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miR-92b-3p抑制物在阿尔兹海默病并发癫痫动物模型中的抗癫痫效应
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作者 陶华 吴郑娟 +2 位作者 张小璐 刘杨 周煦 《深圳中西医结合杂志》 2024年第11期4-7,I0002,I0003,共6页
目的:评估miR-92b-3p抑制物在阿尔兹海默病(AD)并发癫痫动物模型中的抗癫痫效应。方法:通过生物信息学方法和双荧光素酶实验筛选解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)的调控分子,采用实时定量聚合酶链反应和Western Blot评估miR-92b-3p和ADAM1... 目的:评估miR-92b-3p抑制物在阿尔兹海默病(AD)并发癫痫动物模型中的抗癫痫效应。方法:通过生物信息学方法和双荧光素酶实验筛选解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)的调控分子,采用实时定量聚合酶链反应和Western Blot评估miR-92b-3p和ADAM10在神经元细胞和AD并发癫痫动物模型中的表达水平,经鼻腔给药方法给予miR-92b-3p的抑制物,评估其在AD并发癫痫动物模型中的抗癫痫效应。结果:通过生物信息学方法,双荧光素酶实验,Western Blot条带及其灰度分析,确认miR-92b-3p可转录后调控ADAM10,且在神经元细胞中对ADAM10调控作用较强。与AD动物模型组相比,miR-92b-3p在AD并发癫痫动物模型(AD+EP)组中显著上调。与AD+EP组相比,经鼻腔给予miR-92b-3p抑制物的治疗组癫痫发生率,Racine 4级以上发生率均显著减少。Racine 4级以上发作的潜伏期显著延长。结论:本研究初步证实miR-92b-3p抑制物在AD并发癫痫动物模型中具有抗癫痫效应。 展开更多
关键词 阿尔兹海默病 癫痫 MIRNAS mir-92b-3p 抑制物
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miR-92b-3p在禽流感病毒感染与非感染鸭中的表达差异 被引量:2
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作者 丛立新 宿甲子 +3 位作者 孟继伦 邢沈阳 张金玉 赵志辉 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期5-8,共4页
采用荧光定量PCR方法检测miR-92b-3p在感染与非感染H5N1亚型禽流感病毒状态下SPF鸭不同组织中的相对表达情况。以筛选到在SPF鸭非感染和感染H5N1亚型禽流感病毒状态下差异microRNA的miR-92b-3p。结果表明:miR-92b-3p在感染与非感染鸭的... 采用荧光定量PCR方法检测miR-92b-3p在感染与非感染H5N1亚型禽流感病毒状态下SPF鸭不同组织中的相对表达情况。以筛选到在SPF鸭非感染和感染H5N1亚型禽流感病毒状态下差异microRNA的miR-92b-3p。结果表明:miR-92b-3p在感染与非感染鸭的不同组织中均能检测到表达。在非感染鸭的脾脏中相对表达量最高,感染禽流感病毒后在肺脏中的相对表达量最高;感染禽流感病毒后的SPF鸭与对照组SPF鸭相同组织间的相对比较分析显示,miR-92b-3p在感染病毒鸭的肾脏、气管、肺脏、肝脏和心脏中的表达量均高于SPF鸭的相同组织中的表达量。探明在病毒感染状态下miR-92b-3p对水禽的作用机制,为进一步研究miR-92b-3p预防禽流感病毒感染宿主中的作用提供参考。 展开更多
关键词 SpF鸭 mir-92b-3p 禽流感病毒
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miR-92b-3p促进人脐带间充质干细胞的成骨分化 被引量:3
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作者 张燕 严冰浩 +3 位作者 徐辰 顾道兰 王越 刘厚奇 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第5期598-603,共6页
目的探究miR-92b-3p在人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)成骨分化过程中的作用及其作用机制。方法通过转染h UCMSCs过表达或抑制miR-92b-3p,qRT-PCR检测各组成骨相关基因OCN、RUNX2、OSTERIX mRNA表达以明确miR-92b-3p对h UCMSCs成骨分化的... 目的探究miR-92b-3p在人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)成骨分化过程中的作用及其作用机制。方法通过转染h UCMSCs过表达或抑制miR-92b-3p,qRT-PCR检测各组成骨相关基因OCN、RUNX2、OSTERIX mRNA表达以明确miR-92b-3p对h UCMSCs成骨分化的体外调控作用,用茜素红染色比较各处理组的骨化能力。通过生物信息学分析miR-92b-3p可能的靶基因,并通过双荧光素酶基因报告系统以及Western blot验证。结果 miR-92b-3p在h UCMSCs成骨过程中表达量较对照组明显升高(P<0.05);过表达miR-92b-3p能促进h UCMSCs体外成骨分化及体内的异位成骨能力(P<0.05);而抑制miR-92b-3p则能降低h UCMSCs体外成骨分化(P<0.05)。过表达miR-92b-3p能显著降低DKK1的表达量(P<0.05),抑制则能明显提高DKK1的表达(P<0.05)。结论 miR-92b-3p可通过抑制DKK1表达,促进h UCMSCs成骨分化。 展开更多
关键词 mir-92b-3p 人脐带间充质干细胞(hUCMSCs) 成骨分化 DKK1
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MiR-92b-3p通过靶向RAD21增强非小细胞肺癌对顺铂的化学敏感性 被引量:4
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作者 潘有光 傅文凡 +2 位作者 莫益俊 赵健 陈岗东 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第14期1897-1902,共6页
目的检测miR-92b-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株A549及其顺铂耐药株A549/DDP中的表达,探讨其在顺铂耐药中的作用机制。方法应用实时定量反转录聚合酶联反应(qPCR)检测miR-92b-3p在A549/DDP及A549中的表达;C... 目的检测miR-92b-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株A549及其顺铂耐药株A549/DDP中的表达,探讨其在顺铂耐药中的作用机制。方法应用实时定量反转录聚合酶联反应(qPCR)检测miR-92b-3p在A549/DDP及A549中的表达;CCK8法分别检测各细胞株转染miR-92b-3p mimics或inhibitor后对DDP敏感度的改变;生物信息学预测及双荧光素酶报告基因验证miR-92b-3p和靶基因的关系。qPCR和Western Blot检测RAD21基因及蛋白的表达。结果 miR-92b-3p在A549/DDP细胞株中呈现低表达(P <0.05),miR-92b-3p mimics转染A549/DDP细胞株后,DDP对转染细胞株的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)显著低于阴性对照组(P <0.05);同时该细胞株的RAD21的mRNA及蛋白表达水平明显低于阴性对照组(P <0.05)。反之,在A549细胞株中转染miR-92b-3p inhibitor后,得出相反的结论。结论 miR-92b-3p在A549/DDP细胞株低表达,其通过调控RAD21 mRNA及蛋白的表达而逆转A549/DDP细胞对DDP的耐药。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mir-92b-3p 化疗耐药 顺铂 RAD21
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miR-92b-3p/USF2/DNA损伤轴调节葡萄膜黑色素瘤增殖和侵袭 被引量:1
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作者 郝雅楠 陈妍鹏 +2 位作者 仝真真 袁沣 赵晓敏 《局解手术学杂志》 2022年第11期949-957,共9页
目的探讨miR-92b-3p对葡萄膜黑色素瘤(UM)增殖和侵袭的影响。方法将UM细胞(OCM-1A和MUM-213)分成Vector组、USF2组、miR-NC组、miR-92b-3p组和miR-92b-3p+USF2组。生物信息学分析USF2和miR-92b-3p在UM细胞中的表达,USF2和miR-92b-3p差... 目的探讨miR-92b-3p对葡萄膜黑色素瘤(UM)增殖和侵袭的影响。方法将UM细胞(OCM-1A和MUM-213)分成Vector组、USF2组、miR-NC组、miR-92b-3p组和miR-92b-3p+USF2组。生物信息学分析USF2和miR-92b-3p在UM细胞中的表达,USF2和miR-92b-3p差异表达与UM临床恶性表型的关系,并预测两者之间的靶向关系。RT-PCR检测miR-92b-3p在APRE-19、OCM-1A和MUM-213细胞中的表达。CCK-8检测细胞增殖能力。细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力。乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH活性。裸鼠移植瘤实验检测瘤体重量、体积。免疫组化染色检测肿瘤组织中USF2表达。Western blot实验检测USF2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和增殖相关抗原Ki67蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-92b-3p和USF2的靶标关系。结果USF2在UM细胞中低表达,miR-92b-3p在UM细胞中高表达,且均与UM临床恶性表型有关,USF2可能促进DNA损伤。USF2过表达抑制UM细胞增殖、侵袭,增加LDH活性,上调Bax蛋白表达,下调Ki67和Bcl-2蛋白表达。上调USF2表达抑制裸鼠移植瘤生长。数据库StarBase v2预测和双荧光素酶报告基因实验证实USF2是miR-92b-3p的作用靶点。不同浓度H_(2)O_(2)对MUM-213和OCM-1A细胞增殖具有抑制作用,与Vector组相比,H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+USF2组磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)蛋白表达增加,H_(2)O_(2)+USF2组γH2AX蛋白表达高于H_(2)O_(2)组(P<0.05)。不同浓度的司美替尼处理细胞后,UM细胞活性逐渐下降,USF2组细胞活性下降幅度大于Vector组(P<0.05)。miR-92b-3p靶向结合USF2抑制UM细胞增殖和侵袭。结论miR-92b-3p可能通过调控USF2/DNA损伤轴抑制UM细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 mir-92b-3p 上游刺激因子2 DNA 葡萄膜黑色素瘤
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miR-92b-3p靶向GDF11调控骨髓间充质干细胞
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作者 牟朋林 麦彩园 王斌 《医学理论与实践》 2022年第14期2350-2352,2355,共4页
目的:探讨miR-92b-3p在骨质疏松(OP)中靶向GDF11对骨髓间充质干细胞(BMSCs)调控的分子机制。方法:购买10只糖尿病OP大鼠,抽取骨髓组织4ml,构建BMSCs细胞模型,成骨诱导分化,qPCR法检测miR-92b-3p的表达。荧光素酶报告基因系统测定miR-92b... 目的:探讨miR-92b-3p在骨质疏松(OP)中靶向GDF11对骨髓间充质干细胞(BMSCs)调控的分子机制。方法:购买10只糖尿病OP大鼠,抽取骨髓组织4ml,构建BMSCs细胞模型,成骨诱导分化,qPCR法检测miR-92b-3p的表达。荧光素酶报告基因系统测定miR-92b-3p的结合位点GDF11。构建miR-92b-3p的过表达载体,过表达转染BMSCs,更换成骨诱导基,培养。于第7、14、21天收集细胞行碱性磷酸酯酶(ALP)、茜素红染色。于第7天,qPCR检测BMSCs中Runx2、GDF11的表达。结果:(1)模拟物过表达转染后miR-92b-3p水平显著上升。(2)随着时间延长,ALP水平逐渐增加,茜素红染色结节沉积逐增多。(3)第7天,BMSC+成骨分化液组显著升高,BMSC+过表达miR-92b-3p组显著上升;BMSC+成骨分化液组的GDF11表达显著下降,BMSC+过表达miR-92b-3p组的GDF11表达显著下降。(4)双荧光素酶报告基因可以证实miR-92b-3p结合GDF11。结论:miR-92b-3p可通过GDF11调节BMSCs的成骨分化进而参与OP的形成。 展开更多
关键词 糖尿病骨质疏松 mir-92b-3p GDF11 骨髓间充质干细胞
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miR-92b-3p靶向肌细胞增强子2D抑制心肌细胞肥大 被引量:3
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作者 胡志琴 朱杰宁 +5 位作者 杨静 林秋雄 符永恒 张梦珍 吴书林 单志新 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期820-826,877,共8页
【目的】探讨微小RNAmicroRNA-92b-3p(mi R-92b-3p)对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因。【方法】建立血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导的C57BL/6小鼠心肌肥厚模型。通过尾静脉注射胆固醇修饰的mi R-92b-3p模拟物(agomi R-92b-3p)来增加... 【目的】探讨微小RNAmicroRNA-92b-3p(mi R-92b-3p)对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因。【方法】建立血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导的C57BL/6小鼠心肌肥厚模型。通过尾静脉注射胆固醇修饰的mi R-92b-3p模拟物(agomi R-92b-3p)来增加小鼠心肌中mi R-92b-3p水平,分别设立3个实验组:agomi R-negative control(agomi R-NC)+saline组,agomi RNC+Ang-Ⅱ组,agomi R-92b-3p+Ang-Ⅱ组。用Ang-Ⅱ诱导乳小鼠心肌细胞建立心肌细胞肥大模型;双荧光素酶报告基因实验检测mi R-92b-3p与潜在靶基因MEF2D 3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用;蛋白印迹法检测MEF2D及肥厚相关蛋白的表达。【结果】(1)Ang-II诱导的小鼠肥厚心肌和肥大心肌细胞分别与对照组中心肌肥厚相关基因ANP、ACTA1和β-MHC水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)双荧光素酶报告基因实验结果提示mi R-92b-3p与MEF2D 3′UTR具有相互结合作用;mi R-92b-3p可在转录后水平抑制MEF2D的表达;升高mi R-92b-3p或降低MEF2D水平能一致性地抑制Ang-II诱导的乳小鼠心肌细胞肥大表型。【结论】MEF2D是mi R-92b-3p的靶基因,并介导了mi R-92b-3p发挥抑制心肌细胞肥大的作用。 展开更多
关键词 心肌肥厚 microRNA-92b-3p MEF2D
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结直肠癌组织中miR-92b-3p、FBXW7的表达变化及临床意义 被引量:1
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作者 张文天 刘杰 杜锦波 《山东医药》 CAS 2020年第25期69-72,共4页
目的观察微小RNA(miRNA)-92b-3p和F框/WD40域蛋白(FBXW7)在结直肠癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法回顾性分析153例结直肠癌患者的病理和临床资料,采用实时荧光定量PCR技术检测结直肠癌组织及其癌旁正常组织中的miR-92b-3p、F... 目的观察微小RNA(miRNA)-92b-3p和F框/WD40域蛋白(FBXW7)在结直肠癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法回顾性分析153例结直肠癌患者的病理和临床资料,采用实时荧光定量PCR技术检测结直肠癌组织及其癌旁正常组织中的miR-92b-3p、FBXW7,分析miR-92b-3p、FBXW7表达与结直肠癌临床病理参数的关系,采用Pearson相关分析结直肠癌组织中miR-92b-3p和FBXW7表达的相关性。结果与癌旁正常组织相比,结直肠癌组织中miR-92b-3p的相对表达量高,FBXW7的相对表达量低(P均<0.01)。结直肠癌组织中miR-92b-3p和FBXW7的表达均与临床分期、淋巴结转移及分化程度有关(P均<0.05)。结直肠癌组织中miR-92b-3p和FBXW7的表达呈负相关(r=-0.751,P=0.000)。结论结直肠癌组织中miR-92b-3p表达升高,FBXW7表达降低,二者均与临床分期、淋巴结转移以及分化程度有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 微小RNA-92b-3p FBXW7基因
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能谱增强CT联合血清miR-92b-3p、AFF3在胃癌淋巴结转移及预后中的预测价值
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作者 李嵘 许园晨 李琰 《中国CT和MRI杂志》 2024年第11期131-134,共4页
目的探究能谱增强CT联合血清miR-92b3p、AFF3在胃癌患者淋巴结转移及预后中的预测价值。方法选取2021年4月至2022年4月来我院治疗的120例确诊的胃癌患者为研究对象,根据是否发生淋巴结转移分为转移组(48例)和未转移组(72例),根据预后生... 目的探究能谱增强CT联合血清miR-92b3p、AFF3在胃癌患者淋巴结转移及预后中的预测价值。方法选取2021年4月至2022年4月来我院治疗的120例确诊的胃癌患者为研究对象,根据是否发生淋巴结转移分为转移组(48例)和未转移组(72例),根据预后生存情况分为死亡组(43例)和生存组(77例)。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR92b-3p、AFF3水平对胃癌患者发生淋巴结转移及预后的预测价值;四格表法分析能谱增强CT联合血清miR-92b-3p、AFF3水平对胃癌患者发生淋巴结转移及预后的预测价值。结果转移组血清miR92b-3p显著高于未转移组(P<0.05),AFF3水平显著低于未转移组(P<0.05);死亡组血清miR-92b-3p显著高于生存组(P<0.05),AFF3水平显著低于生存组(P<0.05);三者联合预测胃癌患者发生淋巴结转移的敏感性为95.83%,特异性为70.83%,准确率为80.83%。三者联合预测的敏感性显著高于三者单独预测(P<0.05),特异性显著低于miR-92b-3p单独预测(P<0.05),准确率显著高于能谱增强CT单独预测(P<0.05);三者联合预测胃癌患者发生死亡的敏感性为69.77%,特异性为88.31%,准确率为81.67%。三者联合预测的敏感性显著低于能谱增强CT单独预测(P<0.05),特异性显著高于miR-92b3p、AFF3、能谱增强CT单独预测(P<0.05),准确率显著高于miR-92b-3p、AFF3单独预测(P<0.05)。结论胃癌淋巴结转移及死亡患者血清miR-92b-3p水平上调,AFF3水平下调,能谱增强CT联合血清miR92b-3p,AFF3对胃癌患者发生淋巴结转移及预后有较高的预测效能。 展开更多
关键词 胃癌 mir-92b-3p AFF3 能谱增强CT 淋巴结转移 预后
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帕纳替尼调控miR-92b-3p对胆管癌恶性生物学行为的影响
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作者 邱实 杜杰 +3 位作者 罗刚 林一煌 张子强 江帆 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第19期2847-2852,共6页
目的研究帕纳替尼对胆管癌(CCA)的影响及分子作用机制。方法将QBC939细胞分为对照组(不做任何处理)、低剂量组(0.1μmol·L^(-1)帕纳替尼处理)、中剂量组(0.5μmol·L^(-1)帕纳替尼处理)、高剂量组(1.0μmol·L^(-1)帕纳替... 目的研究帕纳替尼对胆管癌(CCA)的影响及分子作用机制。方法将QBC939细胞分为对照组(不做任何处理)、低剂量组(0.1μmol·L^(-1)帕纳替尼处理)、中剂量组(0.5μmol·L^(-1)帕纳替尼处理)、高剂量组(1.0μmol·L^(-1)帕纳替尼处理)、高剂量+microRNA-92b-3组(1.0μmol·L^(-1)帕纳替尼处理后转染miR-92b-3p mimic)、高剂量+miR-92b-3p mimic+过表达同源结构域相互作用蛋白激酶3质粒(oe-HIPK3)组(1.0μmol·L^(-1)帕纳替尼处理后转染miR-92b-3p mimic和oe-HIPK3)、mimic-NC组(转染miR-92b-3p NC)、miR-92b-3p mimic组(转染miR-92b-3p mimic)。用细胞计数试剂盒8检测细胞的增殖情况,用Transwell实验法检测细胞迁移,用蛋白质印迹法检测蛋白相对表达水平。结果对照组、高剂量组、高剂量+miR-92b-3p mimic组、高剂量+miR-92b-3p mimic+oe-HIPK3组的细胞增殖率分别为(76.58±8.56)%、(61.85±7.77)%、(74.54±7.68)%和(58.63±6.87)%,细胞迁移数量分别为(185.32±20.14)、(132.33±18.99)、(168.23±19.85)和(138.66±15.95)个,磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)/PI3K比值分别为1.00±0.23、0.68±0.09、0.91±0.18和0.60±0.08,磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)/AKT比值分别为1.00±0.25、0.61±0.08、1.12±0.28和0.72±0.14;高剂量组的上述指标与对照组比较,高剂量+miR-92b-3p mimic组的上述指标与高剂量组比较,高剂量+miR-92b-3p mimic+oe-HIPK3组的上述指标与高剂量+miR-92b-3p mimic组比较,在统计学上差异均有统计学差异(均P<0.05)。结论帕纳替尼能有效抑制胆管癌的恶性生物学行为,可能与抑制miR-92b-3p水平,促进HIPK3介导的PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 帕纳替尼 非编码微小RNA-92b-3p 胆管癌 同源结构域相互作用蛋白激酶3 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路
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miR-519b-3p调控IL-6/STAT3通路对宫颈癌细胞凋亡、迁移、侵袭的影响 被引量:1
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作者 黄丽 龚豪 张春莲 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第1期56-59,90,共5页
目的探讨miR-519b-3p调控IL-6/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路对宫颈癌细胞(SiHa)凋亡、迁移、侵袭的影响。方法qRT-PCR检测miR-519b-3p在宫颈癌组织中的表达。SiHa细胞分为miR-NC组、miR-519b-3p组、miR-NC+RhIL-6组、miR-519b-3p... 目的探讨miR-519b-3p调控IL-6/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路对宫颈癌细胞(SiHa)凋亡、迁移、侵袭的影响。方法qRT-PCR检测miR-519b-3p在宫颈癌组织中的表达。SiHa细胞分为miR-NC组、miR-519b-3p组、miR-NC+RhIL-6组、miR-519b-3p+RhIL-6组。流式细胞术评估SiHa细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。Western blotting检测B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Bcl相关x蛋白(Bax)、STAT3和p-STAT3蛋白水平。结果与癌旁组织比较,宫颈癌组织miR-519b-3p表达下调(P<0.05)。SiHa细胞凋亡率、Bax和E-cadherin蛋白水平miR-519b-3p组高于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组低于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组低于miR-519b-3p组(P<0.05)。SiHa细胞迁移数、侵袭数、Bcl-2、N-cadherin、p-STAT3蛋白水平miR-519b-3p组低于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组高于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组高于miR-519b-3p组(P<0.05)。结论miR-519b-3p通过抑制IL-6/STAT3通路来抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭,并增加细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 mir-519b-3p 细胞凋亡 细胞迁移 细胞侵袭 IL-6/STAT3通路
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miR-15b-3p靶向CMTM6对胃癌细胞上皮-间充质转化的影响
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作者 郭晶 王迪 董石 《国际消化病杂志》 CAS 2024年第5期302-309,共8页
目的探讨miR-15b-3p靶向趋化素样因子超家族6(CMTM6)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法采用实时荧光定量PCR法检测人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、MKN-1及人正常胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-15b-3p和CMTM6表达水平。采用双荧光... 目的探讨miR-15b-3p靶向趋化素样因子超家族6(CMTM6)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法采用实时荧光定量PCR法检测人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、MKN-1及人正常胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-15b-3p和CMTM6表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-15b-3p和CMTM6的靶向关系。将BGC-823细胞随机分为对照组(不做处理)、miR-15b-3p抑制剂组(转染miR-15b-3p抑制剂)、miR-15b-3p抑制剂+shRNA-CMTM6组(转染miR-15b-3p抑制剂和shRNA-CMTM6)。分别采用MTT实验、细胞划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。采用蛋白质印迹法检测EMT相关蛋白表达水平。结果与GES-1细胞相比,SGC-7901、BGC-823和MKN-1细胞中miR-15b-3p和CMTM6 mRNA的相对表达量均显著升高(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,与miR-NC+CMTM6-WT组相比,miR-15b-3p抑制剂+CMTM6-WT组细胞的相对荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-15b-3p抑制剂组细胞中miR-15b-3p和CMTM6mRNA的相对表达量均显著降低(P均<0.05);与miR-15b-3p抑制剂组相比,miR-15b-3p抑制剂+shRNA-CMTM6组细胞中miR-15b-3p的相对表达量无显著变化(P>0.05),而CMTM6 mRNA的相对表达量显著降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-15b-3p抑制剂组的细胞增殖抑制率升高,细胞划痕愈合率降低,细胞侵袭数目减少,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均降低,E-cadherin蛋白表达水平升高,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。与miR-15b-3p抑制剂组相比,miR-15b-3p抑制剂+shRNA-CMTM6组的细胞增殖抑制率升高,细胞划痕愈合率降低,细胞侵袭数目减少,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均降低,E-cadherin蛋白表达水平升高,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论miR-15b-3p表达下调可通过靶向CMTM6而抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力及EMT进程。 展开更多
关键词 胃癌 mir-15b-3p 趋化素样因子超家族6 上皮-间充质转化 增殖 侵袭 迁移
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miR-19b-3p靶向IGF-1参与绒毛膜癌发生发展的机制研究
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作者 陈光元 李日红 邓闹 《中国现代药物应用》 2024年第11期176-180,共5页
目的探究miR-19b-3p靶向胰岛素样生长因子-1(IGF-1)参与绒毛膜癌增殖、侵袭和转移的机制。方法以人绒毛膜癌细胞系JEG-3为研究对象,A组:miR-19b-3p mimics组,B组:miR-19b-3p mimics NC组,C组:miR-19b-3p inhibitor组,D组:miR-19b-3p inh... 目的探究miR-19b-3p靶向胰岛素样生长因子-1(IGF-1)参与绒毛膜癌增殖、侵袭和转移的机制。方法以人绒毛膜癌细胞系JEG-3为研究对象,A组:miR-19b-3p mimics组,B组:miR-19b-3p mimics NC组,C组:miR-19b-3p inhibitor组,D组:miR-19b-3p inhibitor NC组,E组:空白对照组。A组、B组、C组、D组按照分组情况进行相应转染,E组不做任何处理。分别用Real-time PCR和Western blot检测五组miR-19b-3p RNA和IGF-1蛋白表达水平,采用CCK-8法测定细胞增殖,采用划痕实验和Transwell小室侵袭实验测定细胞迁移和侵袭能力,并进行比较;采用双荧光素酶(Dualluciferase)报告实验验证miR-19b-3p对IGF-1的靶向关系。结果与E组的(0.98±0.13)相比,A组miR-19b-3p mRNA表达水平(2.23±0.16)明显上调,C组miR-19b-3p mRNA表达水平(0.73±0.08)明显下调(P<0.05)。与E组的(1.03±0.03)nmol/L相比,A组IGF-1蛋白表达水平(1.48±0.12)nmol/L明显上调,C组IGF-1蛋白表达水平(0.76±0.05)nmol/L明显下调(P<0.05)。72 h时,与E组的(5.03±0.14)%相比,A组细胞增殖活力(10.34±0.87)%明显增加,C组细胞增殖活力(2.42±0.13)%明显下调(P<0.05);与E组的(1.09±0.07)mm相比,A组细胞划痕迁移距离(1.45±0.08)mm明显增加,C组细胞划痕迁移距离(0.73±0.07)mm明显减少(P<0.05)。与E组的(103.00±7.00)个相比,A组侵袭细胞数(173.00±4.00)个明显增加,C组侵袭细胞数(82.00±1.00)个明显减少(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示:miR-19b-3p转染WT-IGF-1的细胞荧光素酶活性(0.57±0.08)Kat低于miR-NC的(0.95±0.06)Kat(P<0.05);miR-19b-3p转染MUT-IGF-1的细胞荧光素酶活性(0.98±0.05)Kat与miR-NC的(0.96±0.06)Kat比较无明显差异(P>0.05)。结论miR-19b-3p靶向上调IGF-1促进绒毛膜癌JEG-3细胞增殖、侵袭、迁移。 展开更多
关键词 绒毛膜癌 mir-19b-3p 胰岛素样生长因子-1 增殖 侵袭
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miR-421和miR-196b-3p在胃癌癌前病变和早期胃癌诊断中的潜在价值 被引量:2
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作者 王文怡 余静恬 甘程 《检验医学与临床》 2024年第6期726-732,共7页
目的研究血浆miR-421和miR-196b-3p作为诊断胃癌癌前病变和早期胃癌新型潜在生物标志物的临床意义。方法(1)发现集:于2018年12月1日至12月31日采集早期胃癌患者(早期胃癌组)、癌前病变患者(癌前病变组)和健康志愿者(NC组)的血浆标本各3... 目的研究血浆miR-421和miR-196b-3p作为诊断胃癌癌前病变和早期胃癌新型潜在生物标志物的临床意义。方法(1)发现集:于2018年12月1日至12月31日采集早期胃癌患者(早期胃癌组)、癌前病变患者(癌前病变组)和健康志愿者(NC组)的血浆标本各3例,用作miRNA微阵列分析。借用TCGA数据证实候选miRNA在癌症组织中的表达。(2)验证集:于2019年1月1日至2023年1月1日共采集90例胃癌患者(胃癌组)、89例癌前病变患者(癌前病变组)和45例健康志愿者(NC组)的血浆标本。通过定量实时聚合酶链反应测定候选miRNA水平。比较各组候选miRNA及常规肿瘤标志物[铁蛋白、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、CA211、CA50、CA125、CA199、CA153、CA242、CA724]水平;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析比较候选miRNA与常规肿瘤标志物的诊断价值。结果(1)发现集:通过miRNA微阵列筛选,与NC组相比,miR-421和miR-196b-3p水平在早期胃癌组和癌前病变组明显上调(P<0.05)。TCGA数据证实,与正常胃黏膜相比,miR-421在胃癌组织中呈高表达(P<0.001)。(2)验证集:与NC组相比,癌前病变组和胃癌组血浆miR-421、miR-196b-3p水平明显上调(P<0.05),且胃癌组血浆miR-421、miR-196b-3p水平高于癌前病变组(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血浆miR-421对胃癌的诊断价值最高,曲线下面积(AUC)为0.931(95%CI:0.889~0.972),高于CEA、CA125、CA199、CA724、CA211、CA50诊断胃癌的AUC(P<0.05);miR-196b-3p诊断胃癌的AUC[0.804(95%CI:0.733~0.875)]也高于CEA、CA125、CA199和CA724诊断胃癌的AUC(P<0.05);miR-421和miR-196b-3p也可用于早期胃癌诊断,AUC分别为0.942(95%CI:0.886~0.997)和0.809(95%CI:0.708~0.910);血浆miR-421和miR-196b-3p诊断癌前病变的AUC分别为0.788(95%CI:0.714~0.863)和0.648(0.556~0.741),miR-421诊断癌前病变的AUC均高于miR-196b-3p、铁蛋白、CA50诊断癌前病变的AUC(P<0.05)。血浆miR-421和miR-196b-3p在胃癌Ⅰ期病例中的水平与Ⅱ、Ⅲ/Ⅳ期相比,差异无统计学意义(P>0.05),但在胃癌发病早期(Ⅰ~Ⅱ期)的水平明显高于NC组和癌前病变组(P<0.05)。结论血浆miR-421和miR-196b-3p在早期胃癌患者中过表达,有希望成为诊断癌前病变和早期胃癌的新型生物标志物。 展开更多
关键词 早期诊断 癌前病变 mir-421 mir-196b-3p miRNA微阵列 胃癌
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miR-26b-3p靶向CREB1调控神经胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭
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作者 黄秋虎 周建 +2 位作者 王子珍 杨堃 陈政纲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期578-584,共7页
目的探讨miR-26b-3p靶向调控环磷酸腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)表达水平影响胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法运用RT-qPCR和Western blotting检测不同级别胶质瘤中miR-26b-3p和CREB1的表达情况;生物信息学方法分析miR-... 目的探讨miR-26b-3p靶向调控环磷酸腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)表达水平影响胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法运用RT-qPCR和Western blotting检测不同级别胶质瘤中miR-26b-3p和CREB1的表达情况;生物信息学方法分析miR-26b-3p与CREB1结合的靶向序列。采用双荧光素酶报告基因检测miR-26b-3p对CREB1的靶向调控机制;将胶质瘤U251细胞分为对照组、miR-26b-3p mimic组及miR-26b-3p inhibitor组,采用Western blotting检测CREB1的表达变化,采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力的影响,采用划痕实验检测各组细胞迁移能力的影响,采用Transwell检测各组细胞侵袭能力的影响,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡的影响。结果miR-26b-3p的表达随着胶质瘤级别的增加而降低(P<0.05),而CREB1的表达则逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示miR-26b-3p可显著影响CREB13′UTR表达载体的荧光素酶活性,CREB1是miR-26b-3p下游靶基因。抑制miR-26b-3p表达可上调CERB1的表达,进而抑制细胞凋亡,促进胶质瘤细胞的增殖和侵袭。过表达miR-26b-3p可下调CERB1的表达,促进细胞凋亡,抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭(P<0.05)。结论miR-26b-3p可靶向调控CREB1的表达调节胶质瘤细胞的凋亡、增殖、迁移和侵袭,进而参与胶质瘤的发生发展。 展开更多
关键词 CREB1 mir-26b-3p 胶质瘤 增殖 迁移 侵袭
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miR-92b-5p对高糖诱导的足细胞凋亡的影响及其机制
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作者 闪玥 李文贤 +2 位作者 陈彦霞 王婷 贺银习 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第8期985-993,共9页
目的探讨miR-92b-5p在高糖诱导的足细胞损伤或凋亡过程中可能发挥的作用,并揭示其对线粒体功能的作用机制。方法①体外培养足细胞,分为对照组(NG组)和高糖组(HG组),通过高通量测序技术筛选差异表达的miRNA。②为了观察miR-92b-5p对足细... 目的探讨miR-92b-5p在高糖诱导的足细胞损伤或凋亡过程中可能发挥的作用,并揭示其对线粒体功能的作用机制。方法①体外培养足细胞,分为对照组(NG组)和高糖组(HG组),通过高通量测序技术筛选差异表达的miRNA。②为了观察miR-92b-5p对足细胞线粒体功能和足细胞凋亡的影响,将正常血糖条件下培养的足细胞分为NC mimics、miR-92b-5p mimics、NC inhibitor、miR-92b-5p inhibitor组。为了观察抑制miR-92b-5p表达能否通过改善线粒体功能减轻高糖诱导的足细胞凋亡,将足细胞分为NG组、HG组、HG+NC inhibitor组、HG+miR-92b-5p inhibitor组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定miR-92b-5p的表达,流式细胞术测定足细胞凋亡率,CCK-8法测定足细胞活力,Western blot测定凋亡相关蛋白和线粒体相关蛋白的表达。结果①通过高通量测序技术,筛选出16个差异表达的miRNA,其中,HG组miR-92b-5p的表达明显升高(P<0.05)。②与NC mimics组相比,miR-92b-5p mimics组miR-92b-5p表达升高(P<0.05),足细胞活力降低(P<0.05),足细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达降低(P<0.05),Bax、Fis1表达增加(P<0.05)。与NC inhibitor组相比,miR-92b-5p inhibitor组miR-92b-5p表达降低(P<0.05),足细胞活力升高(P<0.05),足细胞凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达升高(P<0.05),Bax、Fis1表达降低(P<0.05)。③与NG组相比,HG组miR-92b-5p表达升高(P<0.05),足细胞活力降低(P<0.05),足细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达降低(P<0.05),Bax、Fis1表达增加(P<0.05)。与HG+NC inhibitor相比,HG+miR-92b-5p inhibitor组miR-92b-5p表达降低(P<0.05),足细胞活力升高(P<0.05),足细胞凋亡率减少(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达升高(P<0.05),Bax、Fis1表达降低(P<0.05)。结论在高糖条件下,miR-92b-5p的表达水平增加,而抑制miR-92b-5p的表达能够通过改善线粒体功能减轻高糖诱导的足细胞凋亡,从而延缓糖尿病肾病的进展。 展开更多
关键词 mir-92b-5p 微小RNA 糖尿病 糖尿病肾病 足细胞凋亡 线粒体功能障碍
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miR-92a-1-5p通过调控SOCS3和P53促进急性白血病细胞增殖的机制研究
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作者 王珏 姜婉晴 +1 位作者 刘学文 卓丽 《中国药业》 CAS 2024年第S01期104-107,共4页
目的探讨miR-92a-1-5p通过调控细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)、P53促进急性白血病(AL)细胞增殖的机制。方法收集20例初诊AL患者和15例正常人的骨髓标本,检测miR-92a-1-5p、SOCS3、P53 mRNA、蛋白质的表达水平,剖析其与临床特征和预... 目的探讨miR-92a-1-5p通过调控细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)、P53促进急性白血病(AL)细胞增殖的机制。方法收集20例初诊AL患者和15例正常人的骨髓标本,检测miR-92a-1-5p、SOCS3、P53 mRNA、蛋白质的表达水平,剖析其与临床特征和预后的关联性;利用基因工程手段,在急性淋巴细胞白血病细胞系HL-60和急性髓系白血病细胞系K562中分别提高和降低miR-92a-1-5p的表达水平,以评估其对SOCS3和P53蛋白表达水平的调控作用;研究miR-92a-1-5p对细胞周期、增殖和凋亡的影响。结果miR-92a-1-5p的表达水平与白细胞计数、骨髓增生程度、分化程度、髓外浸润和预后均呈负相关,与SOCS3和P53 mRNA表达水平均呈正相关。在HL-60和K562细胞中,上调miR-92a-1-5p表达水平能抑制SOCS3和P53 mRNA的表达,促进细胞周期进入S期,增加细胞增殖能力,抑制细胞凋亡;下调miR-92a-1-5p表达则产生相反的效果。结论miR-92a-1-5p通过调控SOCS3和P53促进AL细胞增殖,可能作为AL的潜在诊断标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 mir-92a-1-5p 细胞因子信号转导抑制因子3 p53 急性白血病 细胞增殖
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miR-200b-3p accelerates progression of pituitary adenomas by negatively regulating expression of RECK
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作者 XIAOXI WANG YANFEI JIA +8 位作者 QIANG LI QIANG YANG YINGFENG LIU BEIFENG WEI XIANG NIU YINJIE ZHANG XIAODONG LUO ZIYU ZHAO PENG WANG 《Oncology Research》 SCIE 2024年第5期933-941,共9页
MicroRNA(miR)-200b-3p has been associated with many tumors,but its involvement in pituitary adenoma is unclear.This study investigated the molecular mechanism underlying miR-200b-3p regulation in pituitary adenomas to... MicroRNA(miR)-200b-3p has been associated with many tumors,but its involvement in pituitary adenoma is unclear.This study investigated the molecular mechanism underlying miR-200b-3p regulation in pituitary adenomas to provide a theoretical basis for treatment.Bioinformatics was used to analyze pituitary adenoma-related genes and screen new targets related to RECK and miRNA.As well,the relationship between miR-200b-3p and RECK protein was verified using a double-luciferase reporter gene assay.The expression of miR-200b-3p in clinical samples was analyzed by in situ hybridization.Transfection of the miR-200b-3p inhibitor and small interfering-RECK(si-RECK)was verified by qPCR.GH3 cell viability and proliferation were detected using CCK8 and EdU assays.Apoptosis was detected by flow cytometry and western blotting.Wound healing and Transwell assays were used to detect cell migration and invasion.The effects of miR-200b-3p and RECK on GH3 cells were verified using salvage experiments.miR-200b-3p was highly expressed in pituitary tumor tissue.Inhibitors of miR-200b-3p inhibited cell proliferation promoted cell apoptosis,inhibited invasion and migration,and inhibited the expression of matrix metalloproteinases.Interestingly,miR-200b-3p negatively regulated RECK.The expression of RECK in pituitary adenoma tissues was lower than that in neighboring tissues.Si-RECK rescued the function of miR-200b-3p inhibitors in the above cellular behaviors,and miR-200b-3p accelerated the development of pituitary adenoma by negatively regulating RECK expression.In summary,this study investigated the molecular mechanism by which miR-200b-3p regulates the progression of pituitary adenoma through the negative regulation of RECK.The findings provide a new target for the treatment of pituitary adenoma. 展开更多
关键词 pituitary adenomas mir-200b-3p RECK Matrix metalloproteinase
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MiR-92a-3p靶向KLF4促进肝细胞癌恶性进程
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作者 蔡青山 郑建兴 +4 位作者 申月玲 吴东洋 李树栋 刘立友 刘东 《河北医学》 CAS 2024年第2期199-204,共6页
目的:探究微小RNA-92a-3p(miR-92a-3p)对肝细胞癌(HCC)的影响及其分子机制。方法:qRT-PCR检测人肝细胞癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、Hep3B和人正常肝细胞系HL-7702中miR-92a-3p和Krüppel样因子4(KLF4)的表达。将SMMC-7721... 目的:探究微小RNA-92a-3p(miR-92a-3p)对肝细胞癌(HCC)的影响及其分子机制。方法:qRT-PCR检测人肝细胞癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、Hep3B和人正常肝细胞系HL-7702中miR-92a-3p和Krüppel样因子4(KLF4)的表达。将SMMC-7721、Bel-7402细胞分组为Inhibitor NC组、miR-92a-3p Inhibitor组、mimic NC组、miR-92a-3p mimic组、mimic NC+oe-NC组、mimic NC+oe-KLF4组、miR-92a-3p mimic+oe-NC组、miR-92a-3p mimic+oe-KLF4组。qRT-PCR检测细胞中miR-92a-3p和KLF4的mRNA表达水平。Western blot检测KLF4蛋白表达水平。MTT增殖实验检测细胞活力。划痕愈合、Transwell侵袭实验分别检测细胞迁移能力和侵袭能力。通过TargetScan分析miR-92a-3p与KLF4的靶向关系,并通过双荧光素酶实验验证。结果:相比于正常细胞,miR-92a-3p在HCC细胞中高表达,KLF4在HCC细胞中低表达(P<0.05)。与正常表达组相比,下调miR-92a-3p显著抑制了SMMC-7721和Bel-7402细胞的增殖、迁移、侵袭能力(P<0.05)。双荧光素酶实验验证了miR-92a-3p与KLF4存在靶向结合位点。过表达KLF4能够阻碍HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制过表达miR-92a-3p对HCC细胞生长的促进作用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-92a-3p能够通过靶向下调KLF4来促进HCC细胞的增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 肝细胞癌 mir-92a-3p KLF4 增殖 迁移 侵袭
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早期宫颈癌患者血清miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达及对术后复发的预测效能
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作者 孙静 黄佳琛 张华 《南昌大学学报(医学版)》 2024年第3期66-71,共6页
目的 探讨miR-193a-3p、miR-146b-5p在早期宫颈癌(ECC)血清中的表达量及其对术后复发的预测价值。方法 选取汉中市人民医院门诊收治的ECC患者(研究组)82例,另选取同期本院体检的健康女性(对照组)74例,比较2组血清miR-193a-3p、miR-146b... 目的 探讨miR-193a-3p、miR-146b-5p在早期宫颈癌(ECC)血清中的表达量及其对术后复发的预测价值。方法 选取汉中市人民医院门诊收治的ECC患者(研究组)82例,另选取同期本院体检的健康女性(对照组)74例,比较2组血清miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量。根据是否复发将研究组分为复发亚组(n=23)和未复发亚组(n=59),单因素分析比较2亚组的临床资料和实验室指标;Logistic多因素回归分析影响术后复发的因素;ROC分析血清miR-193a-3p、miR-146b-5p表达量预测术后复发的价值。结果 研究组血清miR-193a-3p、miR-146b-5p表达量均低于对照组(P<0.05)。复发亚组高危型HPV阳性率、FIGO分期、宫颈浸润深度、淋巴结转移及鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)水平均高于未复发亚组(P<0.05),而血清miR-193a-3p和miR-146b-5p的表达量均低于未复发亚组(P<0.05);血清miR-193a-3p和miR-146b-5p的低表达、高危型HPV阳性、SCC-Ag均是影响术后复发的独立危险因素(P<0.05);血清miR-193a-3p、miR-146b-5p表达量预测术后复发的最佳截断值分别为0.57和2.12,二者联合预测的灵敏度、特异度和AUC分别为82.61%,96.61%和0.932。结论 血清miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达在ECC患者呈低表达;二者均可作为预测ECC术后复发的敏感指标,且联合预测价值更高。 展开更多
关键词 宫颈癌 mir-193a-3p mir-146b-5p 复发预测 血清
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