miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响

目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p mimics)、NC-mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-mimics)、miR-30c-5p inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p inhibitor)、NC-inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-inhibitor)。qRT-PCR检测各组细胞miR-30c-5p表达;Transwell小室检测细胞侵袭数目;划痕试剂盒检测细胞划痕愈合率;相关试剂盒检测ROS水平;免疫印记检测PEG10、Parkin、PINK1蛋白水平。结果空白组、低氧组、miR-30c-5p mimics组、NC-mimics组、miR-30c-5p inhibitor组及NC-inhibitor组的miR-30c-5p表达分别为1.00±0.00、1.00±0.00、1.61±0.15、1.03±0.13、0.75±0.08及0.96±0.10,差异有统计学意义(F=45.750,P<0.05);与空白组相比,低氧组HTR-8/SVneo细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧组与NC-mimics组、NC-inhibitor组比较上述指标,差异均无统计学意义(P>0.05);与低氧组相比,miR-30c-5p mimics组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05),miR-30c-5p inhibitor组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1升高,ROS降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-30c-5p可加快低氧状态下的人绒毛滋养层细胞侵袭及迁移,并通过促进线粒体自噬降低ROS表达,机制与抑制PEG10水平相关。

LINC00707靶向miR-30c-5p对ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症因子的影响

目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-30c-5p mimic分别转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞,si-LINC00707和anti-miR-NC、si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor分别共转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞;qRT-PCR法检测LINC00707、miR-30c-5p的表达量;CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖及迁移;ELISA法检测IL-6、TNF-α、IL-10的水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00707与miR-30c-5p的靶向关系;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果ox-LDL诱导的HVSMCs中LINC00707的表达量升高(P<0.05),miR-30c-5p的表达量降低(P<0.05);转染si-LINC00707或miR-30c-5p mimic后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),迁移细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平升高(P<0.05);LINC00707可靶向结合miR-30c-5p;共转染si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),迁移细胞数增多(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平降低(P<0.05)。结论下调LINC00707导致miR-30c-5p表达升高从而抑制ox-LDL诱导的HVSMCs增殖、迁移及炎症反应。

miR-30c-5p通过调节Notch1的表达抑制人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移、侵袭和管状形成

目的:探讨miR-30c-5p通过调节Notch1表达对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭和管状形成调控的机制,确定其在子痫前期发病中的潜在作用。方法:在体外对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo进行培养,慢病毒系统构建miR-30c-5p过表达及敲低稳转HTR-8/SVneo细胞系。分为对照组、导入miR-30c-5p过表达质粒组和导入miR-30c-5p敲低质粒组。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-30c-5p和Notch1基因的表达量,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中Notch1蛋白的表达量,划痕愈合实验、Transwell侵袭实验和管状形成实验分别检测各组细胞的迁移、侵袭和管状形成能力。结果:与对照组比较,miR-30c-5p过表达质粒组中细胞的miR-30c-5p基因表达水平升高(P<0.0001),细胞Notch1蛋白表达水平下降(P<0.01),细胞迁移(P<0.01)、侵袭(P<0.001)和管状形成能力(P<0.05)均受到抑制。反之,miR-30c-5p敲低质粒组中细胞的miR-30c-5p基因表达水平下降(P<0.01),细胞Notch1蛋白表达升高(P<0.001),细胞的迁移(P<0.01)、侵袭(P<0.05)以及细胞的管状形成能力(P<0.01)增强。结论:miR-30c-5p能够通过抑制Notch1的表达降低人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移、侵袭和管状形成能力,参与子痫前期的发病。

circ_POLA2靶向miR-30c-5p对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨circ_POLA2对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法:qRT-PCR法检测胃癌组织与癌旁组织中circ_POLA2、miR-30c-5p的表达量;Pearson法分析circ_POLA2与miR-30c-5p在胃癌组织中表达量的相关性;体外培养人胃癌细胞HGC-27,根据转染物不同进行分组:si-NC组、si-circ_POLA2组、miR-NC组、miR-30c-5p组、si-circ_POLA2+NC-inhibitor组、si-circ_POLA2+miR-30c-5p-inhibitor组;CCK-8法、Transwell实验依次检测细胞增殖及迁移、侵袭;双荧光素酶实验检测miR-30c-5p与circ_POLA2的靶向关系;免疫印迹法检测蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、MMP-2、MMP-9表达。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中circ_POLA2的表达量升高,miR-30c-5p的表达量降低;circ_POLA2与miR-30c-5p的表达呈负相关;与si-NC组比较,si-circ_POLA2组miR-30c-5p的表达量升高,细胞存活率、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均降低;miR-30c-5p过表达可抑制野生型circ_POLA2的荧光素酶活性;与miR-NC组比较,miR-30c-5p组的细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均降低;与si-circ_POLA2+NC-inhibitor组比较,si-circ_POLA2+miR-30c-5p-inhibitor组的细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均升高。结论:干扰circ_POLA2可通过靶向上调miR-30c-5p表达,抑制PI3K/AKT通路的激活,进而抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭。

MiR-30c通过靶向KRAS抑制肝癌细胞系生长侵袭能力的体外研究

目的探讨Mi R-30c对肝癌细胞生长和侵袭的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000将Mi R-30c模拟物组和Mi R-30c模拟物组阴性对照转染至肝癌细胞Huh7,q RT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力、MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果成功构建稳定过表达Mi R-30c的肝癌细胞亚系Huh7-Mi R30c,荧光定量PCR结果显示Mi R-30c表达量明显上调,过表达Mi R-30c后Huh7细胞的侵袭和增殖能力均受到明显抑制;抑制Mi R-30c能明显抑制KRAS蛋白和减低p-ERK蛋白表达水平,对ERK蛋白水平无明显影响。结论抑制Mi R-30c表达可能通过调控RAS/MAPK/ERK通路抑制肝癌细胞Huh7增殖和侵袭。

MiR-30c-2-3p对足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素干预作用研究

目的:探讨miR-30c-2-3p对小鼠足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素(TP)干预作用。方法:采用嘌呤霉素(PAN)致小鼠足细胞损伤的体外模型,将足细胞分成5组:空白组、转染阴性质粒组(阴性质粒组)、转染阴性质粒+PAN组(阴性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN组(阳性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN+TP组(阳性质粒+PAN+TP组)。瞬时转染miR-30c-2-3p mimics,质粒终浓度均为50 nmol/L,转染6 h后进行药物干预,PAN干预浓度均为45 mg/L,TP干预浓度均为1 ng/ml,药物干预时间均为48 h。CCK-8法检测足细胞活力;实时荧光定量PCR检测细胞中miR-30c-2-3p表达;Western Blot检测足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达。结果:(1)阴性质粒+PAN组足细胞活力明显低于空白组及阴性质粒组(P<0.01),阳性质粒+PAN组较阴性质粒+PAN组足细胞活力提高(P<0.05),使用TP干预后其活力进一步提高(P<0.05)。(2)与空白组、阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组miR-30c-2-3p表达减少,差异有统计学意义(P<0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组、阳性质粒+PAN+TP组miR-30c-2-3p表达均增加(P<0.05);但与阳性质粒+PAN组相比,雷公藤甲素干预组未见统计学意义(P>0.05)。(3)与空白组及阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组Nephrin、Podocin两者表达均减少,差异有统计学意义(P<0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组Nephrin、Podocin蛋白表达增加(P<0.05);在使用了TP干预后两者表达进一步增加(P<0.05)。结论:PAN能降低足细胞活力,降低miR-30c-2-3p表达,而增加其表达可以上调足细胞活力以及Nephrin、Podocin的表达。TP可以减轻PAN诱导的足细胞损伤以及Nephrin、Podocin的表达下降,但其作用机制似乎与miR-30c-2-3p无关。

miR-30c在前列腺癌中的临床意义

目的研究mi R-30c在前列腺癌组织的表达及其与前列腺癌的临床相关性。方法从mi RNA芯片检测结果中获得前列腺癌相关的特异表达mi R-30c分子,进一步运用q RT-PCR检测mi R-30c在前列腺癌细胞株及组织的表达情况,结合临床信息,分析mi R-30c表达与前列腺癌临床特征的相关性。结果前列腺癌mi RNA芯片结果表明,mi R-30c在肿瘤中表达下调显著(倍数变化=2.09倍,t=-3.65,P=0.016)。q RT-PCR检测mi R-30c的表达情况表明其在前列腺癌组织的表达显著低于良性组织(3.27±0.62 vs 6.85±0.33,t=7.53,P<0.001)。进一步分析mi R-30c表达与临床预后的关系,结果表明,mi R-30c的表达水平同Gleason评分(χ2=10.04,P<0.01)、病理分期(χ2=5.03,0.01<P<0.05)、转移(χ2=5.68,0.01<P<0.05)及生化复发(χ2=4.07,0.01<P<0.05)显著相关,即Gleason评分低组、病理分期低组、无转移和无生化复发的患者中的mi R-30c表达水平更高。经统计检验,它的表达水平同术前PSA水平(χ2=0.64,P>0.05)及切缘性质(χ2=0.64,P>0.05)无显著相关。结论 mi R-30c与前列腺癌临床相关,检测mi R-30c表达不仅可鉴别前列腺癌及良性组织,并可预测生化复发的概率及危险度。

miR-30c在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-30c在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法:37例骨肉瘤组织标本均来自于2007年1月至2015年1月间在新疆医科大学第六附属医院住院接受治疗的骨肉瘤患者,实时定量PCR和原位杂交分析骨肉瘤组织中miR-30c表达情况。单因素和多因素分析miR-30c表达与骨肉瘤临床病理参数和预后之间的相关性。结果:实时定量PCR检测和原位杂交检测分析结果一致表明:骨肉瘤组织中miR-30c的表达水平显著低于正常骨组织,差异有统计学意义(P<0.05);miR-30c低表达组肿瘤与更晚分期和中低分化程度、肿瘤复发有相关性(P<0.05);多元回归分析表明,miR-30c低表达与骨肉瘤患者生存期更短有关(P<0.01);miR-30c低水平表达是骨肉瘤患者预后的一个独立危险因数。结论:miR-30c表达下调能够促进肿瘤进展,是预测骨肉瘤患者预后的可靠指标,miR-30c也具有成为骨肉瘤靶向治疗靶点的潜力。

MiR-30c-2-3p对足细胞活力及Nephrin和Podocin蛋白表达的影响

目的探讨MiR-30c-2-3p对足细胞活力及Nephrin和Podocin蛋白的表达影响。方法采用嘌呤霉素(PAN)诱导的足细胞体外模型,将足细胞分成4组,即空白组、PAN组、阴性质粒+PAN组、阳性质粒+PAN组。通过LipofectamineTM2000瞬时转染MiR-30c-2-3p mimic。通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞活力、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中MiR-30c-2-3p表达、Western blot检测Nephrin和Podocin蛋白的表达。结果(1)CCK-8结果提示PAN组足细胞活力明显低于空白组,差异有高度统计学意义(P<0.01),阴性质粒+PAN组较PAN组差异无统计学意义(P>0.05),阳性质粒+PAN组足细胞活力与PAN组和阴性质粒+PAN组相比均有所提高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(2)qRT-PCR显示PAN组MiR-30c-2-3p的表达较空白组明显下降,差异有高度统计学意义(P<0.01);阴性质粒+PAN组较PAN组表达差异无统计学意义(P>0.05),而阳性质粒+PAN组MiR-30c-2-3p的表达较PAN组和阴性质粒+PAN组均提高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(3)Western blot提示PAN组Nephrin和Podocin蛋白的表达较空白组明显下降,差异有高度统计学意义(P<0.01);与PAN组相比,阴性质粒+PAN组两者蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05),而阳性质粒+PAN组Nephrin和Podocin蛋白的表达较单纯PAN组和阴性质粒+PAN组均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PAN对足细胞的活力,MiR-30c-2-3p含量及Nephrin和Podocin蛋白的表达有抑制作用,而通过外源性增加MiR-30c-2-3p表达后可提高足细胞的活力,同时可增加Nephrin和Podocin蛋白的表达。

CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛患者冠状动脉病变严重程度关系

目的:探讨C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛(SAP)患者冠状动脉病变严重程度的关系。方法:回顾性分析2016年5月至2019年5月间医院收治的经冠状动脉造影(CAG)证实的90例SAP患者的临床资料,根据SYNTAX评分分为轻度组(0~22分,41例)、中度组(23~32分,32例)、重度组(≥33分,17例)。收集三组患者的临床资料,采血检测三组患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平,三组患者的冠状动脉病变严重程度用SYNTAX评分评估,用Pearson相关性分析CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平与SYNTAX评分的关系。结果:三组患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX评分比较,差异均具有统计学意义(P均<0.05),两两对比LSD-t检验,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,CRP、cTnT、TSLP与SYNTAX评分均呈显著正相关(P<0.01),而miR-30c-5p与SYNTAX评分呈显著负相关(P<0.01)。结论:CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛患者冠状动脉病变严重程度存在相关性,早期检测以上生物学标志物有助于判断稳定性心绞痛患者的冠状动脉病变严重程度。

miR-30c对胃癌细胞MGC803增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨miR-30c在胃癌中的表达及其对胃癌细胞MGC803增殖和侵袭等恶性生物学行为的影响。方法:采用逆转录定量PCR(RT-qPCR)法检测胃癌和癌旁组织中miR-30c的表达;将胃癌细胞MGC803进行转染,其中转染组细胞转染miR-30c-mimic,阴性对照组转染NC-mimic,正常对照组细胞不做任何处理,采用RT-qPCR法检测miR-30cmRNA的表达情况以判断转染效率,采用CCK8法测定细胞增殖情况,采用细胞划痕愈合试验和Transwell侵袭试验测定细胞迁移和侵袭能力。结果:与癌旁组织相比,在胃癌组织中miR-30c的表达量显著降低(P<0.05);转染组MGC803细胞miR-30cmRNA的表达量较正常对照组和阴性对照组显著增高(P<0.05),其细胞增殖率显著降低(P<0.05);细胞划痕距离显著升高(P<0.05),且细胞穿膜数量显著降低(P<0.05)。结论:miR-30c在胃癌组织中异常低表达,胃癌细胞MGC803中过表达miR-30c可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

CircRNA EZH2通过调控miR-30c-5p促进前列腺癌细胞增殖和迁移

目的探究circRNA EZH2通过调控miR-30c-5p对前列腺癌细胞的增殖和迁移的影响及其相关作用机制。方法通过TCGA数据库分析circRNA EZH2在前列腺癌组织中的表达差异及生存曲线;转染siRNA敲降前列腺癌LNCaP细胞中的circRNA EZH2表达后,CCK-8实验和划痕实验观察LNCaP细胞增殖和迁移,RT-qPCR和Western blot法测定miR-30c-5p、JAK1和PI3K蛋白的表达。结果在前列腺癌组织中circRNA EZH2的表达显著上调(P<0.0001),且高表达circRNA EZH2的患者生存率降低;沉默circRNA EZH2的LNCaP细胞较正常LNCaP细胞的增殖和迁移能力下降(P<0.0001),miR-30c-5p表达增高(P<0.0001),JAK1表达降低(P<0.0001),PI3K信号受抑制。结论EZH2在前列腺癌中高表达,通过调控miR-30c-5p激活PI3K信号通路促进前列腺癌LNCaP细胞的增殖和迁移。

miR-30c减轻肝细胞肝癌的侵袭与转移

目的:观察miR-30c/snail在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达并探讨其在肝癌侵袭中的作用。方法:定量PCR检测肝癌及肝癌细胞系中miR-30c/snail的mRNA表达水平,通过免疫组织化学和Western blot分别检测肝癌及肝癌细胞系中snail的蛋白表达水平,并在肝癌细胞株中转染miR-30c模拟物或抑制物,分析其对肝癌细胞侵袭的作用。结果:与无脉管转移组相比,miR-30c在有脉管转移组的HCC组织中表达明显下调,同时在高转移肝癌细胞株MHCC-97H中也有相似的结果。转染miR-30c模拟物可减少snail的表达,并减少MHCC-97H细胞的侵袭性,然而,转染miR-30c抑制剂则增加snail的蛋白水平,增加HepG2细胞的侵袭力。结论:上调miR-30c的表达通过直接抑制snail,可减弱HCC的侵袭性。一种新的针对miR-30c的治疗策略可能有利于伴侵袭转移的HCC患者。

miR-30c-2-3p靶向MPO介导高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡及炎性反应

目的探讨miR-30c-2-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡及炎性反应的影响及其机制。方法用终浓度为30 mmol/L的高糖溶液刺激细胞作为高糖组(HG),同时以终浓度为5 mmol/L的糖溶液处理细胞作为对照组(NG);设置miR-NC组、miR-30c-2-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-30c-2-3p组、HG+miR-NC组、HG+miR-30c-2-3p组、HG+miR-30c-2-3p+pcDNA3.1组、HG+miR-30c-2-3p+pcDNA3.1-MPO组,转染均采用脂质体法。qRT-PCR检测miR-30c-2-3p的表达水平;Western Blot检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测TNF-α和IL-6的表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果高糖可以抑制miR-30c-2-3p的表达(P<0.05);过表达miR-30c-2-3p表达可抑制高糖作用的细胞HMC凋亡,抑制IL-6、TNF-α的表达(P<0.05)。miR-30c-2-3p靶向调控MPO的表达,过表达MPO能逆转miR-30c-2-3p过表达对高糖作用的HMC细胞凋亡及IL-6、TNF-α表达的抑制作用(P<0.05)。结论miR-30c-2-3p能抑制高糖作用的HMC细胞凋亡,其机制主要是下调MPO及炎性因子IL-6、TNF-α的表达。可为糖尿病肾病的治疗提供新思路和新靶点。

血清miR-30c-2-3p与卵巢癌组织内质网应激相关蛋白表达及患者预后的相关性

目的:分析血清miR-30c-2-3p与卵巢癌(OC)组织内质网应激(ERS)相关蛋白表达、患者临床特征及预后的关系。方法:招募2018年1月至2020年12月期间70例于我院接受治疗的OC患者(OC组),并纳入同期100例健康志愿者作为对照组。采用蛋白质印迹法分析OC组织C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(BIP)的表达情况。使用定量实时聚合酶链反应检测血清miR-30c-2-3p表达。随访记录患者的无病生存期(DFS)。结果:OC组患者基线血清miR-30c-2-3p表达显著低于对照组受试者(0.77±0.25 vs.1.15±0.39,t=7.869,P<0.001)。经受试者工作特征曲线分析,基线血清miR-30c-2-3p表达诊断OC的曲线下面积为0.785(95%CI 0.718~0.852)。基线血清miR-30c-2-3p表达≤0.703的患者FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期概率更大,肿瘤直径也更大(P<0.05)。基线血清miR-30c-2-3p表达水平与OC组织CHOP表达呈正相关(r=0.483,P<0.001),与BIP表达呈显著负相关(r=-0.240,P=0.045)。经多元线性回归分析,OC组织中CHOP(t=4.080,P<0.001)、BIP(t=-2.048,P=0.045)都是影响基线血清miR-30c-2-3p表达水平的独立因子。绘制Kaplan-Meier生存曲线,基线血清miR-30c-2-3p低表达OC患者中位DFS显著短于高表达者(χ^(2)=7.515,P=0.006)。经多因素COX回归分析显示,基线血清miR-30c-2-3p低表达为OC患者术后复发的独立临床因素(OR=0.399,95%CI 0.201~0.791,P=0.009)。结论:血清miR-30c-2-3p在OC患者中多呈低表达,并可能通过调节ERS影响患者预后。因此,血清miR-30c-2-3p表达对OC患者术后复发具有预测价值。

威草胶囊对尿酸性肾病大鼠肾组织miR-29a和miR-30c的影响和机制

目的观察威草胶囊对尿酸性肾病大鼠肾组织miR-29a和miR-30c表达的影响,探讨威草胶囊降血尿酸和肾保护作用的具体机制。方法将50只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、别嘌呤醇组、威草胶囊小剂量组、威草胶囊大剂量组,每组10只。正常组给予普通饲料喂养,其余4组均给予高嘌呤饲料喂养,在给予高嘌呤饲料后的第20天停用高嘌呤饲料,均改用普通饲料喂养。正常组和模型组每日给予蒸馏水2 m L灌胃,别嘌呤醇组给予别嘌呤醇0.05 g/(kg·d)灌胃,威草胶囊小剂量组、大剂量组分别给予威草胶囊0.9g/(kg·d)、1.8 g/(kg·d)灌胃,共4周。4周后处死大鼠,检测血清UA、BUN、SCr水平;摘取双侧肾脏,做HE染色、Masson染色,免疫组织化学方法检测CTGF、TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ表达情况,实时荧光定量PCR法测定大鼠肾组织中miR-29a和miR-30c表达情况。结果模型组大鼠血清UA、BUN、SCr水平均明显高于正常组(P均<0.05);别嘌呤醇组血清UA水平明显低于模型组(P<0.05),威草胶囊小剂量组、大剂量组血清UA、BUN、SCr水平均明显低于模型组(P均<0.05);威草胶囊大剂量组血清UA、BUN水平均明显低于别嘌呤醇组(P均<0.05),威草胶囊小剂量组血清UA、BUN、SCr水平与威草胶囊大剂量组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。HE染色、Masson染色:正常组少量肾组织纤维化,纤维化程度轻;模型组纤维化区域增多,纤维化程度重;别嘌呤醇组肾组织纤维化改变不明显;威草胶囊小剂量组和大剂量组肾组织间质纤维化程度明显减轻,威草胶囊大剂量组接近正常。模型组大鼠肾组织中CTGF、TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ表达量均明显高于正常组(P均<0.05);威草胶囊小剂量组和大剂量组CTGF、ColⅠ、ColⅢ表达量和威草胶囊大剂量组TGF-β1表达量均明显低于模型组和别嘌呤醇组(P均<0.05);威草胶囊小剂量组CTGF、TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ表达量与威草胶囊大剂量组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。模型组大鼠肾组织中miR-29a、miR-30c表达水平均明显低于正常组(P均<0.05);威草胶囊小剂量组和大剂量组miR-29a、miR-30c表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),别嘌呤醇组与模型组比较差异无统计学意义(P均>0.05);威草胶囊大剂量组miR-29a、miR-30c表达水平均明显高于别嘌呤醇组(P均<0.05);威草胶囊小剂量组miR-29a、miR-30c表达水平与威草胶囊大剂量组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论威草胶囊可改善尿酸性肾病大鼠的肾功能,减轻肾组织纤维化程度,与其升高肾组织miR-29a、miR-30c的表达水平,降低TGF-β1、CTGF的表达,减少ColⅠ、ColⅢ的生成有关,别嘌呤醇不具有此作用。

子痫前期miR-30c-5p和Notch1的表达及相关性

目的探讨miR-30c-5p和Notch1在子痫前期(PE)患者胎盘中的表达及其相关性。方法选取中国人民解放军联勤保障部队第九六〇医院产科2021年1月至12月行剖宫产分娩的产妇60例,正常妊娠组20例,中度PE组20例,重度PE组20例。采用荧光定量PCR和免疫组织化学分别检测胎盘组织中miR-30c-5p和Notch1的表达水平;采用SPSS 25.0统计学软件分析数据;采用Pearson相关性分析检测miR-30c-5p与Notch1的相关性;采用ROC曲线分析miR-30c-5p与Notch1对疾病诊断的特异性。结果与正常妊娠组比较,中度PE组和重度PE组miR-30c-5p表达水平均显著升高(P<0.05),重度PE组miR-30c-5p表达水平较中度PE组有升高趋势。与正常妊娠组比较,中度PE组和重度PE组胎盘组织中Notch1表达水平均显著降低(P<0.05);且PE越重,胎盘组织中Notch1表达水平越低。miR-30c-5p与Notch1的表达呈明显负相关(r=-0.484,P<0.001)。miR-30c-5p诊断PE的AUC为0.625,诊断性能较好,但差异无统计学意义;Notch1诊断PE的AUC为0.914,诊断效能为优,其表达值对PE的诊断有意义。结论胎盘滋养细胞中miR-30c-5p负向调控靶基因Notch1,从而抑制滋养细胞的增殖、浸润,导致胎盘灌注不足,从而参与并加重PE的发生。

miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨mi R-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采集行手术治疗的52例结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常黏膜组织,实时定量PCR法检测两种组织中mi R-30c-1-3p的表达水平并作比较;进一步分析结直肠癌组织中mi R-30c-1-3p表达水平与患者临床特征的关系。结果结直肠癌组织中mi R-30c-1-3p表达水平明显低于癌旁正常黏膜组织(P<0.05)。结直肠癌组织中mi R-30c-1-3p表达水平与患者有无淋巴结转移及临床分期有关,有淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期的患者结直肠癌组织中mi R-30c-1-3p表达水平均较低(均P<0.05);而与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置、分化程度、浸润深度等均无关(均P>0.05)。结论 mi R-30c-1-3p在人结直肠癌组织中表达下调,与有无淋巴结转移、临床分期有关,提示mi R-30c-1-3p可能与结直肠癌的转移侵袭相关。

miR-30c对胃癌细胞株HGC-27侵袭转移能力的影响

目的探讨miR-30c对胃癌细胞株HGC-27侵袭转移能力的影响。方法使用miR-30c mimics和inhibitor分别进行miR-30c的过表达和抑制,采用划痕实验和transwell小室实验分析癌细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达差异。结果抑制miR-30c可促进胃癌细胞系HGC-27的侵袭(P<0.05),同时高表达miR-30c可抑制细胞侵袭(P<0.05)。抑制miR-30c后E-cadherin表达降低、Vimentin和Fibronectin表达升高,高表达miR-30c后E-cadherin的表达升高、Vimentin和Fibronectin表达下降。结论 miR-30c可能通过调节上皮间质转化(EMT)相关蛋白来影响胃癌的侵袭能力。

miR-26a和miR-30c在调节TGFβ1诱导的糖尿病肾病上皮-间充质转化中的协同作用

微小RNAs（microRNAs,miRNAs）在糖尿病肾病的发展中起着重要作用。Zheng等比较了miR-26a和miR-30c在肾小管上皮细胞NRK-52E中的保护效果,并测定它们在减轻肾纤维化的过程中是否表现出叠加效应。转化生长因子β1（transforming growth factorβ1,TGFβ1）抑制NRK-52E细胞中miR-26a和miR-30c的表达,但上调促纤维化标志物的表达;在40周龄糖尿病Otsuka Long-Evans Tokushima肥胖大鼠的肾皮质中也出现这些变化.