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miR-23a/27a/24基因簇g.65307469G>A突变对大白猪产仔数和启动子活性的影响
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作者 王思琪 李玉琦 +5 位作者 周春雪 杨柳 杜星 吴望军 潘增祥 李齐发 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期334-341,共8页
[目的]本文旨在研究大白猪miR-23a/27a/24基因簇启动子突变位点多态性与产仔数性状的关系及潜在机制,为母猪繁殖性状的分子育种提供新的潜在遗传标记。[方法]利用混池测序技术筛选猪miR-23a/27a/24基因簇启动子突变位点,直接测序法对大... [目的]本文旨在研究大白猪miR-23a/27a/24基因簇启动子突变位点多态性与产仔数性状的关系及潜在机制,为母猪繁殖性状的分子育种提供新的潜在遗传标记。[方法]利用混池测序技术筛选猪miR-23a/27a/24基因簇启动子突变位点,直接测序法对大白猪群体(n=345)miR-23a/27a/24基因簇突变位点进行基因分型,计算遗传多样性;用线性模型对突变位点多态性与产仔数性状进行关联性分析;构建不同等位基因类型启动子载体,转染猪卵巢颗粒细胞,通过检测荧光素酶活性分析突变对启动子活性的影响;用生物信息学方法预测不同等位基因类型启动子潜在结合的差异转录因子,用荧光素酶活性分析差异转录因子对不同等位基因类型启动子活性的影响。[结果]在猪miR-23a/27a/24基因簇启动子-648 nt(Chr.2,65307469 nt)处发现1个新的G/A突变,命名为g.65307469G>A。在大白猪群体中发现3种基因型(GG、GA和AA),其中GG为优势基因型(89.57%),G等位基因为优势等位基因(94.64%)。关联性分析发现,GA基因型母猪的总产仔数(TNB)比GG基因型母猪每胎高0.56头(P<0.05)。荧光素酶活性分析结果显示G等位基因类型启动子活性显著高于A等位基因类型(P<0.05)。在不同等位基因类型启动子间发现1个潜在结合的差异转录因子死亡相关蛋白1(THAP1),成功构建猪THAP1基因过表达载体,共转试验结果显示转录因子THAP1对不同等位基因类型启动子活性均无显著影响(P>0.05)。[结论]miR-23a、miR-27a和miR-24是大白猪产仔数性状的候选基因,g.65307469G>A突变抑制miR-23a/27a/24基因簇的启动子活性,但与转录因子THAP1无关。 展开更多
关键词 大白猪 mir-23a/27a/24基因簇 变异位点 产仔数性状 启动子活性
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肾小管HIF-1α/miR-23a通路在脓毒血症急性肾损伤中的作用机制
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作者 陈思宇 强立娟 +2 位作者 朱嘉兴 马世兰 陈占龙 《河北医药》 CAS 2024年第5期645-651,共7页
目的探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-... 目的探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-2细胞分为LPS组、NC siRNA组、HIF-1αsiRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1αsiRNA+miR-NC组、HIF-1αsiRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2细胞作为空白对照组(Control组)。采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达。结果与Control组比较,LPS组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与LPS组比较,anti-miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与Control组比较,LPS组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组和anti-miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。结论肾小管HIF-1α通过调控miR-23a表达调节NF-κB信号通路,从而参与LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 脓毒血症急性肾损伤 肾小管上皮细胞 肾小管低氧诱导因子- mir-23a 炎性反应 细胞凋亡 NF-ΚB信号通路
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HPV16 E6调控miR-23a表达促进宫颈癌细胞侵袭、迁移 被引量:1
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作者 王敏 母丹 +3 位作者 孔德军 杨莉 叶璐 贺丹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期146-152,共7页
目的探讨高危型人乳头瘤病毒16 E6蛋白(HPV16 E6蛋白)调控miR-23a表达对宫颈癌细胞SiHa侵袭、迁移的作用。方法选取100例宫颈癌HPV阴性患者、100例HPV阳性患者的组织标本、100例癌旁正常组织;宫颈癌SiHa细胞分为空白组、E6过表达组、阴... 目的探讨高危型人乳头瘤病毒16 E6蛋白(HPV16 E6蛋白)调控miR-23a表达对宫颈癌细胞SiHa侵袭、迁移的作用。方法选取100例宫颈癌HPV阴性患者、100例HPV阳性患者的组织标本、100例癌旁正常组织;宫颈癌SiHa细胞分为空白组、E6过表达组、阴性转染组、E6+miR-23a mimics组;qRTPCR法检测miR-23a、HPV16 E6 mRNA表达;MTT法检测增殖抑制率;流式细胞仪检测凋亡;Transwell小室实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;WB检测HPV16 E6、凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bax、Bcl-2)、迁移相关蛋白(MMP-2、MMP-9)的表达。结果宫颈癌组织中miR-23a表达降低,其中宫颈癌HPV阳性组织中miR-23a表达水平更低。E6过表达降低miR-23a表达水平、细胞增殖抑制率、凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表达,增高Bcl-2蛋白、划痕愈合率、侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05);miR-23a mimics逆转了E6过表达对上述各项指标的影响。结论HPV16 E6促进宫颈癌细胞侵袭、迁移可能与调控miR-23a表达有关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 E6蛋白 mir-23a 宫颈癌 侵袭 迁移
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结直肠癌组织中METTL3、miR-23a-3p表达与病理参数及术后肝转移的关系
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作者 王广月 周林妍 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第5期729-733,739,共6页
目的探讨结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中甲基转移样酶3(Methyltransferase-like protein 3,METTL3)、微小核糖核酸-23a-3p(miRNA-23a-3p,miR-23a-3p)表达与病理参数及CRC术后肝转移的关系。方法选取2018年3月至2021年6月中国医... 目的探讨结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中甲基转移样酶3(Methyltransferase-like protein 3,METTL3)、微小核糖核酸-23a-3p(miRNA-23a-3p,miR-23a-3p)表达与病理参数及CRC术后肝转移的关系。方法选取2018年3月至2021年6月中国医科大学附属盛京医院收治的145例CRC患者,患者均进行CRC根治术,术中取患者CRC组织及癌旁组织样本,采用荧光定量聚合酶链反应法检测METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平,分析不同病理参数的CRC组织METTL3 mRNA、miR-23a-3p表达情况。收集患者临床病理资料,采用Cox比例风险模型对预后因素进行单变量和多变量分析。术后随访2年,统计患者术后肝转移发生情况,并采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p对CRC术后肝转移的预测价值。结果CRC组织中METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平均高于癌旁组织(P<0.05);国际抗癌联盟肿瘤通用分期(Tumor node metastasis,TNM)Ⅲ期CRC患者METTL3 mRNA水平高于Ⅱ期,低分化CRC患者METTL3 mRNA水平高于中-高分化(P<0.05);TNMⅢ期CRC患者miR-23a-3p水平高于Ⅱ期,发生淋巴转移CRC患者METTL3 mRNA水平高于未发生淋巴转移CRC患者(P<0.05);单因素及多因素Cox分析显示,TNM分期Ⅲ期、低分化、淋巴转移、METTL3 mRNA及miR-23a-3p高水平是CRC术后肝转移的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p单独及联合预测CRC术后肝转移的曲线下面积(Area under the curve,AUC)分别为0.748(0.669~0.816)、0.778(0.701~0.842)、0.882(0.818~0.930),二者联合检测预测CRC术后肝转移的效能高于单独检测(Z=2.387、2.027,P均<0.05)。结论CRC组织中METTL3、miR-23a-3p表达均异常升高,METTL3与TNM分期、分化程度相关,miR-23a-3p与TNM分期、淋巴转移相关,METTL3、miR-23a-3p联合对预测CRC术后肝转移具有更高价值。 展开更多
关键词 直肠癌 甲基转移样酶3 微小核糖核酸-23a-3p 病理参数 术后肝转移 预测
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miR-23a-3p与miR-182在结直肠癌患者外周血中的异常表达及其临床意义
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作者 秦万民 王孟姣 +1 位作者 綦声波 裴昌增 《临床医学研究与实践》 2024年第4期86-89,共4页
目的探讨miR-23a-3p与miR-182在结直肠癌患者外周血中的异常表达及其临床意义。方法选取2021年6月至2022年6月我院收治的30例结直肠癌患者为观察A组,30例结直肠良性肿瘤患者为观察B组,同期30名健康体检者为对照组。采集观察A组、观察B... 目的探讨miR-23a-3p与miR-182在结直肠癌患者外周血中的异常表达及其临床意义。方法选取2021年6月至2022年6月我院收治的30例结直肠癌患者为观察A组,30例结直肠良性肿瘤患者为观察B组,同期30名健康体检者为对照组。采集观察A组、观察B组治疗前空腹静脉血以及对照组体检时空腹静脉血,使用实时荧光定量PCR仪测定miR-23a-3p、miR-182水平;比较miR-23a-3p、miR-182单独及联合检测对结直肠癌的诊断效能;分析结直肠癌临床因素与miR-23a-3p、miR-182的关系。结果观察A组、观察B组的miR-23a-3p、miR-182水平高于对照组(P<0.05);观察A组的miR-23a-3p、miR-182水平高于观察B组(P<0.05)。miR-23a-3p、miR-182联合检测诊断结直肠癌的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、曲线下面积(AUC)大于miR-23a-3p、miR-182单独检测。不同家族史、淋巴结转移、病灶大小、临床分期的结直肠癌患者miR-23a-3p、miR-182水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论家族史、淋巴结转移、病灶大小及临床分期与结直肠癌患者miR-23a-3p、miR-182水平有密切联系,且miR-23a-3p与miR-182检测在结直肠癌临床诊断中均具备一定价值,二者联合应用可提高结直肠癌早期诊断的准确性。 展开更多
关键词 结直肠癌 mir-23a-3p mir-182 联合检测
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多囊卵巢综合征患者血清miR-23a、miR-143表达及与胰岛素抵抗的相关性分析
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作者 李冉冉 李亚晗 《中外女性健康研究》 2024年第1期41-43,共3页
目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微小RNA-23a(miR-23a)、微小RNA-143(miR-143)表达及其与胰岛素抵抗的相关性分析。方法:选取2022年1月至2023年6月枣庄市妇幼保健院收治的68例PCOS患者(PCOS组)和50例健康体检女性(对照组)为研究... 目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微小RNA-23a(miR-23a)、微小RNA-143(miR-143)表达及其与胰岛素抵抗的相关性分析。方法:选取2022年1月至2023年6月枣庄市妇幼保健院收治的68例PCOS患者(PCOS组)和50例健康体检女性(对照组)为研究对象,均采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miR-23a、miR-143表达,PCOS患者根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为胰岛素抵抗组(HOMA-IR≥2.69)40例和非胰岛素抵抗组(HOMA-IR<2.69)28例,比较各组血清miR-23a、miR-143表达水平,并采用Pearson相关分析血清miR-23a、miR-143表达与胰岛素抵抗的相关性。结果:PCOS组血清miR-23a、miR-143表达水平均高于对照组(P<0.05)。胰岛素抵抗组PCOS患者血清miR-23a、miR-143表达水平均高于非胰岛素抵抗组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,PCOS患者血清miR-23a、miR-143表达水平与HOMA-IR均呈正相关(P<0.05)。结论:PCOS患者血清miR-23a、miR-143均呈异常高表达,且表达水平与HOMA-IR有关,可作为PCOS病情评估的有效生物学标志物。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 血清mir-23a mir-143 胰岛素抵抗
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外周血miR-299和miR-23a在PE患者诊断及预后评估中的应用
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作者 刘博 王运菊 +2 位作者 刘孟彬 尚丽 黄卉 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2024年第3期403-409,共7页
目的:探讨外周血miR-299和miR-23a在子痫前期(PE)患者诊断及预后评估中的应用价值。方法:回顾性选取2020年1月至2023年1月在十堰市人民医院就诊的84例PE患者为研究对象(观察组),并随机选取同期73例正常孕妇作为对照组。检测血清中miR-29... 目的:探讨外周血miR-299和miR-23a在子痫前期(PE)患者诊断及预后评估中的应用价值。方法:回顾性选取2020年1月至2023年1月在十堰市人民医院就诊的84例PE患者为研究对象(观察组),并随机选取同期73例正常孕妇作为对照组。检测血清中miR-299和miR-23a表达量。多因素Logistic回归模型分析PE孕妇的影响因素。采用ROC曲线分析miR-299和miR-23a对PE的诊断价值;通过Kaplan-Meier法分析miR-299和miR-23a表达水平对观察组孕期生存的影响。结果:观察组血清中miR-299和miR-23a水平(3.13±0.84、1.94±0.55)显著高于对照组(2.34±0.73、1.47±0.43)(P<0.05)。Logistic回归分析显示,miR-299和miR-23a水平是PE发生的危险因素(P<0.05)。miR-299和miR-23a两者联合诊断结果优于任何1项单独分析(Z_(两项联合-miR-299)=2.067,P=0.038;Z_(两项联合-miR-23a)=2.086,P=0.037)。患者中miR-299和miR-23a高表达组的死亡率显著高于低表达组(P<0.05)。结论:PE患者血清中miR-299和miR-23a表达水平均上调,两者联合对PE有一定的诊断价值,且其表达水平与PE患者的预后密切相关。 展开更多
关键词 子痫前期 mir-299 mir-23a 诊断 预后
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白藜芦醇通过miR-23a靶向XIAP-caspase-3信号通路影响小鼠卵巢功能
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作者 修银玲 于月新 +3 位作者 孙凯旋 周静 赵盼盼 徐金龙 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第11期1031-1035,共5页
目的观察白藜芦醇(RES)对小鼠卵巢功能的影响,探讨其中miR-23a的作用机制。方法通过腹腔注射环磷酰胺(120mg/kg)和丁磺芬(30 mg/kg),建立卵巢早衰(POF)小鼠模型。将30只小鼠随机分为对照组、模型组(POF组)和干预组(RES组),每组10只。测... 目的观察白藜芦醇(RES)对小鼠卵巢功能的影响,探讨其中miR-23a的作用机制。方法通过腹腔注射环磷酰胺(120mg/kg)和丁磺芬(30 mg/kg),建立卵巢早衰(POF)小鼠模型。将30只小鼠随机分为对照组、模型组(POF组)和干预组(RES组),每组10只。测量小鼠体重、卵巢重量,计算卵巢指数;HE染色观察小鼠卵巢组织的病理变化;实时定量PCR检测卵巢组织中miR-23a、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和caspase-3 mRNA表达;Western blotting检测卵巢组织中XIAP和caspase-3蛋白表达。结果与对照组比较,POF组小鼠卵巢质量(P<0.05)、卵巢指数(P<0.05)和原始卵泡数量明显下降;与POF组比较,RES组小鼠卵巢质量(P<0.05)、卵巢指数(P<0.05)和原始卵泡数量明显增加。与对照组比较,POF组小鼠卵巢组织中miR-23a和caspase-3 mRNA表达水平升高,XIAP mRNA表达水平降低(均P<0.05);与POF组比较,RES组小鼠卵巢组织中miR-23a和caspase-3 mRNA表达水平降低,XIAP mRNA表达水平升高(均P<0.05)。与对照组比较,POF组小鼠卵巢组织中XIAP蛋白表达水平降低,caspase-3蛋白表达水平升高(均P<0.05);与POF组比较,RES组小鼠卵巢组织中XIAP蛋白表达水平升高,caspase-3蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论RES对卵巢功能减弱小鼠具有保护作用,其机制可能与RES影响miR-23a靶向XIAP-caspase-3信号通路有关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 卵巢早衰 mir-23a X连锁凋亡抑制蛋白 CASPASE-3
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PCI术后应用益气复脉(冻干)对青少年急性心肌梗死患者左心室重构及miR-23a水平的影响 被引量:3
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作者 赵新祥 苏方成 +1 位作者 房师荣 李永光 《中国中医急症》 2023年第1期100-103,共4页
目的观察青少年急性心肌梗死患者经冠状动脉介入术(PCI)后辅助应用益气复脉(冻干)对其左心室重构以及miR-23a水平的影响。方法选取急诊PCI治疗的13~40岁急性心肌梗死患者52例,随机分为观察组与对照组各26例,均PCI手术后结合常规西医治疗... 目的观察青少年急性心肌梗死患者经冠状动脉介入术(PCI)后辅助应用益气复脉(冻干)对其左心室重构以及miR-23a水平的影响。方法选取急诊PCI治疗的13~40岁急性心肌梗死患者52例,随机分为观察组与对照组各26例,均PCI手术后结合常规西医治疗,观察组在此基础上加用益气复脉(冻干)静滴,通过酶联免疫吸附法(ELISA)、心动超声仪和RT-PCR检测两组患者治疗前后外周血中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平,左心室舒张末期内径(LVEDD)、后壁厚度(LVPWT)、舒张末期室间隔厚度(IVST)、重量指数(LVMI)、射血分数(LVEF)、舒张末期容积(LVEDV)和收缩末期容积(LVESV)及血清miR-23a水平。同时记录比较两组治疗前后的不良心血管事件发生率。结果治疗后观察组IL-6、TNF-α、MMP-9、LVEDD、LVPWT、IVST、LVMI、LVEDV、LVESV、miR-23a相对表达水平均显著低于对照组(P<0.05),LVEF明显高于对照组(P<0.05),不良心血管事件发生率低于对照组。结论在常规手术和西医治疗基础上加用益气复脉(冻干)能有效抑制青少年急性心肌梗死后炎症反应、心肌细胞外基质降解以及心室重构,改善心功能,降低miR-23a水平,且明显降低不良心血管事件发生率,安全且有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 PCI术 青少年 益气复脉(冻干) 左心室重构 mir-23a
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川芎提取物通过miR-23a-3p/SNCA轴对帕金森综合征模型MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞的影响
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作者 谢平安 廖辉 +2 位作者 张艳敏 杜从斌 陈慧丰 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期626-633,共8页
目的探究川芎提取物对MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞和帕金森综合征的影响。方法1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP^(+))干预SH-SY5Y建立帕金森综合征细胞模型(SH-SY5Y-MPP^(+)),川芎提取物干预后检测细胞增殖、凋亡以及miR-23a-3p、SNCA的表达情况... 目的探究川芎提取物对MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞和帕金森综合征的影响。方法1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP^(+))干预SH-SY5Y建立帕金森综合征细胞模型(SH-SY5Y-MPP^(+)),川芎提取物干预后检测细胞增殖、凋亡以及miR-23a-3p、SNCA的表达情况。另观察调控miR-23a-3p、SNCA表达后SH-SY5Y-MPP^(+)的变化,双荧光素报告酶验证miR-23a-3p与SNCA的关系。结果SH-SY5Y-MPP^(+)的细胞增殖能力明显低于SH-SY5Y,而凋亡率则高于SH-SY5Y(P<0.05)。川芎提取物干预下,SH-SY5Y-MPP^(+)的增殖能力、Bcl-2、SNCA蛋白升高,凋亡率与miR-23a-3p、Bax蛋白降低(P<0.05)。沉默miR-23a-3p与升高SNCA均可以促进SH-SY5Y-MPP^(+)的增殖能力,抑制凋亡;而升高miR-23a-3p与沉默SNCA则反之(P<0.05)。在线靶基因预测网站发现,miR-23a-3p与SNCA存在可结合的互补位点,双荧光素报告酶显示SNCA-wt的萤火活性在转染了miR-23a-3p模拟物序列后受到了明显的抑制(P<0.05)。在升高miR-23a-3p后,SH-SY5Y-MPP^(+)中SNCA蛋白表达降低,而沉默miR-23a-3p则反之(P<0.05)。拯救实验显示,川芎提取物对SH-SY5Y-MPP^(+)的干预效果被升高miR-23a-3p或沉默SNCA完全逆转(P>0.05);升高miR-23a-3p对SH-SY5Y-MPP^(+)产生的影响则升高SNCA逆转(P>0.05)。结论川芎提取物通过调控miR-23a-3p/SNCA轴影响MPP^(+)诱导的SH-SY5Y生物学行为改变,未来可能是治疗帕金森综合征的新方向。 展开更多
关键词 川芎提取物 mir-23a-3p SNCA MPP^(+)诱导的SH-SY5Y 帕金森综合征
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miR-23a-3p调控痛风性关节炎细胞自噬的作用机制
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作者 李芳 孙广瀚 +2 位作者 刘美平 初晓 吴曙琳 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第7期1200-1204,共5页
目的探究miR-23a-3p对痛风性关节炎(GA)滑膜细胞自噬的影响。方法电镜观察滑膜细胞的变化,自噬双标腺病毒实验观察细胞内自噬流,Western Blot检测LC3B和p62蛋白的表达量。结果电镜结果显示,模型组和对照组相比线粒体明显减少,线粒体模... 目的探究miR-23a-3p对痛风性关节炎(GA)滑膜细胞自噬的影响。方法电镜观察滑膜细胞的变化,自噬双标腺病毒实验观察细胞内自噬流,Western Blot检测LC3B和p62蛋白的表达量。结果电镜结果显示,模型组和对照组相比线粒体明显减少,线粒体模糊不清,粗面内质网、糖原颗粒明显减少,自噬体明显增多;而和模型组相比,模型+miR-23a-3p mimics组线粒体明显皱缩,线粒体膜模糊不清,内质网减少,自噬体大量存在。自噬双标腺病毒实验结果显示,与对照组相比,图像中黄色斑点、红色斑点显著增多,即自噬小体、自噬溶酶体显著增多(P<0.05);而和模型组相比,模型+miR-23a-3p mimics组黄色斑点、红色斑点显著增多,即自噬小体、自噬溶酶体增加(P<0.05)。WB结果显示,与模型组比较,对照组中LC3B的蛋白表达显著降低(P<0.05),P62的蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型+miR-23a-3p mimics组比较,对照组、模型组、模型+miR-23a-3p NC组中LC3B的蛋白表达显著降低(P<0.05),P62的蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论miR-23a-3p可以促进GA滑膜细胞的自噬反应,升高LC3B表达,降低P62表达。 展开更多
关键词 痛风性关节炎 滑膜细胞 mir-23a-3p 自噬
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黄芩苷通过miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR抑制痛风性关节炎成纤维样滑膜细胞炎症反应机制探究 被引量:1
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作者 张先恒 刘健 +2 位作者 孙艳秋 丁香 陈晓露 《山西中医药大学学报》 2023年第10期1151-1160,共10页
目的:探究黄芩苷(baicalin)通过微RNA-23a-3p/磷酸酶与紧张素同源物/磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR)抑制痛风性关节炎(GA)成纤维样滑膜细胞(FLS)炎症反应的机制。方法:提取GA患者... 目的:探究黄芩苷(baicalin)通过微RNA-23a-3p/磷酸酶与紧张素同源物/磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR)抑制痛风性关节炎(GA)成纤维样滑膜细胞(FLS)炎症反应的机制。方法:提取GA患者和正常人外周血辅助性T淋巴细胞(CD4^(+)T),购买正常人FLS,应用单钠尿酸盐结晶液刺激正常人FLS构建GA-FLS模型,细胞迁移(transwell)进行CD4^(+)T细胞与GA-FLS共培养,构建miR-23a-3p模拟物(miR-23a-3p mimics)转染至GA-FLS中;黄芩苷作用24 h、48 h和72 h后,细胞计数8(CCK8)检测细胞活力并选取最佳作用浓度和时间;实验分为正常组(GA-FLS)、对照组(CD4^(+)T+GA-FLS)、模型组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS)、黄芩苷组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS+100μg/ml Baicalin)、miR-23a-3p-NC组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS+miR-23a-3p-NC)、miR-23a-3p mimics组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS+miR-23a-3p mimics)、黄芩苷miR-23a-3p mimics组(GA-CD4^(+)T+GAFLS+miR-23a-3p mimics+100μg/ml Baicalin);实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和免疫印迹(WB)检测miR-23a3p、PTEN、PI3K、AKT、mTOR的表达,酶联免疫吸附(ELISA)测定检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的表达。结果:CCK8检测结果显示黄芩苷最佳作用浓度和时间为100μg/ml、48 h。RT-qPCR和WB检测结果显示:模型组miR-23a-3p mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA的表达较正常组、对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);而PTEN mRNA组表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与miRNA-23a-3p-NC组相比,miR-23a-3p mimics组miRNA-23a-3p mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA的表达明显上升,PTEN mRNA的表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与miR-23a3p mimics组相比,黄芩苷miR-23a-3p mimics组miRNA-23a-3p mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA的表达明显下调,PTEN mRNA的表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01)。ELISA检测结果显示:模型组TNF-α、IL1β、IL-6的表达较正常组、对照组明显升高,而IL-10表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与miRNA-23a3p-NC组相比,miRNA-23a-3p mimics组TNF-α、IL-1β、IL-6的表达明显上升,IL-10表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与miR-23a-3p mimics组相比,黄芩苷miR-23a-3p mimics组TNF-α、IL-1β、IL-6的表达明显下调,IL-10表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:黄芩苷可通过下调miR-23a-3p,抑制PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活,降低痛风性关节炎成纤维样滑膜细胞炎症反应。 展开更多
关键词 痛风性关节炎 成纤维样滑膜细胞 炎症 黄芩苷 mir-23a-3p PTEN/PI3K/AKT/mTOR
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猪miR-23a-27a-24簇启动子预测及活性分析
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作者 李清春 孙晓梅 +1 位作者 孙敬礼 黄涛 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第3期279-285,共7页
目的 本研究旨在对猪miR-23a-27a-24簇(miR-23a-27a-24 cluster)的潜在启动子区域进行预测和分析,为进一步探索miR-23a-27a-24基因对猪转录调控机制的研究奠定基础。方法 利于生物信息学分析猪miR-23a-27a-24簇的启动子区域、CpG岛及其... 目的 本研究旨在对猪miR-23a-27a-24簇(miR-23a-27a-24 cluster)的潜在启动子区域进行预测和分析,为进一步探索miR-23a-27a-24基因对猪转录调控机制的研究奠定基础。方法 利于生物信息学分析猪miR-23a-27a-24簇的启动子区域、CpG岛及其潜在的转录因子;利用截短突变和PCR技术克隆得到5个逐级缺失的miR-23a-27a-24基因启动子片段,构建双荧光素酶报告载体,通过检测各载体的双荧光素酶活性获得miR-23a-27a-24基因的核心启动子区域。结果 pGL3-cMiR启动子在猪miR-23a-27a-24簇上游341bp至994bp区荧光素酶活性最强,为pGL3-basic空载体活性的5.02倍(P<0.05),视为miR-23a-27a-24簇核心启动区。生物信息学分析表明:猪miR-23a-27a-24簇启动子区不含CpG岛,其核心启动子区可能存在SP1、VDR、MAZ、YY1、E2F1和ELF1六种潜在的转录因子结合位点。结论 本研究构建并确定了猪miR-23a-27a-24簇核心启动子区域,可为今后开展猪miR-23a-27a-24簇的转录调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 mir-23a-27a-24簇 启动子 转录调控
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血清miR-23a、ESM-1、CA-199在结直肠癌患者中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 陈杰 吴勇 《检验医学与临床》 CAS 2023年第9期1240-1243,共4页
目的探讨血清微小核糖核酸-23a(miR-23a)、内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、糖类抗原199(CA-199)在结直肠癌患者中的表达,分析其诊断价值及与患者临床病理特征的关系。方法回顾性选取2020年1-12月该院收治的结直肠癌患者128例作为癌症组... 目的探讨血清微小核糖核酸-23a(miR-23a)、内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、糖类抗原199(CA-199)在结直肠癌患者中的表达,分析其诊断价值及与患者临床病理特征的关系。方法回顾性选取2020年1-12月该院收治的结直肠癌患者128例作为癌症组、结直肠腺瘤患者100例作为腺瘤组,另选取同期该院体检健康者100例作为对照组。比较血清miR-23a、ESM-1、CA-199在各组间的表达。采用受试者工作特征曲线评估血清miR-23a、ESM-1、CA-199对结直肠癌的诊断价值。比较血清miR-23a、ESM-1、CA-199在结直肠癌不同病理特征患者中的表达,并分析其与患者临床病理特征的相关性。结果癌症组血清miR-23a、ESM-1、CA-199水平明显高于腺瘤组和对照组(P<0.05)。3项指标联合检测结直肠癌的曲线下面积为0.900,灵敏度和特异度为84.2%、90.8%。血清miR-23a、ESM-1、CA-199水平在TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移及有远处转移的患者中明显高于Ⅰ+Ⅱ期、无淋巴结转移及无远处转移的患者(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,血清miR-23a、ESM-1、CA-199水平与TNM分期、淋巴结转移、远处转移呈正相关(P<0.05)。结论血清miR-23a、ESM-1、CA-199水平在结直肠癌患者中明显升高,联合检测有助于结直肠癌的早期诊断及病情评估。 展开更多
关键词 结直肠癌患者 微小核糖核酸-23a 内皮细胞特异性分子-1 糖类抗原199
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CircSERPINE2靶向miR-23a-3p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制 被引量:1
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作者 胡颖婷 邹毅刚 周外平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2294-2298,共5页
目的:探讨CircSERPINE2对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:选取于武汉市第四医院就诊的44例RA患者和健康体检者的外周血,培养滑膜成纤维细胞(FLSs)和RA滑膜成纤维细胞(RA-FLSs),采用实时荧光定量... 目的:探讨CircSERPINE2对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:选取于武汉市第四医院就诊的44例RA患者和健康体检者的外周血,培养滑膜成纤维细胞(FLSs)和RA滑膜成纤维细胞(RA-FLSs),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CircSERPINE2和miR-23a-3p表达水平;将RA-FLSs随机分为NC组、pcDNACircSERPINE2组、pcDNA组、anti-miR-23a-3p组、anti-miR-NC组、miR-23a-3p+pcDNA-CircSERPINE2组、miR-NC+pcDNA-CircSERPINE2组;CCK-8检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移数和侵袭数;双荧光素酶报告实验检测CircSERPINE2和miR-23a-3p的靶向关系。结果:RA患者外周血中CircSERPINE2表达水平低于健康体检者,而miR-23a-3p表达水平高于健康体检者(P<0.05)。与FLSs比较,RA-FLSs中CircSERPINE2表达水平降低,而miR-23a-3p表达水平升高(P<0.05)。过表达CircSERPINE2或抑制miR-23a-3p表达,细胞活性降低,迁移和侵袭细胞数减少(P<0.05)。CircSERPINE2靶向调控miR-23a-3p。miR-23a-3p过表达可逆转CircSERPINE2过表达对RA-FLSs的影响。结论:CircSERPINE2过表达可通过靶向调控miR-23a-3p抑制RA滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 CircSERPINE2 mir-23a-3p 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 增殖 迁移 侵袭
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肺结核患者外周血miR-23a-3p的表达及其对患者诊断及预后评估的价值分析
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作者 邹同会 刘世军 汪永强 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2023年第4期533-539,共7页
目的:探究miR-23a-3p在肺结核(PTB)患者中的表达及其对PTB患者的诊断和预后的价值。方法:将2020年6月至2021年6月本院传染病科收治的98例PTB患者设为PTB组,同期另选取92例健康志愿者作为健康组。采用qRT-PCR法检测受试者外周血miR-23a-3... 目的:探究miR-23a-3p在肺结核(PTB)患者中的表达及其对PTB患者的诊断和预后的价值。方法:将2020年6月至2021年6月本院传染病科收治的98例PTB患者设为PTB组,同期另选取92例健康志愿者作为健康组。采用qRT-PCR法检测受试者外周血miR-23a-3p、核转录因子SP1(SP1)和干扰素调节因子1(IRF1)的表达;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-23a-3p对PTB的诊断价值和预后价值;采用Pearson相关系数分析PTB患者外周血miR-23a-3p与SP1、IPF1之间的相关性;对PTB患者完成6个月随访,采用Kaplan-Meier法分析miR-23a-3p与PTB患者预后关系;Cox回归分析影响PTB患者预后的危险因素。结果:与健康组相比,PTB组患者miR-23a-3p水平显著降低,SP1和IPF1表达显著升高(P<0.05);ROC曲线显示,外周血miR-23a-3p诊断PTB的曲线下面积(AUC)为0.861(95%CI:0.809~0.913),灵敏度和特异度分别为85.70%和70.70%;Pearson相关系数分析显示,PTB患者外周血miR-23a-3p的表达与SP1表达和IPF1表达均呈负相关(r值分别为-0.570、-0.435,均P<0.05),PTB患者SP1表达与IPF1表达呈正相关(r=0.524,P<0.05);随访期间,患者预后良好87例,预后不良11例;ROC曲线显示,miR-23a-3p预测PTB患者预后的AUC为0.881(95%CI:0.790~0.971),灵敏度和特异度分别为72.70%和92.00%;与预后良好组相比,预后不良组miR-23a-3p水平显著降低,SP1和IPF1表达显著升高(P<0.05);Kaplan-Meier分析结果显示,miR-23a-3p高表达PTB患者复发率明显低于miR-23a-3p低表达患者;Cox回归分析显示,肺部空洞、痰液MTB培养阳性、miR-23a-3p低表达、SP1高表达、IPF1高表达是影响PTB患者预后的危险因素。结论:PTB患者外周血miR-23a-3p表达明显降低,其低表达是影响PTB患者预后的危险因素,对PTB诊断和预后判断均具有良好的价值。 展开更多
关键词 肺结核 mir-23a-3p 诊断价值 预后价值
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CircACTR2调节miR-23a-3p/TBL1X轴对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响
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作者 黄春艳 向汨 +1 位作者 费志医 高琴 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第10期1048-1054,共7页
目的探讨环状RNA肌动蛋白相关蛋白2(circACTR2)调节miR-23a-3p/转导素β1X连锁蛋白(TBL1X)轴对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响。方法将人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo分为NG组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG组(25 mmol/L葡萄糖)、si-NC组(25 m... 目的探讨环状RNA肌动蛋白相关蛋白2(circACTR2)调节miR-23a-3p/转导素β1X连锁蛋白(TBL1X)轴对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响。方法将人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo分为NG组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG组(25 mmol/L葡萄糖)、si-NC组(25 mmol/L葡萄糖+转染si-NC)、si-circACTR2组(25 mmol/L葡萄糖+转染si-circACTR2)、si-circACTR2+inhibitor-NC组(25 mmol/L葡萄糖+si-circACTR2和inhibitor-NC共转染)、sicircACTR2+miR-23a-3p inhibitor组(25 mmol/L葡萄糖+si-circACTR2和miR-23a-3p inhibitor共转染)。实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中circACTR2、miR-23a-3p的表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;酶联免疫吸附试验检测丙二醛(MDA)水平和乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot检测细胞中TBL1X、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达。双萤光素酶报告基因实验分别验证circACTR2、TBL1X和miR-23a-3p的靶向关系。结果与NG组相比,HG组HTR-8/Svneo细胞miR-23a-3p表达、增殖能力、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9表达、SOD活性降低,circACTR2、TBL1X和caxpase-3表达、MDA含量、LDH活性、凋亡率升高(P<0.05);与HG组和si-NC组相比,si-circACTR2组HTR-8/Svneo细胞中miR-23a-3p表达、增殖能力、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9表达、SOD活性升高,circACTR2、TBL1X和caxpase-3表达、MDA含量、LDH活性、凋亡率降低(P<0.05);在敲低circACTR2的基础上,下调miR-23a-3p可明显减弱circACTR2敲低对高糖诱导的HTR-8/Svneo细胞的增殖和迁移的促进作用,增强细胞凋亡和氧化应激能力。双萤光素酶报告基因实验结果显示,circACTR2靶向负调控miR-23a-3p表达,miR-23a-3p靶向负调控TBL1X表达。结论敲低circACTR2可调控miR-23a-3p/TBL1X轴,进而通过抑制高糖诱导的滋养层细胞损伤来发挥保护作用。 展开更多
关键词 肌动蛋白相关蛋白质2 妊娠特异性β1糖蛋白质类 滋养层 细胞凋亡 mir-23a-3p 高糖 人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo
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miR-23a对LPS诱导小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响 被引量:9
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作者 刘敏 姜明红 +3 位作者 高静 刘丹 刘彦信 郑德先 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第6期666-670,共5页
目的探讨miR-23a对LPS诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响。方法 Real-time PCR定量分析LPS刺激不同时间的腹腔巨噬细胞中miR-23a的表达以及瞬时转染miR-23a mimics和inhibitors的腹腔巨噬细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α等... 目的探讨miR-23a对LPS诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响。方法 Real-time PCR定量分析LPS刺激不同时间的腹腔巨噬细胞中miR-23a的表达以及瞬时转染miR-23a mimics和inhibitors的腹腔巨噬细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α等促炎性细胞因子的表达;ELISA检测mRNA变化明显的细胞培养上清的IL-6的含量。结果原代腹腔巨噬细胞在LPS刺激后,miR-23a的表达明显下调;在转染miR-23a mimics后,IL-6的表达和分泌明显升高(P<0.05),但对IL-1β和TNF-α的表达没有明显影响。而转染miR-23a inhibitors后,则IL-6的表达水平受到抑制。结论 LPS刺激原代巨噬细胞可抑制miR-23a的表达;miR-23a可促进炎性细胞因子IL-6的表达,对IL-1β和TNF-α无显著影响。 展开更多
关键词 mir-23a 巨噬细胞 LPS 促炎性细胞因子
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炎性骨组织中miR-23a和miR-30a的表达改变及其生物学作用的研究 被引量:5
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作者 杨博 陆群 +2 位作者 汪平 苏凌云 杨帆 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期231-234,共4页
目的:观察研究体外炎性微环境下的牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)、成骨细胞(MC3T3-E1)和体内大鼠牙周炎牙龈组织、骨组织中miR-23a和miR-30a的表达变化,证实miR-23a和miR-30a在牙周炎性骨缺失中发挥重要调控作用,探讨... 目的:观察研究体外炎性微环境下的牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)、成骨细胞(MC3T3-E1)和体内大鼠牙周炎牙龈组织、骨组织中miR-23a和miR-30a的表达变化,证实miR-23a和miR-30a在牙周炎性骨缺失中发挥重要调控作用,探讨其生物学作用。方法:1μg/mL LPS刺激PDLCs、MC3T3-E1细胞模拟炎性微环境,24 h后收集细胞。采用正畸结扎丝结扎各SD大鼠右侧上颌第一磨牙颈部,左侧未结扎作为自身对照,21 d后取其牙龈、牙槽骨组织。采用荧光定量PCR分别检测处于炎性微环境下的细胞、大鼠牙周炎牙龈组织、牙周骨组织中miR-23a和miR-30a的表达。结果:炎性环境下PDLCs、MC3T3-E1细胞中miR-23a和miR-30a的表达水平均较对照组明显增高(P<0.05)。大鼠牙周炎牙龈组织、牙槽骨组织中miR-23a和miR-30a的表达水平明显高于正常对照侧(P<0.05)。结论:miR-23a和miR-30a参与调控炎性环境下骨代谢和成骨细胞活性。 展开更多
关键词 mir-23a mir-30a 炎症 骨缺失
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miR-23a靶向NID2通过Notch通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移 被引量:7
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作者 盛晶 万里新 屈中玉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期381-386,共6页
目的探讨mi R-23a靶向调控NID2蛋白的表达通过Notch通路对肺癌细胞的生物学行为的影响及其机制。方法免疫组织化学检测NID2在肺癌和癌旁正常肺组织中的表达;Western blot检测不同肺癌细胞株中NID2的表达;荧光素酶报告基因检测mi R-23a与... 目的探讨mi R-23a靶向调控NID2蛋白的表达通过Notch通路对肺癌细胞的生物学行为的影响及其机制。方法免疫组织化学检测NID2在肺癌和癌旁正常肺组织中的表达;Western blot检测不同肺癌细胞株中NID2的表达;荧光素酶报告基因检测mi R-23a与NID2的相互作用;Transwell侵袭和划痕实验检测mi R-23a的表达对肺癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot检测过表达mi R-23a后肺癌H1650细胞中hes1和NICD蛋白的表达。结果与癌旁正常肺组织相比,肺癌组织中NID2表达明显增高;H1650肺癌细胞株中NID2的表达水平最高;在肺癌H1650细胞中,mi R-23a能与NID2的3’UTR特异性结合,调控NID2的表达;mi R-23a可调控肺癌H1650细胞的侵袭迁移能力;过表达mi R-23a可以抑制肺癌H1650细胞中hes1和NICD的表达。结论 mi R-23a可以靶向NID2通过Notch信号通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 mir-23a 肺癌 NID2 NOTCH
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