缺氧状态下has-miR-215-5p通过抑制BLCAP的表达调控子宫内膜腺上皮细胞增殖和迁移

目的探究缺氧状态下的子宫内膜腺上皮细胞(EEC)增殖和迁移的可能机制。方法分别提取缺氧(1%氧浓度,缺氧组)和常氧(21%氧浓度,常氧组)条件下EEC的RNA进行高通量测序(RNA-sequence),分析两组细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)的差异表达。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)的方法对差异表达的miRNA即has-miR-215-5p进行鉴定,通过miRNA靶基因数据库网站(Target Scan)分析has-miR-215-5p的靶基因。Western Blot检测两组细胞中靶基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)的蛋白表达水平,细胞计数实验检测两组EEC的增殖情况,划痕实验检测两组EEC的迁移能力。结果测序结果显示,缺氧组EEC中has-miR-215-5p表达显著上升(P<0.001),RT-qPCR验证结果与测序结果一致。miRNA Target Scan数据库检索结果显示,BLCAP是has-miR-215-5p的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验结果显示has-miR-215-5p与BLCAP-3’-UTR结合,结合位点突变后结合活性消失。Western Blot结果显示,与常氧组相比,缺氧组EEC中的BLCAP蛋白表达显著下降(P<0.001)。CCK-8及划痕实验分别提示与常氧组相比,缺氧组的EEC增殖能力显著降低、迁移能力显著增强(P<0.001)。结论缺氧条件下EEC中has-miR-215-5p可能通过与BLCAP-3’-UTR结合,抑制BLCAP的表达活性,导致EEC的增殖降低与迁移增强。

金莲花总黄酮下调miR-215-5p抑制PI3K/AKT信号通路影响AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和迁移

目的 探讨金莲花总黄酮对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、迁移的影响和潜在机制。方法 不同浓度(0.2、0.4、0.8 mmol/L)的金莲花总黄酮作用于AngⅡ诱导CFs。细胞计数试剂盒检测细胞活力确定金莲花总黄酮使用浓度。Transwell实验、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞迁移、miR-215-5p表达水平。Western印迹检测磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。将miR-215-5p模拟物、抑制物分别转染CFs,检测上调或下调miR-215-5p对AngⅡ诱导的CFs增殖和迁移的影响。结果 金莲花总黄酮作用于AngⅡ诱导的CFs后,细胞活力、迁移能力、miR-215-5p、磷酸化(p)-PI3K和p-AKT蛋白表达显著降低(P<0.05)。上调miR-215-5p表达后,AngⅡ诱导的CFs活力、迁移能力显著升高(P<0.05)。下调miR-215-5p表达后,AngⅡ诱导的CFs活力、迁移能力显著降低(P<0.05)。上调miR-215-5p表达能够显著降低金莲花总黄酮对AngⅡ诱导的CFs活力、迁移能力及PI3K/AKT信号通路的影响(P<0.05)。结论 金莲花总黄酮能够降低AngⅡ诱导的CFs增殖和迁移,其机制可能与下调miR-215-5p表达和抑制PI3K/AKT信号通路有关。

FGF-2及miR-215对早期胃癌患者经内镜黏膜下剥离术后复发的预测价值分析

目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF-2)及miR-215对早期胃癌的诊断价值,并分析两者对患者经内镜黏膜下剥离术后复发的预测价值。方法2018年1月到2021年1月,选取我院收治的90例早期胃癌患者,将其分为观察组,另选取同期90例经病理活检确定为正常胃粘膜的志愿者,将其分为对照组。对比两组受检者FGF-2及miR-215表达水平,并建立受试者工作特征(ROC)曲线,分析FGF-2及miR-215对早期胃癌的诊断效能。90例早期胃癌患者均经内镜黏膜下剥离术治疗。术后对患者进行随访依照是否复发情况判定为复发组(n=20)和非复发组(n=70)两个亚组,对比两组患者一般临床情况,并应用logistic回归分析分析FGF-2及miR-215对早期胃癌患者经内镜黏膜下剥离术后复发的预测价值。结果观察组患者胃黏膜组织FGF-2阳性率、表达水平,miR-215阳性率、表达水平明显高于对照组(P<0.05);FGF-2对早期胃癌的诊断效能明显高于miR-215(P<0.05),其中FGF-2诊断早期胃癌的曲线下面积为0.852,最佳诊断界限值为1.11,miR-215曲线下面积为0.735,最佳诊断界限值为0.86;复发组与非复发组患者浸润深度、组织分化程度、FGF-2及miR-215水平对比差异显著(P<0.05);logistic回归分析结果表明:FGF-2及miR-215为胃癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论FGF-2及miR-215对于早期胃癌的诊断价值较高,且FGF-2、miR-215水平升高为早期胃癌经内镜黏膜下剥离术后复发的独立预测因素。

lncRNASOX2-OT调节miR-215-5p/ZEB2轴抑制人前列腺癌细胞系增殖和上皮间质转化研究

目的探讨长非编码RNA SRY盒转录因子2重叠转录本(lncRNA SOX2-OT)调节miR-215-5p/E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)轴对前列腺癌细胞增殖和上皮间质转化(EMT)的影响。方法将PC-3细胞分为对照组、si-SOX2-OT组、si-NC组、si-SOX2-OT+anti-miR-215-5p组,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中SOX2-OT、miR-215-5p与ZEB2表达。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)及5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测PC-3细胞增殖;流式细胞术检测PC-3细胞凋亡率;Transwell检测PC-3细胞迁移、侵袭;qRT-PCR检测PC-3细胞miR-215-5p、ZEB2 mRNA、凋亡蛋白与EMT标志蛋白转录表达;Western blot检测PC-3细胞ZEB2、凋亡蛋白与EMT标志蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证PC-3细胞中SOX2-OT对miR-215-5p及miR-215-5p对ZEB2的靶向调节作用。结果与人前列腺上皮细胞相比,人前列腺癌组织源细胞和人前列腺癌细胞株PC-3、DU 145、22RV1中SOX2-OT、ZEB2 mRNA表达升高,miR-215-5p表达降低(P<0.05)。与对照组相比,si-SOX2-OT组细胞活力、EdU阳性率、迁移细胞数、侵袭细胞数、细胞ZEB2、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及Vimentin mRNA和蛋白表达均降低,细胞凋亡率、miR-215-5p及Bcl-2相关X基因(Bax)、E-cadherin mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05)。下调miR-215-5p表达可减弱敲低SOX2-OT对PC-3细胞的影响。结论敲低SOX2-OT可通过促进miR-215-5p表达而下调ZEB2的表达,从而抑制前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,并诱导细胞凋亡。

miR-192、miR-215及ERCC3在NSCLC细胞系A549放疗后的表达变化及意义

目的探讨非小细胞肺癌细胞系A549放疗后,miR-192、miR-215及ERCC3的表达变化及意义。方法体外常规培养的A549细胞分为对照组、20 Gy剂量放疗组及40 Gy剂量放疗组,采用RT-qPCR检测miR-192和miR-215变化,Western blot检测ERCC3蛋白表达情况。结果 A549细胞受不同剂量(20 Gy和40 Gy)的射线照射后,miR-192、miR-215表达上调。在20 Gy剂量组中,miR-192上调(4.27±0.56)倍,miR-215上调(6.58±0.56)倍。在40 Gy剂量组中,miR-192上调(4.94±0.39)倍,miR-215上调(7.48±0.47)倍。而ERCC3蛋白水平下调,相较于对照组(1.35±0.23),40 Gy剂量组中ERCC3表达量(0.28±0.08)呈5倍下降,与20 Gy组(0.63±0.14)相比,其值约呈2倍下降。结论在非小细胞肺癌中,放疗可上调miR-192和miR-215的表达,下调其下游靶基因ERCC3的表达,从而对放疗后DNA损伤及修复发挥调控作用。

miR-215对胃癌细胞侵袭转移能力的影响及机制

目的探讨miR-215对胃癌细胞侵袭转移能力的影响及作用机制。方法通过RT-PCR检测miR-215在高转移胃癌细胞株NCIN87,BGC-823,RF-48及低转移细胞株HGC-27及MKN-28中的表达;Transwell迁移及侵袭实验检测miR-215抑制剂对胃癌细胞迁移及侵袭能力的影响;Western印迹检测miR-215抑制剂对胃癌细胞活化白细胞黏附分子(ALCAM),基质金属蛋白酶(MMP)-2,MMP-9,上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏附素(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin)表达量的影响。结果 RT-PCR结果证实miR-215在高转移胃癌细胞株中的表达高于低转移胃癌细胞中的表达,且miR-215在BGC-823细胞中的表达最高,因此选用BGC-823作为后续实验细胞株。miR-215抑制剂转染BGC-823细胞48 h后,发现下调miR-215表达能显著抑制BGC-823细胞迁移及侵袭能力,并能下调ALCAM,MMP-2,MMP-9及Vimentin表达,上调E-cadherin表达。结论miR-215低表达能显著抑制胃癌细胞BGC-823侵袭及转移能力,与下调MMPs及抑制EMT生成有关。

miR-215抑制骨肉瘤细胞生长及其分子机制

目的:研究miR-215对骨肉瘤细胞143B生长的影响及其分子机制。方法:通过转染miR-215 agomir稳定升高143B细胞内miR-215表达水平,CCK-8实验、平板克隆形成实验以及流式细胞术检测143B细胞的增殖状况以及周期分布。利用生物信息学分析miR-215潜在的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验、qPCR实验、Western blot实验验证miR-215靶基因。结果:在143B细胞内将miR-215表达水平上调数倍。CCK-8实验、平板克隆形成实验表明miR-215能够抑制143B细胞生长,流式细胞术实验表明miR-215能够延缓143B细胞周期进程。生物信息学、qPCR实验和Western blot实验表明转化生长因子β受体1(transforming growth factorβreceptor 1,TGFβR1)是miR-215潜在的靶基因。结论:miR-215能够抑制骨肉瘤细胞生长,并且该抑制作用可能通过miR-215靶向抑制TGFβR1实现,为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供了理论依据。

肝内胆管癌上皮组织miR-215表达与病理特征的相关性

目的 探讨肝内胆管癌上皮组织miR-215表达与病理特征的相关性。方法 选取河南省新乡医学院第一附属医院2015年4月至2018年4月收治的肝内胆管癌患者120例,所有患者均行根治性手术治疗,作为研究组。选取同期收治的肝良性瘤患者120例作为对照组。留取两组上皮组织,经实时定量PCR法对上皮组织中miR-215表达量进行测定,利用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-215表达量对肝内胆管癌的评估价值。收集肝内胆管癌患者的临床资料,分析上皮组织miR-215表达与患者病理特征的相关性。结果 研究组miR-215在上皮组织中的表达量为(1.24±0.28),高于对照组的(0.39±0.12),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线提示miR-215表达量预测肝内胆管癌的曲线下面积为0.746(标准误=0.032,P=0.000,95%CI=0.683~0.808)。miR-215高表达组的TNM分期(Ⅲ~Ⅳ期)、低分化占比分别为65.48%、44.05%,高于低表达组的25.00%、22.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman检验提示miR-215表达量与TNM分期、分化程度呈正相关(rs=0.492、0.467,P<0.05)。结论 上皮组织miR-215表达量对肝内胆管癌具有一定评估价值,其表达水平与TNM分期、分化程度密切相关。

miR-215-5p靶向FOXN1调控肝癌细胞生物学特性

目的 探究微小RNA-215-5p(miR-215-5p)对肝癌细胞生物学特性的影响及可能分子机制。方法 实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测人正常肝细胞(LO2)和肝癌细胞(MHCC97-H)中miR-215-5p的表达量;噻唑蓝(MTT)实验检测敲低miR-215-5p对MHCC97-H细胞增殖的影响,流式细胞术检测凋亡率;Targetscan在线数据库预测miR-215-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-215-5p与叉头状基因家族蛋白(FOX)N1的靶向关系;Western印迹观察上调/下调miR-215-5p对FOXN1蛋白水平的影响;观察共转染过表达miR-215-5p和FOXN1对FOXN1蛋白及MHCC97-H细胞生物学特性的影响。结果 miR-215-5p在MHCC97-H细胞系中表达量增加(P<0.05);敲低miR-215-5p抑制MHCC97-H细胞增殖、侵袭,促进凋亡(均P<0.05);FOXN1是miR-215-5p的下游靶基因;miR-215-5p负反馈调节FOXN1表达量;共转染过表达miR-215-5p和FOXN1可显著逆转miR-215-5p对FOXN1蛋白表达量的抑制作用,恢复其对MHCC97-H细胞增殖和侵袭抑制、凋亡促进作用。结论 miR-215-5p抑制FOXN1调控MHCC97-H细胞的恶性生物学特性。

miR-215-5p在甲状腺滤泡癌中的表达及与血清TSH的相关性

目的观察甲状腺滤泡癌组织中微小RNA-215-5p(miR-215-5p)的表达特征,并分析miR-215-5p与血清中促甲状腺激素(TSH)的关系。方法选取2014年3月~2017年4月河北省人民医院和河北以岭医院55例甲状腺滤泡癌术后组织为观察组,留取术前的血清标本,另选取55例甲状腺滤泡性腺瘤组织为对照组。应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-215-5p的表达,免疫组化法检测甲状腺滤泡癌组织中Ki67的表达,电化学发光法检测甲状腺滤泡癌患者血清TSH的表达。结果甲状腺滤泡癌中miR-215-5p的表达明显低于对照组,miR-215-5p的表达在不同肿瘤最大径、Ki67增殖指数和TNM分期的分组中差异有统计学意义(均P<0.05)。miR-215-5p的表达与预后相关,甲状腺滤泡癌组织中miR-215-5p与血清TSH呈负相关。结论miR-215-5p在甲状腺滤泡癌中的表达下降,与病变的临床特征相关,且与TSH成负相关。miR-215-5p的表达与患者预后有关。

miR-215-5p通过靶向NCOA3基因抑制固始鸡腹部前脂肪细胞的增殖和分化

为揭示miR-215-5p在固始鸡腹部脂肪沉积中的作用机制,本研究采用实时荧光定量PCR,分析了miR-215-5p在14周龄固始鸡8种组织和腹部前脂肪细胞分化过程的表达特征;通过miR-215-5p mimics和inhibitors转染试验,利用CCK-8、EdU、油红O染色、甘油三酯含量测定等方法,分别评价了miR-215-5p对固始鸡腹部前体脂肪细胞增殖和分化的影响。结果表明:miR-215-5p在固始鸡腹脂和皮脂等组织中高表达,在前脂肪细胞分化过程具明显时序表达特征;当转染miR-215-5p mimics后,前体脂肪细胞中增殖标志基因CDK1和PCNA表达水平极显著下降(P<0.01)、细胞周期阻滞因子p21表达水平极显著升高(P<0.01),EdU阳性细胞比例和前脂肪细胞总数极显著降低;同时,可显著抑制脂肪细胞分化标志基因PPARG、CEBPA、FABP4和LPL的表达,减少脂肪细胞内脂滴生成和甘油三酯含量。与此不同,miR-215-5p inhibitors转染前脂肪细胞后,在增殖和分化上获得与miR-215-5p mimics转染后相反的结果。同时,采用双荧光素酶报告基因系统,验证了mi-R-215-5p的靶基因,过表达miR-215-5p可抑制核受体辅激活因子3(nuclear receptor coactivator 3,NCOA3)基因3′-UTR区荧光活性,而突变NCOA3基因3′-UTR区与miR-215-5p种子序列的结合位点可解除其抑制效果。上述结果证明,miR-215-5p可抑制固始鸡腹部前脂肪细胞的增殖和分化,且在脂肪细胞分化过程中直接靶作用于NCOA3。因此,miR-215-5p是固始鸡腹部脂肪形成的一个负调控因子。

慢病毒介导miR-215过表达对克罗恩病的影响及作用机制

目的研究慢病毒介导miR-215过表达对克罗恩病(CD)小鼠的影响及其作用机制。方法 48只BALB/c小鼠随机分成空白组(A组)12只,模型组36只。模型组经2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)造模成功后的30只小鼠随机分成TNBS组(B组)、Lenti-Scramble(C组)、Lenti-miR-215(D组),每组各10只。每日观察小鼠体质量、粪便性状、隐血便血,计算小鼠疾病活动指数(DAI)积分;ELISA试剂盒检测血清白细胞介素-8(IL-8)、IL-10、髓过氧化物酶(MPO)的水平;HE染色观察结肠组织病理变化;Real-time PCR检测结肠组织miR-215 mRNA和Beclin1 mRNA的水平;Western blotting检测结肠组织Beclin1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β蛋白的水平。结果与A组比较,B、C、D组小鼠DAI评分显著升高,miR-215 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05),B、C组IL-8、MPO、TNF-α和IL-1β表达水平显著升高,IL-10、Beclin1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。D组小鼠DAI评分、IL-8、MPO、TNF-α和IL-1β蛋白水平均显著低于B、C组(P<0.05),而IL-10、miR-215 mRNA、Beclin1 mRNA、Beclin1蛋白的表达水平显著高于B、C组(P<0.05)。结论 miR-215过表达对于CD小鼠有一定的保护作用,该作用与Beclin1介导的自噬通道有关。

MiR-215-5p经AKT/GSK-3β/Snail信号通路抑制乳头状甲状腺癌增殖、迁移和侵袭

目的探究miR-215-5p对乳头状甲状腺癌增殖、迁移和侵袭能力的影响以及机制。方法乳头状甲状腺癌TPC1细胞体外转染miR-215-5p mimic后利用MTT实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验检测TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化;预测并验证miR-215-5p的靶基因,并且在TPC1细胞过表达和低表达miR-215-5p的靶基因后,检测TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化;利用Western blot检测转染后靶基因的表达水平,AKT和GSK-3β的磷酸化水平,以及Snail的表达水平。结果miR-215-5p mimic能够显著抑制TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力(P<0.05);通过双荧光素酶报告实验验证了miR-215-5p的靶基因为ARFGEF1;低表达ARFGEF1的TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力被显著抑制(P<0.05);miR-215-5p mimic可显著抑制过表达ARFGEF1引起的TPC1细胞增殖、迁移、侵袭能力的增加(P<0.05);Western blot结果显示miR-215-5p mimic可引起ARFGEF1和Snail表达水平显著降低(P<0.05),AKT和GSK-3β的磷酸化水平降低(P<0.05),但是miR-215-5p inhibitor和过表达ARFGEF1均可恢复ARFGEF1和Snail表达水平以及AKT和GSK-3β的磷酸化水平。结论MiR-215-5p通过AKT/GSK-3β/Snail信号通路以ARFGEF1为目标发出信号抑制乳头状甲状腺癌增殖、迁移和侵袭。

lncRNA Xist/miR-215-5p下调LPAR4表达对乳腺癌细胞增殖与转移的影响

目的:探讨溶血磷脂酸受体4(LPAR4)在乳腺癌组织中的表达水平及与乳腺癌发生发展的关系,探究lncRNA Xist/miR-215-5p对LPAR4的调控作用。方法:通过Targetscan和Starbase预测LPAR4的上游通路lncRNA Xist/miR-215-5p。使用慢病毒转染LPAR4和miR-215-5p;使用质粒转染lncRNA Xist。在MDA-MB-231细胞系中,通过MTT和划痕实验检测细胞的增殖和转移能力。结果:LPAR4在乳腺癌细胞系中高表达,miR-215-5p和lncRNA Xist为低表达。Western blot显示LPAR4在乳腺癌细胞系中高表达。MTT和划痕实验提示上调LPAR4可以促进MDA-MB-231细胞的增殖和转移能力。进一步实验发现lncRNA Xist可以上调miR-215-5p,并且负性调控LPAR4;且lncRNA Xist可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖能力。除此之外,在lncRNA Xist下调细胞中,上调miR-215-5p可以抑制lncRNA Xist下调介导的细胞增殖能力增强。结论:lncRNA Xist/miR-215-5p可能通过调控LPAR4的表达,为治疗乳腺癌提供可能的新靶点。LPAR4在乳腺癌细胞中高表达,可能成为乳腺癌潜在的肿瘤标志物。

MiR-215与肿瘤关系的研究进展

MiR-215是miRNAs中的重要成员之一,在多种肿瘤中异常表达,既能发挥促癌作用,也能发挥抑癌作用。MiR-215通过调节靶基因的表达,参与调控肿瘤细胞增殖、转移、凋亡和耐药等过程,其表达水平与肿瘤的发生、发展和预后密切相关。因此miR-215有望成为肿瘤治疗的一个新型靶点。

miR-215-3p通过调控CXCR4逆转结肠癌HCT8细胞5-FU耐药的实验研究

目的 探讨miR-215-3p对CXC结构趋化因子受体4(CXCR4)及CXCR4/RhoA信号通路的调控作用,以及对结肠癌HCT8细胞5-FU耐药的影响。方法 体外培养HCT8细胞和HCT8/5-FU耐药细胞分别作为HCT8组和HCT8/5-FU组,将miR-215-3pmimics转染至HCT8/5-FU细胞作为miR-215-3p组,转染无义序列为NC组。采用MTT法检测各组细胞增殖能力的改变,计算半数抑制浓度(IC50)。采用双荧光素酶报告实验验证miR-215-3p与CXCR4的靶向关系。采用Western blotting法检测各组CXCR4/RhoA信号通路相关蛋白CXCR4、RhoA、PI3K、RhoGEF、PAK、PKN1和ROCK的表达水平。结果 5-FU对HCT8细胞和HCT8/5-FU细胞的IC50分别为19.98μmol/L和105.86μmol/L。HCT8/5-FU的耐药指数为5.30。HCT8/5-FU组miR-215-3p表达水平为0.54±0.13,低于HCT8组(P<0.05)。miR-215-3p组miR-215-3p表达水平为1.49±0.22,高于NC组和HCT8/5-FU组(P<0.05)。1、3、9、27、81μmol/L5-FU对miR-215-3p组HCT8/5-FU细胞增殖抑制率分别为(14.46±1.79)%、(20.37±2.64)%、(54.87±3.81)%、(79.51±3.67)%和(84.62±4.15)%;相同浓度下,miR-215-3p组细胞增殖抑制率高于HCT8/5-FU组和NC组(P<0.05)。miR-215-3p可抑制野生型CXCR43'-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型CXCR43'-UTR的荧光素酶活性无影响。miR-215-5p组CXCR4、RhoA、PI3K、RhoGEF、PAK、PKN1和ROCK蛋白表达水平分别为0.41±0.07、0.34±0.08、0.82±0.15、0.29±0.04、0.39±0.06、0.30±0.03和0.51±0.08,均低于其余3组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 上调miR-215-3p表达可逆转HCT8/5-FU细胞株对5-FU的耐药性,其可能的作用机制可能与负性调控CXCR4/RhoA通路的活性有关。

miR-215、KDM1B在弥漫性大B细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义

目的:检测miR-215、KDM1B在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中的表达,初步探究其临床意义。方法:选择本院50例DLBCL患者作为DLBCL组以及30例反应性淋巴结炎患者作为对照组,应用RQ-PCR检测患者病理组织中miR-215的表达水平,免疫组织化学检测KDM1B蛋白表达,比较不同临床特征的患者病理组织中miR-215、KDM1B的表达水平,比较不同表达水平miR-215、KDM1B的患者的生存情况。miR-215 mimics转染DLBCL的SU-DHL-4细胞株,采用CCK-8法检测细胞增殖率,AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测KDM1B蛋白的表达变化。结果:DLBCL组中的miR-215表达低于对照组,而KDM1B蛋白阳性高表达率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman等级相关分析显示,miR-215表达与KDM1B蛋白表达存在负相关(r=-0.751,P<0.05)。miR-215和KDM1B表达与DLBCL患者B组症状、血清LDH水平、IPI评分、Ann-Arbor临床分期、肿瘤大小存在相关性(P<0.05)。Kaplan-Meier检测结果显示,miR-215高表达组患者5年生存率显著高于低表达患者(P=0.013),而KDM1B阳性高表达组患者5年生存率显著低于阳性低表达患者(P=0.024)。miR-215 mimics转染72 h后,miR-215 mimics组细胞增殖率明显低于对照组和NC mimics组(P<0.05),细胞凋亡率均明显高于对照组和NC mimics组(P<0.05),KDM1B蛋白表达水平明显低于对照组和NC mimics组(P<0.05)。结论:DLBCL患者病理组织中miR-215低表达、KDM1B蛋白高表达,这可能成为DLBCL诊断和预后指标。miR-215可靶向抑制KDM1B的表达,抑制DLBCL细胞增殖,促进细胞的凋亡。

miRNA-720、miR-17-3p及miR-215-5p在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

目的:探讨miRNA-720、miR-17-3p及miR-215-5p在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及临床意义。方法:提取100例MM患者(病例组)和100名健康人群(对照组)血清RNA。实时荧光定量PCR测定血清miRNA-720、miR-17-3p及miR-215-5p表达水平,分析其表达量与临床病理特征的关系,Kaplan-Meier生存分析法分析三种不同基因相对表达量与患者预后的关系。结果:病例组血清miRNA-720、miR-17-3p相对表达量高于对照组(P<0.05),miR-215-5p相对表达量低于对照组(P<0.05);血清miR-17-3p相对表达量与ISS分期有统计学差异(P<0.05),血清miR-215-5p相对表达量与血红蛋白水平有统计学差异(P<0.05);血清miRNA-720高表达患者初次化疗有效率低于低表达患者(P<0.05),血清miR-215-5p低表达患者初次化疗有效率低于高表达患者(P<0.05);miRNA-720及miR-17-3p低表达和miR-215-5p高表达患者生存情况较好(P<0.05)。结论:miRNA-720、miR-17-3p及miR-215-5p可能与MM密切相关,可作为MM诊断、治疗及预后的评估指标。

miR-324-5p和miR-215-5p在多发性骨髓瘤中的表达及预后分析

目的检测多发性骨髓瘤(MM)患者血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平,研究其表达水平和预后的关系.方法收集60例MM患者血清标本,为初治组(20例)、巩固治疗组(20例)、复发难治组(20例);20例健康人血清标本(健康对照组),实时荧光定量PCR检测血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平.结果与健康对照组比较,MM患者血清中miR-215-5p表达水平下降(P<0.0083),初治组和难治复发组患者血清miR-324-5p表达水平下降(P<0.0083),巩固治疗组与健康对照组血清miR-324-5p表达水平差异无统计学意义(P>0.0083);巩固治疗组血清miR-324-5p表达水平高于初治组及难治复发组(P<0.0083);巩固治疗组血清miR-215-5p表达水平高于初治组(P<0.0083),巩固治疗和难治复发患者间差异无统计学意义(P>0.0083);初治组与复发难治组之间两种miRNAs表达水平差异无统计学意义(P>0.0083).miR-324-5p和miR-215-5p表达水平与β2微球蛋白和红细胞体积分布宽度呈负相关,与血红蛋白呈正相关.初治MM患者血清miR-324-5p和miR-215-5p高表达组无进展生存期高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05).结论miR-324-5p和miR-215-5p在MM血清中表达水平降低,miR-324-5p和miR-215-5p可能与疾病密切相关,其低表达可能提示预后不良.

miR-215在进展期结肠直肠癌中的表达及其临床意义

目的:研究miR-215在结肠直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达及其临床意义。方法:研究对象是我院2007年1月至6月的进展期CRC病人,从入选病人的石蜡包埋组织中提取microRNA,进行实时定量PCR检测。结果:共有42例CRC病人入选,男25例,女17例;直肠癌18例,结肠癌24例。miR-215在CRC组织中的表达水平低于配对的癌旁正常组织(P<0.001);CRC组织中miR-215下降不明显者的生存时间较长(P=0.035)、P53表达水平较高(r=0.556,P<0.001)。结论:miR-215可能成为CRC的预后标志物。