血浆miR-1290在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:研究miR-1290在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者及健康体检者血浆中的表达差异,并探讨其与临床特征之间的关系.方法:采用实时荧光定量PCR检测检测219例CRC患者及年龄、性别相匹配的45例健康体检者血浆中miR-1290的表达情况,分析其与临床特点之间的关系.结果:在健康体检者与CRC患者两组中,CRC组血浆中miR-1290表达量增高,有统计学意义(P<0.05);以年龄分组(≥60岁,<60岁),高龄组人群中血浆miR-1290的表达水平较低龄组增高,有统计学意义(P<0.05);以性别(男、女)分组,血浆miR-1290的表达水平变化无统计学意义(P>0.05).结论:miR-1290在CRC患者血浆中表达上调,其高表达与CRC的分期相关,有望成为CRC诊断及治疗的指标之一.

miR-1290与RASAL2基因靶向关系的探索

目的通过构建RASAL23′-非翻译区(3′-UTR)双荧光素酶报告载体,探索RASAL2与非编码核糖核酸(ncRNA)miR-1290的靶向调控情况。方法借助在线数据库Targetscan预测miR-1290与RASAL2结合位点;利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增RASAL2基因3′-UTR序列,并以GV272为载体将其连接,分别构建野生型GV272-RASAL2-wt 3′-UTR和突变型GV272-RASAL2-mut 3′-UTR荧光素酶报告基因重组质粒;并将miR-1290及相应阴性对照分别与这两种重组质粒共转染到293T细胞中,通过检测各组荧光素酶活性,探索miR-1290与RASAL2基因的结合情况。结果酶切和测序数据表明:野生型GV272-RASAL2-wt 3′-UTR及突变型GV272-RASAL2-mut 3′-UTR双荧光素酶报告载体构建成功;相较于miR-1290与突变型GV272-RASAL2-mut 3′-UTR共转染组,miR-1290与野生型GV272-RASAL2-wt 3′-UTR共转染组的荧光素酶活性无明显变化(P>0.05)。结论成功构建了RASAL23′-UTR的双荧光素酶报告基因载体,但miR-1290不能与RASAL2结合,不能抑制其表达。

miR-1290对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探究miR-1290对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法回顾性收集2018年3月至2019年6月海南省人民医院收治的45例患者,取肺腺癌组织及癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测组织中miR-1290的表达。将肺腺癌细胞随机分为对照组、miR-1290 mimic组和miR-1290 inhibitor组,通过脂质体2000试剂盒,分别以无意义序列、miR-1290 mimic、miR-1290 inhibitor转染细胞。分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell小室、划痕实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。蛋白质印迹法检测Cyclin D1、p27、基质金属蛋白酶(MMP-2和MMP-9)蛋白的表达。经在线生物信息学和双荧光素酶报告基因检测miR-1290的靶基因,荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测miR-1290靶基因的表达。结果与癌旁组织比较,肺腺癌组织中miR-1290表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,miR-1290 mimic组miR-1290表达明显增加,miR-1290 inhibitor组miR-1290表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。培养48 h时,与对照组比较,miR-1290 mimic组细胞吸光度值、侵袭细胞数及划痕“愈合”率明显增加,miR-1290 inhibitor组细胞吸光度值、侵袭细胞数及划痕“愈合”率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,miR-1290 mimic组细胞周期蛋白Cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白表达量明显增加、p27蛋白表达明显降低,miR-1290 inhibitor组Cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白表达量明显降低、p27蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,与对照组比较,共转染INPP4B-WT、miR-1290 mimic细胞中荧光表达量明显降低(P<0.05);与对照组比较,miR-1290 mimic组二型磷脂酰肌醇4磷酸酶(INPP4B)mRNA和蛋白表达量明显降低,miR-1290 inhibitor组INPP4B mRNA和蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论miR-1290在肺腺癌组织中表达上调,miR-1290可能靶向抑制INPP4B水平,促进肺腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

靶向IRF2的miR-1290对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭的调控作用及其机制研究

背景与目的:miR-1290可以调节干扰素调节因子-2(interferon regulatory factor-2,IRF2)的表达,调节非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的恶性生物学行为,但其具体作用机制目前尚不清楚,因此,探讨miR-1290靶向IRF2对NSCLC细胞增殖、侵袭的调控作用及相关机制。方法:将体外培养的A549细胞分为miR-1290 mimic组、miR-1290 inhibitor组和NC组;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞miR-1290和IRF2的表达,采用荧光素酶实验进一步验证靶向关系。将体外培养的A549细胞分为NC组(转染空白质粒)、miR-1290组(转染miR-1290)、IRF2组(转染IRF2)和miR-1290+IRF2组(转染miR-1290+IRF2);细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测各组细胞的增殖活性;Transwell实验检测各组细胞的侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测各组细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和Ki-67。结果:miR-1290可以靶向负调控IRF2的表达;与NC组相比,miR-1290组miR-1290的表达明显上调(P<0.05),IRF2的表达明显下调(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭力和迁移率明显上调(P<0.05),VEGF、MMP-2和Ki-67明显上调(P<0.05),E-cadherin水平明显下调(P<0.05),IRF2组IRF2的表达明显上调(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭力和迁移率明显下调(P<0.05),VEGF、MMP-2和Ki-67明显下调(P<0.05),E-cadherin水平明显上调(P<0.05);与IRF2组相比,miR-1290+IRF2组miR-1290的表达明显上调(P<0.05),IRF2的表达明显下调(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭力和迁移率明显上调(P<0.05),VEGF、MMP-2和Ki-67明显上调(P<0.05),E-cadherin水平明显下调(P<0.05)。结论:miR-1290可能通过靶向负调控IRF2的表达,促进NSCLC细胞的增殖和侵袭。

血浆miR-1290在胃癌中的表达及临床意义

目的:探究胃癌患者血浆miR-1290的表达及其临床意义。方法:收集2017年10月至2018年6月间就诊于安徽省立医院的84例胃癌患者的血浆及临床病理资料,所有患者均经胃镜及病理活检确诊且术前未进行放疗、化疗或其他药物治疗,同时收集年龄、性别与之相匹配的健康者血浆29例,检测血浆中miR-1290的表达水平,并分析胃癌患者血浆miR-1290表达量与临床病理参数之间的关系。利用受试者工作曲线评估血浆miR-1290作为生物标志物在诊断胃癌方面的临床价值。结果:胃癌患者与健康对照组相比,血浆miR-1290的表达量明显增高(6.44±2.59 vs 3.44±1.75),差异有统计学意义(P<0.001)。miR-1290在胃癌患者血浆中的表达水平与患者的年龄、性别无相关性,但与肿瘤的大小、肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有显著相关性。ROC曲线结果表明miR-1290对胃癌的发生有预测作用,最佳截断值为3.5,此时灵敏度为86.9%,特异度为65.6%。结论:miR-1290在胃癌患者血浆中表达上调,其表达水平与胃癌的发生、发展密切相关,有望成为胃癌诊断的指标。

血浆miR-1290表达水平对口腔鳞状细胞癌患者预后预测的价值

目的探讨血浆miR-1290表达水平对口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者预后预测的价值。方法选取2014年1月—2018年12月儋州市人民医院收治的OSCC患者70例,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测OSCC患者血浆miR-1290表达水平。通过ROC曲线确定血浆miR-1290表达水平的最佳界值,并以此为标准将OSCC患者分为高miR-1290组(n=31)和低miR-1290组(n=39),对2组临床病理特征进行比较。应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用单因素及多因素COX回归模型分析影响OSCC患者预后不良的危险因素。结果OSCC组血浆miR-1290表达水平(0.65±0.14)明显低于对照组(2.06±0.90),二者间差异有统计学意义(t=13.912,P<0.001)。血浆miR-1290低表达与OSCC患者的临床分期、分化程度、肿瘤直径及淋巴结转移有关(P<0.05)。生存分析显示,低miR-1290组患者总生存率和无进展生存率明显低于高miR-1290组(P<0.01)。多因素COX回归模型分析显示,临床分期、淋巴结转移及血浆miR-1290<1.14是影响OSCC患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论OSCC患者血浆miR-1290表达水平明显降低,miR-1290低表达与OSCC患者生存期短有关,可能是预测OSCC预后不良的潜在标志物。

lncRNA KIZ-AS1通过调控miR-1290/CDC73轴抑制膀胱癌细胞增殖和迁移

目的分析lncRNA KIZ-AS1在膀胱癌组织中表达,探讨KIZ-AS1通过调控miR-1290/CDC73轴对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测膀胱癌组织和不同膀胱癌细胞系中KIZ-AS1的表达水平。选择KIZ-AS1表达最低的细胞系分为对照组(感染阴性对照慢病毒)和KIZ-AS1组(感染KIZ-AS1慢病毒),采用细胞增殖实验(MTT法)和Transwell实验分别检测膀胱癌细胞增殖情况和迁移能力。采用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验验证KIZ-AS1与miR-1290的靶向关系。qPCR和Western blot法分别检测miR-1290与CDC73(cell division cycle 73)基因的表达水平。结果与癌旁组织比较,膀胱癌组织中KIZ-AS1表达水平明显降低(P<0.01)。与膀胱上皮永生化细胞比较,膀胱癌细胞中KIZ-AS1表达明显降低(P<0.05),KIZ-AS1表达最低的细胞是5637细胞(P<0.01)。与对照组比较,KIZ-AS1组5637细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞迁移数目显著减少(P<0.01)。KIZ-AS1与miR-1290存在结合位点(P<0.01)。与对照组比较,KIZ-AS1组5637细胞中miR-1290表达水平降低(P<0.01),CDC73表达水平增加(P<0.01)。结论KIZ-AS1在膀胱癌组织和细胞系中呈低表达,KIZ-AS1通过调控miR-1290/CDC73轴表达,抑制膀胱癌5637细胞增殖和迁移。

MiR-1290在结直肠癌患者血清中的表达水平及临床意义

目的探究结直肠癌(CRC)患者血清miR-1290表达水平及与患者临床病理特征的关系,分析miR-1290联合癌胚抗原(CEA)检测对CRC的诊断价值。方法收集2017年1月至2019年12月伊川县人民医院收治的80例CRC患者、40例结直肠腺瘤(CRA)患者及40例健康体检者血清,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和电化学发光法(ECL)检测3组研究对象血清miR-1290及CEA表达水平,采用χ^(2)检验分析miR-1290、CEA表达水平与CRC患者临床病理特征的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-1290单独或联合CEA检测对CRC的诊断价值。结果CRC患者血清miR-1290和CEA表达水平均高于CRA患者和健康体检者,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-1290表达与CRC患者TNM分期、肿瘤分化程度和远处转移密切相关(P<0.05);CEA表达与CRC患者TNM分期和肿瘤分化程度密切相关(P<0.05)。血清miR-1290用于诊断CRC的曲线下面积(AUC)为0.807(95%CI 0.863~0.951),特异度和灵敏度分别为71.2%和80.1%,miR-1290联合CEA检测能进一步提高诊断效能,AUC升高至0.840(95%CI 0.907~0.973),诊断灵敏度和特异度分别为88.8%和85.2%。结论血清miR-1290在CRC患者血清中高表达,并与临床病理特征相关,血清miR-1290联合CEA检测对CRC有较高的诊断价值。

子痫前期患者胎盘组织中miR-1290及ARL4C的表达及其相关性分析

①目的探讨子痫前期胎盘组织中miR-1290及ADP-核糖基化样因子4c(ARL4C)的表达及相关性。②方法收集健康胎盘组织29例,子痫前期胎盘组织14例,子痫前期重度胎盘组织20例。用荧光定量PCR检测胎盘组织中miR-1290mRNA的表达情况,Western Blotting技术检测ARL4C蛋白表达的差异。③结果miR-1290mRNA在正常组、子痫前期组及子痫前期重度组胎盘组织中相对表达量分别为(1.015±0.030)、(1.256±0.425)及(1.797±0.049),呈升高趋势(F=2307.861,P<0.05),ARL4C蛋白相对表达量分别为(0.769±0.375)、(0.528±0.462)及(0.290±0.312),呈下降趋势(F=959.758,P<0.05),差异均有统计学意义。④结论miR-1290在子痫前期患者胎盘组织中表达量增加,随着病情进展明显升高;ARL4C在子痫前期患者胎盘组织中呈低表达,随着病情进展明显降低,二者呈负相关,miR-1290可能通过靶向调控ARL4C影响子痫前期疾病的发展过程。

SF-1、miR-1290、miR-630在子宫内膜癌组织中表达及与TNM分期关系

目的 探讨类固醇生成因子-1(SF-1)、微小RNA-1290(miR-1290)、微小RNA-630(miR-630)在子宫内膜癌组织中表达及与TNM分期关系。方法 选取2015年7月至2021年9月120例子宫内膜癌患者,比较不同组织、不同病理特征、不同随访结局患者组织SF-1、miR-1290、miR-630表达水平,分析组织SF-1、miR-1290、miR-630表达与病理特征关系及其预测随访结局的价值。结果 癌组织SF-1、miR-1290表达高于癌旁组织,miR-630表达低于癌旁组织(t=9.799、12.933、10.915,均为P<0.05)。经相关性分析,组织SF-1、miR-1290表达与分化程度呈负相关(r=-0.759、-0.848,均为P<0.05),与2018FIGO分期、子宫肌层浸润深度、淋巴结转移、远处转移呈正相关(r=0.634、0.688、0.706、0.722;0.825、0.816、0.870、0.853,均为P<0.05);组织miR-630表达与分化程度呈正相关(r=0.936,P<0.05),与2018FIGO分期、子宫肌层浸润深度、淋巴结转移、远处转移呈负相关(r=-0.693、-0.725、-0.780、-0.801,均为P<0.05);组织SF-1表达与miR-1290表达呈正相关(r=0.823,P<0.05),与miR-630表达呈负相关(r=-0.708,P<0.05);组织miR-1290表达与miR-630表达呈负相关(r=-0.788,P<0.05)。随访结局不良患者子宫内膜组织SF-1、miR-1290表达高于良好患者,miR-630表达低于良好患者(t=13.014、9.342、8.436,均为P<0.05);组织SF-1+miR-1290+miR-630表达预测不良结局的ROC下面积(AUC)为0.916,其敏感度和特异度分别为82.86%和88.24%。结论 子宫内膜癌组织中SF-1、miR-1290表达升高,miR-630表达降低,并与TNM分期、病情转归有关,可作为术前无创性评估TNM分期以及早期预测病情转归的一种方法。

超声微泡介导miR-1290通过调节DKK3表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响

目的探讨超声微泡介导miR-1290通过调节DKK3表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的作用机制。方法将对数期SKOV3细胞分为对照组(Control)、miR-1290 NC组、微泡处理(MB)组、miR-1290 inhibitor组、miR-1290 inhibitor-MB组。双荧光素酶实验验证miR-1290与DKK3的靶向关系;RT-PCR检测SKOV3细胞中miR-1290与DKK3 mRNA的表达;MTT法检测SKOV3细胞活性;流式细胞仪检测SKOV3细胞凋亡情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测SKOV3细胞迁移侵袭能力;Western blot检测蛋白表达。结果双荧光素酶实验证明,miR-1290与DKK3有靶向关系,miR-1290可负靶向调控DKK3;与miR-1290 NC组[24、48、72 h:(0.53±0.05)、(0.82±0.06)、(1.24±0.06)]比较,MB组[24、48、72 h:(0.43±0.06)、(0.71±0.03)、(1.03±0.03)]、miR-1290 inhibitor组[24、48、72 h:(0.41±0.03)、(0.66±0.04)、(0.78±0.05)]、miR-1290 inhibitor-MB组[24、48、72 h:(0.33±0.04)、(0.54±0.05)、(0.67±0.06)]SKOV3细胞增殖活性明显下降(P<0.05)。与miR-1290 NC组SKOV3细胞迁移率、侵袭数目[(45.98±4.11)%、(235.14±5.78)个]比较,MB组[(36.77±4.24)%、(189.57±4.58)个]、miR-1290 inhibitor组[(32.14±3.78)%、(165.35±5.01)个]、miR-1290 inhibitor-MB组SKOV3细胞迁移率、侵袭数目[(20.40±3.01)%、(86.21±4.23)个]明显下降,SKOV3细胞中DKK3 mRNA及蛋白表达、细胞凋亡率、促凋亡蛋白C-Caspase-3、Bax表达显著上升(P<0.05);miR-1209 NC组与Control组SKOV3细胞上述指标无显著差异(P>0.05)。结论miR-1290可负向调DKK3表达,而超声微泡可下调miR-1290表达,上调DKK3表达,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移侵袭,促进癌细胞凋亡。

miR-1290对人脐带间充质干细胞增殖、周期和凋亡的调控作用研究

目的:探索microRNA-1290对人脐带间充质干细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:以从胎儿脐带分离的间充质干细胞为基础细胞,构建miR-1290模拟物,进行瞬时转染,通过荧光定量PCR检测转染后miR-1290水平;运用MTT方法观察转染miR-1290后间充质干细胞的增殖情况;通过流式细胞仪染色观察转染后细胞周期和细胞凋亡的变化。结果:荧光定量PCR结果显示,转染后miR-1290表达水平显著升高12.2倍;MTT结果表明,高表达miR-1290相比于阴性对照组(NC组)可以促进间充质干细胞的增殖;流式细胞周期检测结果发现,转染miR-1290后,细胞周期G1期从(85.90±1.91)%缩短至(76.35±2.03)%,而S期和G2期与对照组相比均明显增加,增殖指数(22.75±3.01)相比于对照组(14.10±1.87)也显著升高(P<0.05);凋亡检测结果显示,高表达miR-1290细胞凋亡率(4.9±0.276)%与阴性对照组(8.2±0.891)%相比下降,有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-1290可以提高MSC的增殖能力,延长S期和G2期,并一定程度上抑制MSC的凋亡。

小檗碱通过下调miR-1290缓解高糖诱导的足细胞损伤研究

目的探究小檗碱对高糖诱导的足细胞损伤的影响及其对miR-1290的调控作用。方法采用高糖诱导小鼠肾足细胞MPC5建立细胞损伤模型,给予不同浓度(1.0、2.5、5.0μmol/L)小檗碱进行干预,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Western blotting法检测细胞B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)蛋白表达情况;采用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;采用qRT-PCR法检测miR-1290 mRNA表达情况。将阴性对照(miR-NC)和miR-1290模拟物(miR-1290 mimics)分别转染至MPC5细胞,给予5μmol/L小檗碱进行干预,考察miR-1290对小檗碱抑制高糖诱导的细胞凋亡及炎性因子分泌的影响。结果与对照组比较,模型组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05),上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著升高(P<0.05),miR-1290 mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,小檗碱组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05),上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著降低(P<0.05),miR-1290 mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。与小檗碱+miR-NC组比较,小檗碱+miR-1290 mimics组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05),上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著升高(P<0.05)。结论小檗碱能够通过下调miR-1290表达抑制高糖诱导的足细胞凋亡及炎性反应,从而减轻细胞损伤。

血浆外泌体miR-1290、miR-1307表达水平与卵巢癌患者临床病理特征的关系及其诊断价值分析

目的:探讨卵巢癌患者血浆外泌体中微小RNA(miR)-1290和miR-1307的表达,分析两者与临床病理参数的关系及诊断价值。方法:选取2019年1月至2021年1月于靖江市人民医院诊治的60例卵巢癌患者为卵巢癌组,另分别选取同期52例良性卵巢肿瘤患者和50例女性健康体检者为良性肿瘤组和健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-1290、miR-1307在各组血浆外泌体中的表达,分析miR-1290、miR-1307与卵巢癌患者临床病理特征的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆外泌体miR-1290、miR-1307对卵巢癌的诊断效能。结果:与良性肿瘤组和健康对照组相比,卵巢癌组的血浆外泌体miR-1290、miR-1307表达水平较高(P<0.05)。卵巢癌组的miR-1290表达水平与FIGO分期、分化程度及淋巴结转移有关,miR-1307表达水平与FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05);卵巢癌患者血浆外泌体miR-1307表达与miR-1290表达呈显著正相关(r=0.478,P<0.05)。血浆外泌体miR-1290、miR-1307联合应用诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)(0.95CI)为0.726(0.526~0.926),高于两指标单独应用的0.724(0.466~0.987)、0.845(0.750~0.933)。结论:卵巢癌患者血浆外泌体miR-1290、miR-1307表达水平升高,两者联合检测对卵巢癌的早期诊断具有较高的价值,有望成为新的卵巢癌的分子标志物。

非小细胞肺癌组织miR-1290和干扰素调节因子-2表达及意义

目的观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者癌组织miR-129、干扰素调节因子-2(interferon regulatory factor-2, IRF-2)表达变化,探讨其与NSCLC患者临床病理特征及预后的关系。方法 NSCLC患者84例,均行胸腔镜下肺叶切除+淋巴结清扫术,术后采用吉西他滨联合顺铂方案化疗6个周期。采用实时荧光定量PCR法检测手术切除癌组织及癌旁组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量;比较不同临床病理特征NSCLC患者癌组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量;Pearson相关法分析NSCLC患者癌组织miR-1290与IRF-2表达的相关性。依据癌组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量中位数,将NSCLC患者分为miR-1290高表达组(miR-1290相对表达量≥3.06)43例和miR-1290低表达组(miR-1290相对表达量<3.06)41例,IRF-2高表达组(IRF-2 mRNA相对表达量≥0.72)40例和IRF-2低表达组(IRF-2 mRNA相对表达量<0.72)44例。随访3年,比较miR-1290和IRF-2高、低表达组NSCLC患者的生存情况。结果癌组织miR-1290相对表达量(3.05±0.96)高于癌旁组织(1.12±0.37)(P<0.05),IRF-2 mRNA相对表达量(0.73±0.24)低于癌旁组织(1.89±0.52)(P<0.05);有淋巴结转移(5.12±1.83)、临床分期Ⅲ~Ⅳ期(3.94±2.03)者癌组织miR-1290相对表达量分别高于无淋巴结转移、临床分期Ⅰ~Ⅱ期者(2.77±1.16、2.63±0.99)(P<0.05);有淋巴结转移(0.18±0.06)、临床分期Ⅲ~Ⅳ期(0.56±0.04)者癌组织IRF-2 mRNA相对表达量分别低于无淋巴结转移、临床分期Ⅰ~Ⅱ期者(0.80±0.23、0.81±0.34)(P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤直径、病理类型、分化程度及有无吸烟史者癌组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。NSCLC组织miR-1290表达与IRF-2 mRNA表达呈负相关(r=-0.742,P<0.001)。84例NSCLC患者3年总生存率为42.86%;miR-1290高表达组3年总生存率(27.91%)低于miR-1290低表达组(58.54%)(P<0.05),IRF-2低表达组3年总生存率(29.55%)低于IRF-2高表达组(57.50%)(P<0.05)。结论 NSCLC患者癌组织miR-1290表达升高,IRF-2 mRNA表达降低,提示NSCLC患者有淋巴结转移、临床分期晚,且预后较差。

ADAMTS9-AS2调控miRNA-1290和CFTR的表达及对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的本研究旨在探究长链非编码RNA(lncRNA)ADAMTS9反义RNA 2(ADAMTS9-AS2)靶向调控微小RNA-1290(miR-1290)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)的表达及对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ADAMTS9-AS2在乳腺癌组织和细胞系(MCF-7、MDA-MB-453、T47D、MDA-MB-468、MDA-MB-231和SK-BR-3)中的表达情况。培养MDA-MB-231细胞,分为:对照组(空白)、pcDNA组(阴性对照)和ADAMTS9-AS2过表达组。MTT法、划痕实验和Transwell实验分别检测MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot验证ADAMTS9-AS2和miR-1290靶向关系。结果ADAMTS9-AS2在乳腺癌组织(0.444±0.045)中的相对表达水平低于癌旁组织(1.000±0.062)(P<0.01)。与癌旁正常乳腺组织相比(1.000±0.092),miR-1290在乳腺癌组织中相对表达水平更高(1.504±0.104)(P<0.01)。ADAMTS9-AS2在乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-453、T47D、MDA-MB-468、MDA-MB-231和SK-BR-3相对表达量低于正常乳腺上皮细胞(MCF-10A),miR-1290在乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-453、T47D、MDA-MB-468、MDA-MB-231和SK-BR-3中相对表达量高于MCF-10A细胞,其中MDA-MB-231的ADAMTS9-AS2相对表达量最低,miR-1290相对表达量最高。ADAMTS9-AS2过表达组MDA-MB-231细胞增殖(48 h和72 h)、迁移(12 h和24 h)和侵袭(24 h)能力均低于对照组和pcDNA组,CFTR的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组和pcDNA组(均P<0.05)。ADAMTS9-AS2可靶向结合miR-1290。结论ADAMTS9-AS2可能调控miR-1290和CFTR表达,抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭,提示ADAMTS9-AS2可能是三阴性乳腺癌治疗的潜在靶点。

miR-1290在乳腺癌组织中表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的观察miR-1290在乳腺癌组织中表达情况,探讨其对乳腺癌细胞增殖、凋亡及骨髓基质抗原2(stromal antigen 2,STAG2)表达的影响。方法取120例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-1290相对表达量。对数生长期MCF-7细胞,随机分为对照组、模拟物对照组、模拟物组、抑制物对照组和抑制物组,对照组加入含LipofectamineTM 2000的完全培养液,模拟物对照组、模拟物组、抑制物对照组和抑制物组分别转染miR-1290模拟物阴性对照、miR-1290模拟物、miR-1290抑制物阴性对照和miR-1290抑制物。采用CCK-8法检测细胞相对活力,采用TUNEL法检测细胞凋亡率,采用Western blot法检测细胞STAG2蛋白相对表达量。结果乳腺癌组织miR-1290相对表达量(3.84±0.76)高于癌旁组织(1.06±0.18)(P<0.05)。模拟物组细胞miR-1290相对表达量(4.83±0.25)和细胞相对活力[(124.71±2.74)%]高于对照组[2.67±0.16、(100.00±1.15)%]和模拟物对照组[2.72±0.18、(101.32±2.18)%](P<0.05),细胞凋亡率[(3.25±0.48)%]和STAG2蛋白相对表达量(0.58±0.04)低于对照组[(6.72±0.74)%、0.74±0.08]和模拟物对照组[(7.04±0.69)%、0.72±0.06](P<0.05);抑制物组细胞miR-1290相对表达量(1.31±0.12)和细胞相对活力[(78.82±2.02)%]低于对照组和抑制物对照组[2.59±0.17、(98.65±1.83)%](P<0.05),细胞凋亡率[(34.17±1.16)%]和STAG2蛋白相对表达量(1.12±0.07)高于对照组和抑制物对照组[(6.69±0.67)%、0.81±0.05](P<0.05)。结论miR-1290在乳腺癌组织中表达上调,可能通过调控STAG2的表达促进乳腺癌细胞增殖,抑制细胞凋亡。

血浆miR-1290在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨血浆miR-1290表达水平对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者预后预测的价值。方法:选取2015年1月~2018年10月儋州市人民医院收治的OSCC患者82例,采用实时荧光定量PCR技术检测OSCC患者血浆miR-1290表达水平。通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线确定血浆miR-1290表达水平的最佳截断值,并以此为标准将OSCC患者分为高miR-1290组(n=48)和低miR-1290组(n=34),对两组临床病理特征进行比较。应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用单因素及多因素COX回归模型分析影响OSCC患者预后不良的危险因素。结果:OSCC组血浆miR-1290表达水平明显低于对照组(P<0.01)。血浆miR-1290低表达与OSCC患者的临床分期、分化程度、肿瘤直径及淋巴结转移有关(P<0.05)。生存分析显示,低miR-1290组患者总生存率明显低于高miR-1290组(P<0.01),低miR-1290组患者无进展生存率明显低于高miR-1290组(P<0.01)。多因素COX回归模型分析显示,临床分期[HR(95%CI)=2.375(1.742~4.106)]、淋巴结转移[HR(95%CI)=2.946(2.526~6.210)]及血浆miR-1290表达水平<1.16[HR(95%CI)=3.927(3.458~9.113)]是影响OSCC患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论:OSCC患者血浆miR-1290表达水平明显降低,miR-1290低表达与OSCC患者生存期短有关,有望作为预测OSCC预后不良的生物标志物。

胃癌组织miR-148b和miR-1290及miR-141与胃癌患者Hp感染相关性探讨

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与胃癌组织微小RNA(miR),miR-148b、miR-1290、miR-141的相关性,并分析各指标对肿瘤侵袭性的影响。方法收集2019-01-31-2020-01-31鞍山市中心医院收治的胃癌患者42例临床资料。采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测Hp感染及胃癌组织miR-148b、miR-1290和miR-141表达情况,对比胃癌组织与癌旁正常组织miR-148b、miR-1290和miR-141表达,比较是否Hp感染患者临床资料及miR-148b、miR-1290和miR-141表达,logistic多因素回归模型分析胃癌患者Hp感染影响因素,ROC曲线分析miR-148b、miR-1290和miR-141表达对Hp感染的评估价值,Spearman相关系数模型分析各指标与临床病理特征的相关性,对比miR-148b、miR-1290、miR-141联合评估阳性与阴性患者预后。结果胃癌组织miR-148b表达(0.82±0.27)低于癌旁正常组织(1.25±0.31),差异有统计学意义(t=6.779,P<0.05),miR-141表达胃癌组织(1.27±0.32)低于癌旁正常组织(3.23±0.45),差异有统计学意义(t=19.426,P<0.05),miR-1290表达胃癌组织(4.72±0.98)高于癌旁正常组织(1.58±0.37),差异有统计学意义(t=23.004,P<0.05);胃癌Hp感染患者胃癌组织miR-1290表达(5.26±1.02)高于非Hp感染患者(3.75±0.74),差异有统计学意义(t=2.649,P<0.05),胃癌Hp感染患者胃癌组织miR-148b(0.75±0.19)表达低于非Hp感染患者(0.95±0.30),差异有统计学意义(t=5.033,P<0.05),胃癌Hp感染患者胃癌组织miR-141(1.06±0.25)表达低于非Hp感染患者(1.65±0.37),差异有统计学意义(t=6.157,P<0.05);临床分期(OR=4.607)、浸润深度(OR=5.325)、淋巴结转移(OR=3.468)、脉管瘤栓(OR=4.057)及胃癌组织miR-148b(OR=0.423)、miR-1290(OR=5.689)、miR-141(OR=0.405)表达均与胃癌Hp感染相关,均P<0.05;miR-148b、miR-1290、miR-141联合评估胃癌Hp感染的AUC为0.931,敏感度、特异度分别为85.19%、93.33%;胃癌Hp感染患者miR-148b、miR-1290、miR-141表达与临床分期(r值分别为-0.528、0.627、-0.682)、浸润深度(r值分别为0.615、0.631、-0.544)、淋巴结转移(r值分别为-0.576、0.624、-0.532)、脉管瘤栓(r值分别为-0.504、0.602、-0.567)间存在相关性,均P<0.05;miR-148b、miR-1290、miR-141联合评估阳性患者6个月病死率(4.55%)与阴性患者6个月病死率(0)比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.236,P=0.627),miR-148b、miR-1290、miR-141联合评估阳性患者12个月病死率(13.64%)与阴性患者12个月病死率(0)比较,差异无统计学意义,χ^(2)=0.767,P=0.381。结论胃癌Hp感染患者癌组织miR-148b、miR-141表达明显降低,miR-1290表达升高,各指标表达情况与Hp感染的发生密切相关,且与临床分期、浸润深度、淋巴结转移、脉管瘤栓密切相关,联合应用在评估胃癌Hp感染方面具有良好价值。

microRNA-1290通过NDRG1/NF-κB/IL-6信号通路促进结肠癌细胞迁移和侵袭

目的:探讨微小RNA-1290(microRNA-1290,miR-1290)通过N-myc下游调节基因1(N-Myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)调控NF-κB/IL-6活化分子机制及其对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响。方法:选择48例结肠癌患者肿瘤及癌旁组织,用免疫组织化学染色检测IL-6表达;qRT-PCR法检测20例肿瘤组织,结肠癌细胞与正常结肠上皮HCoEpiC细胞中IL-6 mRNA及miR-1290表达;结合miR-1290类似物及抑制剂处理,蛋白质印迹和ELISA法分别检测结肠癌细胞中p-NF-κB、NF-κB、NDRG1、上皮钙黏素、波形蛋白表达以及IL-6外泌量;小干扰RNA及中和性抗体靶向下调IL-6表达,miR-1290类似物处理,划痕实验以及Transwell实验检测结肠癌细胞迁移、侵袭能力。结果:结肠癌中IL-6免疫组织化学染色评分明显高于癌旁组织(P<0.01);结肠癌瘤体内miR-1290与IL-6 mRNA表达呈正相关(r=0.8454,P<0.01);与HCoEpiC细胞相比,结肠癌细胞中miR-1290表达明显增高(P均<0.01);上调miR-1290表达可抑制NDRG1表达从而促进NF-κB信号通路及上皮间充质转化活化(P<0.01),而下调miR-1290表达可促进NDRG1、上皮钙黏素表达并抑制p-NF-κB和波形蛋白形成(P<0.01);划痕实验显示上调miR-1290表达可增强结肠癌细胞迁移能力,而敲低IL-6后细胞愈合率则明显抑制(P<0.01);miR-1290类似物处理促进结肠癌细胞侵袭,而抗体中和IL-6可显著降低侵袭细胞数(P<0.01)。结论:结肠癌细胞中miR-1290可通过抑制NDRG1形成促进NF-κB/IL-6调控轴诱导的细胞迁移和侵袭发生。