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miR-548c-5p对乳腺癌细胞MCF-7的影响 被引量:1
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作者 侯冷晨 孔祥杰 +3 位作者 李佳 张俊峰 李晓宇 房林 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2013年第4期20-25,共6页
目的研究miR-548c-5p转染乳腺癌MCF-7细胞株后对细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法 CCK-8试剂盒检测不同浓度的miR-548c-5p(50、75、100、125、150 nmol/L)分别在24、48、72 h不同时间点对细胞增殖的影响;miR-548c-5p转染MCF-7乳腺癌细... 目的研究miR-548c-5p转染乳腺癌MCF-7细胞株后对细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法 CCK-8试剂盒检测不同浓度的miR-548c-5p(50、75、100、125、150 nmol/L)分别在24、48、72 h不同时间点对细胞增殖的影响;miR-548c-5p转染MCF-7乳腺癌细胞株后,荧光定量PCR法检测其转染效率;划痕实验检测细胞迁移能力的变化;流式细胞术分析干扰后细胞周期的变化;荧光显微镜观察转染后乳腺癌细胞凋亡的变化。结果使用RNA干扰技术成功地将miRNA转染入乳腺癌细胞株,使得miR-548c-5p的表达升高。转染后48 hmiR-548c-5p浓度为125 nmol/L时,对乳腺癌细胞的抑制作用最明显。miR-548c-5p表达上调后细胞G_0/G_1明显增多,而S期明显减少(P<0.01),能一定程度上抑制细胞的迁移。荧光显微镜观察发现早期凋亡细胞升高。结论 miR-548c-5p通过干扰细胞周期,增加G_0/G_1期的乳腺癌细胞数,进而抑制细胞增殖。抑制乳腺癌细胞株MCF-7的迁移能力并显著促进其凋亡。miR-548c-5p影响乳腺癌细胞的增殖、迁移和凋亡,有望成为乳腺癌诊疗的靶点之一。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 mir-548c-5p 凋亡 增殖 迁移
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miR-548c-5p靶向Notch通路增强胃癌SGC7901/VCR细胞对紫杉醇的敏感性 被引量:4
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作者 黄河 魏童 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第15期2066-2071,共6页
目的分析miR-548c-5p在胃癌SGC7901/VCR细胞药物耐受中的作用。方法通过qRTPCR分析miR-548c-5p在SGC7901细胞系和SGC7901耐药细胞系(SGC7901/VCR)中的表达差异。分别通过qRT-PCR和western blot分析SGC7901细胞系和SGC7901/VCR中Notch1和... 目的分析miR-548c-5p在胃癌SGC7901/VCR细胞药物耐受中的作用。方法通过qRTPCR分析miR-548c-5p在SGC7901细胞系和SGC7901耐药细胞系(SGC7901/VCR)中的表达差异。分别通过qRT-PCR和western blot分析SGC7901细胞系和SGC7901/VCR中Notch1和Hes1在mRNA水平上和蛋白质水平上的表达变化。通过荧光素酶实验分析miR-548c-5p与Notch1的3′-UTR的作用。采用CCK-8实验分析miR-548c-5p对细胞增殖的影响,采用Transwell实验分析miR-548c-5p对细胞侵袭的影响。在SGC7901/VCR细胞中转染miR-548c-5p mimics,采用CCK-8分析miR-548c-5p联合紫杉醇对细胞增殖的影响,采用流式细胞术分析miR-548c-5p联合紫杉醇对细胞增殖和侵袭的影响,评估miR-548c-5p对胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR细胞药物耐受性的作用。结果 miR-548c-5p在SGC7901/VCR细胞中的表达显著低于SGC7901细胞(P <0.05),Notch1和Hes1 mRNA和蛋白质在SGC7901/VCR细胞中的表达显著低于SGC7901细胞(P <0.05)。miR-548c-5p mimics可以抑制SGC7901/VCR细胞的增殖和侵袭。而过表达Notch1可以抵消miR-548c-5p对SGC7901/VCR细胞的抑制作用。miR-548c-5p与紫杉醇联合使用,可以进一步抑制SGC7901/VCR细胞的增殖和侵袭。结论 miR-548c-5p可以通过靶向Notch通路,提高胃癌SGC7901/VCR细胞对化疗药物紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 mir-548c-5p NOTCH通路 SGC7901/VCR细胞 化疗敏感性
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miR-34c-5p靶向poFUT1对胎盘血管形成的影响
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作者 刘月华 杨照远 +10 位作者 鲁继聪 谢梦霞 郭婧 王媛媛 杨敬敬 田赟 赵明 陈冬笋 朱双慧 李珠银 丁文珺 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2024年第3期320-325,共6页
目的:探讨miR-34c-5p与poFUT1的靶向关系及对胎盘血管形成的影响。方法:利用ENCORI数据库预测miR-34c-5p与poFUT1的结合位点,采用双荧光素酶报告实验验证。随机选取2023年4至10月在郑州大学第三附属医院住院的胎儿生长受限(FGR)孕妇20例... 目的:探讨miR-34c-5p与poFUT1的靶向关系及对胎盘血管形成的影响。方法:利用ENCORI数据库预测miR-34c-5p与poFUT1的结合位点,采用双荧光素酶报告实验验证。随机选取2023年4至10月在郑州大学第三附属医院住院的胎儿生长受限(FGR)孕妇20例(FGR组),选择同期正常孕妇20例为对照。采用实时荧光定量PCR法检测两组胎盘组织中miR-34c-5p和poFUT1 mRNA的表达。取脐静脉内皮细胞,分组转染miR-34c-5p模拟物及其对照(NC)、miR-34c-5p抑制物及其NC、si-poFUT1 NC、si-poFUT1、si-poFUT1+miR-34c-5p抑制物,采用CCK-8法、Transwell实验以及成管实验检测细胞转染24、48、72、96 h后的增殖能力,转染48 h后的侵袭能力和成管能力。结果:FGR组和对照组胎盘组织中miR-34c-5p表达水平分别为(1.57±0.39)、(1.09±0.18),poFUT1 mRNA表达水平分别为(0.51±0.17)、(1.06±0.13),FGR组胎盘组织中miR-34c-5p表达水平高于对照组,poFUT1 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。与miR-34c-5p模拟物NC组比较,模拟物组侵袭细胞数和管腔节点数减少,细胞增殖活性降低(P<0.05)。与miR-34c-5p抑制物NC组比较,抑制物组侵袭细胞数和管腔节点数增加,细胞增殖活性升高(P<0.05)。与si-poFUT1 NC组相比,si-poFUT1组侵袭细胞数和管腔节点数减少,细胞增殖活性降低(P<0.05),而si-poFUT1+miR-34c-5p抑制物组上述变化较si-poFUT1组部分逆转(P<0.05)。结论:miR-34c-5p可能通过调控poFUT1影响血管内皮细胞功能,从而影响胎盘的血管形成,参与FGR的发生。 展开更多
关键词 mir-34c-5p 胎儿生长受限 poFUT1 血管形成
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血清miR-184、miR-513c-5p表达与复发性流产相关性研究及临床意义
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作者 王纪元 郭战坤 +4 位作者 张雪 杨欣 李静 索青霞 边冰溪 《中国妇幼健康研究》 2024年第7期96-101,共6页
目的研究血清微小RNA-184(miR-184)、微小RNA-513c-5p(miR-513c-5p)表达与复发性流产(RSA)相关性及临床意义。方法选取2019年3月至2022年7月我院收治的67例RSA患者(RSA组)及67例正常早孕期女性(对照组),比较两组、RSA组血清miR-184、miR... 目的研究血清微小RNA-184(miR-184)、微小RNA-513c-5p(miR-513c-5p)表达与复发性流产(RSA)相关性及临床意义。方法选取2019年3月至2022年7月我院收治的67例RSA患者(RSA组)及67例正常早孕期女性(对照组),比较两组、RSA组血清miR-184、miR-513c-5p表达,将RSA组根据妊娠结局分为再次流产与未再次流产亚组,比较两亚组血清miR-184、miR-513c-5p表达。依次运用Pearson、受试者工作特征(ROC)曲线、临床决策分析曲线(DCA)、比值比(OR)进行相关性、预测效能、临床效用、危险度分析。结果RSA组妊娠前、后血清miR-184、miR-513c-5p均高于对照组,且RSA组妊娠后高于妊娠前(P<0.05);RSA组再次流产患者妊娠后血清miR-184、miR-513c-5p高于未再次流产患者(P<0.05)。RSA组妊娠前、后血清miR-184均与miR-513c-5p呈显著正相关(r=0.800、0.750,P<0.001);血清miR-184+miR-513c-5p表达预测RSA再发流产的ROC曲线下面积(AUC)为0.901,高于单独的血清miR-184、miR-513c-5p(Z=3.892、3.411,P<0.05)。采用该预测方案进行预测和干预,具有良好的临床效用。妊娠后血清miR-184高表达RSA患者再发流产的风险是低表达患者的7.407倍,血清miR-513c-5p高表达RSA患者再发流产的风险是低表达患者的18.125倍(P<0.05)。结论血清miR-184、miR-513c-5p的高表达与RSA及其再妊娠结局有关,联合检测两者可为再妊娠结局的预测提供一定参考,从而指导做出进一步的决策与治疗。 展开更多
关键词 mir-184 mir-513c-5p 复发性流产 相关性 临床意义
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miR-181c-5p调控BIRC5对前列腺癌细胞生物学行为的影响
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作者 邢星 成少平 +2 位作者 熊鹰 黄知刚 邓昊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第9期1543-1550,共8页
目的探讨miR-181c-5p对前列腺癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法通过TCGA数据库中前列腺癌数据分析BIRC5、miR-181c-5p与前列腺癌病理关系,采用miRNA靶基因预测数据库分析miR-181c-5p与BIRC5靶结合位点并使用双色荧光素酶活性... 目的探讨miR-181c-5p对前列腺癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法通过TCGA数据库中前列腺癌数据分析BIRC5、miR-181c-5p与前列腺癌病理关系,采用miRNA靶基因预测数据库分析miR-181c-5p与BIRC5靶结合位点并使用双色荧光素酶活性实验验证,Western blot检测miR-181c-5p过表达细胞中BIRC5蛋白表达。以前列腺癌细胞PC3、DU145为研究背景,构建miR-181c-5p过表达细胞系(miR-181c-5p组)及其阴性对照(miR-NC组)并用qRT-PCR验证,CCK-8法检测细胞增殖情况[450 nm处光密度值(OD_(450 nm)值)],流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western blot检测细胞增殖、凋亡相关蛋白表达。建立miR-181c-5p/BIRC5双过表达调细胞系(miR-181c-5p+BIRC5组),用上述相同方法检测细胞生长、细胞周期分布、细胞凋亡率及相关蛋白表达。结果BIRC5在前列腺癌组织表达升高且在肿瘤高侵犯程度、淋巴结转移和复发患者呈现更高表达趋势,BIRC5高表达患者生存情况较差;miR-181c-5p在前列腺癌癌组织表达降低,miR-181c-5p水平与BIRC5水平呈负相关,miR-181c-5p靶向抑制BIRC5表达。在PC3、DU145细胞中,miR-181c-5p组细胞miR-181c-5p水平高于miR-NC组(P<0.05),OD_(450 nm)值和S期细胞百分比低于miR-NC组(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞百分比、细胞凋亡率和BAX、caspase-3、PARP蛋白表达高于miR-NC组(P<0.05),CDK2、CCNB1、BCL-2蛋白表达弱于miR-NC组(P<0.05)。miR-181c-5p+BIRC5组细胞的BIRC5蛋白表达和OD_(450 nm)值高于miR-181c-5p组(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞百分比低于miR-181c-5p组(P<0.05),S期细胞百分比高于miR-181c-5p组(P<0.05),细胞凋亡率低于miR-181c-5p组(P<0.05),CDK2、CCNB1和BCL-2蛋白表达高于miR-181c-5p组,BAX、caspase-3、PARP蛋白表达低于miR-181c-5p组。结论miR-181-5p可以靶作用BIRC5抑制人前列腺癌细胞增殖,使细胞周期在G_(0)/G_(1)期阻滞,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 mir-181c-5p BIRC5 细胞周期 增殖 凋亡
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miR-548c-3p通过调控TRIM59表达对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响 被引量:26
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作者 年士艳 冯磊 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第4期283-289,共7页
目的研究miR-548c-3p对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和潜在的分子机制。方法 qRT-PCR检测TRIM59 mRNA和miR-548c-3p的表达,Western blot检测TRIM59、增殖相关蛋白CyclinD1和p21,及迁移侵袭相关蛋白MMP2和MMP9的表达水平,MTT法测定He... 目的研究miR-548c-3p对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和潜在的分子机制。方法 qRT-PCR检测TRIM59 mRNA和miR-548c-3p的表达,Western blot检测TRIM59、增殖相关蛋白CyclinD1和p21,及迁移侵袭相关蛋白MMP2和MMP9的表达水平,MTT法测定HepG2细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告系统验证miR-548c-3p与TRIM59的调控关系。结果与正常肝细胞L02相比,在肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和BEL-7402组中TRIM59的mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05),miR-548c-3p的表达量则均显著降低(P<0.05);过表达miR-548c-3p和抑制TRIM59表达均可抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭;双荧光素酶报告系统结果表明,miR-548c-3p靶向负调控TRIM59的表达;过表达TRIM59逆转了过表达miR-548c-3p对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-548c-3p通过靶向TRIM59基因抑制HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭,miR-548c-3p是肝癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 肝癌 mir-548c-3p TRIM59
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MiR-130c-5p靶向乌鳢水泡病毒g基因抑制病毒增殖
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作者 季艳 周旋 +3 位作者 于永耀 刘晓丹 张驰 林强 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期13-23,共11页
为了研究miR-130c-5p在乌鳢水泡病毒(snakehead vesiculovirus,SHVV)感染中潜在靶基因g的靶向关系以及对病毒复制的影响,本研究以斑点叉尾鮰卵巢(channel catfish ovary,CCO)为实验材料,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR... 为了研究miR-130c-5p在乌鳢水泡病毒(snakehead vesiculovirus,SHVV)感染中潜在靶基因g的靶向关系以及对病毒复制的影响,本研究以斑点叉尾鮰卵巢(channel catfish ovary,CCO)为实验材料,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术测定SHVV不同感染时间和感染剂量条件下,病毒基因水平和蛋白水平以及miR-130c-5p变化情况。此外,将SHVV的g基因上miR-130c-5p对应的靶序列克隆到质粒pmirGLO,构建质粒pmirGLO-G用于双荧光素酶报告实验进行靶基因验证。结果显示,随着SHVV感染时间及剂量的不断增加,miR-130c-5p和g基因的表达水平都显著上调。进一步实验证明,miR-130c-5p类似物和pmirGLO-G质粒共转染可显著抑制荧光素酶活性强度,而转染miR-130c-5p抑制剂则明显上调了pmirGLO-G报告载体的荧光信号。此外,miR-130c-5p的过表达显著降低了病毒g基因的mRNA及蛋白表达,而抑制miR-130c-5p的表达则上调了g基因的mRNA及蛋白的表达水平。研究结果表明,miR-130c-5p通过靶向SHVV的g基因,引起G蛋白的降解,从而抑制SHVV的增殖。本研究结果为理解microRNA调控SHVV的致病机制提供了重要基础,为抗SHVV疫苗等药物的研发提供了理论支持。 展开更多
关键词 mir-130c-5p 乌鳢水泡病毒(SHVV) 靶向 G蛋白 弹状病毒
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血清外泌体miR-181c-5p和miR-142-5p对非小细胞肺癌的诊断价值
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作者 董美慧 王钰钏 朱利敏 《实用癌症杂志》 2024年第5期721-725,共5页
目的探讨血清外泌体miR-181c-5p和miR-142-5p在非小细胞肺癌诊断中的价值。方法前瞻性选取NSCLC患者65例作为研究对象,为NSCLC组;另选取同期体检健康者60例为健康组。收集NSCLC患者的一般资料,包括年龄、性别、病理类型、肿瘤直径、TNM... 目的探讨血清外泌体miR-181c-5p和miR-142-5p在非小细胞肺癌诊断中的价值。方法前瞻性选取NSCLC患者65例作为研究对象,为NSCLC组;另选取同期体检健康者60例为健康组。收集NSCLC患者的一般资料,包括年龄、性别、病理类型、肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移、分化程度、浸润程度等。NSCLC患者治疗前、健康组体检时抽取空腹静脉血,血清中提取外泌体,RT-PCR法检测外泌体的miR-181c-5p和miR-142-5p的表达。结果NSCLC组血清中miR-181c-5p和miR-142-5p的表达明显低于健康组(t=7.358、8.613,P<0.001)。NSCLC患者miR-181c-5p和miR-142-5p表达与年龄、性别、病理类型、肿瘤直径无关(P>0.05),与TNM分期、淋巴结转移、分化程度、浸润程度相关(P<0.05)。miR-181c-5p曲线下面积AUC为0.862(95%CI:0.799~0.925,P<0.001),当截断值为0.673时,灵敏度为81.54%,特异度为71.67%;miR-142-5p曲线下面积AUC为0.878(95%CI:0.819~0.936,P<0.001),当截断值为0.752时,灵敏度为84.62%,特异度为72.30%;miR-181c-5p和miR-142-5p联合诊断的曲线下面积AUC为0.912(95%CI:0.863~0.961,P<0.001),灵敏度为86.15%,特异度为78.33%。结论miR-181c-5p和miR-142-5p在NSCLC患者血清中低表达,其有望成为临床NSCLC辅助诊断的分子标志物。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 外泌体 mir-181c-5p mir-142-5p
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LncRNA IDH1-AS1 sponges miR-518c-5p to suppress proliferation of epithelial ovarian cancer cell by targeting RMB47
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作者 Juan Zhou Yiran Xu +8 位作者 Luyao Wang Yu Cong Ke Huang Xinxing Pan Guangquan Liu Wenqu Li Chenchen Dai Pengfei Xu Xuemei Jia 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2024年第1期51-65,共15页
Long noncoding RNA(lncRNA)IDH1 antisense RNA 1(IDH1-AS1)is involved in the progression of multiple cancers,but its role in epithelial ovarian cancer(EOC)is unknown.Therefore,we investigated the expression levels of ID... Long noncoding RNA(lncRNA)IDH1 antisense RNA 1(IDH1-AS1)is involved in the progression of multiple cancers,but its role in epithelial ovarian cancer(EOC)is unknown.Therefore,we investigated the expression levels of IDH1-AS1 in EOC cells and normal ovarian epithelial cells by quantitative real-time PCR(qPCR).We first evaluated the effects of IDH1-AS1 on the proliferation,migration,and invasion of EOC cells through cell counting kit-8,colony formation,EdU,transwell,wound-healing,and xenograft assays.We then explored the downstream targets of IDH1-AS1 and verified the results by a dual-luciferase reporter,qPCR,rescue experiments,and Western blotting.We found that the expression levels of IDH1-AS1 were lower in EOC cells than in normal ovarian epithelial cells.High IDH1-AS1 expression of EOC patients from the Gene Expression Profiling Interactive Analysis database indicated a favorable prognosis,because IDH1-AS1 inhibited cell proliferation and xenograft tumor growth of EOC.IDH1-AS1 sponged miR-518c-5p whose overexpression promoted EOC cell proliferation.The miR-518c-5p mimic also reversed the proliferation-inhibiting effect induced by IDH1-AS1 overexpression.Furthermore,we found that RNA binding motif protein 47(RBM47)was the downstream target of miR-518c-5p,that upregulation of RBM47 inhibited EOC cell proliferation,and that RBM47 overexpressing plasmid counteracted the proliferation-promoting effect caused by the IDH1-AS1 knockdown.Taken together,IDH1-AS1 may suppress EOC cell proliferation and tumor growth via the miR-518c-5p/RBM47 axis. 展开更多
关键词 lncRNA IDH1-AS1 epithelial ovarian cancer mir-518c-5p RBM47
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miR-29c-5p通过上调LRP6调控铁死亡减轻脑梗死缺血再灌注损伤
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作者 甄文剑 郝进敏 +1 位作者 苏建龙 孙宇婷 《河北医学》 CAS 2024年第5期738-744,共7页
目的:探究miR-29c-5p在脑缺血-再灌注损伤中调控铁死亡的机制。方法:在这项研究中,雄性SD大鼠接受大脑中动脉闭塞(MCAO)手术,随后恢复血液流动。采用神经功能评分和TTC染色来评估脑组织损伤和梗死体积。采用qPCR方法检测miR-29c-5p的相... 目的:探究miR-29c-5p在脑缺血-再灌注损伤中调控铁死亡的机制。方法:在这项研究中,雄性SD大鼠接受大脑中动脉闭塞(MCAO)手术,随后恢复血液流动。采用神经功能评分和TTC染色来评估脑组织损伤和梗死体积。采用qPCR方法检测miR-29c-5p的相对表达水平。通过Western Blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)的表达水平。采用相应的检测试剂盒检测GSH、Fe和丙二醛(MDA)的含量,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-29c-5p的靶基因。结果:随着大鼠缺血再灌注时间的增加,miR-29c-5p的相对表达水平升高,铁死亡加重。此外,agomiR-29c-5p干预也加重了脑组织损伤和铁死亡,而antagomiR-29c-5p干预则使这些影响得到逆转。此外,agomiR-29c-5p和Fer-1联合干预可减轻脑组织损伤和铁死亡。双荧光素酶报告基因实验结果表明,LRP6是miR-29c-5p的靶基因。结论:在本研究中,miR-29c-5p通过负调控LRP6促进铁死亡进而加重大鼠脑缺血-再灌注损伤。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 mir-29c-5p 铁死亡 LRp6
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miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响
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作者 许文方 黄官友 +2 位作者 杨朝 徐文杰 赵孝梅 《解剖学研究》 CAS 2024年第2期103-109,131,共8页
目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧... 目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p mimics)、NC-mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-mimics)、miR-30c-5p inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p inhibitor)、NC-inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-inhibitor)。qRT-PCR检测各组细胞miR-30c-5p表达;Transwell小室检测细胞侵袭数目;划痕试剂盒检测细胞划痕愈合率;相关试剂盒检测ROS水平;免疫印记检测PEG10、Parkin、PINK1蛋白水平。结果空白组、低氧组、miR-30c-5p mimics组、NC-mimics组、miR-30c-5p inhibitor组及NC-inhibitor组的miR-30c-5p表达分别为1.00±0.00、1.00±0.00、1.61±0.15、1.03±0.13、0.75±0.08及0.96±0.10,差异有统计学意义(F=45.750,P<0.05);与空白组相比,低氧组HTR-8/SVneo细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧组与NC-mimics组、NC-inhibitor组比较上述指标,差异均无统计学意义(P>0.05);与低氧组相比,miR-30c-5p mimics组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05),miR-30c-5p inhibitor组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1升高,ROS降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-30c-5p可加快低氧状态下的人绒毛滋养层细胞侵袭及迁移,并通过促进线粒体自噬降低ROS表达,机制与抑制PEG10水平相关。 展开更多
关键词 人绒毛滋养层细胞 线粒体自噬 mir-30c-5p 间充质转化 父系表达基因10
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MiR-199b-3p、miR-373、miR-548c-3p及Lin28在肺癌中表达及其意义 被引量:4
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作者 刘敏 张若冰 +3 位作者 杨凯云 尚莉 平妮娜 何越峰 《云南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第6期553-557,共5页
探讨miR-199b-3p、miR-373、miR-548c-3p与Lin28在肺癌中的表达,以及它们与临床指标的相关关系.用溶液法提取46例肺癌患者的癌组织和癌旁组织中的总RNA,Q-PCR检测基因的相对表达量.经过两独立样本t检验,比较miR-373(t=3.28,P=0.0007)、l... 探讨miR-199b-3p、miR-373、miR-548c-3p与Lin28在肺癌中的表达,以及它们与临床指标的相关关系.用溶液法提取46例肺癌患者的癌组织和癌旁组织中的总RNA,Q-PCR检测基因的相对表达量.经过两独立样本t检验,比较miR-373(t=3.28,P=0.0007)、lin28(t=3.94,P=0.0016)及miR-548c-3p(t=2.98,P=0.002)在肺癌组织和癌旁组织中的表达,基因表达均有显著性差异.使用Spearman肺癌组织中RNA与免疫组织化学指标发现MiR-b199b-3p与MRP(Rs=0.40,P=0.029),miR-548c-3p和Ki167呈正相关关系(Rs=0.52,P=0.0056),miR-373与K167呈正相关关系(Rs=0.43,P=0.029),Lin28与P53呈负相关关系(Rs=-0.43,P=0.022),还与PGP呈负相关关系(Rs=-0.38,P=0.034).miR-373在肺癌患者组织中基因表达显著下调,而miR-548c-3p与Lin28基因表达呈上调,3个基因的表达与肿瘤的发生发展关系密切. 展开更多
关键词 肺癌 mir-199b-3p mir-373 mir-548c-3p Lin28
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circ_0005230通过靶向miR-548c-3p影响胆管癌细胞增殖和凋亡的机制 被引量:2
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作者 蒋洋 夏旭良 刘伟 《中国现代普通外科进展》 CAS 2022年第3期180-185,共6页
目的:探讨环状RNA(circRNA)circ_0005230对miR-548c-3p的靶向调控和对胆管癌细胞增殖和凋亡的作用与机制。方法:实时定量PCR(qPCR)检测胆管癌组织中circ_0005230和miR-548c-3p表达。将人胆管癌细胞RBE分为si-NC组、si-circ_0005230组、p... 目的:探讨环状RNA(circRNA)circ_0005230对miR-548c-3p的靶向调控和对胆管癌细胞增殖和凋亡的作用与机制。方法:实时定量PCR(qPCR)检测胆管癌组织中circ_0005230和miR-548c-3p表达。将人胆管癌细胞RBE分为si-NC组、si-circ_0005230组、pcDNA-NC组、pcDNA-circ_0005230组、miR-NC组、miR-548c-3p组、si-circ_0005230+anti-miR-NC组、si-circ_0005230+anti-miR-548c-3p组,分别通过Lipofectamine 2000转染si-NC、si-circ_0005230、pcDNA-NC、pcDNA-circ_0005230、miR-NC、miR-548c-3p mimic、si-circ_0005230和anti-miR-NC、si-circ_0005230和miR-548c-3p inhibitor。以CCK-8法、克隆形成实验、免疫印迹实验(Western blot)和流式细胞术分别进行细胞的增殖、克隆形成、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)表达及细胞凋亡测定。双荧光素酶报告实验分析circ_0005230与miR-548c-3p靶向关系。结果:30例胆管癌组织中circ_0005230表达量高于癌旁组织,miR-548c-3p表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。si-circ_0005230组或miR-548c-3p组RBE细胞的活性、克隆形成数、增殖蛋白CyclinD1和p21表达量减少,凋亡蛋白Caspase-3、Bax表达量和凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。circ_0005230靶向调控miR-548c-3p的表达。pcDNA-circ_0005230组比pcDNA-NC组降低miR-548c-3p表达量,si-circ_0005230组较si-NC组提高miR-548c-3p表达量,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-circ_0005230+anti-miR-NC组比较,si-circ_0005230+anti-miR-548c-3p组RBE细胞的活性、克隆形成数、增殖蛋白CyclinD1和p21表达量升高,凋亡蛋白Caspase-3、Bax表达量和凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:circ_0005230在胆管癌组织中高表达,抑制circ_0005230表达通过靶向miR-548c-3p减弱胆管癌细胞的增殖和诱导其凋亡。 展开更多
关键词 circ_0005230 mir-548c-3p 胆管癌 增殖 凋亡
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miR-30 c-5p在肿瘤中表达和功能的研究进展 被引量:6
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作者 杨晓冬 陈力 +4 位作者 金玉麟 王琳 詹成 时雨 王群 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期362-367,共6页
miR-30 c-5p是miR-30家族的重要成员,研究表明其在肺癌、乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜癌等多种肿瘤组织以及患者血浆、血清中表达异常,并且其作用于肿瘤的增殖、侵袭和迁移以及多种肿瘤相关基因和通路等,暗示其在肿瘤诊断、治疗、监测和... miR-30 c-5p是miR-30家族的重要成员,研究表明其在肺癌、乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜癌等多种肿瘤组织以及患者血浆、血清中表达异常,并且其作用于肿瘤的增殖、侵袭和迁移以及多种肿瘤相关基因和通路等,暗示其在肿瘤诊断、治疗、监测和预后预测等方面有一定的应用价值。本文就miR-30 c-5p在肿瘤中表达和功能的研究进展进行简要综述。 展开更多
关键词 mir-30 c-5p 肿瘤 上皮间质内转化 耐药
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hsa_circ_0000069通过靶向miR-548c-3p调控胃癌细胞增殖、细胞周期和凋亡
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作者 王贵军 于天宇 邓蓓蓓 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第19期4837-4842,共6页
目的 研究hsa_circ_0000069靶向miR-548c-3p在胃癌进展中的功能。方法 RT-qPCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞(SNU-1、AGS、HS-746T)、人正常胃黏膜上皮细胞GES1中hsa_circ_0000069、miR-548c-3p表达情况。将SNU-1细胞分为对照(NC)组... 目的 研究hsa_circ_0000069靶向miR-548c-3p在胃癌进展中的功能。方法 RT-qPCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞(SNU-1、AGS、HS-746T)、人正常胃黏膜上皮细胞GES1中hsa_circ_0000069、miR-548c-3p表达情况。将SNU-1细胞分为对照(NC)组、si-NC组、si-hsa_circ_0000069组、miR-NC组、miR-548c-3p组、pcDNA组、pcDNA-hsa_circ_0000069组、si-hsa_circ_0000069+anti-miR-NC组、si-hsa_circ_0000069+anti-miR-548c-3p组。流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布;CCK-8法分析细胞活力。hsa_circ_0000069和miR-548c-3p的靶向关系通过双荧光素酶报告实验来验证。结果 胃癌组织中hsa_circ_0000069表达水平显著高于癌旁组织,miR-548c-3p表达水平显著低于癌旁组织(均P<0.05)。SNU-1、AGS、HS-746T细胞中hsa_circ_0000069表达水平显著高于GES1细胞,miR-548c-3p表达水平显著低于GES1细胞(均P<0.05)。与NC组比较,si-hsa_circ_0000069组SNU-1细胞miR-548c-3p表达水平、凋亡率、G0/G1期比例显著升高,细胞活力、S期比例显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-548c-3p组SNU-1细胞凋亡率、G0/G1期比例显著升高,细胞活力、S期比例显著降低(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-hsa_circ_0000069组SNU-1细胞miR-548c-3p表达水平显著降低(均P<0.05)。与si-hsa_circ_0000069+anti-miR-NC组比较,si-hsa_circ_0000069+anti-miR-548c-3p组SNU-1细胞凋亡率、G0/G1期比例显著降低,细胞活力、S期比例显著升高(均P<0.05)。结论 干扰hsa_circ_0000069通过靶向miR-548c-3p诱导胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖和周期进展。 展开更多
关键词 胃癌 hsa_circ_0000069 mir-548c-3p 细胞增殖 周期分布 凋亡
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LINC00707靶向miR-30c-5p对ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症因子的影响 被引量:1
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作者 林云钗 王航 周强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1829-1835,共7页
目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、mi... 目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-30c-5p mimic分别转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞,si-LINC00707和anti-miR-NC、si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor分别共转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞;qRT-PCR法检测LINC00707、miR-30c-5p的表达量;CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖及迁移;ELISA法检测IL-6、TNF-α、IL-10的水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00707与miR-30c-5p的靶向关系;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果ox-LDL诱导的HVSMCs中LINC00707的表达量升高(P<0.05),miR-30c-5p的表达量降低(P<0.05);转染si-LINC00707或miR-30c-5p mimic后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),迁移细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平升高(P<0.05);LINC00707可靶向结合miR-30c-5p;共转染si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),迁移细胞数增多(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平降低(P<0.05)。结论下调LINC00707导致miR-30c-5p表达升高从而抑制ox-LDL诱导的HVSMCs增殖、迁移及炎症反应。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 人血管平滑肌细胞 LINC00707 mir-30c-5p 细胞增殖 迁移
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CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛患者冠状动脉病变严重程度关系 被引量:1
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作者 黄玉冰 廖旺 +1 位作者 王苗 王裕岱 《河北医学》 CAS 2020年第8期1255-1259,共5页
目的:探讨C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛(SAP)患者冠状动脉病变严重程度的关系。方法:回顾性分析2016年5月至2019年5月间医院收治的经冠状动脉造影(CAG)证实的90例... 目的:探讨C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛(SAP)患者冠状动脉病变严重程度的关系。方法:回顾性分析2016年5月至2019年5月间医院收治的经冠状动脉造影(CAG)证实的90例SAP患者的临床资料,根据SYNTAX评分分为轻度组(0~22分,41例)、中度组(23~32分,32例)、重度组(≥33分,17例)。收集三组患者的临床资料,采血检测三组患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平,三组患者的冠状动脉病变严重程度用SYNTAX评分评估,用Pearson相关性分析CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平与SYNTAX评分的关系。结果:三组患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX评分比较,差异均具有统计学意义(P均<0.05),两两对比LSD-t检验,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,CRP、cTnT、TSLP与SYNTAX评分均呈显著正相关(P<0.01),而miR-30c-5p与SYNTAX评分呈显著负相关(P<0.01)。结论:CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛患者冠状动脉病变严重程度存在相关性,早期检测以上生物学标志物有助于判断稳定性心绞痛患者的冠状动脉病变严重程度。 展开更多
关键词 C反应蛋白 心肌肌钙蛋白T 胸腺基质淋巴细胞生成素 mir-30c-5p 稳定型心绞痛 冠状动脉病变严重程度
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丙戊酸钠通过激活miR-34c-5p/ATG4B信号通路抑制SH-SY5Y细胞自噬 被引量:1
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作者 戴旭芳 闫小晶 +1 位作者 谢鹏 连继勤 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1415-1420,共6页
目的探讨丙戊酸钠(VPA)对SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p/ATG4B信号通路的激活作用及对自噬的影响。方法人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y用含10%胎牛血清的DMEM培养基常规培养,然后使用不同剂量VPA处理SH-SY5Y细胞24 h,采用定量PCR分析VPA处理对ATG... 目的探讨丙戊酸钠(VPA)对SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p/ATG4B信号通路的激活作用及对自噬的影响。方法人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y用含10%胎牛血清的DMEM培养基常规培养,然后使用不同剂量VPA处理SH-SY5Y细胞24 h,采用定量PCR分析VPA处理对ATG4B m RNA与miR-34c-5p表达的影响,免疫印迹法分析VPA处理对ATG4B蛋白表达的影响,将含ATG4B启动子片段的报告质粒转染SH-SY5Y细胞,然后通过荧光素酶报告基因系统分析VPA处理对ATG4B启动子活性的影响,用VPA单独或联合转录抑制剂放线菌素D分别处理SH-SY5Y细胞不同时间,定量PCR分析检测不同处理对ATG4B mRNA稳定性的影响,用VPA单独或联合miR-34c-5p抑制剂处理细胞24 h,通过检测不同处理对ATG4B表达变化的影响,进而判断miR-34c-5p在VPA下调ATG4B表达中的作用,同时通过Western blot检测不同处理对LC3-II表达的影响,分析细胞自噬水平变化。结果 VPA可剂量依赖性降低SH-SY5Y细胞中ATG4B的mRNA和蛋白水平(P<0.05)。VPA处理不影响SHSY5Y细胞中ATG4B的启动子活性(P>0.05),但显著下调其mRNA的稳定性(P<0.05)。同时,VPA处理明显增强SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p的表达水平(P<0.05)。使用miR-34c-5p抑制剂与VPA联合处理SH-SY5Y细胞,可逆转VPA对ATG4B表达的下调作用。VPA处理还下调了SH-SY5Y细胞中LC3-II的表达水平(P<0.05)。结论 VPA可能通过激活miR-34c-5p/ATG4B信号通路而抑制SH-SY5Y细胞自噬。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 ATG4B mir-34c-5p 自噬
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妊娠期糖尿病视网膜病变患者血清miR-200c-3p、 miR-20b-5p表达水平及检测临床意义
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作者 李威威 杨倩 +6 位作者 常瑚 宋森 李世强 程亚辉 岳钟 冯丽 肖博文 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第8期1076-1080,共5页
目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20... 目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平进行测定,采用全自动生化分析仪对受试者低密度脂胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)进行测定,采用血糖检测仪对受试者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)进行测定。结果:GDM组、DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于对照组(均P<0.05);DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于GDM组(均P<0.05);随着病情严重程度的增加,DR组患者miR-200c-3p、miR-20b-5p水平显著升高(均P<0.05);预后不良组DR患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于预后良好组(均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高为DR患者发生预后不良的危险因素;ROC曲线结果显示,血清miR-200c-3p、miR-20b-5p、两者联合诊断DR患者不良预后曲线下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.843~0.974)、0.848(95%CI:0.746~0.920)、0.985(95%CI:0.924~0.999)。结论:DR患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高,对DR不良预后具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病视网膜病变 mir-200c-3p mir-20b-5p 表达水平 预后 诊断
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CircRNA EZH2通过调控miR-30c-5p促进前列腺癌细胞增殖和迁移
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作者 赵斌 段元鹏 +6 位作者 张国颖 毕城伟 杨李波 施致裕 杨勇 张建朋 高婷 《昆明医科大学学报》 CAS 2022年第7期25-32,共8页
目的探究circRNA EZH2通过调控miR-30c-5p对前列腺癌细胞的增殖和迁移的影响及其相关作用机制。方法通过TCGA数据库分析circRNA EZH2在前列腺癌组织中的表达差异及生存曲线;转染siRNA敲降前列腺癌LNCaP细胞中的circRNA EZH2表达后,CCK-... 目的探究circRNA EZH2通过调控miR-30c-5p对前列腺癌细胞的增殖和迁移的影响及其相关作用机制。方法通过TCGA数据库分析circRNA EZH2在前列腺癌组织中的表达差异及生存曲线;转染siRNA敲降前列腺癌LNCaP细胞中的circRNA EZH2表达后,CCK-8实验和划痕实验观察LNCaP细胞增殖和迁移,RT-qPCR和Western blot法测定miR-30c-5p、JAK1和PI3K蛋白的表达。结果在前列腺癌组织中circRNA EZH2的表达显著上调(P<0.0001),且高表达circRNA EZH2的患者生存率降低;沉默circRNA EZH2的LNCaP细胞较正常LNCaP细胞的增殖和迁移能力下降(P<0.0001),miR-30c-5p表达增高(P<0.0001),JAK1表达降低(P<0.0001),PI3K信号受抑制。结论EZH2在前列腺癌中高表达,通过调控miR-30c-5p激活PI3K信号通路促进前列腺癌LNCaP细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 前列腺癌 环状RNA-EZH2 mir-30c-5p 增殖 迁移
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