量及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定36例食管癌患者（病例组）和10例健康者（对照组）血清中MMP-2和MMP-9的水平。所有患者取血前均未接受任何治疗，并且肿瘤术后按照病理结果对其进行TNM分期。结果食管癌患者血清中MMP－2及MMP－9的水平高于健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。食管癌患者血清中MMP－2及MMP－9的水平与年龄、性别、组织学类型无关（P〉0．05），与有无淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05）。经相关性分析，MMP-2和MMP-9在食管癌患者血清中的含量呈正相关（r=0．45；P〈0．05）。结论早期联合检测血清MMP－2和MMP－9水平对明确食管癌的诊断、发生发展过程以及判断预后具有极其重要的临床意义。

胚胎干细胞关键因子NANOG对膀胱癌细胞侵袭能力的影响

目的检测T24膀胱癌细胞的NANOG基因被沉默后影响T24细胞的侵袭能力。方法以人膀胱癌细胞株T24细胞为靶细胞,转染短发卡RNA(shRNA)沉默T24细胞的NANOG基因。通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1表达的变化,通过划痕实验和侵袭实验检测T24细胞侵袭力的变化。结果当NANOG基因被沉默后,RT-qPCR检测T24细胞中MMP-2、MMP-9的mRNA表达下调(MMP-2下调63.21%,P<0.05;MMP-9下调73.55%,P<0.05),ELISA结果显示T24细胞上清中MMP-9的蛋白水平表达下调(21.07%,P<0.05)。划痕实验和侵袭实验表明在NANOG基因被沉默后,细胞的侵袭能力下降(均P<0.05)。结论NANOG基因可能通过调节膀胱癌细胞MMP-2及MMP-9的表达来介导膀胱癌细胞向周围组织的侵袭。