miR-200c/ZEB1/E-cadherin轴在胆管癌转移侵袭中的作用及对胆管癌预后评估的价值

目的:探讨微小RNA-200c(miR-200c)/锌指转录因子(ZEB1)/E-钙黏蛋白(E-cadherin)在胆管癌(HCCA)转移、侵袭中的作用及对HCCA预后评估的临床价值。方法:选取2020年08月至2022年12月间我院收治的胆管癌患者36例为研究对象,同时选取胆管良性疾病患者(胆总管结石或胆管良性狭窄)20例作为对照。采用原位杂交、实时荧光定量PCR检测miR-200c在HCCA患者组织及血清中的表达;生存曲线分析miR-200c表达与总生存期的相关性;Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力;免疫印迹检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达。体内研究构建裸鼠成瘤实验,采用免疫组化检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达;Tunel技术检测组织中的凋亡情况。受试者工作特征(ROC)曲线评估生物标志物对胆管癌预后的诊断效能。结果:miR-200c低表达于HCCA组织及血清中;生存曲线分析显示,miR-200c表达与患者的总生存期呈正相关性,TNM分期与患者的总生存期呈负相关性;miR-200c mimics抑制了胆管癌细胞的迁移和侵袭能力,并降低ZEB1表达而诱导E-cadherin表达;转染ZEB1逆转miR-200c的作用效应,促进胆管癌细胞的迁移和侵袭特性,抑制胆管癌细胞的凋亡。CA199、CEA和miR-200c联合检测诊断胆管癌预后的ROC曲线下面积为0.892,灵敏度0.8611,特异度0.8000。结论:miR-200c/ZEB1/Ecadherin轴参与胆管癌的转移侵袭;CA199、CEA和miR-200c联合检测对胆管癌预后的诊断效能良好,对临床胆管癌的治疗策略具有重要指导价值。

miR-200c PAPP-A水平与经阴道超声鉴别诊断先兆流产和异位妊娠的价值

目的:探究血清miR-200c、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)水平与经阴道超声鉴别诊断先兆流产和异位妊娠的价值。方法:本研究开展时间为2020年1月至2022年1月,研究对象为此时间段内在我院就诊的正常早孕孕妇、异位妊娠及先兆流产孕妇各43例,患者均接受阴道超声检查,记录各项超声参数,并比较各组孕妇就诊时血清miR-200c、PAPP-A水平差异,探究其对孕妇先兆流产及异位妊娠的诊断价值。结果:三组间孕妇的妊娠黄体平均径比较组间差异无统计学意义(P>0.05),异位妊娠孕妇的子宫内膜厚度低于先兆流产组和正常早孕组,且先兆流产组低于正常早孕组(P<0.05);先兆流产组孕妇的RI高于异位妊娠组和正常早孕组,且异位妊娠组高于正常早孕组(P<0.05);先兆流产组和异位妊娠组孕妇的PSV均低于正常早孕组(P<0.05),但先兆流产组和异位妊娠组组间差异无统计学意义(P>0.05)。先兆流产组和异位妊娠组孕妇的血清miR-200c水平高于正常早孕组(P<0.05),但先兆流产组和异位妊娠组组间差异无统计学意义(P>0.05),异位妊娠孕妇的PAPP-A低于先兆流产组和正常早孕组,且先兆流产组低于正常早孕组(P<0.05)。经分析,超声及miR-200c、PAPP-A水平联合诊断孕妇先兆流产特异度高于各指标单独诊断,对异位妊娠诊断的特异度及阳性预测值高于各指标单独诊断。结论:血清miR-200c和PAPP-A水平结合经阴道超声检查,能有效地用于鉴别诊断先兆流产和异位妊娠,提高诊断的准确率和特异度,具有较高的临床应用潜力。

血清miR-200c表达水平与复发性卵巢癌的相关性及临床意义

目的分析血清miR-200c表达水平与上皮性卵巢癌(EOC)患者治疗后复发的关系。方法选取2019年6月至2020年6月昆明医科大学第三附属医院收治的160例EOC患者作为研究对象,随访2年,有104例复发。调查患者的基线资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测患者血清miR-200c的表达水平,采用单因素分析患者治疗后复发与血清miR-200c的表达水平和基线资料的相关性,多因素Logistic回归分析影响患者复发的独立危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-200c预测EOC患者治疗后复发的效能。结果单因素分析显示,雌激素受体、孕激素受体、淋巴结转移、血清糖类抗原125(CA125)和人附睾蛋白4(HE4)的水平与EOC患者治疗后复发呈正相关,血清miR-200c水平与EOC患者治疗后复发呈负相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,血清CA125高表达(OR>1,P<0.05)、miR-200c低表达(OR<1,P<0.05)是EOC患者术后复发的独立危险因素;ROC曲线结果显示,血清CA125、miR-200c水平单独及联合预测EOC患者治疗后复发的曲线下面积分别为0.915、0.954、0.993,血清miR-200c的预测效能优于CA125,联合预测效能优于单项指标。结论miR-200c是提示EOC细胞侵袭性的分子标志物,血清miR-200c表达水平的降低会增加EOC患者治疗后复发的风险,可作为潜在的癌症复发预测指标和治疗靶点。

miR-200c通过抑制RhoA/ROCK通路延缓皮肤创伤愈合进程

目的探究miR-200c在皮肤创伤愈合中的作用及其调控机制。方法构建SD大鼠背部全层皮肤创伤模型,将创伤后大鼠分为agomir-NC组、miR-200c agomir组、sh-NC组和sh-RhoA组。采用qRT-PCR检测创面组织中miR-200c表达,Western blot检测创面组织中MMP-9、N-cadherin、E-cadherin和RhoA蛋白表达。创伤后第1,7,14天计算大鼠创面愈合率。采用双荧光素酶报告实验分析miR-200c和RhoA靶向关系。将人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞分为inhibitor-NC组、miR-200c inhibitor组、miR-200c inhibitor+sh-NC组和miR-200c inhibitor+sh-RhoA组。采用EdU法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移,qRT-PCR检测HaCaT细胞中miR-200c表达,Western blot检测HaCaT细胞中MMP-9、N-cadherin、E-cadherin、RhoA和ROCK蛋白表达。结果与正常皮肤比较,创面组织中miR-200c表达降低(P<0.01),RhoA表达升高(P<0.01)。miR-200c与RhoA 3′UTR存在靶向结合关系。与agomir-NC组比较,miR-200c agomir组大鼠创面愈合率以及MMP-9、N-cadherin、RhoA和ROCK蛋白表达均降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-RhoA组大鼠创面愈合率以及MMP-9、N-cadherin、RhoA和ROCK蛋白表达均降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。与inhibitor-NC组比较,miR-200c inhibitor组HaCaT细胞增殖水平、细胞迁移率以及MMP-9和N-cadherin蛋白表达均升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);与miR-200c inhibitor+sh-NC组比较,miR-200c inhibitor+sh-RhoA组HaCaT细胞增殖水平、细胞迁移率以及MMP-9和N-cadherin蛋白表达均降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论miR-200c靶向RhoA,过表达miR-200c可以通过调控RhoA/ROCK通路抑制皮肤创伤愈合的再上皮化过程,进而延缓皮肤创伤愈合进程。

miR-200c靶向ZEB1调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡

目的探究miR-200c对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法利用RT-qPCR检测52例宫颈癌组织及癌旁组织中miR-200c的表达水平,使用miR-200c模拟物或抑制物转染宫颈癌细胞系,RT-qPCR验证转染效率后,使用CCK8检测转染细胞的增殖水平,流式细胞术检测转染细胞的凋亡水平;生物信息学预测miR-200c的靶基因,荧光素酶报告基因验证其靶向关系;RT-qPCR检测癌组织中靶基因的表达水平,Pearson相关性分析miR-200c和靶基因的表达关系;RT-qPCR和蛋白质印迹检测转染靶基因siRNA或质粒细胞的增殖和凋亡水平。结果宫颈癌组织中miR-200c的表达显著低于癌旁组织,转染miR-200c模拟物的HT3细胞增殖水平显著降低,凋亡水平显著增加,而转染miR-200c抑制物的HeLa细胞增殖水平显著增加,凋亡水平显著降低;荧光素酶报告基因实验证实ZEB1是miR-200c的指标靶标,miR-200c模拟物显著降低ZEB1表达,而抑制物则发挥相反效应;宫颈癌组织中ZEB1的表达显著高于癌旁组织,且其表达与miR-200c呈显著负相关关系;敲低ZEB1显著抑制HT3的增殖水平,促进其凋亡,而过表达ZEB1则发挥相反效应。结论miR-200c通过靶向抑制ZEB1表达调控宫颈癌细胞的增殖与凋亡,从而参与宫颈癌的发生发展。

阴道彩超联合血清β-hCG、miR-200c对早期异位妊娠的临床诊断价值

目的:探究经阴道彩超联合血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)、miR-200c对早期异位妊娠(EP)的临床诊断价值。方法:回顾性选取2020年1月-2022年5月在本院住院治疗的早期EP患者204例作为EP组,另选取同期进行围产期保健检查的200例健康孕妇作为正常妊娠组。以诊断性刮宫或病理检查结果为金标准,收集所有受试者的临床资料,对所有受试者进行阴道彩超检测,同时检测其外周血β-HGG水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清中miR-200c表达水平。采用多因素logistic分析探究以上各项指标表达水平对EP的影响。结果:两组患者的人工流产占比、自然流产占比、年龄、体质量指数(BMI)、产次、孕次、孕周对比均无统计学差异(P>0.05),两组EP组患者外周血血管内皮生长因子(VEGF)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及肌酸激酶(CK)水平对比无统计学差异(P>0.05)。EP组患者血清miR-200c相对表达量以及血清β-hCG浓度均低于正常妊娠组(P<0.05)。阴道超声检测结果对比,EP组阻力指数(RI)、脉搏指数(PI)均大于对照组(P<0.05)。ROC分析显示,阴道超声RI、PI及血清β-hCG、miR-200c联合诊断EP的敏感度、特异度分别为97.55%、96.50%,AUC为0.989。结论:阴道彩超、血清β-hCG、miR-200c水平均能协助区分早期EP、正常妊娠,三者联合的诊断价值最高,值得临床重视。

miR-200b、miR-200c靶向肝细胞生长因子抑制结直肠癌细胞

目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结直肠癌细胞增殖活性的情况。结果培养1d、2d、3d,阴性对照模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b模拟物、miR-200c模拟物、miR-200b/c模拟物(P<0.05),阴性对照抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂、miR-200b/c抑制剂(P<0.05),miR-200b模拟物、miR-200c模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b/c模拟物(P<0.05),miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b/c抑制剂(P<0.05)。结论miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖,可以作为潜在治疗靶点。

妊娠期糖尿病视网膜病变患者血清miR-200c-3p、 miR-20b-5p表达水平及检测临床意义

目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平进行测定,采用全自动生化分析仪对受试者低密度脂胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)进行测定,采用血糖检测仪对受试者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)进行测定。结果:GDM组、DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于对照组(均P<0.05);DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于GDM组(均P<0.05);随着病情严重程度的增加,DR组患者miR-200c-3p、miR-20b-5p水平显著升高(均P<0.05);预后不良组DR患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于预后良好组(均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高为DR患者发生预后不良的危险因素;ROC曲线结果显示,血清miR-200c-3p、miR-20b-5p、两者联合诊断DR患者不良预后曲线下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.843~0.974)、0.848(95%CI:0.746~0.920)、0.985(95%CI:0.924~0.999)。结论:DR患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高,对DR不良预后具有一定的预测价值。

鼻咽癌组织中miR-200c、LMP1、ZEB2和E-cadherin的表达及调控作用

目的:观察鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中miR-200c、潜伏期膜蛋白1(LMP1)、E盒结合锌指蛋白2(zinc finger E-box-binding protein 2,ZEB2)和E-cadherin的表达变化,并探讨其调控作用。方法:选取2021-05~2022-06于广州市花都区人民医院住院的NPC患者62例和鼻咽炎患者41例为研究对象。分别采用RT-PCR法检测两组患者组织中的miR-200c、LMP1、ZEB2和E-cadherin mRNA的表达和免疫印迹的方法检测两组组织中LMP1、ZEB2和E-cadherin蛋白表达,并对miR-200c、LMP1、ZEB2和E-cadherin mRNA的表达进行Pearson线性相关分析。结果:NPC组织中miR-200c的表达水平低于鼻咽炎组(P<0.05),LMP1和ZEB2 mRNA和蛋白的表达水平均高于鼻咽炎组(P<0.05),E-cadherin mRNA和蛋白的表达水平低于鼻咽炎组(P<0.05);NPC组织中LMP1 mRNA与miR-200c的表达呈负相关(r=-0.853,P<0.05),miR-200c与ZEB2 mRNA的表达呈负相关(r=-0.842,P<0.05),ZEB2 mRNA与E-cadherin mRNA表达呈负相关(r=-0.590,P<0.05)。结论:NPC组织中LMP1和ZEB2表达升高,而miR-200c和E-cadherin表达水平降低,有望成为NPC诊疗新靶点;LMP1可能通过诱导下调miR-200c的表达,使得ZEB2转录因子表达上调,最终抑制E-cadherin的表达,从而促进NPC的侵袭和转移。

生松素调控miR-200c基因影响白血病细胞HL-60增殖、凋亡、迁移和侵袭

目的 探讨生松素对白血病细胞HL-60增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 HL-60细胞分为NC组、不同浓度生松素(100、200、400、800μmol/L)组、anti-miR-NC组、anti-miR-200c组、miR-NC组、miR-200c组、800μmol/L生松素+anti-miR-NC组,800μmol/L生松素+anti-miR-200c组;细胞HS-5用0、800μmol/L处理。细胞计数试剂盒(CCK)-8检测HL-60细胞活性;流式细胞术检测HL-60细胞的凋亡情况;Transwell检测HL-60细胞的迁移和侵袭数量;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-200c表达水平。结果 不同浓度生松素处理后HL-60细胞的活性及迁移、侵袭数量降低,细胞的凋亡率升高,miR-200c表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-200c后,HL-60细胞的活性及迁移、侵袭数量降低,细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。抑制miR-200c表达逆转了生松素对白血病细胞HL-60增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用(P<0.05)。结论 生松素通过上调miR-200c抑制白血病细胞HL-60增殖、迁移和侵袭,且促进细胞凋亡。

上调miR-200c-5p的表达抑制人结直肠癌细胞系SW480增殖

目的探讨miR-200c-5p对人结直肠癌细胞系SW480恶性增殖的影响。方法将miR-200c-5p模拟物/抑制剂及阴性对照分别瞬时转染人结直肠癌细胞系SW480。通过qPCR检测miR-200c-5p的表达,利用CCK-8法和平板克隆形成试验检测miR-200c-5p对结直肠癌细胞增殖活力和克隆形成能力的影响。使用生物信息学方法分析miR-200c-5p在结直肠癌中的差异靶基因和相关通路。结果瞬时转染miR-200c-5p模拟物/抑制剂成功高/低表达miR-200c-5p(P<0.05);高表达miR-200c-5p细胞增殖活力降低,低表达则相反(P<0.05);高表达miR-200c-5p的细胞克隆形成率低于对照组细胞,低表达则相反(P<0.05);miR-200c-5p的靶基因CXCL10在结直肠癌细胞中显著上调,C2orf72、ZC3H12C和DST显著下调,miR-200c-5p显著相关的KEGG通路为“melanoma”、“microRNAs in cancer”和“bladder cancer”。结论miR-200c-5p抑制人结直肠癌细胞系SW480的增殖及克隆形成,与结直肠癌的发生、发展相关。

外周血miR-200C、miR-101和CA-724联合检测对胃癌的诊断价值

目的:探讨外周血miR-200C、miR-101和糖类抗原-724(CA-724)联合检测对胃癌的诊断价值。方法:选取112例高度疑似胃癌患者为研究对象,根据病理检查结果分为胃癌组(n=69)和良性组(n=43);胃癌组患者再根据临床分期分为早期组(n=28)和晚期组(n=41),根据是否淋巴结转移分为转移组(n=43)和无转移组(n=26)。比较各组患者miR-200C、miR-101、CA-724水平,分析其对胃癌的诊断价值。结果:胃癌组患者miR-200C、miR-101低于良性组,CA-724高于良性组(P<0.05);早期组患者miR-200C、miR-101均高于晚期组(P<0.05),CA-724均低于晚期组(P<0.05);无转移组患者miR-200C、miR-101均高于转移组(P<0.05),CA-724低于转移组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-200C、miR-101、CA-724单独及三者联合诊断胃癌曲线下面积(AUC)分别为0.903、0.889、0.965、0.990,三者联合检测诊断的价值高于各指标单独检测(P<0.05)。结论:外周血miR-200C、miR-101在胃癌患者血液中表达呈下降趋势,CA-724则与之相反,三者联合检测对胃癌诊断价值较高。

上皮性卵巢癌患者血清外泌体miR-200c与组织NRP1表达、辅助化疗反应及预后的关系

目的:探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者血清外泌体微小RNA(miR)-200c与组织神经纤毛蛋白1(NRP1)表达、化疗反应及预后的关系。方法:纳入2018年2月至2022年10月期间在本院接受初级减瘤手术和辅助化疗的135例EOC患者,另外纳入30例良性肿瘤患者作为对照。术前3 d采集患者血清样本,提取并纯化血清外泌体,通过实时荧光定量PCR法检测血清外泌体miR-200c表达水平。术中收集135例EOC癌组织、48例癌旁正常组织和30例良性肿瘤组织样本,通过免疫组织化学法评估组织NRP1蛋白表达。118例患者术后完成至少6个疗程的标准化疗方案,化疗完成后>6个月无复发视为化疗敏感。化疗耐药定义为原发性化疗难治性患者或化疗完成后≤6个月复发。结果:EOC组织中NRP1蛋白阳性表达率高于癌旁正常卵巢组织和良性肿瘤组织(P<0.001)。与良性肿瘤患者相比,EOC患者血清外泌体miR-200c表达水平显著降低(P<0.001)。血清外泌体miR-200c水平可良好地区分EOC患者和良性肿瘤患者,ROC曲线下面积(AUC)为0.955(95%CI 0.921~0.989)。EOC患者血清外泌体miR-200c水平与组织NRP1表达呈负相关(P<0.001)。血清外泌体miR-200c表达水平在化疗耐药组患者中更低(P<0.001),其预测EOC患者化疗反应的AUC为0.846(95%CI 0.769~0.924)。Cox回归和Kaplan-Meier预后分析显示,血清外泌体miR-200c低表达是导致EOC患者更短总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的独立危险因素(P<0.05)。结论:血清外泌体miR-200c低表达与组织NRP1高表达、化疗耐药及预后不良有关,有希望作为术前预测EOC化疗反应和预后的生物标志物。

食管鳞癌中微小RNA miR-200c的表达及其意义

目的检测食管鳞癌中微小RNA miR-200c的表达,探讨其与肿瘤发展和分期的关系。方法应用实时荧光定量PCR方法检测76例各类分期分型食管鳞癌和配对癌旁组织中miR-200c的表达,分析其表达与肿瘤临床分期和病理分型的关系。结果食管鳞癌组织与癌旁组织比较,miR-200c的表达显著减少(P<0.01);miR-200c的表达在中晚期(III、IV期)食管鳞癌组织较早中期(Ⅰ、Ⅱ)食管鳞癌组织降低更为显著(P<0.01)。结论 miR-200c在食管鳞癌发生发展过程中表达有明显降低,其表达水平可作为潜在的食管鳞癌临床分期分级和预后的指标。

miR-200c阻滞转化生长因子-β1在腹膜后成纤维细胞增殖和迁移侵袭中的作用

目的:阐明miR-200c对腹膜后成纤维细胞增殖的影响,并分析其分子机制,为抑制腹膜后纤维化提供理论依据。方法:收集36例人腹膜后组织,原代培养成纤维细胞,以5 ng/ml TGF-β1刺激者为TGF-β1组,pc DNA3.1-miR-200c转染成纤维细胞,再给予5 ng/ml TGF-β1刺激者为miR-200c组,仅以pc DNA3.1质粒转染者为pc DNA3.1质粒组,正常培养的成纤维细胞为对照组。分别以噻唑蓝(MTT)细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell细胞小室迁移实验检测成纤维细胞增殖和迁移能力,并以ELISA实验检测各组细胞裂解液中Akt蛋白的含量。结果:miR-200c组成纤维细胞的增殖OD值明显比TGF-β1组降低(P<0.01);与TGF-β1组相比,miR-200c组细胞迁移率明显降低(P<0.01);miR-200c组Akt蛋白的含量比TGF-β1组明显降低(P<0.01)。结论:miR-200c下调Akt通路而抑制TGF-β1对成纤维细胞的增殖或迁移效果,对抑制腹膜纤维化具有重要意义。

miR-200c在胃癌中的表达水平与患者临床病理特征的关系

目的:探讨miR-200c在胃癌组织中的表达水平与胃癌患者临床病理特征及无病生存期(diease free survial,DFS)的关系。方法:收集河北医科大学第四医院普外科2012年5月至2013年1月64例胃癌手术切除的标本及相关临床资料,采用实时荧光定量PCR技术检测miR-200c在胃癌组织和配对癌旁非癌组织中的表达。回顾性分析miR-200c表达水平与胃癌患者的临床病理特征及DFS相关性。结果:胃癌组织中miR-200c的表达水平显著低于癌旁非癌组织(3.29 vs 5.91,P<0.01)。miR-200c的表达水平与肿瘤TNM分期、浸润深度、转移和脉管瘤栓呈显著负相关(均P<0.01)。miR-200c高表达组患者中位DFS明显长于低表达组患者(22.0 vs 13.5个月,P<0.01),其表达水平与患者DFS呈正相关(P<0.01)。结论:miR-200c在胃癌组织中低表达,其表达水平与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度和脉管瘤栓呈负相关,与DFS呈正相关,在胃癌的发生发展及预后中具有重要作用。

miR-200c对乳腺癌BT549细胞迁移及Slug表达的作用

目的:结合对乳腺癌细胞系BT549迁移能力的研究,探讨转染miR-200c对Slug表达的作用。方法:设计miR-200c模拟物,转染具有高转移性的乳腺癌细胞系BT549,通过Transwell迁移试验、划痕实验,观察转染miR-200c后对乳腺癌细胞系BT549迁移能力的影响;利用Real-time PCR检测Slug和E-钙黏连蛋白mRNA的表达水平;利用Western blot检测Slug蛋白的表达水平。结果:Real-time PCR和Western blot结果显示,miR-200c转染组Slug表达水平被有效抑制(P<0.05)。与对照组相比,miR-200c转染组的BT549细胞迁移能力明显下降(P<0.05)。结论:在乳腺癌细胞系BT549中,miR-200c可以通过抑制Slug的表达进而抑制上皮间质转化,最终导致细胞迁移能力下降。

胃癌中DNA甲基化对miR-200c 141表达影响的研究

目的:探讨胃癌组织中miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c/141表达水平和临床病理特征的相关性。方法:运用实时定量PCR(qRT-PCR)和BS-MSP方法检测胃癌组织和癌旁组织中miR-200c/141CpG岛的表达与其基因甲基化水平。统计学分析miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c/141水平和临床病理特征的关系。结果:miR-200c/141CpG岛的甲基化水平在胃癌组织中显著升高,miR-200c和miR-141的水平显著降低,miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c和miR-141的水平呈负相关。结论:胃癌组织中升高的miR-200c/141CpG岛的甲基化水平诱导miR-200c和miR-141表达降低。

miR-200c增强肺癌A549细胞对紫杉醇及吉非替尼的敏感度及相关机制

目的观察上调肺癌A549细胞中mi R-200c的表达对紫杉醇、吉非替尼敏感度及两药联合作用的影响及其作用机制。方法用mi R-200c转染肺癌A549细胞,Real-time PCR检测mi R-200c表达,MTT法和流式细胞仪检测转染mi R-200c后A549细胞对紫杉醇、吉非替尼单药及两药联合的敏感度和细胞凋亡的影响,Western blot检测TUBB3蛋白、EGFR、Akt、MAPK磷酸化蛋白及总蛋白的表达。结果上调mi R-200c表达可增强A549细胞对紫杉醇及吉非替尼敏感度并促进细胞凋亡,对两药联合无明显作用。Western blot显示转染mi R-200c联合紫杉醇可下调A549细胞中TUBB3蛋白表达,联合吉非替尼下调EGFR和Akt磷酸化蛋白表达,与两药联合对EGFR和Akt磷酸化蛋白表达无明显影响。结论mi R-200c可增强肺癌A549细胞对紫杉醇、吉非替尼的敏感度,可能分别与抑制TUBB3表达、抑制EGFR和Akt磷酸化蛋白表达有关,而对两药联合无协同抗肿瘤作用。

miR-200c对舌癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨miR-200c对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-200c的模拟物通过脂质体转染到人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞内,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率、Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和Bcl-2蛋白的表达。结果与对照组相比,miR-200c模拟物20、40、80nmol/L组的Tca8113细胞生长受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05),miR-200c模拟物的浓度越大,作用时间越长,抑制效果越明显(P<0.05);转染miR-200c模拟物48h后,Tca8113细胞停滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot证明20、40、80nmol/L组Bcl-2蛋白表达量明显低于对照组,而Caspase-3蛋白表达量明显高于对照组(P<0.05)。结论 miR-200c过表达可抑制舌癌Tca8113细胞增殖并诱导细胞凋亡。