卟啉介导抗癌药物研究

卟啉是一类具有特别生物功能的化合物 ,对于增殖异常的组织具有一定的亲和力 .利用这一特性 ,合成了四 -对羟基苯卟啉 (ZnII)甲氨蝶呤衍生物 ,并使用红外、紫外、质谱、核磁和元素分析等手段对该化合物进行了表征 .做了该化合物在细胞水平上抗艾氏腹水型肿瘤实验 ,其IC50 值为 0 2 8μg/mL .同时在小鼠体内做了抗艾氏腹水型肿瘤实验 ,抑瘤率为75 82 % .初步实验表明 ,该化合物具有良好的抗癌体内外活性及较小的毒副作用 .

中药祛银颗粒治疗银屑病的机制研究

目的:探讨祛银颗粒治疗银屑病的可能机制及量效关系。方法:建立小鼠阴道上皮模型和鼠尾鳞片表皮模型,设生理盐水组、祛银颗粒低、中、高剂量组和甲氨喋呤(methotrexatum,MTX)组,观察各组对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响和促进小鼠尾部鳞片颗粒层形成的能力。结果:祛银颗粒中剂量组及高剂量组均可以显著抑制小鼠阴道上皮细胞有丝分裂(P<0.01),不同浓度祛银颗粒呈现明显的量效关系;高剂量组与甲氨喋呤组抑制小鼠阴道上皮细胞有丝分裂效果相当。祛银颗粒中剂量组、高剂量组可以显著促进小鼠尾部鳞片表皮的颗粒层形成(P<0.01),不同浓度祛银颗粒呈现明显的量效关系;表明祛银颗粒能够促进小鼠尾部鳞片颗粒层形成,并随剂量的增大而作用增强,但促进小鼠尾部鳞片颗粒层形成的能力均不如甲氨喋呤组。研究未发现中药组有明显的毒副作用。结论:祛银颗粒治疗银屑病的机制与抑制表皮细胞增生和改善角化不全有关。

金属卟啉介导抗癌药物研究

目的提高现有抗癌药物的靶向性 ,降低其不良反应。方法采用对于增殖异常的组织具有一定亲和力的卟啉类物质作为先导化合物 ,对甲氨蝶呤进行修饰 ,合成四 对羟基苯卟啉 (ZnⅡ )甲氨蝶呤衍生物 ,并使用红外、紫外、核磁和元素分析等手段对该化合物进行表征。结果发现该化合物在细胞水平上抗EAC的IC50 值为 0 99mg/L。对小鼠体内的抗EAC实验表明在与甲氨蝶呤对照组折合相同剂量的前提下 ,动物死亡率下降了 5 0 % ,但抑瘤率仍可保持在 6 0 %以上。结论可能是由于金属锌卟啉中 ,锌有空的价电子轨道 ,在特定条件下 ,可以接受细胞膜上配体的孤电子对或成键π电子 ,形成轴向配位化学建 ,使得卟啉环易于吸附并穿过细胞膜 ,在卟啉的介导下 ,锌卟啉甲氨蝶啉衍生物产生靶向性分布 ,从而减少了它的不良反应 ,并保留其抗癌活性。

流动注射化学发光法测定甲氨蝶呤

研究了甲醛增强高锰酸钾与甲氨蝶呤的化学发光反应，由此建立了一种测定甲氨蝶呤的流动注射化学发光分析法。方法的检出限为 ３． ４ × １０－９ｇ／ｍＬ，相对标准偏差为１．１％（２．０×１０－６ｇ／ｍＬ甲氨蝶呤，ｎ＝１１），线性范围为１．０×１０－８～１．０×１０－５ｇ／ｍＬ。该法已用于甲氨蝶呤针剂及片剂中甲氨蝶呤含量的测定。

人转铁蛋白-甲氨喋呤结合物对人肝细胞、人肝癌细胞体外细胞毒的作用特点

目的 了解人转铁蛋白 (Tf)与甲氨喋呤 (MTX)结合物 (Tf- MTX)对人肝细胞和人肝癌细胞体外细胞毒的特点。 方法 采用氧化葡聚糖 (Dex) T- 40作为中介体 ,联结 Tf与 MTX制备人转铁蛋白 -甲氨喋呤结合物(Tf- MTX) ,用四甲偶氮唑蓝法比较结合物对人肝细胞 L - 0 2及人肝癌细胞 Bel 740 4的体外杀伤强度。 结果 体外细胞毒试验显示 ,Tf- MTX对人肝细胞 L - 0 2作用 48h的 IC5 0 是对人肝癌细胞 Bel 740 4的 3.36倍 ,而 MTX对上述细胞作用 1h的 IC5 0 是 Tf- MTX的 3.2 2倍。 结论 Tf- MTX对肿瘤细胞 Bel 740

甲基强的松龙联合鞘内注射治疗狼疮脑病的疗效观察

目的:观察甲基强的松龙(MP)冲击联合鞘内注射甲氨喋呤(MTX)和地塞米松(DXM)治疗狼疮脑病的临床疗效。方法:22例狼疮脑病用甲基强的松龙(MP)500mg静脉滴注3d,随后口服常规强的松1mg/kg·d,同时行鞘内注射甲氨喋呤(MTX)和地塞米松(DXM),每周1次,共3次。结果:有效21例,无效1例,不良反应少。结论:甲基强的松龙(MP)冲击联合鞘内注射甲氨喋呤(MTX)和地塞米松(DXM)是治疗狼疮脑病的有效方法,值得临床推广。

甲氨蝶呤/层状双金属氢氧化物的性能调控及细胞生物实验研究

在乙醇-水混合体系中,以氨水为沉淀剂共沉淀合成了甲氨蝶呤/层状双金属氢氧化物(MTX/LDH)纳米复合物,采用控制水热处理时间的方式来调控其性能。利用X-射线衍射(XRD)、透射电镜(TEM)和红外光谱(FT-IR)等表征手段,对其结构及形貌进行了表征。研究表明:MTX分子以单层倾斜或垂直方式插入LDH层间,随着水热处理时间的不同,MTX在层间的倾斜角度发生了变化;水热处理时间对产物的结晶度、粒径和层间排列方式都有影响,当水热处理时间为12h时,得到的MTX/LDH纳米复合物的结晶度最高,单分散性最好。在磷酸缓冲液中考察了MTX/LDH纳米复合物的缓释性能,结果表明样品均呈现出良好的缓释性能,释放速率先快后慢。重点考察了这几种MTX/LDH纳米复合物作用于肺癌细胞A549的细胞生物实验,研究表明这几种复合物对肺癌细胞A549都具有良好的抑制作用,其效果与纳米复合物的单分散性和粒径有密切的关系,单分散性越好,粒径分布越均匀,对A549癌细胞的抑制效果越好。

转铁蛋白－MTX偶联物的制备及体外试验

以人血浆组份Ⅳ为原料，经过多步纯化及铁饱和，得到纯度为９９％的铁饱和转铁蛋白（Ｈｏｌｏ－ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ，Ｈｏｌｏ－ＴＦ）；以转铁蛋白（Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ，ＴＦ）为载体，采用两种不同的偶联方法制备ＴＦ－氨甲蝶呤（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｕｍ，ＭＴＸ）偶联物：（１）碳二亚胺（ＣＤＣ）法；（２）活化酯（ａｃｔｉｖｅｅｓｔｅｒ）法。偶联制备得到的偶联物兼具有转铁蛋白和药物的特性。体外杀伤试验表明，ＴＦ－ＭＴＸ对Ｋ（５６２）白血病细胞较游离ＭＴＸ分别强８．０倍（ＣＤＣ）和９．０倍（ａｃｔｉｖｅｅｓｔｅｒ）；对ＢＥＬ－７７２１肝癌细胞较游离ＭＴＸ强１４．７倍（ａｃｔｉｖｅｅｓｔｅｒ）。这说明按本文方法制备的偶联药物对于肝癌细胞，白血病细胞有一定的导向杀伤作用。

醇水介质中共沉淀法制备甲氨蝶呤/层状双氢氧化物纳米材料的研究

采用乙醇-水混合溶液为溶剂,以NaOH为沉淀剂制备了甲氨蝶呤(MTX)-镁铝层状双氢氧化物(Mg-Al-LDH)纳米复合材料,利用X-射线衍射(XRD)、透射电镜(TEM)和傅里叶变换红外(FT-IR)光谱等表征手段,对其结构及形貌进行了系统研究.研究表明,与传统的水溶液共沉淀法相比,醇水共沉淀法制备的MTX/LDH纳米复合物为球形片状,粒径较小,且分散性好.研究了醇水体积比对MTX/LDH纳米复合物性质的影响,结果表明,MTX分子以单层倾斜方式插入氢氧化物层间,随着合成条件的变化倾斜角度发生改变.当醇水体积比为1∶3时,制得的粒子最小,且大小均匀,无团聚现象.在磷酸缓冲液中考察了不同粒径MTX/LDH纳米复合物的缓释性能,结果表明,粒径小的MTX/LDH纳米粒子缓释效果优于粒径大的.

Influences of Synthesis Conditions on the Formation of Methotrexate Intercalated Layered Double Hydroxides by Exfoliation-reassembly Route

The intercalation of methotrexate(MTX) into layered double hydroxides(LDHs) via an exfoliation-reassembly process was performed and the resulting hybrids were then characterized by X-ray difEractiometry( XRD), Fourier transform infrared(FTIR) spectroscopy, thermogravimetry(TG) and differential scanning calorimetry(DSC), etc. In the synthesis procedure, LDHs particles were firstly delaminated, and the reassembly process was performed to get MTX intercalated LDH(MTX/LDHs) hybrids. Tlie reassembly conditions, such as reassembly time and diflerent reassembly solvent, were studied emphatically. It was fbimd that 20 min is the optimum time and formamide is the most suitable solvent in the reassembly process. At last, the controlled release property and the drug-loading capacity were examined emphatically to reveal that MTX/LDHs hybrids reassembled in fomiamide exhibit the highest drug-loading capacity. The cytotoxicity of the hybrids was estimated by 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-/7-tetrazolium bromide, thiazolyl blue tetrazolium bromide(MTT) assays on the human lung cancer cells(A549), with the results showing that MTX/LDHs hybrids have effective suppress role on the proliferation of cancer cells, and tlie hybrids obtained from the formamide solution present much better anticancer efleet than the other samples.

甲氨蝶呤/层状双金属氢氧化物的粒径调控及缓释性能研究

在乙醇-水混合体系中,以氨水为沉淀剂共沉淀合成了甲氨蝶呤/层状双金属氢氧化物(MTX/LDH)纳米复合物,首次采用控制沉淀剂滴加速率的方式来调控其粒径.利用X-射线衍射(XRD)、透射电镜(TEM)和红外光谱(FT-IR)等表征手段,对其结构及形貌进行了表征.研究表明:MTX分子以单层倾斜方式插入LDH层间,随着滴加速率不同,MTX在层间的倾斜角度发生了变化;沉淀剂滴加速率对产物的结晶度、粒径和层间排列方式都有影响,当沉淀剂滴加速率为0.100 mL/s时,得到的MTX/LDH纳米复合物的结晶度最高,粒径最大.在磷酸缓冲液中考察了不同粒径MTX/LDH纳米复合物的缓释性能,结果表明:小粒径的MTX/LDH纳米复合物的载药量要高于大粒径的;当MTX阴离子在层间的倾斜角度相似时,粒径小的粒子释放速率较慢,缓释效果优于粒径大的.尤为重要的是我们探索出一条保证复合物阴离子在层间的倾斜角度相似的情况下,制备不同粒径纳米复合物的新途径.

离子交换法合成MTX/LDHs复合物的研究及体外细胞实验的探索

研究了不同水热温度下合成的层状双金属氢氧化物(layered double hydroxides,LDHs)对离子交换法制备的MTX/LDHs纳米复合物的影响.并利用透射电镜(TEM)、X-射线衍射(XRD)、MTT等手段,对纳米复合物的结构及载药量、控释-缓释性、生物细胞活性母体等性质进行了系统研究.结果表明,不同LDHs母体对离子交换后复合物的形貌和性质起着至关重要的作用.在磷酸缓冲液中考察了MTX/LDHs纳米复合物的药物控释性能并进行了动力学拟合,结果表明,采用离子交换法制备MTX/LDHs纳米复合物的释药过程是Fick扩散控制的离子交换和粒内扩散过程.最后,采用MTT法探究了MTX/LDHs纳米复合物对肺癌细胞A549增殖的抑制作用,结果表明,复合物较纯的MTX具有更好的抑制癌细胞增殖的作用.