miR-1284过表达对人胃癌SGC-7901细胞基因表达谱及侵袭转移的影响

背景与目的:人胃癌组织微小RNA表达谱芯片筛选研究报道miR-1284与胃癌淋巴结转移有关,但其在胃癌中的具体作用鲜见报道。该研究探讨miR-1284过表达对人胃癌SGC-7901细胞基因表达谱及侵袭转移的影响。方法:以慢病毒介导miR-1284过表达转染胃癌SGC-7901细胞为实验组(LV-miR-1284组),转染空载体慢病毒载体的细胞为阴性对照组(LV-NC-GFP组),未转染慢病毒载体的细胞为空白组(Control组)。采用荧光定量PCR检测各组细胞miR-1284的表达,芯片检测各组细胞差异表达基因,生物信息学预测miR-1284的靶基因,Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力,裸鼠皮下移植瘤模型检测各组细胞转移能力。结果:PCR结果显示,与LV-NC-GFP组和Control组比较,LV-miR-1284组细胞miR-1284表达明显增高;芯片结果显示,LV-miR-1284组有20个基因表达显著上调,17个基因表达显著下调;生物信息学预测miR-1284的靶基因有138个基因;Transwell侵袭实验结果显示,LV-miR-1284组侵袭细胞数为70.00±2.37,其细胞侵袭能力较LV-NCGFP组(168.67±4.55)和Control组(170.33±3.08)明显减弱;体内裸鼠实验结果显示,LV-miR-1284组肝脏转移率为14.29%,其细胞转移能力较LV-NC-GFP组(85.71%)和Control组(85.71%)明显减弱。结论:miR-1284过表达能抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移,其机制可能与调控SUMO1、JUN基因表达有关。

miR-1284过表达增加胃癌耐药细胞的药物敏感性及机制

胃癌细胞的多药耐药性常常是导致化疗失败的主要原因。小RNA（microRNA,miRNA）为调节基因转录的重要因子,miR-15b和miR-16在胃癌多药耐药SGC-7901/VCR细胞中低表达,通过上调miR-15b和miR-16,可靶向抑制抗凋亡蛋白Bcl-2,进而部分逆转细胞的多药耐药表型[1]。Chen等[2]使用miRNA芯片检测结果表明,

miR-1284过表达对胃癌细胞中EIF4A1的影响

目的通过验证miR-1284可能的靶基因,从而探讨miR-1284影响胃癌发生发展可能的分子作用机制。方法采用生物信息学软件预测miR-1284可能的靶基因。以慢病毒介导miR-1284过表达转染胃癌MGC-803细胞为miR-1284组(LV-miR-1284组),转染空载体慢病毒载体的细胞为阴性对照组,未转染慢病毒载体的细胞为空白对照组。运用荧光定量PCR检测各组EIF4A1基因的表达,Western blot法检测各组EIF4A1蛋白的表达,通过双荧光素酶对EIF4A1进行靶基因验证。结果与阴性对照组和空白对照组比较,miR-1284组的EIF4A1基因和蛋白的表达量下降,双荧光素酶示miR-1284能与靶基因EIF4A1的3'UTR的结合。结论 miR-1284通过作用其靶基因EIF4A1发挥生物功能学作用。

miR-1284在胃癌中表达及相关性研究

目的探讨微小RNA-1284(miRNA-1284)与胃癌的相关性及其在胃癌发生、发展过程中的功能与作用机制。方法选取自2013年8月至2014年8月上海曲阳医院收治的50例胃癌患者为研究对象。采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌组织以及癌旁组织中miR-1284的表达水平,分析其与肿瘤直径、肿瘤分期、淋巴结转移等病理特征的关系。构建慢病毒载体并包装生成上调miR-1284慢病毒载体(LV-hsa-miR-1284),转染胃癌SGC-7910细胞,设为LV-hsa-miR-1284组,同时设立阴性对照组与未转染病毒载体的空白组,RT-PCR检测miR-1284在转染细胞中的表达水平;分析miR-1284表达量与胃癌预后的关系。结果所有患者中,66.0%(33/50)胃癌组织miR-1284的表达水平低于癌旁组织(P<0.05)。miR-1284的表达量与性别、年龄、肿瘤分期、组织学分级无相关性(P>0.05);与肿瘤直径、远处转移存在显著相关性(P<0.05)。LV-hsa-miR-1284组miR-1284相对表达量显著高于阴性对照组组与空白组(P<0.05);阴性对照组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Cox回归多因素分析结果显示,miR-1284可作为胃癌预后的影响因子(P<0.05)。结论 miR-1284在胃癌组织及癌旁组织、不同肿瘤直径以及是否远处转移中的相对表达存在显著性差异,提示miR-1284可能参与胃癌的发生及发展。