前列腺癌患者血清miRNA-194和miRNA-206表达水平及临床意义

目的探讨前列腺癌(PCa)患者血清miRNA-194和miRNA-206表达水平及临床意义。方法选取2008年5月～2014年12月我院收治的108例PCa患者为PCa组,以及同期就诊的60例良性前列腺增生(BPH)患者为BPH组、前列腺正常者60例为正常组,分析所有纳入研究者的临床及随访资料,记录年龄等一般临床资料和血清miR-NA-194和miRNA-206等指标水平及PCa患者肿瘤及预后情况,并比较不同PCa患者间上述资料的差异性。结果BPH组和PCa组患者血清miRNA-206水平较正常组低(P<0.05),而血清PSA水平和miRNA-194较正常组高(P<0.05);且PCa患者其血清miRN A-206水平较BHP患者更低,而血清PSA和miRNA-194水平则更高(P<0.05);Gl-eason评分大于7分、临床分期T3～T4期以及出现淋巴结转移和术后复发的PCa患者其血清miRNA-206水平均显著降低,而血清miRNA-194显著升高(P<0.05);死亡患者血清miRNA-206水平均显著低于生存者,而血清miRNA-194水平显著高于生存者(P<0.05);经Log-rank检验,Gleason评分大于7分、临床分期T3～T4期、出现淋巴结转移、术后复发以及血清miR NA-194水平升高和miRNA-206水平降低的PCa患者其生存时间均较短(P<0.05);经多因素Cox比例风险回归模型分析,淋巴结转移、术后复发以及血清miRNA-194升高和miRNA-206水平降低均为影响PCa患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论血清miRNA-194在PCa患者中显著上升,而血清miRNA-206水平显著下降,且血清miRNA-194的上升和miRNA-206的下降均为影响PCa患者预后的独立影响因素,因此临床上可将其作为评估PCa患者病情及预后的有效指标。

基于miRNA21-5p调控TGF-β1/Smads信号通路探讨苓桂气化方抗射血分数保留心力衰竭心肌纤维化的机制

目的基于miRNA21-5p调控转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)/Smads信号通路探讨苓桂气化方抗射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)心肌纤维化的机制。方法40只4周龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)平均分为HFpEF组、沙库巴曲缬沙坦组(LCZ696,0.018 g·kg^(-1))、苓桂气化方低剂量组(LGQH-L,3.87 g·kg^(-1))和苓桂气化方高剂量组(LGQH-H,7.74 g·kg^(-1)),给予高脂、高盐及高糖饮食16周及腹腔注射链脲霉素溶液8周建立HFpEF大鼠模型。10只威斯塔京都(Wistar Kyoto,WKY)大鼠和10只SHR大鼠作为对照组,以普通饲料喂养至实验结束。造模成功后,WKY、SHR和HFpEF组给予等剂量生理盐水,其他3组按照预先规定的干预措施,每天灌胃1次,持续6周。干预结束后,行超声心动图测量左心室(left ventricle,LV)前壁厚度(LV end-diastolic anterior wall thickness,LVAWd)、LV后壁厚度(LV end-diastolic posterior wall thickness,LVPWd)、LV舒张末内径(LV end-diastolic internal diameter,LVIDd)、LV射血分数(LV ejection fraction,LVEF)、LV舒张早期二尖瓣流入峰值速度(E)、舒张晚期二尖瓣流入峰值速度(A)和LV舒张早期二尖瓣环运动速度(e'),并计算E/A和E/e';酶联免疫吸附试验检测血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、B型利钠肽(B-type brain natriuretic peptide,BNP)及半乳糖凝集素3(Galectin-3,Gal-3);病理切片进行苏木精伊红及马松染色观察心肌肥厚及纤维化,并计算LV室壁厚度(LV wall thickness,LVWT)、胶原体积分数(collagen volume fraction,CVF)及血管周围纤维化比率(perivascular fibrosis ratio,PFR);实时定量聚合酶链反应检测LV心肌miRNA21-5p及TGF-β1/Smads信号通路相关mRNA表达;蛋白印迹检测LV心肌TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,HFpEF组的LVAWd、LVPWd、LVIDd、E/A、E/e'、ANP、BNP、Gal-3、LVWT、CVF和PFR显著升高(P<0.05或P<0.01);LV心肌miR-NA21-5,α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达和α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、P-Smad2/3蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01);Smad7 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。与HFpEF组比较,苓桂气化方呈剂量依赖性减少LVAWd、LVPWd、LVIDd、E/A、E/e'、ANP、BNP、Gal-3、LVWT、CVF和PFR(P<0.05或P<0.01);下调miRNA21-5p,α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达和α-SMA、CollⅠ、GF-β1、P-Smad2/3蛋白表达(P<0.05或P<0.01);上调Smad7 mRNA及蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论苓桂气化方可能通过靶向miRNA21-5p调控TGF-β1/Smads信号通路抑制心肌纤维化,从而减轻HFpEF大鼠LV重塑和舒张功能障碍,是治疗HFpEF的有效中药复方。

miRNA-206与肿瘤发生发展的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类由18~25个核苷酸构成的非编码RNA分子,在调控基因表达方面发挥重要作用,许多疾病的发生发展与miRNA功能失调有关,miRNA-206在许多肿瘤如胃癌、卵巢癌、黑色素瘤细胞、乳腺癌、肺癌和肝癌等组织中都有异常表达,在肿瘤细胞增殖、分化、凋亡及转移中发挥了重要影响。本文就近年来miRNA-206在肿瘤发生发展中作用的研究进展进行综述,并指出其重要的临床诊断和治疗的潜在价值。

FAM 19A 4、PAX 1及miRNA124-2基因启动子区甲基化在宫颈病变早期诊断中的价值

背景与目的:目前有关宫颈病变的DNA甲基化研究较多,但DNA甲基化作为宫颈病变的诊断及分流指标在临床实践中的报道较少。本研究拟探讨FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因启动子区甲基化在宫颈病变进展中早期诊断的价值。方法:收集2020年3月—2022年3月在郑州大学第三附属医院同时行宫颈液基细胞学(thinprep cytologic test,TCT)和HPV检测的患者的宫颈细胞学标本共129例,采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测不同宫颈病变中FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因启动子区甲基化改变情况,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估3个基因甲基化改变对宫颈病变的诊断价值。本研究经郑州大学第三附属医院伦理委员会批准(伦理审批编号:2023-135-01)。结果:根据病理学检查结果分为4组:未见上皮内病变或恶性细胞(no intraepithelial lesions or malignant lesions,NILM)组(42例)、低度鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)组(28例)、高度鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)组(36例)和鳞癌(squamous cervical cancer,SCC)组(23例)。随宫颈病变级别的增加,FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因甲基化检出率逐步增高,差异有统计学意义(P均<0.05)。在HSIL组FAM19A4、PAX1、miRNA124-2甲基化检出率分别为81.2%、80.5%和71.8%,在SCC组3种基因甲基化检出率均高达100.0%;细胞学诊断宫颈癌的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.731,诊断灵敏度和特异度分别为65.9%和80.4%;FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因单独诊断HSIL+(HSIL和SCC)时,PAX1甲基化诊断HSIL+的效能最高,AUC为0.925,灵敏度为92.8%,特异度为87.3%;两两联合诊断时,FAM19A4与PAX1联合诊断HSIL+的AUC为0.930,灵敏度为95.7%,特异度为87.1%;FAM19A4与miRNA124-2联合诊断HSIL+,AUC为0.895,灵敏度为97.6%,特异度为85.7%;PAX1联合miRNA124-2诊断HSIL+,AUC为0.928,灵敏度为95.7%,特异度为89.1%;PAX1、FAM19A4及miRNA124-2基因甲基化联合诊断HSIL+,AUC为0.928,灵敏度为100.0%,特异度为81.8%。结论:FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因启动子区甲基化诊断宫颈病变具有较高的灵敏度和特异度,有潜力成为宫颈病变早期诊断的新指标。

血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a在早期宫颈癌中的诊断价值

目的 探讨血清微小RNA(miRNA)21、miRNA155-5P及miRNA20a在早期宫颈癌中的诊断价值。方法 选取新疆生产建设兵团第十三师红星医院2019年6月-2023年6月收治的100例早期宫颈癌患者作为观察组,另选同期收治的100例进展期宫颈癌患者为进展期组,100名健康志愿者为对照组。采取荧光定量聚合酶链反应法(qRT-PCR)检测所有受检者血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a表达水平,比较血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a表达水平与早期宫颈癌临床特征;采用Spearman相关性分析miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a与早期宫颈癌临床特征的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a对早期宫颈癌的诊断价值。结果 各组血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a相对表达水平及临床分期、病理分级、浸润深度比较,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析结果表明,miRNA21、miRNA20a与早期宫颈癌临床分期、病理分级、浸润深度呈正相关,miR155-5P与早期宫颈癌临床分期呈正相关(P<0.05);ROC曲线结果显示,三者联合、miRNA21、miRNA155-5P、miRNA20a的曲线下面积(AUC)依次为0.897、0.721、0.698、0.641,灵敏度分别为83.54%、73.25%、72.67%、69.57%,特异度分别为81.45%、78.56%、82.54%、72.67%。结论 早期宫颈癌患者血清miRNA21、miRNA155-5P及 miRNA20a表达水平明显升高,且与临床特征密切相关。

miRNA-206及miRNA-26a在周围神经卡压后骨骼肌纤维化过程中的表达

目的探讨大鼠坐骨神经慢性卡压损伤后其支配的腓肠肌组织内miRNA-206、miRNA-26a的表达变化及其意义。方法2020年5月至2020年7月,选取50只成年雄性SD大鼠;大鼠右侧后腿采用Mackinnon建立的坐骨神经卡压模型方法对坐骨神经行硅胶管卡压术,作为手术组(实验组);对大鼠左侧后腿仅分离暴露坐骨神经,作为假手术组(对照组)。于卡压术后2、4、6、8、10周时间点随机取大鼠10只,取其双后腿腓肠肌,观察腓肠肌组织萎缩及纤维化程度,并行组织形态学观察,RT-PCR定量测定miRNA-206、miRNA-26a、转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)的表达。结果坐骨神经慢性卡压损伤后,手术组与假手术组相比,腓肠肌组织湿重明显减轻,肌肉横截面积变小,肌肉组织胶原纤维增生,miRNA-206及miRNA-26a的表达先降低后升高,4周时表达最低,后表达逐渐升高;TGF-β及COL-Ⅰ含量升高,两组比较差异统计学意义(P<0.05)。结论周围神经慢性卡压损伤可致支配骨骼肌发生纤维化病变,TGF-β及COL-Ⅰ表达升高,miRNA-206及miRNA-26a在此过程中表达先降低后升高,提示miRNA-206及miRNA-26a在周围神经卡压致骨骼肌萎缩及纤维化过程中起到重要作用。

MiRNA-206通过抑制CDK9表达对鼻咽癌CNE2细胞的生长及转移的影响

目的:探讨miRNA-206对人鼻咽癌CNE2细胞的增殖和转移能力的影响,并分析细胞周期蛋白依赖性激酶9(cyclin-dependent kinase 9,CDK9)在其中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR(real-timequantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测miR-206在鼻咽上皮NP69细胞和人鼻咽癌CNE2细胞中的表达水平后,将miR-206模拟物或对照物分别导入CNE2细胞。通过CCK-8试验、Annexin V-FITC/PI染色、克隆形成试验、Transwell细胞迁移试验和Transwell细胞侵袭试验分别评价miR-206过表达对CNE2细胞活力、凋亡、克隆形成、迁移和侵袭的影响。最后采用蛋白质印迹法检测CDK9在NP69细胞和CNE2细胞中的表达。进一步检测过表达CDK9对miR-206过表达CNE2细胞的迁移和侵袭的影响。结果:MiR-206在CNE2细胞系中低表达。MiR-206过表达降低CNE2细胞的活性、克隆形成、迁移、侵袭并诱导细胞凋亡。CNE2细胞中CDK9呈现高表达。过表达miR-206显著抑制CNE2细胞中CDK9表达水平;而CDK9过表达能逆转miR-206过表达对CNE2细胞侵袭与迁移的抑制作用。结论:MiRNA-206对CNE2细胞的生长和转移起抑制作用,可通过抑制CDK9表达来介导。

加味逍遥散通过外泌体miRNA途径发挥抗肝癌作用

背景:在课题组先前研究中发现加味逍遥散具有明显的抗肝癌作用,但具体作用机制不明。目的:基于高通量测序结合生物信息学,探讨加味逍遥散对二乙基亚硝胺慢性诱导的原发性肝癌模型大鼠血浆外泌体miRNA水平的调节作用。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、肝癌模型组、加味逍遥散组。以二乙基亚硝胺持续给药12周诱导肝癌模型,从第17周开始,加味逍遥散组大鼠给予加味逍遥散灌服,每日1次,直至第20周末停药,空白对照组和肝癌模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,通过检测大鼠肝组织的形态结构、肝癌标志物Glypican-3蛋白和血清甲胎蛋白表达验证抗肝癌效应。使用超速离心法分离提取各组大鼠血浆外泌体,利用高通量测序技术筛选出大鼠血浆外泌体中差异表达的miRNA,生物信息学预测加味逍遥散通过肝癌血浆来源外泌体miRNA发挥抗肝癌作用的潜在生物标志物,并进行功能分析。结果与结论:①加味逍遥散对肝癌模型大鼠肝组织的形态结构有显著改善作用,与肝癌模型组相比,加味逍遥散组肝癌标志物Glypican-3蛋白和血清甲胎蛋白的表达均显著降低;②生物信息学分析显示,加味逍遥散组对肝癌模型组上调的miR-223-3p与基因E2F1、NCOA1存在靶向结合位点,并且与肝癌生存率及预后密切相关。由此可见,加味逍遥散对肝癌有治疗作用,可能是通过肝癌血浆来源外泌体miR-223-3p靶向负调控NCOA1/E2F1进而发挥抗肝癌效应。

颈部血管彩超联合血清miR-222-3p、miR-206在脑梗死患者颈动脉狭窄程度诊断中的应用价值

目的分析颈部血管彩超联合血清微小RNA-222-3p(miR-222-3p)、微小RNA-206(miR-206)在脑梗死患者颈动脉狭窄程度诊断中的应用价值。方法选取该院2018年7月至2022年7月收治的90例脑梗死患者为研究组,并根据患者颈动脉狭窄程度分为轻度狭窄组(29例)、中度狭窄组(35例)、重度狭窄组(26例)。另选取在该院体检的96例体检健康者为对照组。采用实时荧光定量PCR对各组血清miR-222-3p、miR-206水平进行检测,脑梗死患者均接受颈部血管彩超检查,并分析不同狭窄程度患者临床资料。采用多因素Logistic回归分析影响脑梗死患者颈动脉狭窄程度的因素,受试者工作特征(ROC)曲线评估颈动脉超声指标及血清miR-222-3p、miR-206水平对脑梗死患者颈动脉狭窄程度的诊断价值。结果与对照组比较,研究组血清miR-222-3p水平升高,血清miR-206水平降低(P<0.05)。与轻度狭窄组比较,中度狭窄组、重度狭窄组收缩期峰值流速(PSV)、舒张末期容积(EDV)及血清miR-222-3p水平升高,血清miR-206水平降低(P<0.05);与中度狭窄组比较,重度狭窄组EVD、PSV及血清miR-222-3p水平升高,miR-206水平降低(P<0.05)。EVD、PSV、血清miR-222-3p水平是脑梗死患者发生颈动脉狭窄的危险因素,血清miR-206水平是脑梗死患者发生颈动脉狭窄的保护因素(P<0.05)。EVD、PSV联合血清miR-222-3p、miR-206诊断脑梗死患者颈动脉狭窄程度的曲线下面积为0.991,灵敏度和特异度分别为98.36%和93.10%,优于EVD、PSV、血清miR-222-3p、miR-206单独诊断(Z_(四者联合-EVD)=2.927、P=0.003,Z_(四者联合-PSV)=2.834、P=0.005,Z_(四者联合-miR-222-3p)=3.300、P=0.001,Z_(四者联合-miR-206)=3.730、P<0.001)。结论颈部血管彩超联合血清miR-222-3p、miR-206在脑梗死患者颈动脉狭窄程度诊断中具有应用价值。

血清miRNA-21、术前清蛋白-球蛋白比值对大脑胶质瘤预后的预测价值

目的:探讨血清miRNA-21、术前清蛋白-球蛋白比值与胶质瘤预后的关系。方法:选取2019年1月—2023年1月243例术后病理检查确诊为胶质瘤的病人,收集病人年龄、性别、吸烟和饮酒情况、体质指数、Karnofsky表现状态(KPS)、肿瘤大小、肿瘤位置(脑区)、切除范围、术前淋巴细胞计数、术前清蛋白水平、辅助放疗、化疗等资料,并根据磁共振成像数据计算肿瘤大小,采集病人术前1周血液学指标数据,评估术前清蛋白与球蛋白比值(AGR)及总生存期(OS)。检测血清miRNA-21,OS由Kaplan-Meier分析估计,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析AGR和miRNA21的预测能力。Cox比例风险模型用于单变量和多变量分析。结果:排除65例不符合纳入标准的病人和12例失访病人,共纳入166例病人。Kaplan-Meier分析曲线显示,AGR≤1.75或miRNA-21≤48的病人OS明显低于AGR>1.75或miRNA-21>48的病人(P均<0.001)。1年生存期:AGR和miRNA-21的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.680,0.631;2年生存期:AGR和miRNA-21的AUC分别为0.651,0.656。在多变量分析中,AGR[HR=0.785,95%CI(0.357,0.979),P=0.040]和miRNA-21[HR=0.757,95%CI(0.378,0.985),P=0.039]均是OS的独立预测因子。结论:术前AGR和miRNA-21与胶质瘤病人的OS显著相关。基于术前炎症、免疫和营养状况等指标,AGR和miRNA-21可为胶质瘤病人制定更有效的术前调节策略和更好的辅助治疗方案。

6-姜烯酚通过miRNA-26a-5p/DAPK1减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

为探究6-姜烯酚(6-Shogaol,6-SH)对大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的保护作用,采用分子对接观察6-SH能否自发性结合microRNA-26a-5p(miRNA-26a-5P),双萤光素报告基因检测验证miRNA-26a-5p与死亡相关蛋白激酶1(ceath associated protein kinase 1,DAPK 1)的靶向关系;线栓法制备大鼠CIRI模型,雄性SD大鼠随机为假手术组、模型组、6-姜烯酚组;于CIRI后72 h进行改良神经功能评分,氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色,评分后采集脑组织标本进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察神经细胞病理损伤情况,透射电镜观察神经元超微结构及自噬情况,免疫荧光检测自噬标志物,实时荧光定量和蛋白印迹法检测自噬和钙超载相关蛋白和基因。实验结果表明6姜烯酚可上调miRNA-26a-5p的表达,抑制DAPK1的表达,减轻大鼠CIRI后过度自噬和钙超载,发挥神经保护作用。

心脏超声斑点成像联合microRNA-16-5p、microRNA-206诊断非ST段抬高型急性心肌梗死的价值及与疾病严重程度的相关性

目的 探讨心脏超声斑点成像技术联合microRNA-16-5p(miR-16-5p)、microRNA-206(miR-206)诊断非ST段抬高型急性心肌梗死(NSTEMI)的价值及与疾病严重程度的相关性。方法 选取2020年1月—2023年12月延安大学咸阳医院收治的102例NSTEMI患者为研究对象,根据全球急性冠状动脉事件登记风险评分体系将患者分为低风险组(55例)、中风险组(32例)及高风险组(15例)。测定并比较3组心脏超声斑点成像参数、血清miR-16-5p和miR-206水平,并采用Spearman法分析其与疾病严重程度的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价心脏超声斑点成像参数联合miR-16-5p和miR-206在疾病严重程度评估中的诊断效能。结果 中风险组和高风险组的整体长轴收缩期峰值应变(GLS)、整体圆周收缩期峰值应变(GCS)、整体径向收缩期峰值应变(GRS)、整体面积收缩期峰值应变(GAS)、GAS变化率(GAS rate)及三维左心室整体应变(3D-Strain)参数比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。中风险组和高风险组的GLS、GCS、GAS、GAS rate参数的绝对值均低于低风险组,GRS和3D-Strain参数低于低风险组(P <0.05);高风险组的GLS、GCS、GAS、GAS rate参数的绝对值低于中风险组,GRS和3D-Strain参数低于低风险组(P <0.05)。中风险组和高风险组血清miR-16-5p mRNA相对表达量均高于低风险组(P <0.05),高风险组血清miR-16-5p mRNA相对表达量高于中风险组(P <0.05);中风险组和高风险组血清miR-206 mRNA相对表达量均低于低风险组(P <0.05),高风险组血清miR-206 mRNA相对表达量低于中风险组(P <0.05)。Spearman相关性分析结果显示,疾病严重程度与miR-16-5p、GLS、GAS、GCS、GAS rate均呈正相关(rs=0.688、0.842、0.506、0.801和0.227,P=0.000、0.000、0.000、0.000和0.021),疾病严重程度与miR-206、GRS、3D-Strain均呈负相关(rs=-0.615、-0.815和-0.860,均P=0.000)。ROC曲线分析结果显示,心脏超声斑点成像参数联合miR-16-5p和miR-206在诊断NSTEMI患者疾病严重程度方面具有较好的准确性,曲线下面积为0.971(95%CI:0.927,1.000),敏感性为93.3%(95%CI:0.807,1.000);特异性为96.9%(95%CI:0.908,1.000)。结论 心脏超声斑点成像联合miR-16-5p和miR-206可作为评估NSTEMI患者疾病严重程度的有效诊断生物标志物,为临床提供新的诊断工具。

水体中多氯联苯PCB194与PCB206的气相色谱-质谱法分析及其精确性评价

为了评价水体中多氯联苯PCB194与PCB206的气相色谱-质谱法分析的精确性,采用气相色谱-质谱法对样品进行分析,通过对水体样品的采集、预处理及气相色谱分析,研究PCB194与PCB206在环境水体中的分布情况及分析的精确性。结果表明,该方法能够有效检测水体中PCB194与PCB206的含量,重复性好,精确度高,可为水体中多氯联苯污染的监测提供一种可靠的分析手段。分析了影响分析精确性的主要因素,为提高环境监测的准确性提供参考。

PCOS患者血清miR-206表达及其与下丘脑-垂体-性腺轴内分泌的关系分析

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微小核糖核酸-206(miR-206)表达及其与下丘脑-垂体-性腺轴内分泌的关系。方法选取2020年3月至2022年12月许昌市人民医院收治的148例PCOS患者设为研究组,另同期选取133例月经正常的健康体检未孕女性设为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-206表达,另采用化学发光免疫分析法检测血清促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)、孕酮(P)水平。采用Pearson相关系数分析PCOS患者血清miR-206表达与FSH、LH、E2、T、PRL、P的关系。结果研究组血清miR-206表达(0.38±0.07)明显低于对照组(0.95±0.12)(P<0.05);研究组血清FSH、P水平[(5.12±1.19)mIU/mL、(1.52±0.44)nmol/L]均明显低于对照组[(6.58±1.34)mIU/mL、(2.49±0.62)nmol/L],血清LH、E2、T、PRL水平[(10.96±2.24)mIU/mL、(78.63±22.49)pg/mL、(0.88±0.23)ng/mL、(21.46±5.32)ng/mL]均明显高于对照组[(6.73±1.85)mIU/mL、(49.41±10.65)pg/mL、(0.51±0.12)ng/mL、(16.35±3.21)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关系数分析,PCOS患者血清miR-206表达与LH、E2、T、PRL水平均呈负相关性(r=-0.546、-0.501、-0.533、-0.485,P<0.05),与FSH、P水平均呈正相关性(r=0.493、0.528,P<0.05)。结论PCOS患者血清miR-206表达明显降低,其与下丘脑-垂体-性腺轴内分泌相关指标存在一定的相关性。

子痫前期孕妇血清和胎盘组织miRNA-206、miRNA-126表达水平及其临床意义

目的:探讨微小核糖核酸-206(miRNA-206)与微小核糖核酸-126(miRNA-126)在子痫前期(PE)孕妇血清及胎盘组织中的表达及其临床意义。方法:选取2018年3月至2020年3月我院收治的子痫前期孕妇80例为观察组,另选取同期年龄、孕周匹配的正常孕妇40例为对照组作为研究对象。结果:①观察组年龄、孕周、BMI与对照组比较无显著差异,观察组SBP、DBP高于对照组,24 h尿蛋白量低于对照组。②PE组血清及胎盘组织miRNA-206水平均高于对照组,miRNA-126水平均低于对照组。③miRNA-206表达与SBP、DBP、24 h尿蛋白呈正相关,miRNA-126表达与SBP、DBP、24 h尿蛋白呈负相关。④血清miRNA-206、miRNA-126诊断PE的最佳截值分别为1.82、1.41,AUC分别为0.830(95%CI:0.753~0.891)、0.720(95%CI:0.634~0.891),miRNA-206诊断PE的AUC大于miRNA-126诊断PE的AUC。结论:PE孕妇外周血血清及胎盘组织中miRNA-206表达水平上调,miRNA-126表达水平下调,二者对PE有较好的诊断价值。

电针调控miRNA206/HDAC4轴促进损伤多裂肌修复过程中成肌细胞分化的机制

背景:作者前期的动物及细胞实验研究已证明电针可提高损伤腰多裂肌中Pax7 和成肌分化抗原的表达,促进多裂肌的损伤修复。亦有研究证明miRNA206 促进成肌分化主要是通过抑制组蛋白去乙酰化酶4 实现的。目的:观察电针对布比卡因致大鼠腰多裂肌损伤修复过程中miRNA206/组蛋白去乙酰化酶4 表达的影响。方法:实验方案经广东省第二中医院动物实验伦理委员会批准(批准号为048604)。将30 只雄性SD 大鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组10 只。模型组、电针组采用0.5%布比卡因肌内注射复制大鼠多裂肌损伤模型;对照组予注射等量生理盐水。对照组与模型组不进行针刺干预,电针组予针刺双侧委中穴、肾俞穴,针刺后连接电针,波形选用疏密波,电针频率采用2 Hz/10 Hz,电流强度选择1 mA,持续治疗20 min,每天治疗1 次,共治疗7 d。干预7 d 后,通过苏木精-伊红染色观察损伤部位多裂肌形态学变化,采用qRT-PCR检测多裂肌中miRNA206 的表达量,Western-blot 检测多裂肌中成肌分化抗原、Myogenin 及组蛋白去乙酰化酶4 蛋白的表达。结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,7 d 后,对照组可见视野中骨骼肌纤维大部分排列整齐,无明显破坏及巨噬细胞浸润;模型组视野内可见大量肌纤维被破坏,但出现部分肌纤维修复,巨噬细胞数量仍较多;电针组新生肌纤维较多,巨噬细胞较模型组减少;②Western-blot 结果显示,7 d 后,模型组成肌分化抗原、Myogenin、组蛋白去乙酰化酶4 蛋白表达均较对照组升高(P < 0.05 或P < 0.01);电针组成肌分化抗原、Myogenin 蛋白表达较模型组升高(P < 0.01),组蛋白去乙酰化酶4 蛋白较模型组降低(P < 0.01);③qRT-PCR结果显示,7 d 后,模型组miRNA206 表达高于对照组(P < 0.01),电针组miRNA206 表达高于模型组(P <0.05);④结果说明,电针可促进多裂肌损伤后成肌分化,其作用可能是通过提高miRNA206 表达抑制组蛋白去乙酰化酶4 活性实现的。

哮喘患儿外周血单个核细胞microRNA-206表达及意义

目的探讨哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMCs）microRNA-206（miR-206）表达在哮喘发生发展中的作用。方法收集27例哮喘患儿发作期和缓解期,以及25名健康对照儿童的外周血标本,分离PBMCs,采用实时定量PCR（qRT-PCR）方法检测PBMCs中microRNA-206及锌指样转录因子4（KLF4）、白介素-17（IL-17）mRNA的相对表达量。结果miR-206、KLF4 mRNA和IL-17 mRNA水平在哮喘发作期、缓解期患儿以及健康对照组儿童三组间的差异均有统计学意义（F=46.58-72.81,P均=0.000）。哮喘发作期的miR-206水平分别低于缓解期和健康对照组,而KLF4 mRNA和IL-17 mRNA水平均分别高于缓解期和健康对照组,差异有统计学意义（P均〈0.01）;缓解期和健康对照组间miR-206、KLF4 mRNA和IL-17 mRNA水平的差异无统计学意义（P均〉0.05）。哮喘患儿发作期,microRNA-206水平与KLF4和IL-17 mRNA相对表达量均呈负相关（r=–0.66、–0.81,P均〈0.01）,KLF4和IL-17 mRNA相对表达量呈正相关（r=0.70,P〈0.01）。结论哮喘患儿外周血单个核细胞microRNA-206表达水平下降,与疾病的发生发展关系密切。

四肢骨折延迟愈合患者血清miR-206、IGF-1、sICAM-1水平变化及诊断效能

目的观察四肢骨折延迟愈合患者血清微小RNA-206(miR-206)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)的水平变化,并探讨其对骨折延迟愈合的诊断效能。方法159例四肢骨折患者,行钢板内固定或髓内钉固定术,分别于术前(T0)及术后第3天(T1)、第1周(T2)、第4周(T3)时采集静脉血,实时荧光PCR法检测血清miR-206,ELISA法检测血清IGF-1、sICAM-1。术后3个月时159例患者根据是否存在骨折延迟愈合分为89例骨折延迟愈合(延迟组),70例骨折正常愈合(正常组)。采用单因素分析、Logistic逐步回归分析法分析骨折延迟愈合的危险因素。绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析血清miR-206、IGF-1、sICAM-1及三者联合对骨折延迟愈合的诊断效能。结果T0~T3时两组血清miR-206表达、IGF-1水平逐渐增高,sICAM-1水平逐渐降低(P均<0.05)。与正常组比较,T0、T1、T2、T3时延迟组血清miR-206表达、sICAM-1水平高,血清IGF-1水平低(P均<0.05)。骨质疏松、损伤类型、T3基线时血清miR-206、T3基线时血清IGF-1、T3基线时血清sICAM-1是骨折延迟愈合的危险因素(P均<0.01)。T3基线时,血清miR-206、IGF-1、sICAM-1诊断骨折延迟愈合的截断值分别为0.62、291.34μg/L、202.43 ng/mL时,其诊断骨折延迟愈合的灵敏度分别为72.41%、79.31%、70.11%,特异度分别为72.86%、80.00%、84.29%,阳性预测值为76.83%、86.13%、77.22%,阴性预测值分别为68.00%、75.68%、66.67%,AUC分别为0.690(95%CI:0.606~0.773)、0.682(95%CI:0.596~0.767)、0.709(95%CI:0.626~0.793)。血清miR-206、IGF-1、sICAM-1联合诊断骨折延迟愈合的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为91.95%、91.43%、93.02%、90.14%,AUC为0.895(95%CI:0.837~0.95)。T3时血清miR-206、IGF-1、sICAM-1水平联合诊断骨折延迟愈合AUC高于三者单独诊断(z分别为3.021、3.162、2.615,P均<0.05)。结论手术固定患处的骨折延迟愈合患者血清miR-206、sICAM-1水平升高,IGF-1水平降低。血清miR-206、sICAM-1、IGF-1联合诊断四肢骨折患者术后骨折延迟愈合的准确性较高。

miRNA 452-5P及miRNA 215-5P在结直肠癌中的表达及意义

目的研究miRNA 452-5P及miRNA 215-5P在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系,并分析其诊断价值。方法收集30组结直肠癌患者的结直肠癌组织及癌旁正常肠黏膜组织,采用实时荧光定量PCR技术检测全部患者结直肠癌组织及癌旁正常肠黏膜组织中miRNA 452-5p、miRNA 215-5p的表达,分析其与临床病理资料之间的关系,并进行ROC分析。结果 miRNA 452-5P在结肠癌组织中表达显著下调(P<0.001),miRNA 215-5p在结肠癌组织中表达显著上调(P<0.001),两种miRNA与结直肠癌患者年龄、性别、分化程度、肿瘤位置、浸润深度、淋巴转移、Dukes分期等均不相关。miRNA 452-5p曲线下面积AUC=0.859(95%CI:0.719～0.999),miRNA 215-5p曲线下面积为AUC=0.879(95%CI:0.757～1.0)。2-miRNAs panel曲线下面积为AUC=0.930(95%CI:0.833～1.0)。结论 miRNA 452-5p在结肠癌组织中表达显著下调,miRNA 215-5p在结直肠癌组织中表达显著上调。2-miRNAs panel对结直肠癌诊断价值较高,可作为潜在的结直肠癌诊断价值的分子标志物和治疗靶点。

miRNA-31靶向基质金属蛋白酶-3基因对宫颈鳞癌侵袭力的影响

目的探讨miRNA(miR)-31对宫颈鳞癌siHa细胞系侵袭性的影响及其可能存在的作用靶点。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹对比宫颈鳞癌组织、正常宫颈组织及siHa细胞系中miR-31、基质金属蛋白酶(MMP)-3mRNA及蛋白表达情况。通过mimics上调siHa细胞miR-31表达后,运用transwell小室研究siHa细胞袭性变化。结果宫颈鳞癌组织较正常宫颈组织miR-31表达明显下调,差异达14.64倍(P<0.01)。上调siHa细胞miR-31表达后,MMP-3蛋白表达显著降低(P<0.05),siHa细胞侵袭能力明显下降(P<0.05)。结论 miR-31在宫颈鳞癌细胞表达下降,miR-31能抑制siH a癌细胞侵袭的能力,而MMP-3是miR-31下游作用靶点。