汉黄芩素通过调控miR-451/PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路改善低氧诱导的肺动脉高压

目的:评价汉黄芩素对低氧诱导的肺动脉高压(HPH)的保护作用及其相关分子机制。方法:在体内采用成年雄性野生型C57BL/6小鼠建立HPH模型,将小鼠随机分为3组:对照组(N)、低氧(H+Saline)组、低氧+汉黄芩素(H+w)组。造模3周后,使用压力传感器系统采集小鼠血流动力学指标;肺小动脉管壁直径/管总直径(WT/TT)、肺小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)来评估肺动脉结构重塑;基于网络药理学方法筛选汉黄芩素作用于HPH潜在靶点及分子信号通路。在体外采用小鼠肺动脉平滑肌细胞(MPASMCs),将细胞分为5组:常氧(N)组、低氧(H+PBS)组、低氧+低剂量汉黄芩素(H+40μmol/L w)组、低氧+高剂量汉黄芩素(H+80μmol/L w)组、低氧+高剂量汉黄芩素+740Y-P(H+80μmol/L w+740Y-P)组。N组在常氧(5%CO_(2),21%O_(2),74%N2,37℃)环境中培养48 h,H+PBS、H+40μmol/L w、H+80μmol/L w、H+80μmol/L w+740Y-P组在低氧(5%CO_(2),3%O_(2),92%N2,37℃)环境中培养48 h。通过CCK-8、Ed U法检测评估细胞增殖能力,Transwell和伤口愈合/划痕实验用于检测评估细胞迁移能力,Western blot检测PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路的主要蛋白(P-PI3K、PI3K、P-AKT、AKT、RXRA、Bcl-2)的表达,并利用PI3K通路激活剂740Y-P进行功能回补实验;RT-q PCR检测汉黄芩素对miR-451表达水平的影响,Western blot检测汉黄芩素对PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2通路上游调控因子CAB39和MIF表达的影响。结果:与对照组相比,低氧组MPASMCs的增殖、迁移能力以及小鼠右心室压力(RVSP)显著增加(P<0.05),肺动脉结构发生显著重构,经汉黄芩素干预后MPASMCs的增殖、迁移能力以及小鼠RVSP显著下降(P<0.05),肺动脉结构重塑得到显著改善。与对照组相比,低氧组中PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、RXRA、Bcl-2表达显著升高;与低氧组相比,汉黄芩素干预组中PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路相关的蛋白表达水平显著下调(P<0.05);功能回补实验证实在缺氧条件下,激活PI3K通路能够显著削弱汉黄芩素对MPASMCs增殖抑制效应。与对照组相比,低氧组中CAB39和MIF表达水平显著上升,miR-451表达水平显著减少(P<0.05);与低氧组相比,汉黄芩素干预组中CAB39和MIF表达水平显著下降,miR-451表达水平显著上升(P<0.05);miR-451 inhibitor干预能够部分逆转汉黄芩素对MPASMCs增殖和迁移能力的抑制效应(P<0.05)。结论:汉黄芩素可能通过上调mi R-451的表达靶向调控CAB39和MIF进而抑制PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路,抑制低氧诱导的MPASMCs的增殖和迁移、改善HPH小鼠右心室压力和肺动脉结构重塑,最终缓解肺动脉高压。

老年食管癌患者血清miR-451、miR-21表达水平及其对新辅助化疗预后的影响

目的分析血清miR-451、miR-21与老年食管癌(EC)患者新辅助化疗预后的关系。方法选取辽宁省人民医院2015年6月~2021年1月收治的117例老年EC患者进行前瞻性研究,患者均接受2个周期的TP新辅助化疗,化疗结束后随访1个月,依据实体瘤疗效评价标准评估预后,其中病灶稳定和进展者为预后不良组,病灶全部缓解和部分缓解者为预后良好组。新辅助化疗前检测血清miR-451、miR-21水平,采集患者相关基线资料,比较预后不良组和预后良好组患者的一般资料,以差异有统计学意义的指标作为自变量,以预后情况为因变量,进行多因素logistic回归分析;采用ROC曲线分析血清miR-451、miR-21对老年EC患者新辅助化疗预后的预测价值。结果117例老年EC患者新辅助化疗2个周期后43例预后不良,预后不良组TNM分期Ⅲ期比例、淋巴结转移比例及血清癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)、miR-451、miR-21水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05);logistic回归分析结果显示,TNM高分期、淋巴结转移及血清CEA、SCC、miR-451、miR-21是老年EC患者新辅助化疗预后不良的危险因素(P<0.05);绘制ROC曲线发现,血清miR-451、miR-21单独及联合检测预测老年EC患者新辅助化疗预后不良风险的AUC均>0.80,均有一定预测价值。结论老年EC患者新辅助化疗预后不良可能受miR-451、miR-21升高影响。

miR-451、miR-223在脓毒症患者中的变化及预后评估价值分析

目的分析外周血微小核糖核酸(miR)-451与miR-223在脓毒症患者中的变化及其对预后的评估价值。方法回顾性收集我院2020年1月至2022年12月收入的137例脓毒症患者临床资料,设为观察组,根据其28 d内死亡、存活情况将其分为死亡组(30例)、存活组(107例),另选同时间段来院体检健康者46例为对照组。所有受试者均于入院当日测外周血miR-451、miR-223水平(对照组于体检当日)。比较不同受试者miR-451、miR-223水平差异,采用二元logistics回归分析影响脓毒症患者预后的因素,建立受试者工作特征(ROC)曲线,评估miR-451、miR-223水平预测脓毒症患者预后的价值。结果与对照组相比,观察组患者外周血miR-451与miR-223水平明显更高(P<0.05)。两组患者年龄、尿素氮、血肌酐、C-反应蛋白、APACHEⅡ评分、miR-451、miR-223有显著差异(P<0.05),与存活组相比,死亡组年龄更高、尿素氮、血肌酐、C-反应蛋白、APACHEⅡ评分、外周血miR-451与miR-223水平明显更高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血肌酐、APACHEⅡ评分、miR-451、miR-223是影响脓毒症患者预后不良的因素(P<0.05)。相关性分析结果显示,脓毒症患者APACHEⅡ评分与miR-451呈负相关性,与miR-223水平呈正相关性(r=-0.978、0.635,P<0.05),APACHEⅡ评分与miR-451、miR-223关系紧密,APACHEⅡ评分与miR-451、miR-223关系紧密。ROC曲线结果显示,miR-451、miR-223单独、联合预测预后曲线下面积分别为0.829、0.755、0.947,特异度为0.813、0.888、0.925,敏感度为0.733、0.807、0.657,预测价值较好。结论脓毒症患者miR-451、miR-223水平存在异常表达,miR-451、miR-223是影响患者预后的因素,对预测脓毒症患者预后情况有一定参考价值。

miR-451a对慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡与自噬的影响

目的探究miR-451a对慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡与自噬的作用机制。方法采用1μmol/L阿霉素(DOX)建立慢性心衰细胞模型。将细胞实验分为Control组(正常心肌细胞H9c2)、DOX组(DOX培养)、DOX+miR-NC组(DOX培养转染对照miR-NC)、DOX+miR-451a组(DOX培养转染miR-451a模拟物miR-451a)、DOX+miR-451a+CCI-779组(DOX和CCI-779培养转染miR-451a)。qRT-PCR检测各组细胞miR-451a相对表达水平;CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖活性与凋亡;Western blotting检测剪切的Caspase-3(cleaved Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3I(LC3I)、LC3II、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70s6k、磷酸化mTOR(p-mTOR)、p-p70s6k蛋白表达。结果成功建立慢性心衰细胞模型。与Control组比较,DOX组miR-451a相对表达水平、细胞活性、p-mTOR、p-p70s6k蛋白表达降低,而凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达升高。与DOX+miR-NC组比较,DOX+miR-451a组miR-451a相对表达水平、细胞活性、p-mTOR、p-p70s6k蛋白表达升高,而凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达降低。与DOX+miR-451a组比较,DOX+miR-451a+CCI-779组细胞活性降低,凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达升高。结论miR-451a通过抑制mTOR信号通路促进慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡和自噬。

miR-451在白血病细胞株K562/A02多药耐药中的作用及相关机制

目的:检测miR-451、ABCB1、ABCC2在白血病药物敏感细胞株K562及其耐药株K562/A02中的差异表达,探讨miR-451与ABCB1、ABCC2表达的调控关系及miR-451参与白血病耐药的相关机制。方法:CCK-8法检测K562/A02及K562细胞的耐药性,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证miR-451在K562及K562/A02细胞中的差异表达,将miR-451模拟物(mimic)及其阴性对照(miR-NC)、miR-451抑制剂(inhibitor)及其阴性对照(miR-inNC)分别转染K562及K562/A02细胞,应用q RT-PCR、Western blot检测ABCB1、ABCC2在K562、K562/A02细胞及转染后各组细胞中的mRNA、蛋白表达水平。结果:K562/A02细胞对阿霉素的耐药是其亲本细胞系K562的177倍。与K562细胞相比,K562/A02细胞中miR-451明显高表达(P<0.001),ABCB1、ABCC2在K562/A02中的mRNA及蛋白表达水平均显著高于K562细胞(P<0.001)。K562/A02细胞转染miR-451 inhibitor后,miR-451表达显著下调(P<0.001),对化疗药物的敏感性显著增强(P<0.05),ABCB1、ABCC2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。K562细胞转染miR-451 mimic后,miR-451表达显著上调(P<0.001),ABCB1、ABCC2 mRNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01)。结论:miR-451、ABCB1及ABCC2在白血病敏感细胞株K562及其耐药株K562/A02中的表达存在显著差异,miR-451可能通过调控ABCB1、ABCC2的表达对白血病细胞的耐药性产生影响。

急性脑梗死患者血清miR-134、miR-451表达水平与脑损伤标志物和预后不良的关系

目的研究急性脑梗死(ACI)患者血清微小RNA(miR)-134、miR-451表达水平与脑损伤标志物和预后不良的关系。方法选取2019年3月至2022年3月陕西省宝鸡高新医院收治的230例ACI患者作为观察组。另选取同期健康体检志愿者100例作为对照组。比较两组血清miR-134、miR-451表达水平与脑损伤标志物水平,采用Pearson相关分析明确血清miR-134、miR-451表达水平及视锥蛋白样蛋白1(VILIP-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平与ACI患者预后不良的相关性。随访3个月,将所有ACI患者按照改良Rankin量表评分差异分为预后良好组(143例)和预后不良组(87例),采用多因素Logistic回归分析ACI患者预后不良的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-134、miR-451及二者联合预测ACI患者预后不良的效能。结果观察组血清miR-134、miR-451表达水平及VILIP-1、NSE水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清miR-134、miR-451表达水平与VILIP-1、NSE水平均呈正相关(r=0.692、0.459、0.672、0.493,P<0.05)。预后不良组年龄、入院时美国国立卫生院脑卒中量表(NIHSS)评分、血清miR-134、miR-451表达水平及VILIP-1、NSE水平均高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄升高、入院时NIHSS评分升高、血清miR-134、miR-451表达水平及VILIP-1、NSE水平升高均为ACI患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析发现,血清miR-134、miR-451单独预测ACI患者预后不良的ROC曲线下面积分别为0.784、0.802,低于两项联合的0.911。提示血清miR-134、miR-451联合预测ACI患者预后不良的效能优于两项指标单独预测。结论ACI患者血清miR-134、miR-451均呈异常高表达,与脑损伤标志物和预后不良均密切相关。

血清lncRNA-GAS5及miR-451在重症肺炎患儿中的表达水平及临床意义

目的 探讨lncRNA-GAS5及miR-451在重症肺炎患儿血清中的表达及临床意义。方法 选取2017年1月至2020年1月西北妇女儿童医院收治的89例重症肺炎患儿为研究组,另选取同期健康体检儿童92例作为对照组。通过实时荧光定量聚合酶链反应检测血清lncRNA-GAS5和miR-451水平;通过免疫比浊法检测血清载脂蛋白E(ApoE)及C-反应蛋白(CRP)水平;通过化学发光法检测血清降钙素原(PCT)水平;通过Pearson相关分析lncRNA-GAS5、miR-451表达与ApoE、CRP、PCT水平的相关性;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA-GAS5及miR-451对重症肺炎的诊断价值。结果 与对照组相比,研究组血清lncRNA-GAS5水平明显降低,miR-451、ApoE、CRP、PCT水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);重症肺炎患儿血清中lncRNA-GAS5表达与ApoE、CRP、PCT水平呈负相关(r=-0.493、-0.526、-0.477,P<0.05),miR-451表达与ApoE、CRP、PCT水平呈正相关(r=0.547、0.446、0.454,P<0.05);lncRNA-GAS5与miR-451联合检测诊断重症肺炎的曲线下面积(AUC)高于二者单项检测。结论 lncRNA-GAS5及miR-451可作为早期诊断重症肺炎的分子标志物。

左向右分流型先天性心脏病肺动脉高压患儿血清miR-210和miR-451的表达及诊断价值

目的探讨左向右分流型先天性心脏病(CHD)肺动脉高压(PAH)患儿血清微小核糖核酸(miR)-210和miR-451的表达及诊断价值。方法选取2020年1月至2022年1月乌鲁木齐市第一人民医院收治的114例CHD患儿,根据指南对PAH的诊断,将其分为CHD组(n=53)和CHD-PAH组(n=61)。收集并比较两组患儿一般资料、生化检查、肺动脉压参数以及外周血miR-210和miR-451表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-210和miR-451在CHD-PAH中的诊断价值,Pearson相关分析miR-210、miR-451与尿素氮、不对称二甲基精氨酸和平均肺动脉压的相关性,多元logistic回归分析CHD-PAH的危险因素。结果CHDPAH组患儿外周血miR-210和miR-451表达水平分别为(1.36±0.57)和(3.52±1.23),低于CHD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-210、miR-451和二者联合诊断的曲线下面积分别为0.737、0.725和0.840。Pearson相关显示,CHD-PAH患儿外周血miR-210和miR-451水平与BNP、ADMA和mPAP呈负相关(P<0.05)。多元logistic回归分析显示,miR-210<1.12、miR-451<2.52和PVR升高是CHD-PAH发病的危险因素。结论CHD-PAH患儿外周血miR-210和miR-451降低,miR-210和miR-451联合检测对CHD-PAH具有较高的诊断价值,miR-210<1.12、miR-451<2.52和PVR升高是CHD-PAH发病的危险因素。

藤梨根提取物通过调控miR-451干预人食管鳞癌EC9706细胞的增殖

目的探讨藤梨根提取物(RAE)对食管鳞癌细胞EC9706增殖的影响及机制。方法采用MTT法检测不同剂量的RAE对人食管鳞癌细胞EC9706的增殖抑制作用,运用RT-PCR检测食管鳞癌细胞株中miR-451表达水平并制备不同浓度的RAE干预食管鳞癌细胞株的生长,并再次运用RT-PCR检测各组食管鳞癌细胞株中miR-451表达水平。结果 RAE对食管鳞癌细胞有毒性作用,当RAE浓度≤10μg/ml时,与空白对照组相比,对于EC9706细胞的抑制率无统计学差异(P>0.05),RAE 100μg/ml和1 000μg/ml的抑制率分别为18.9%、31.1%,与空白对照组比较有显著统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测两组细胞miR-451的表达程度有显著性差异(P<0.05)。结论不同浓度RAE的细胞毒性不同,在一定范围内与其浓度相关,当其浓度≤10μg/ml时,抑制率较小,为非细胞毒性浓度。RAE在一定的浓度范围内可以上调miR-451的表达水平,是藤梨根治疗食管癌的机制之一。

miR-451与MIF在胃癌组织中表达的相关性研究

目的观察miR-451与巨噬细胞游走抑制因子(MIF)在胃癌组织中的表达情况,并探讨其与胃癌相关临床因素的关系。方法收集25例胃癌患者的胃癌组织和胃癌旁组织,应用RT-PCR法检测miR-451及MIF mRNA的相对表达水平,分析其相关性并探讨与胃癌相关临床因素的关系。结果 miR-451在胃癌组织中明显低表达(P<0.01),而MIF mRNA在胃癌组织中明显高表达(P<0.01),在胃癌组织中,miR-451与MIF mRNA表达呈显著负相关(P<0.01),miR-451及MIF mRNA与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关(P<0.01)。结论 miR-451及MIF mRNA与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关,miR-451可能通过抑制MIF负向调控了胃癌的发生、发展作用。

广西地区鼻咽癌miR-451a表达与预后的关系

目的:探讨mi R-451a在鼻咽癌中的表达及与预后关系。方法:用实时荧光定量RT-PCR方法检测89例广西地区人群鼻咽未分化非角化性癌(鼻咽癌)组织中mi R-451a的表达情况,分析其表达强度与预后的关系。结果:鼻咽癌组织表达mi R-451a,其表达强度与总生存期及无病生存期呈负相关(P=0.01及P=0.04)。结论 :mi R-451a在鼻咽癌发生中可能起重要作用,是预测鼻咽癌患者预后的分子标志物,mi R-451a高表达者预后较差。

miR-451对肝癌细胞增殖、糖酵解及相关基因表达的影响

目的研究miR-451对肝癌细胞增殖、糖酵解及相关基因表达的影响。方法实验分为普通组、增强组和抑制组,增强组和抑制组肝癌MHCC97细胞分别转染miR-451的模拟物mimics和阻遏物inhibitors,普通组常规培养。采用RT-PCR法检测3组肝癌细胞中miR-451和AMPK/mT OR、Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、胰岛素样生长因子(IGF-1)表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测3组肝癌细胞增殖情况,通过检测3组细胞葡萄糖摄取和乳酸分泌情况评估肝癌细胞糖酵解情况。结果增强组肝癌细胞中miR-451表达量明显高于普通组(P<0.05),抑制组肝癌细胞中miR-451表达量明显低于普通组(P<0.05)。MTT结果显示转染后各时间点增强组吸光度(OD)明显低于普通组和抑制组(P均<0.05)。转染后增强组肝癌细胞mT OR、Ki-67、MMP-9、VEGF、IGF-1mR NA表达量和葡萄糖消耗值、乳酸分泌值均明显低于普通组和抑制组(P均<0.05),而AMPK mR NA表达量明显高于普通组和抑制组(P均<0.05)。结论 miR-451参与调控肝癌细胞增殖及糖酵解,其调控机制可能通过影响AMPK/mT OR信号通路,进而影响细胞中Ki-67、MMP-9、VEGF、IGF-1的表达而实现。

慢性髓细胞白血病患者骨髓单个核细胞miR-203、miR-451、miR-17表达及其临床意义

目的分析探讨miR-203、miR-451、miR-17在慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)骨髓单个核细胞中表达水平的动态变化及在不同治疗方案后的表达差异,评价miR-203、miR-451、miR-17的表达水平在CML诊治中应用的可行性。方法收集2011年1月至2014年1月在西南医院经细胞形态学、免疫学、细胞遗传学及分子生物学(morphologie,immunophenotypie,cytogenetic,molecular,MICM)联合检测,由WHO造血组织和淋巴系统肿瘤分类的标准确诊为CML的患者98例及20例正常对照,采用实时定量PCR检测miR-203、miR-451、miR-17的表达水平,同步检测BCR-ABL融合基因的表达水平。结果 1 CML患者的miR-203表达水平明显低于对照组(P<0.05),且逐步多元回归分析显示miR-203与BCR-ABL融合基因表达水平呈负相关(r=-0.934,P<0.01);2 CML患者的miR-451表达水平明显低于对照组(P<0.05),miR-451与BCR-ABL融合基因表达水平呈负相关(r=-0.917,P<0.01);3 miR-17表达水平在CML-CP患者中上升,在CML-AP、BP患者中下调,差异有统计学意义(P<0.05);4 3种miRNA表达水平均提示传统化疗组与TKI治疗组、造血干细胞移植组有统计学差异,而TKI治疗组与造血干细胞移植组无统计学差异。结论 miR-203、miR-451、miR-17表达水平与BCR-ABL融合基因表达水平、CML疾病分期、治疗和预后评估等均有密切关系,有望成为CML新的生物学标志。

miR-451通过靶向ROCK1对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的调控作用

目的:探讨miR-451对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的作用及机制。方法:通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测卵巢癌组织及卵巢癌细胞、癌旁组织及正常卵巢上皮细胞中miR-451与Rho的卷曲螺旋激酶1(ROCK1)mRNA的表达;将卵巢癌CaOV-3细胞分为6组:Control组(未转染组)、miR-NC组(用miR-NC无序序列转染)、miR-451 mimic组(用过表达miR-451的模拟物转染)、miR-451 inhibitor组(用抑制miR-451表达的质粒转染)、pc-ROCK1组(用过表达ROCK1的质粒转染)和miR-451+pc-ROCK1组(miR-451的模拟物和过表达ROCK1的质粒联合转染);通过划痕实验检测细胞迁移能力;通过Transwell法检测细胞侵袭能力,通过蛋白印迹法检测E-钙粘附蛋白(E-carderin)、N-钙粘附蛋白(N-carderin)、细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)、ROCK1蛋白表达水平;通过TargetScan数据库预测miR-451靶基因;通过双荧光素酶报告检测miR-451与ROCK1靶向关系。结果:与癌旁组织相比,在大多数卵巢组织中miR-451表达下调(57/70,81.43%);低表达的miR-451患者卵巢癌肿瘤较大,分化程度较差,多属于FIGO晚期,并存在明显的腹膜转移(P<0.05)。与对照组相比,miR-451 mimic组卵巢癌CaOV-3细胞划痕闭合率明显降低、侵袭细胞数目明显减少、E-cadherin明显上调、N-cadherin和MMP2表达明显下调(P<0.01),miR-451 inhibitor组和卵巢癌CaOV-3细胞划痕闭合率明显升高、侵袭细胞数目明显增多、E-cadherin明显下调、N-cadherin和MMP2表达明显上调(P<0.01)。miR-451靶向下调ROCK1。共转染pc-ROCK1逆转miR-451 mimic对卵巢癌CaOV-3细胞侵袭和迁移的影响(P<0.01)。结论:miR-451通过靶向下调RCOK1抑制卵巢癌CaOV-3细胞迁移和侵袭能力。

慢性心力衰竭病人血清miR-451a调控MMP-9的表达及临床意义

目的探讨慢性心力衰竭病人血清miR-451a与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况及其临床意义。方法选取我院确诊为慢性心力衰竭的病人80例作为研究组,美国纽约心脏病学会(NYHA)分级:Ⅰ级20例,Ⅱ级22例,Ⅲ级26例,Ⅳ级12例。另选择健康成年人80名作为对照组。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测血清miR-451a和MMP-9表达水平,分析二者在不同NYHA分级中的表达情况及相关性。结果与对照组比较,研究组miR-451a表达水平显著降低,而血清MMP-9表达水平显著增加,差异均有统计学意义(P <0.05)。随着NYHA分级的增高,miR-451a表达水平下降,而MMP-9表达水平上升,各分级间差异均有统计学意义(P <0.05)。线性相关分析发现,随着miR-451a表达水平的降低,MMP-9表达水平逐渐增加,血清miR-45a与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.702,P <0.05)。结论 miR-451a至少部分通过调控MMP-9表达而在慢性心力衰竭的发生发展及病情演变过程中起作用。

血浆miR-451水平与子宫内膜异位症的关系

目的:探讨血浆微小RNA451(mi R-451)与子宫内膜异位症(EMs)的关系,并观察mi R-451对体外培养的子宫内膜基质细胞的增殖和迁移的作用。方法:选取2014年1月—2015年5月于深圳市罗湖区人民医院就诊的EMs患者(EMs组)54例,正常对照组59例,采血并提取血浆总RNA。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time q PCR)检测血浆mi R-451的表达强度。通过CCK-8实验检测mi R-451对异位子宫内膜基质细胞增殖的调控作用;采用损伤愈合实验探讨过表达mi R-451后异位子宫内膜基质细胞的迁移变化。结果:EMs患者血浆mi R-451表达水平低于对照组[(0.53±0.14)vs.(1.00±0.20),t=14.50,P<0.01];过表达mi R-451后EMs基质细胞的相对迁移活性下降[(1.00±0.12)vs.(0.74±0.02),t=4.73,P=0.001]。结论:EMs患者血浆mi R-451水平减低;mi R-451可能通过抑制异位内膜基质细胞增殖和迁移发挥作用。

胃癌组织中miR-451与MIF的表达及与临床病理的关系

目的探讨胃癌组织中microRNA-451(miR-451)与巨噬细胞游走抑制因子(MIF)的表达及与临床病理的关系。方法收集2013年3月至2014年3月该院接受治疗的30例胃癌患者,取其肿瘤及肿瘤旁相关组织,采用RT-PCR法检测组织内的miR-451与MIF的表达水平,并分析其与胃癌临床病理的关系。结果肿瘤组织中的miR-451相对表达为(0.287±0.143),显著低于肿瘤旁组织的(0.520±0.257)(t=-4.021,P<0.05);肿瘤组织中的MIF相对表达为(1.542±0.023),显著高于肿瘤旁组织的(0.631±0.027)(t=-23.183,P<0.05);miR-451与MIF的相对表达呈现显著负相关性(t=-0.721,P<0.05);肿瘤组织中miR-451及MIF与胃癌的组织类型(高、中、低分化)、TNM分期(Ⅰ+Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ)、浸润深度(T1+T2、T3+T4)及淋巴结转移(有、无)相关(均P<0.05)。结论胃癌组织中miR-451及MIF的表达与胃癌的组织类型、TNM分期、浸润深度及有无淋巴结转移相关,推测miR-451反向抑制MIF,进一步调控胃癌在人体内的发生及发展。

miR-451在胃癌组织中的表达及临床意义

目的观察miR-451在胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌相关临床因素的关系。方法收集18例胃癌患者的胃癌组织和胃癌旁组织,应用RT-PCR技术检测miR-451的表达水平(以U6为对照),并分析其与胃癌相关临床因素的关系。结果与胃癌旁组织相比,miR-451在胃癌组织中明显下调(P<0.05)。其中上调6例,下调12例,下调比率66.67%(12/18)。miR-451的表达水平与胃癌的分化相关(P<0.05),与年龄、性别、TNM分期、Borrmann分型、浸润深度、淋巴结转移等无明显相关。结论 miR-451在胃癌组织中低表达,并与胃癌的分化程度密切相关,表明其可能参与了胃癌的发生和发展过程。

荞麦七水提物通过调控LncRNA SOX21-AS1/miR-451a通路抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的机制

目的探索荞麦七水提物对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其分子机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测胃癌组织长链非编码RNA(LncRNA)SOX21反义RNA1(SOX21-AS1)和miR-451a表达。用10 mg/ml、20 mg/ml、40 mg/ml荞麦七水提物处理胃癌细胞MKN45,qPCR检测LncRNA SOX21-AS1和miR-451a表达,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达。在MKN45细胞中转染si-SOX21-AS1,评估抑制SOX21-AS1表达在细胞增殖、迁移、侵袭中的作用。生物信息学结合双荧光素酶报告实验分析LncRNA SOX21-AS1与miR-451a的靶向关系。在细胞中转染pcDNA-SOX21-AS,并使用40 mg/ml荞麦七水提物处理,观察LncRNA SOX21-AS1过表达对荞麦七水提物诱导的胃癌MKN45细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中LncRNA SOX21-AS1表达明显上调,miR-451a表达显著下调(P<0.05)。荞麦七水提物明显降低LncRNA SOX21-AS1表达量、迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白水平,显著提高miR-451a表达量、细胞生长的抑制率、p21、p27蛋白水平,且呈浓度依赖性(P<0.05)。抑制LncRNA SOX21-AS1表达明显增加MKN45细胞抑制率、p21蛋白表达量,显著减少迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量(P<0.05)。LncRNA SOX21-AS1靶向调控miR-451a的表达。LncRNA SOX21-AS1过表达逆转了荞麦七水提物对胃癌MKN45细胞SOX21-AS1表达、迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用及对miR-451a表达、抑制率、p21蛋白表达的促进作用。结论荞麦七水提物通过调控LncRNA SOX21-AS1/miR-451a通路抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭。

miR-451在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的研究miR－451在胃癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法收集胃癌组织标本92例，癌旁正常组织47例，制成组织芯片。采用原位杂交技术检测胃癌组织及癌旁组织中miR－451的表达情况，分析miR－451在胃癌组织中的表达水平与胃癌患者临床病理参数以及预后的关系。结果miR－451在胃癌组织中的高表达率比癌旁正常胃黏膜组织明显降低（38．04％vs 76．60％，χ^2=18．503，P〈0．001）。Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者miR－451的高表达率低于Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者（27．3％掷54．1％，P=0．009），有淋巴结转移胃癌组织中miR－451的高表达率亦低于无淋巴结转移者（27．1％掷57．6％，P=0．004），而不同年龄、性别、组织分化程度、T分期患者间miR－451高表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。miR－451高表达者总生存率明显高于低表达者（69．2％ vs 39．1％，P=0．003）。结论miR－451与胃癌的恶性转变、浸润转移以及预后明显相关，可能是胃癌新的潜在诊断和预后分子标志物及治疗靶点。