miR-103a-3p在先天性巨结肠中的作用及机制

目的探讨miR-103a-3p在先天性巨结肠(Hirschsprung disease,HSCR)发生、发展中的作用及机制。方法RT-PCR检测miR-103a-3p在HSCR狭窄段及扩张段结肠肠管组织标本中的表达差异。CCK-8和Transwell法评估miR-103a-3p对细胞增殖和迁移的影响。运用KEGG、GO以及蛋白质-蛋白质相互作用网络分析预测潜在靶基因。通过RT-PCR、自动免疫印迹、双荧光素酶报告基因检测在细胞和组织层面验证miR-103a-3p的靶基因PIK3R1。结果在HSCR病变段结肠组织中miR-103a-3p表达显著上调。miR-103a-3p可以抑制细胞的增殖和迁移。生物信息学分析提示:PIK3R1可能是miR-103a-3p在HSCR中的潜在靶点。双荧光素酶实验证实miR-103a-3p可与PIK3R1的3′-UTR结合,并影响其mRNA和蛋白质的表达水平。而在组织样本中,病变段肠管的PIK3R1表达水平明显降低,与miR-103a-3p呈负向关系。结论miR-103a-3p在HSCR的病变肠管中存在表达差异,其可通过靶向PIK3R1影响细胞增殖及迁移,在HSCR的发生发展中起着重要作用。

动脉粥样硬化性心血管疾病患者血清miR-103b检测的临床价值

目的探讨动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerosis cardiovascular disease,ASCVD)患者血清miR-103b的表达水平变化及其临床应用价值。方法选取2021年1月至2022年11月在东部战区总医院心血管内科确诊的ASCVD患者以及同期体检的健康人对照血清标本各80例。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组血清miR-103b的表达水平;运用ROC曲线、Spearman相关性分析血清miR-103b对ASCVD的预测及评估价值。结果qRT-PCR结果显示,与健康人对照组[0.0002(0.00008,0.0004)]相比,ASCVD患者血清miR-103b的表达水平[0.0009(0.0005,0.0033)]显著升高,差异有统计学意义(U=1069,P<0.001)。Spearman相关分析显示,血清miR-103b与心肌肌钙蛋白I(r=0.322,P<0.05)、心肌肌钙蛋白T(r=0.298,P<0.05)、肌酸激酶MB同工酶(r=0.393,P<0.05)、总胆固醇(r=0.290,P<0.001)、低密度脂蛋白胆固醇(r=0.268,P<0.001)均呈正相关,而与高密度脂蛋白胆固醇(r=-0.313,P<0.001)呈负相关。ROC曲线分析结果显示,血清miR-103b水平区分ASCVD患者及健康人对照者的ROC曲线下面积(AUC ROC)为0.854(95%CI:0.791~0.917),敏感性为73.26%,特异性为83.92%。结论ASCVD患者血清miR-103b的表达水平上调,可作为ASCVD潜在的辅助诊断生物学标志物。

miR-103靶向PTEN并激活PI3K/AKT通路促进肺癌细胞A549对达沙替尼耐药

目的:探讨miR-103靶向PTEN并激活PI3K/AKT信号通路促进肺癌细胞对达沙替尼(dasatinib,DASA)耐药的机制。方法:收集2014年4月至2018年1月昆明医科大学第一附属医院胸外科收治的资料完整的肺癌DASA耐药组织和不耐药组织各35例。采用q PCR实验检测miR-103在肺癌DASA耐药组织和细胞中的表达水平,同时,采用CCK-8、Transwell和Wb实验检测敲降miR-103对A549/DASA细胞增殖、迁移和上皮间质转化(EMT)的影响,双荧光素酶报告基因验证miR-103与PTEN的靶向关系。进一步采用CCK-8、Transwell和Wb实验检测miR-103通过PTEN-PI3K/AKT信号通路对A549/DASA细胞恶性生物学行为的影响。结果:miR-103在肺癌DASA耐药组织和A549/DASA细胞中均高表达(均P<0.01)。敲降miR-103可显著抑制A549/DASA细胞的增殖、迁移和EMT(P<0.05或P<0.01)。此外,双荧光素酶报告基因证实miR-103靶向作用PTEN并下调其表达水平(P<0.01)。进一步实验显示,过表达mi R-103通过靶向下调PTEN并激活PI3K/AKT信号通路进而显著促进A549/DASA细胞增殖、迁移和EMT(P<0.05或P<0.01),从而上调A549/DASA细胞对DASA的耐药性。结论:miR-103/PTEN/PI3K/AKT信号通路与肺癌DASA耐药性存在调控关系,敲降miR-103可逆转A549/DASA对DASA耐药。

miR-103a-3p对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨mi R-103a-3p在人肺癌组织中的表达及对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集南通市肿瘤医院52例肺癌患者手术组织标本,q RT-PCR检测肺癌组织及癌旁组织中mi R-103a-3p的表达;采用Lipofecta mineTM3000将mi R-103a-3p mimic、mimic NC、mi R-103a-3p inhibitor及inhibitor NC转染至A549细胞中,q RT-PCR检测mi R-103a-3p的转染效率;CCK8实验检测其细胞增殖能力;流式细胞术检测其细胞凋亡能力;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力。结果 mi R-103a-3p在肺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);q RT-PCR结果显示,转染mi R-103a-3p mimic组细胞中mi R-103a-3p的表达水平明显高于mimic NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力受到抑制;而转染mi R-103a-3p inhibitor组细胞中mi R-103a-3p的表达水平低于inhibitor NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力增强;但细胞凋亡在4组中变化均不明显。结论 mi R-103a-3p在肺癌组织中低表达,mi R-103a-3p能够抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭。

miR-103通过抑制FBW7的表达促进肝癌细胞增殖

【目的】研究miR-103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】Real time PCR方法检测miR-103在肝癌组织和细胞中的表达。将miR-103 inhibitor转染到肝癌细胞中,分为实验组(转染miR-103 inhibitor)和对照组(转染Negative Control),通过MTT实验检测肝癌细胞的增殖变化。Real time PCR和Western blotting检测转染miR-103 mimics后肝癌细胞中FBW7 mRNA和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染miR-103 mimics或inhibitor后FBW7-3’UTR活性的变化。【结果】Real time PCR结果显示miR-103在肝癌组织和HepG2细胞系中均高于癌旁组织和LO2肝细胞系(P<0.05)。MTT实验结果显示,转染miR-103 inhibitor实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Real time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-103 mimics实验组肝癌细胞中FBW7的mRNA和蛋白表达水平都低于对照组.重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染miR-103 mimics的实验组中FBW7-3’UTR报告基因活性显著降低(P<0.05);与对照组相比,转染miR-103 inhibitor的实验组中FBW7-3’UTR活性显著升高(P<0.05)。进一步实验发现,转染FBW7后能显著下调由miR-103 mimics所引起的细胞增殖作用。【结论】miR-103可以通过抑制FBW7的表达来促进肝癌细胞增殖。

猪组织中miR-103实时定量PCR分析时合适内参的确定

定量实时PCR是miRNA表达检测的主要方法之一,而利用合适内参对定量实时PCR数据进行校正处理是确保该方法分析准确性的关键.为了确定猪正常组织中miR-103定量实时PCR检测分析的合适内参,首先采用geNorm算法和扩增效率试验对miR-196、U6 snRNA和总RNA3个候选内参进行了评价;然后以miR-103的绝对定量结果为对照,比较分析了3个候选内参的校正准确性.结果表明,miR-196的表达稳定性和扩增效率均优于U6 snRNA和总RNA;以miR-196为内参的miR-103相对定量结果同绝对定量结果具有较高的一致性,两者均显示miR-103在猪大脑中高丰度表达,在胃、小脑、小肠、心脏、肝脏和胰脏中适度表达,在肺、脾脏和腿肌中轻度表达.这些结果说明,miR-196可作为猪正常组织中miR-103定量实时PCR相对定量分析的一个合适内参.

血清miR-103和Dicer1表达及在结直肠癌中的诊断价值

目的:探讨结直肠癌患者血清miR-103和Dicer1表达情况,分析miR-103联合Dicer1检测在结直肠癌诊断中的应用前景。方法:72例经病理确诊的结直肠癌患者为实验组,72例健康体检者为对照组。应用实时定量PCR法检测实验组和对照组血清miR-103和Dicer1表达水平。分析两种生物标志物联合诊断结直肠癌的价值。结果:与对照组相比,miR-103在实验组患者血清中表达水平显著上调(P<0.01),Dicer1水平显著下调(P<0.05)。miR-103表达水平与结直肠癌临床分期、肿瘤转移情况以及Dicer1水平密切相关(P均<0.05)。miR-103与Dicer1联合在结直肠癌检测的敏感度和特异度最高可达82.1%和95.6%,Logistic分析受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积(AUC)为0.754。结论:miR-103高表达与结直肠癌分期、转移及Dicer1表达关系密切,与Dicer1联合有望成为结直肠癌的早期诊断指标。

lncRNA NEAT1/miR-103a/STAMBPL1轴对胃癌细胞增殖和侵袭的调控作用

目的探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在胃癌组织和细胞中的表达,以及其通过调控miR-103a/STAMBPL1轴对胃癌细胞增殖和侵袭的影响。方法采用qRT-PCR法检测胃癌组织及癌旁组织中lncRNA NEAT1的表达水平;采用qRT-PCR法检测人正常胃上皮GES-1细胞及胃癌细胞SGC-7901和BGC-823中lncRNA NEAT1的表达水平。胃癌细胞SGC-7901和BGC-823中分别转染si-NEAT1(si-NEAT1组)和si-NC(si-NC组)。采用CCK-8法和Transwell检测细胞增殖和侵袭;采用qRT-PCR和Western blot法分别测定胃癌细胞中miR-103a mRNA和STAMBPL1蛋白的表达变化。结果与癌旁正常组织或正常细胞GES-1相比,lncRNA NEAT1在胃癌组织及胃癌SGC-7901和BGC-823细胞中表达水平明显增加(P<0.05)。与si-NC组相比,si-NEAT1组中胃癌SGC-7901和BGC-823细胞增殖和侵袭能力明显减少(P<0.05),miR-103a mRNA水平增高以及STAMBPL1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论lncRNA NEAT1在胃癌中可能通过调控miR-103a/STAMBPL1信号途径改变胃癌细胞增殖及侵袭的能力。

miR-103通过抑制MED26的表达促进小细胞肺癌细胞的增殖

目的:研究miR-103对小细胞肺癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法:Real-time PCR法检测miR-103在人小细胞肺癌组织和细胞中的表达。将miR-103 inhibitor转染到人小细胞肺癌细胞中,通过CCK8实验检测小细胞肺癌细胞的增殖活性。Real-time PCR和Western blotting检测转染miR-103 inhibitor后小细胞肺癌细胞中MED26 mRNA和蛋白的表达变化。通过双萤光素酶报告基因验证miR-103与MED26的作用机制。结果:miR-103在小细胞肺癌组织和人小细胞肺癌细胞系NCI-H1688中的表达均高于癌旁组织和对照细胞系。转染miR-103 inhibitor后小细胞肺癌细胞的增殖活性显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-103 inhibitor后小细胞肺癌细胞中MED26的mRNA表达水平高于对照组。双萤光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染miR-103mimics的实验组中MED26 3'-UTR报告基因活性显著降低(P<0.05)。转染MED26后能显著抑制小细胞肺癌细胞增殖活性。结论:miR-103可以通过抑制MED26的表达来促进小细胞肺癌细胞的增殖。

安神定志方对阿尔茨海默病细胞模型miR-103a-3p及Tau蛋白磷酸化的影响

目的观察安神定志方对阿尔茨海默病细胞模型miR-103a-3p及其介导的Tau蛋白磷酸化的影响,探讨其可能作用机制。方法采用β淀粉样蛋白_(25-35)诱导PC12细胞构建阿尔茨海默病体外模型,将细胞分为空白组、模型组、安神定志方组、过表达组和安神定志方+过表达组(联合组),采用安神定志方含药血清和miR-103a-3p模拟剂进行干预。流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,RT-qPCR检测细胞miR-103a-3p mRNA表达,Western blot检测细胞脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)、p-TrkB、Tau、p-Tau蛋白表达。结果与空白组比较,模型组PC12细胞各时点细胞活力明显降低,凋亡率明显增加,LDH活性和MDA含量明显增加,SOD和GSH-Px活性明显降低,miR-103a-3p mRNA表达明显升高,p-Tau蛋白表达明显升高,BDNF、p-TrkB蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,安神定志方组和联合组PC12细胞各时点细胞活力明显升高,凋亡率明显降低,LDH活性和MDA含量明显降低,SOD和GSH-Px活性明显增加,miR-103a-3p mRNA表达明显降低,p-Tau蛋白表达明显降低,BDNF、p-TrkB蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论安神定志方能通过下调miR-103a-3p表达激活BDNF/TrkB信号通路,从而抑制Tau蛋白磷酸化,发挥对PC12细胞的保护作用。

LncRNA FGD5-AS1靶向miR-103a-3p对IL-1β诱导的关节软骨细胞凋亡的机制研究

目的探讨LncRNA FGD5-AS1靶向miR-103a-3p对IL-1β诱导的关节软骨细胞损伤及细胞凋亡的影响与分子机制。方法体外培养大鼠关节软骨细胞,分为NC组、IL-1β组(IL-1β浓度为10 ng/mL)。采用qRT-PCR检测细胞中FGD5-AS1、miR-103a-3p的表达水平。分别将pcDNA-FGD5-AS1、miR-103a-3p mimics转染至软骨细胞,随后使用IL-1β处理48 h。采用ELISA检测IL-6、TNF-α、IL-8水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证FGD5-AS1与miR-103a-3p的靶向关系;Western blot检测Bax、Cyt C、Cleaved Caspase-3、p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达量。结果与NC组相比,IL-1β组软骨细胞中FGD5-AS1的表达水平显著降低(P<0.05),miR-103a-3p、Bax、Cyt C、Cleaved Caspase-3的表达水平显著升高(P<0.05),IL-6、TNF-α、IL-8水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);FGD5-AS1过表达后可明显降低IL-6、TNF-α、IL-8、p-NF-κB p65、p-IκBα水平(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05),抑制Bax、Cyt C、Cleaved Caspase-3表达(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实FGD5-AS1靶向结合miR-103a-3p并可负向调控miR-103a-3p的表达(P<0.05);miR-103a-3p过表达可明显逆转FGD5-AS1过表达对细胞凋亡及炎症反应的抑制作用(P<0.05)。结论LncRNA FGD5-AS1可通过靶向负调控miR-103a-3p的表达从而抑制IL-1β诱导的关节软骨细胞炎症反应及细胞凋亡,其作用机制可能通过抑制NF-κB信号通路激活有关。

首发精神分裂症患者血清miR-103a和BDNF的表达及临床意义

目的检测首发精神分裂症(FES)患者血清中miR-103a、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达情况,探讨二者在FES中的作用及关系。方法选取2016-08~2017-09本院69例FES患者作为研究对象,同期选取70例健康体检者作为对照组。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测血清中miR-103a表达水平,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中BDNF表达水平,获得阳性与阴性症状量表(PANSS)、威斯康星卡片分类测验(WCST)评分,并分析FESF患者血清中miR-103a与BDNF相关性及两者与PANSS评分、WCST评分的相关性。结果两组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),FES组患者血清中miR-103a水平比对照组高,BDNF水平比对照组低(P<0.05),两者呈负相关(P<0.05)。FES患者miR-103a水平与PANSS评分中攻击危险性、WCST评分中错误应答数、非持续性错误数呈正相关(P<0.05),BDNF水平与PANSS评分中PANSS阴性、WCST评分中错误应答数、持续性错误数、非持续性错误数呈负相关(P<0.05)。结论在两组一般资料无明显差异情况下,FES患者血清中miR-103a高表达、BDNF低表达,两者呈负相关,且两者与认知能力相关指标关系密切。

miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系。方法选取122例肝细胞癌患者作为本研究对象。聚合酶链式反应检测miR-96和miR-103表达水平,采用单因素和多因素Cox回归模型,探讨肝癌患者中位生存时间的危险因素并建立预测模型。结果肝癌组织中miR-96和miR-103相对表达水平均显著高于癌旁正常组织;肝癌组织中miR-96和miR-103的表达与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期及分化程度均有关(均P<0.05),而与性别、年龄及合并肝硬化等无关(P>0.05);所有患者随访60月,中位生存时间为37.8月。单因素分析结果显示:肝细胞癌患者中位生存时间与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期、病理分化程度、miR-96和miR-103表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素分析结果显示:TNM分期为Ⅲ~Ⅳ、低分化、淋巴结转移、miR-96和miR-103高表达是肝癌患者中位生存时间独立危险因素。结论肝癌组织中miR-96和miR-103的高表达是患者预后差的独立影响因素,可作为原发性肝癌患者预后评估指标。

安神定志方对阿尔茨海默病大鼠海马组织miR-103a-3p及其介导的Tau蛋白磷酸化的影响

目的观察安神定志方对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织miR-103a-3p及其介导的Tau蛋白磷酸化的影响,探讨其相关作用机制。方法通过GEO数据库筛选AD海马组织差异表达miRNA。50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、miR-103a-3p mimic组、安神定志方组和miR-103a-3p mimic+安神定志方组,每组10只,采用Aβ1-42侧脑室注射制备AD大鼠模型。造模后各给药组给予相应药物干预4周。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马组织形态,RT-PCR检测海马组织miR-103a-3p基因的表达,Western blot和免疫组化检测海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)及Tau蛋白的表达。结果通过GEO数据库共筛选出34个差异miRNA,其中17个上调、17个下调。与模型组比较,安神定志方显著增加AD大鼠跨越平台次数和有效停留时间,减少逃避潜伏期,改善海马CA1区组织形态,上调BDNF的表达,抑制miR-103a-3p、p-TauSer396和p-TauThr231的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论安神定志方可能通过抑制海马组织miR-103a-3p的表达进而促进BDNF的表达,调控Tau蛋白的磷酸化水平,从而促进AD大鼠学习记忆能力。

miR-103a-3p在胰腺癌细胞中的表达及意义

目的:观察mi R-103a-3p抑制表达的慢病毒载体对高表达mi R-103a-3p的PANC-1胰腺癌细胞株的表达抑制作用,为阐明胰腺癌的发病机制及筛选治疗靶基因提供理论依据。方法:采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测不同侵袭能力的胰腺癌细胞株(PANC-1、Bx PC-3)和永生化正常胰腺细胞(H6C7)中mi R-103a-3p表达情况;构建慢病毒载体mi R-103a-3p-inhibitor,包装后感染高表达mi R-103a-3p的PANC-1细胞株,荧光显微镜观察其转染效率,q RT-PCR检测其表达情况。结果:q RT-PCR检测显示,mi R-103a-3p在PANC-1、Bx PC-3细胞及正常胰腺细胞H6C7细胞中相对表达量分别为(4.949±0.130)、(1.417±0.120)和(1.010±0.151),PANC-1表达水平最高(P<0.05)。mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒感染PANC-1细胞第4天,荧光显微镜下可见报告基因绿色荧光蛋白(GFP)高强度表达。q RT-PCR结果显示:mi R-103a-3p相对表达量在未感染mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒的PANC-1组(1.002±0.160)与阴性病毒感染的PANC-1组(0.956±0.250)间差异无显著性,但慢病毒感染的PANC-1组的相对表达量(0.317±0.320)显著下降(P<0.05)。结论:mi R-103a-3p在侵袭能力较强的胰腺癌细胞株中表达增高,mi R-103a-3p-inhibitor能稳定转染PANC-1细胞系并抑制其mi R-103a-3p表达。

水牛bbu-miR-103-1在泌乳期与非泌乳期表达模式及靶向基因的初步研究

旨在探讨bbu-miR-103-1在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达模式,并预测其靶向调控基因及功能。本研究应用qRT-PCR检测bbu-miR-103-1,在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达。构建bbu-miR-103-1前体表达质粒LpEZX-pre-miR-103-1,并在293T细胞中包装高滴度的慢病毒颗粒,用于感染水牛乳腺上皮细胞实现过表达bbu-miR-103-1,同时应用化学合成的bbu-miR-103-1抑制剂转染水牛上皮细胞实现抑制表达bbu-miR-103-1,研究bbu-miR-103-1对PANK3及乳脂代谢相关基因表达的影响。结果表明,水牛泌乳期bbu-miR-103-1的相对表达量为非泌乳期的5.29倍(P<0.01);成功构建的慢病毒载体LpEZX-pre-miR-103-1包装获得了感染滴度为3.47×106PFU·mL-1的慢病毒颗粒;过表达和抑制表达bbu-miR-103-1分别极显著下调和上调了水牛乳腺上皮细胞PANK3基因的相对表达量(P<0.01);过表达bbu-miR-103-1极显著提高了ACACA、GPAM、DGAT1和PDK4基因的表达(P<0.01),对SREBP1c、ADFP、CD36、ACSS1等基因产生了显著的上调作用(P<0.05)。过表达bbu-miR-103-1通过下调PANK3的表达,反馈提高了SREBP1c的mRNA水平,促进了以ACACA开头的脂肪酸从头合成。表明bbu-miR-103-1对水牛乳脂肪合成有十分重要的促进作用,为揭示水牛高乳脂形成和调控机理提供了分子依据。

Linc00152靶向miR-103a-3p对膀胱癌细胞放射敏感性和增殖、凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA Linc00152(LncRNA Linc00152)影响膀胱癌细胞放射敏感性、增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测膀胱癌组织中Linc00152的表达;采用RNA干扰技术抑制膀胱癌BIU-87细胞中Linc00152的表达,利用脂质体转染技术上调miR-103a-3p的表达。应用双荧光素酶报告实验验证Linc00152与miR-103a-3p是否存在靶向作用。噻唑蓝(MTT)法检测转染后各组细胞增殖活性;流式细胞术检测转染后各组细胞凋亡情况;克隆形成实验检测放射照射后细胞存活分数及放射敏感性;Western印迹检测细胞中Cyclin D1、Bcl-2、P21、Bax表达。结果膀胱癌组织中Linc00152的相对表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。与si-NC组比较,si-Linc00152组膀胱癌BIU-87细胞活性显著降低,而细胞凋亡率显著升高,并可促进P21、Bax表达,而抑制Cyclin D1、Bcl-2表达(均P<0.05),miR-103a-3p过表达对膀胱癌BIU-87细胞具有相同作用。克隆形成试验结果显示,与阴性对照组比较,在膀胱癌BIU-87细胞中miR-103a-3p组与si-Linc00152组的放射增敏比分别为1.879、1.740,细胞存活分数均显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示Linc00152可竞争性结合miR-103a-3p并可负向调控其表达。抑制miR-103a-3p表达并抑制Linc00152表达可促进BIU-87细胞增殖及存活,而抑制细胞凋亡。结论抑制Linc00152表达可通过上调miR-103a-3p表达进而抑制膀胱癌细胞增殖及促进其凋亡,并可增强细胞放射敏感性。

血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量对帕金森病的诊断效能

目的评价血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量在帕金森病中的诊断效能。方法采用RTPCR法检测90例帕金森病患者(观察组)及24例健康人(对照组)外周血清中miR-103a、miR-30b、miR-29a。采用受试者工作曲线法观察血清miR-103a、miR-30b、miR-29a用于诊断帕金森病的效能。结果观察组外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量分别为1.12±0.10、1.57±0.37、1.23±0.09,对照组分别为0.43±0.03、0.97±0.07、0.51±0.04,观察组外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量均高于对照组,P均<0.05。外周血清miR-103a诊断帕金森病的AUC为0.816,选择0.715为诊断阈值时约登指数最大,此时外周血清miR-103a诊断帕金森病的灵敏度为71.3%,特异度为83.9%。外周血清miR-30b诊断帕金森病的AUC为0.789,选择1.120为诊断阈值时约登指数最大,此时外周血清miR-30b诊断帕金森病的灵敏度为70.5%,特异度为84.6%。外周血清miR-29a诊断帕金森病的AUC为0.756,选择1.001为诊断阈值时约登指数最大,此时外周血清miR-29a诊断帕金森病的灵敏度为72.1%,特异度为80.8%。结论帕金森病患者外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量升高。外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量在帕金森疾病中的诊断效能好。

血清循环miR-103a-2在非酒精性脂肪性肝病中的表达及意义

目的探讨miR-103作为非侵袭性生物学标志物对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)代谢异常的筛查意义。方法以健康人群和NAFLD患者为研究对象,采集血清样本进行生化指标检测。采用Nucleo ZOL法分离血清miRNA,SYBR Green法对miR-103a-2进行相对定量分析。Speraman法对miR-103a-2和生化指标进行相关性分析。结果血清学分析结果显示,与健康人对照组相比,NAFLD组TC(P<0.01)、TG(P<0.01)、ALT(P<0.01)和γ-GGT(P<0.01)水平均明显升高。与血脂正常NAFLD组相比,高脂血症NAFLD组中TC(P<0.01)、TG(P<0.01)和LDL-C(P<0.05)水平均明显升高,与健康人对照组相比,血脂正常NAFLD患者(P<0.05)和伴有高血脂症NAFLD患者(P<0.01)血清miR-103a-2表达水平均升高。血清miR-103a-2水平与血清TC水平呈正相关(r=0.495,P=0.001)。结论血清miR-103a-2较血脂更为敏感,可能成为NAFLD无创性筛查指标。

circMAT2B靶向miR-103a-3p对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的探讨环状RNA MAT2B(circular RNA MAT2B,circMAT2B)靶向微小RNA-103a-3p(miR-103a-3p)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及其作用机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,采用高糖诱导HK-2细胞建立细胞损伤模型(HG组),正常培养的HK-2细胞记为Con组;si-NC、si-circMAT2B、miR-NC、miR-103a-3p mimics、si-circMAT2B与anti-miR-NC、si-circMAT2B与anti-miR-103a-3p分别转染入HK-2细胞后加入25 mmol/L葡萄糖处理细胞(HG+si-NC组、HG+si-circMAT2B组、HG+miR-NC组、HG+miR-103a-3p组、HG+si-circMAT2B+anti-miR-NC组、HG+si-circMAT2B+anti-miR-103a-3p组);采用定量反转录聚合酶链式反应法检测circMAT2B与miR-103a-3p的表达量;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测circMAT2B与miR-103a-3p的靶向关系。结果与Con组比较,HG组circMAT2B的表达水平与凋亡率升高(P<0.05),IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),miR-103a-3p的表达水平降低(P<0.05);与HG+si-NC组比较,HG+si-circMAT2B组IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);circMAT2B能够吸附miR-103a-3p而靶向调控其表达;与HG+miR-NC组比较,HG+miR-103a-3p组IL-6、TNF-α的水平与Bax蛋白水平降低(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);与HG+si-circMAT2B+anti-miR-NC组比较,HG+si-circMAT2B+anti-miR-103a-3p组IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05)。结论抑制circMAT2B表达可通过负向调控miR-103a-3p的表达而抑制细胞炎症因子的分泌及凋亡从而减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。