miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a与冠心病冠脉病变的关系

目的 探讨miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a与冠心病冠脉病变的关系。方法 选取2021年1月至2022年12月商丘市第一人民医院收治的CHD患者86例为观察组,选取70名同期院内健康体检者作为对照组。对比两组血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平;分析影响CHD冠脉病变的单因素,采用Logistic回归分析影响CHD冠脉病变的单因素、多因素;对比不同CHD冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平;对比不同CHD冠脉病变支数的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平。结果 观察组miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic多因素分析显示,患有高血压、糖尿病以及miRNA-223>1.5、miRNA-21>6.0、miRNA-27a>5.5均是影响CHD冠脉病变的独立危险因素(P<0.05);miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平:急性心肌梗死>不稳定型心绞痛>稳定型心绞痛,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平:三支>双支>单支,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 不同冠脉病变CHD患者miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平不同,提示以上指标对判断CHD患者冠脉病变类型具有一定的临床价值。

血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21对冠心病经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄的预测价值

目的探讨血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)、分泌型卷曲蛋白5(Sfrp5)、微小RNA-21(miRNA-21)对冠心病(CHD)经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选择商水县人民医院2021年1月至2022年9月间行PCI手术治疗的CHD患者218例为CHD组,同期非心血管疾病的住院患者97例为对照组,比较两组FGF21、Sfrp5及miRNA-21;CHD组术后随访6个月,以是否发生ISR分为ISR组(n=56)及无ISR组(n=162);分析CHD患者行PCI手术后发生ISR的影响因素,分析FGF21、Sfrp5及miRNA-21对ISR的预测价值。结果CHD组FGF21、miRNA-21均高于对照组,Sfrp5水平低于对照组,差异有统计学意义(t=11.196、15.030、13.685,P<0.05);ISR组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、FGF21、miRNA-21均高于无ISR组,Sfrp5水平低于无ISR组,差异有统计学意义(t=7.093、7.216、6.388,P<0.05),ISR组吸烟、合并糖尿病比率高于无ISR组,差异有统计学意义(χ^(2)=6.015、11.295,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,LDL-C、合并糖尿病、FGF21、Sfrp5、miRNA-21是CHD患者行PCI术后发生ISR的影响因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,FGF21、Sfrp5、miRNA-21三者单独及联合检测预测PCI术后发生ISR的AUC分别为0.772、0.758、0.763、0.905(P<0.05)。结论血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21在行PCI手术后发生ISR的CHD患者中表达异常,联合检测三者水平对于预测CHD患者PCI术后发生ISR具有较好的应用价值。

基于miRNA21-5p调控TGF-β1/Smads信号通路探讨苓桂气化方抗射血分数保留心力衰竭心肌纤维化的机制

目的基于miRNA21-5p调控转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)/Smads信号通路探讨苓桂气化方抗射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)心肌纤维化的机制。方法40只4周龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)平均分为HFpEF组、沙库巴曲缬沙坦组(LCZ696,0.018 g·kg^(-1))、苓桂气化方低剂量组(LGQH-L,3.87 g·kg^(-1))和苓桂气化方高剂量组(LGQH-H,7.74 g·kg^(-1)),给予高脂、高盐及高糖饮食16周及腹腔注射链脲霉素溶液8周建立HFpEF大鼠模型。10只威斯塔京都(Wistar Kyoto,WKY)大鼠和10只SHR大鼠作为对照组,以普通饲料喂养至实验结束。造模成功后,WKY、SHR和HFpEF组给予等剂量生理盐水,其他3组按照预先规定的干预措施,每天灌胃1次,持续6周。干预结束后,行超声心动图测量左心室(left ventricle,LV)前壁厚度(LV end-diastolic anterior wall thickness,LVAWd)、LV后壁厚度(LV end-diastolic posterior wall thickness,LVPWd)、LV舒张末内径(LV end-diastolic internal diameter,LVIDd)、LV射血分数(LV ejection fraction,LVEF)、LV舒张早期二尖瓣流入峰值速度(E)、舒张晚期二尖瓣流入峰值速度(A)和LV舒张早期二尖瓣环运动速度(e'),并计算E/A和E/e';酶联免疫吸附试验检测血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、B型利钠肽(B-type brain natriuretic peptide,BNP)及半乳糖凝集素3(Galectin-3,Gal-3);病理切片进行苏木精伊红及马松染色观察心肌肥厚及纤维化,并计算LV室壁厚度(LV wall thickness,LVWT)、胶原体积分数(collagen volume fraction,CVF)及血管周围纤维化比率(perivascular fibrosis ratio,PFR);实时定量聚合酶链反应检测LV心肌miRNA21-5p及TGF-β1/Smads信号通路相关mRNA表达;蛋白印迹检测LV心肌TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,HFpEF组的LVAWd、LVPWd、LVIDd、E/A、E/e'、ANP、BNP、Gal-3、LVWT、CVF和PFR显著升高(P<0.05或P<0.01);LV心肌miR-NA21-5,α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达和α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、P-Smad2/3蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01);Smad7 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。与HFpEF组比较,苓桂气化方呈剂量依赖性减少LVAWd、LVPWd、LVIDd、E/A、E/e'、ANP、BNP、Gal-3、LVWT、CVF和PFR(P<0.05或P<0.01);下调miRNA21-5p,α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达和α-SMA、CollⅠ、GF-β1、P-Smad2/3蛋白表达(P<0.05或P<0.01);上调Smad7 mRNA及蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论苓桂气化方可能通过靶向miRNA21-5p调控TGF-β1/Smads信号通路抑制心肌纤维化,从而减轻HFpEF大鼠LV重塑和舒张功能障碍,是治疗HFpEF的有效中药复方。

血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行根治性前列腺切除术老年前列腺癌患者预后的评估价值

目的分析血清微小RNA(miRNA)-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行腹腔镜根治性前列腺切除术(LRP)的老年前列腺癌患者预后的评估价值。方法选取2014年1月至2018年9月该院收治的行LRP治疗的213例老年前列腺癌患者作为研究对象,根据5年随访结局将患者分为预后优良组(87例)和预后不良组(126例)。收集患者术前临床基线资料及血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平。采用Logistic回归分析筛选影响患者预后的因素,并以独立危险因素构建预后预测模型,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测价值。结果多因素Logistic回归分析结果显示,患者血清前列腺特异性抗原(PSA)水平、切缘阳性、血清miRNA-21-5p与miRNA-5189-5p表达水平均为行LRP的老年前列腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05),以独立危险因素构建联合预测模型,各因素单独预测行LRP的老年前列腺癌患者预后的曲线下面积均小于4项联合(P<0.05)。结论血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行LRP的老年前列腺癌患者预后的预测具有较高价值。

肺部超声评分及血浆miRNA-21-5p对脓毒症患者肺损伤程度及预后预判价值

目的分析外周血miRNA-21-5p水平与肺部超声评分(LUS)对脓毒症患者并发急性肺损伤(ALI)的病情及预后的预测价值。方法选择我院就诊的90例ALI患者作为研究对象,根据ALI患者病情严重程度分为3组:低危组(38例,APACHEⅡ评分≤10分)、中危组(32例,APACHEⅡ评分10-20分)及重危组(20例,APACHEⅡ评分≥20分)。检测比较3组血浆miRNA-21-5p、B型脑钠肽(BNP)、D二聚体(D-dimer)、氧合指数(OI)、血管外肺水指数(EVLWI)以及LUS评分。采用Pearson直线分析评估血浆miRNA-21-5p水平及LUS评分和APACHEⅡ评分相关程度。依据患者预后结局分为存活组(71例)和死亡组(19例),比较上述临床指标的差异。应用多元Logistic回归分析上述指标与患者预后结局的危险程度。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆miRNA-21-5p水平与LUS评分对ALI患者预后的诊断价值。结果中危组血浆miRNA-21-5p、BNP、EVLWI及LUS评分均低于重危组(P<0.05),但均高于轻危组(P<0.05);而中危组OI高于重危组(P<0.05),但低于轻危组(P<0.05)。三组D-dimer均无统计学差异(P>0.05)。血浆miRNA-21-5p水平及LUS评分和APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.857,P=0.026;r=0.795,P=0.036)。死亡组的血浆miRNA-21-5p、BNP、EVLWI及LUS评分显著高于存活组(P<0.05),但OI则显著低于存活组(P<0.05)。血浆miRNA-21-5p水平与LUS评分是ALI患者预后结局的危险因素(OR=3.656,P=0.013;OR=2.913,P=0.029)。血浆miRNA-21-5p切点3.25与LUS评分切点17.50对预测ALI患者短期预后的曲线下面积为0.856,灵敏度为84.2%和特异度为81.7%(P=0.018)。结论血浆miRNA-21-5p与LUS评分能有效评估ALI患者病情严重程度,对短期预后结局预测有较好价值。

急性心肌梗死血清miRNA-21变化及其与细胞凋亡因子的相关性

目的 分析急性心肌梗死(AMI)患者血清微小RNA-21(miRNA-21)变化及其与细胞凋亡因子[半胱氨酸天冬酶-3(Caspase-3)、可溶性肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(sTRAIL)、可溶性凋亡相关因子(sFas)]的相关性。方法 选取北京市大兴区人民医院2020年4月至2022年4月112例AMI患者作为研究组,根据冠脉病变程度分为单支组(n=30)、双支组(n=48)及三支组(n=34),选取同期健康体检者70名作为对照组。采用实时荧光定量聚合链式反应技术检测血清miRNA-21水平,酶联免疫吸附法检测血清Caspase-3、sTRAIL及sFas水平。比较所有受试者血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平,采用Pearson系数分析miRNA-21与Caspase-3、sTRAIL及sFas的相关性,采用ROC曲线分析血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas对AMI的诊断价值,采用Spearman系数分析miRNA-21、Caspase-3、s TRAIL及s Fas与冠脉病变程度的相关性。结果 研究组血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,AMI患者血清miRNA-21均与Caspase-3、sTRAIL、sFas呈正相关(P<0.05);由ROC曲线可知,血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及s Fas联合诊断AMI的AUC为0.940,高于四者单独诊断的0.788、0.749、0.775、0.756(P<0.05);三组血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平相比:三支组>双支组>单支组,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示,miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas均与冠脉病变程度呈正相关(P<0.05)。结论 miRNA-21与细胞凋亡因子在AMI患者血清中呈高表达,且均与冠脉病变程度相关,有望成为诊断AMI的参考指标。

恒温扩增检测miRNA-21-5p系统的构建和初步评价

目的建立一种基于滚环扩增和CRISPR-Cas9系统的荧光检测miRNA-21-5p方法,并对检测性能进行初步评价。方法设计一种特异性的锁式探针识别靶标miRNA-21-5p,在大肠杆菌DNA连接酶和Phi29 DNA聚合酶的作用下,进行滚环扩增,扩增形成一条长重复单链。在Cas9酶的辅助下进行特异性识别,并形成双链DNA,然后通过加SYBR GreenⅠ荧光染料与形成双链DNA产物结合,产生荧光信号的荧光强度与双链DNA产物浓度成正比,并对该系统进行特异性和灵敏度进行分析。用构建的方法对胃癌患者血清和健康人血清进行miRNA检测,是否成功检测miRNA,同时检测两组血清中胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅠ/Ⅱ)水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,根据曲线下面积(AUC)分析miRNA-21-5p、胃蛋白酶原对胃癌的诊断价值。结果构建的扩增系统能检测到血清中miRNA,胃癌血清中miRNA-21-5p荧光强度高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,miRNA-21-5p、PGⅠ/Ⅱ单独诊断胃癌的AUC分别为0.72、0.80,两者联合检测诊断的AUC为0.85,高于任意单个指标诊断。结论用该方法直接检测miR-21-5p操作方便快捷,不需要复杂热循环仪器,适用范围广。

BNP联合miRNA-21对冠心病心肌缺血的诊断价值

目的:脑钠肽(BNP)联合血浆微小核糖核酸-21(miRNA-21)对冠心病(CHD)心肌缺血的诊断价值。方法:纳入2020年4月至2022年3月于我院进行诊治的141例疑似CHD心肌缺血患者,根据检查结果分为冠状动脉造影(CAG)阳性组(69例)和CAG阴性组(72例)。分析血清BNP、血浆miRNA-21联合对CHD心肌缺血的诊断价值。结果:与CAG阴性组比较,CAG阳性组患者血清BNP、血浆miRNA-21显著升高,P均=0.001。经ROC曲线结果显示,BNP、miRNA-21及三项联合检测诊断CHD心肌缺血的曲线下面积(AUC)分别为0.692、0.726、0.731、0.874。三项联合检测的AUC显著高于各项单独检测(P均=0.001)。结论:BNP、miRNA-21联合能够显著提高对冠心病心肌缺血的诊断价值。

miRNA-27、FGF21及AGE在2型糖尿病血清中的表达及其与微血管并发症的相关性

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清中miRNA-27、纤维细胞生长因子21(FGF21)及糖化终末产物(AGE)的表达,并分析它们与微血管并发症的相关性。方法 回顾性选取2020年2月至2022年2月在沧州市人民医院进行诊疗的89例2型糖尿病患者纳入研究组,根据患者是否合并微血管并发症(包括糖尿病所致的周围神经病变、肾脏病变和视网膜病变)将其分为合并组(n=41)和未合并组(n=48)。另选50例在本院进行健康体检的志愿者纳入对照组。比较研究组和对照组的miRNA-27、FGF21及AGE水平;比较合并组和未合并组患者的miRNA-27、FGF21、AGE水平、生化指标[总胆固醇、甘油三酯、甘油三酯、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、尿酸、血肌酐及尿素氮]水平,并探究影响患者合并微血管并发症的影响因素。结果 研究组的miRNA-27、FGF21、AGE水平分别为2.31±0.42、(388.27±23.09) ng/mL、(89.29±4.98) UA,均高于对照组[0.89±0.31、(268.56±26.18) ng/mL、(70.22±5.16) UA],差异均有统计学意义(P<0.05)。合并组患者的miRNA-27、FGF21、AGE水平分别为2.45±0.44、(399.26±25.49) ng/mL、(92.34±4.28) UA,均高于未合并组[1.98±0.36、(316.44±23.91) ng/mL、(76.28±3.92) UA],差异均有统计学意义(P<0.05)。两组间总胆固醇、LDL-C水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);合并组患者的HDL-C水平为(1.12±0.33) mmo/L,低于未合并组[(1.28±0.36) mmo/L],甘油三酯、尿酸、血肌酐、尿素氮水平分别为(2.33±0.51) mmo/L、(355.26±41.08)μmol/L、(92.08±9.04)μmol/L、(7.99±2.15) mmol/L,均高于未合并组[(1.98±0.46) mmo/L、(336.11±45.26)μmol/L、(72.45±9.87)μmol/L、(5.06±1.03) mmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析,可知FGF21、AGE、miRNA-27均为2型糖尿病合并微血管并发症产生的影响因素(P<0.05)。结论 2型糖尿病患者的血清中miRNA-27、FGF21和AGE水平较高,且在合并微血管并发症的2型糖尿病患者中表达更高,与2型糖尿病的微血管并发症的发生具有一定的相关性。

糖通饮经miRNA-21/TGF-β1/Smad信号转导对糖尿病肾病大鼠肾脏功能的保护作用

目的基于miRNA-21/TGF-β_(1)/Smad信号转导探讨糖通饮(黄芪、生地黄、山药、山萸肉等)对糖尿病肾病(DN)大鼠的肾脏保护作用及机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组(13.5 mg·kg^(-1))及糖通饮低、中、高剂量组(6.21、12.42、24.84 g·kg^(-1)),每组10只。采用高脂高糖饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素制备DN大鼠模型。模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,连续8周。采用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白;全自动生化分析仪检测血清空腹血糖、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平;HE及PAS染色法观察肾组织病理改变;RT-PCR法检测肾组织miRNA-21、转化生长因子(TGF)-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达水平;Western Blot法检测肾组织TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达。结果与正常组比较,模型组的空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平均明显升高(P<0.05);肾小球系膜细胞增生,基底膜增厚,肾小管萎缩,小管间质间均可见有炎性细胞的浸润,肾小球系膜区可见明显PAS阳性染色物质沉积;大鼠肾组织miRNA-21、TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达及TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达均明显上调(P<0.05)。与模型组比较,糖通饮各剂量组的空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平均明显降低(P<0.05);肾小球和肾小管病变程度均出现减轻,PAS阳性染色物质均有不同程度减少;糖通饮中、高剂量组大鼠肾组织miRNA-21、TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达及TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达均明显下调(P<0.05)。结论糖通饮可能通过下调miRNA-21的表达,抑制TGF-β_(1)/Samd信号转导,从而有效降低细胞外基质进行性累积,从而改善DN大鼠的肾脏损伤,保护其肾脏功能。

老年慢性心力衰竭病人血清微RNA-21、白细胞介素-6、脑利钠肽水平与预后的关系研究

目的 研究老年慢性心力衰竭(CHF)病人血清微RNA-21(miRNA-21)、白细胞介素-6(IL-6)、脑利钠肽(BNP)与预后的关系。方法 将唐山中心医院2020年1月至2021年1月住院的老年慢性心力衰竭病人120例作为研究对象,随访至2022年1月31日,以发生CHF再入院、全因死亡的病人为预后不良(n=46),其余病人为预后良好组(n=74),比较两组血清miRNA-21、IL-6、BNP水平及心功能。采用logistic回归分析老年CHF病人预后的影响因素。建立受试者操作特征(ROC)曲线,分析血清miRNA-21、IL-6、BNP水平对老年CHF病人预后的评估价值。结果 预后良好组心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的构成比例分别为50.00%、31.08%、18.92%,预后不良组分别为10.87%、47.83%、41.30%(P<0.05)。预后良好组LVEF高于预后不良组,LVEDD低于预后不良组(P<0.05)。预后良好组血清miRNA-21、IL-6、BNP水平均低于预后不良好组(P<0.05)。logistic回归显示:左室射血分数(LVEF)及三个血清指标(miRNA-21、IL-6、BNP)均是CHF病人预后不良的危险因素(P<0.05,OR>1)。ROC分析显示:miRNA-21、IL-6、BNP单独与联合预测CHF病人预后的AUC 95%CI分别为:0.74(0.52,0.96)、0.69(0.43,0.93)、0.76(0.58,0.94)、0.86(0.77,0.94),联合预测效能最高。结论 血清miRNA-21、IL-6、BNP水平升高是CHF病人预后不良的危险因素,通过血清miRNA-21、IL-6、BNP水平可预测CHF病人的预后。在预测价值上miRNA-21最高,BNP次之,第三为IL-6。三种指标联合预测价值高于任何单一指标。

miRNA-21提高骨髓间充质干细胞心肌样分化和旁分泌的作用

目的 探讨miRNA-21提高BMSC向心肌样细胞分化和促进旁分泌的作用。方法 分离培养骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC),行BMSC性质鉴定;通过构建缺血心肌动物模型;健康SD大鼠20只,随机分为miR-21-OE组、miR-21-KD组和对照组,每组各5只;将成功构建的miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒载体侵染BMSC,使用western-blot检测cTnI、Ajuba、isl1的表达情况。分组将BMSC移植到急性缺血心肌SD大鼠动物模型中,western-blot鉴定各组中BMSC体内分化为心肌样细胞VEGF、bFGF等的表达情况。结果 成功分离培养BMSC,成功构建miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒感染BMSC;WB检测到cTnI在miR-21-OE组高表达,当miR-21表达增高时,抑制Ajuba的表达,加强Isl1表达。生物细胞学技术检测miR-21-OE组心肌梗死区域缩小,VEGF及bFGF表达增高。结论 miRNA-21能够提高BMSC向心肌样细胞分化能力和促进BMSC的旁分泌作用,从而提高缺血心肌功能。

血清miR-199、miR-21对复发性自然流产患者流产再发生的预测价值分析

目的探讨miRNA-199、miR-21对复发性自然流产(RSA)患者流产再发生的预测价值。方法回顾性选取2021年7月至2023年5月湖州市第三人民医院妇科诊治的RSA患者95例,根据是否再发生流产分为再发生组和未发生组。收集患者临床资料,抽取患者肘静脉血检测血清miR-199、miR-21水平。随访观察95例RSA患者孕28周流产再发生率。比较再发生组与未发生组患者临床资料及血清miR-199、miR-21水平;分析RSA患者流产再发生的影响因素;分析血清miR-199、miR-21对RSA患者流产再发生的预测效能。结果95例RSA患者均无失访,其中孕28周流产再发生24例,发生率为25.26%(24/95),71例未发生。再发生组年龄≥35岁、自然流产次数≥4次患者比例均高于未发生组(均P<0.05),孕酮水平及超声多模态评分均低于未发生组(均P<0.05)。再发生组血清miR-199、miR-21水平均高于未发生组(P<0.05)。自然流产次数≥4次(OR=2.984)及血清miR-199(OR=4.141)、miR-21(OR=4.926)水平升高是RSA患者流产再发生的独立危险因素(均P<0.05),超声多模态评分(OR=0.206)是保护因素(P<0.05)。血清miR-199、miR-21水平预测RSA患者流产再发生的AUC分别为0.779、0.804,最佳截断值分别为3.57、2.95;两者联合预测AUC为0.907,明显高于各指标单独预测。结论RSA患者血清miR-199、miR-21均呈高表达,与流产再发生密切相关,两者联合预测流产再发生的价值较高,有助于指导临床做进一步决策与治疗。

miRNA-21在胸腔积液中表达及临床意义

目的:了解miRNA-21在胸腔积液中的表达及临床意义。方法:选取蚌埠市第三人民医院呼吸内科住院治疗的60例胸腔积液患者,其中恶性胸腔积液45例(肺鳞癌、肺腺癌、小细胞肺癌各15例)、良性胸腔积液15例。每例取13 mL新鲜胸腔积液提取miRNA,采用RT-PCR法检测各组胸腔积液中miRNA-21的相对表达量,采用ROC曲线评价miRNA-21对恶性胸腔积液诊断效能。结果:恶性组胸腔积液中miRNA-21表达水平(7.46±1.16)高于良性组(6.16±0.60),差异有统计学意义(P<0.05)。肺鳞癌组(8.15±0.74)、肺腺癌组(8.08±0.78)、小细胞肺癌组(8.10±0.66)与良性组(6.16±0.60)比较,差异均有统计学意义(P<0.05),恶性胸腔积液各组之间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC分析结果显示,miRNA-21诊断恶性胸腔积液,曲线下面积0.977,灵敏度为87.8%,特异度为86.70%。结论:miRNA-21高表达在恶性胸腔积液的诊断方面具有一定的诊断效能,可能成为一种有效的诊断标志物。

miRNA-21在糖尿病肾脏病的作用机制及中药干预新进展

糖尿病肾脏病是糖尿病的并发症之一,可进展至终末期肾脏病。近年研究发现,miRNA-21可通过调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)、Wnt/β-连环蛋白等信号通路影响糖尿病肾脏病的进展。中药对miRNA-21表达具有调节作用,可以靶向miRNA-21调控TGF-β1/Smads、磷酸酶张力蛋白同源物/PI3K/AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、过氧化物酶体增殖物激活受体等信号转导,引发信号级联反应,干预纤维化、炎症、氧化应激、自噬等病理过程。就miRNA-21在糖尿病肾脏病中的作用机制及中药对其的干预作用进行综述。

血清外泌体miRNA-21在肝癌诊断中的应用

目的探究血清外泌体miRNA-21的表达水平在肝癌诊断中的应用。方法收集2018年12月-2019年12我院收治肝癌患者30例为研究对象,另选取正常健康体检者30例做对照组,收集所有受试者外周血血清,提取血清外泌体,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清外泌体miRNA-21表达水平;分析血清外泌体miRNA-21表达水平与肝癌患者临床病理参数的关系。绘制ROC曲线分析miRNA-21检测对肝癌的诊断价值。Logistic回归分析影响肝癌患者发生的危险因素。结果与对照组比较,肝癌患者血清外泌体miRNA-21表达水平明显升高;miRNA-21表达水平与患者年龄、性别、AFP水平无关;血清外泌体miRNA-21-5p和miRNA-21-3p表达水平诊断的肝癌患者的AUC分别为0.711、0.977,特异度分别为80%、100%,灵敏度分别为66.7%、90%,miRNA-21诊断肝癌患者的AUC为0.982,特异度为90%,灵敏度为96.7%。结论miRNA-21-5p和miRNA-21-3p在肝癌患者血清外泌体中显著高表达,两者联合检测可提高对肝癌诊断的特异度及灵敏度,对肝癌的诊断有一定的诊断意义。

miRNA-21的循环放大检测及成像

报道了一种miRNA循环放大检测系统,该系统涉及红色发射碳量子点(CDs)以及聚多巴胺纳米球(PDANSs)。通过纳米材料与DNA的自组装,在激发光源410、542 nm的照射下,产生650、585 nm的荧光信号,通过荧光信号的关-开,可以实现对靶标miRNA-21循环放大的双荧光检测与细胞成像,极大提高检测的灵敏度与准确性。

LncRNA TUG1靶向调节miR-21/PTEN轴抑制糖尿病肾病大鼠肾纤维化的作用机制研究

目的:探索LncRNA TUG1在糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化中的作用及其潜在分子机制。方法:应用链脲佐菌素构建DN大鼠模型,LncRNA表达谱芯片筛选DN大鼠肾脏组织中LncRNA的差异表达。应用慢病毒试验过表达LncRNA TUG1,苏木精-伊红(HE)染色检测过表达LncRNA TUG1对DN大鼠肾脏组织形态学的改变;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测过表达LncRNA TUG1对miR-21及纤维连接蛋白(FN)、人Ⅳ型胶原(Col-4)和转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA表达水平的影响;Western blot检测FN、Col-4、TGFβ1、磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化磷脂肌醇3激酶(p-PI3K)及磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达水平。应用生物信息软件预测miR-21与LncRNA TUG1的作用关系,双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与LncRNA TUG1的相互作用关系。构建高糖诱导的肾小球系膜HBZY-1细胞模型,应用慢病毒试验方法过表达LncRNA TUG1或应用miR-21 mimic处理细胞,采用CCK-8试验检测他们对细胞增殖的影响,使用RT-qPCR实验检测其对HBZY-1细胞FN、Col-4、TGFβ1 mRNA表达水平的影响。结果:DN大鼠肾脏组织中LncRNA TUG1的表达水平显著降低。过表达LncRNA TUG1抑制DN大鼠FN、Col-4、TGFβ1 mRNA以及蛋白表达水平,肾组织病理形态学明显改善。双荧光素酶报告基因实验结果显示,LncRNA TUG1通过直接靶向方式与miR-21结合。过表达LncRNA TUG1能够抑制miR-21表达,上调PTEN并可能抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路。过表达LncRNA TUG1抑制HBZY-1细胞增殖,抑制FN、Col-4、TGFβ1 mRNA在细胞中的表达水平;应用miR-21 mimic处理能够逆转LncRNA TUG1过表达产生的增殖抑制和纤维化抑制效应。结论:LncRNA TUG1靶向调节miR-21/PTEN轴抑制DN大鼠肾纤维化。

黄芪总黄酮对特发性肺纤维化miRNA-21、let-7 d及TGF-β/smad信号干预作用

目的：研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用。方法：C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组。模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素（10 mg/kg）,假手术组予等量生理盐水,造模后治疗组予黄芪总黄酮（43 mg/kg）灌胃,假手术组和模型组与等量生理盐水灌胃。第28天取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,realtime-PCR分析miRNA-21、let-7 d表达变化,Western-Bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达。结果：BLM诱导肺纤维化miRNA-21明显上调,而let-7 d下调,在此过程中信号蛋白smad7表达增强mad3磷酸化水平减弱,EMT标记蛋白α-SMA表达增高而E-cadherin减少,黄芪总黄酮对上述改变具有逆转作用,但对let-7 d表达无影响。结论：黄芪总黄酮可通过抑制miRNA-21,增加smad7表达,使TGF-β1/smad激活能力下降,抑制肺纤维化EMT作用。

miRNA-21和miRNA-134在乳腺癌患者血清中表达情况及其临床意义

【目的】研究乳腺癌相关miRNA在正常人群及乳腺癌患者血清中的表达情况,统计分析其在乳腺癌诊断中的临床价值。【方法】收集47例乳腺癌及50例正常体检人群血清,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组miR-630、miR-21、miR-195、miR-134、miR-200a、miR-381、miR-1228的表达情况。分析单个血清miRNA在乳腺癌诊断中的价值,进一步用统计学方法分析多个miRNA联合检测的诊断价值。【结果】相比正常体检人群,乳腺癌患者血清中miR134和miR-21表达增加,P<0.01;miR-134的表达在早期和晚期患者之间没有明显区别,P=0.143;miR-21在晚期患者中表达增加,P=0.004;miR-195、miR-630、miR-200a、miR-381、miR-1228的表达量在两组之间差异没有统计学意义。ROC曲线分析结果显示,miR-21在乳腺癌诊断中的AUC为0.82(95%CI,0.71-0.88),P<0.001;miR-134在乳腺癌诊断中的AUC为0.88(95%CI,0.80-0.94),P<0.001。miR-21联合miR-134在乳腺癌诊断中AUC值为0.95(95%CI,0.89-0.99),P<0.001;两者联合优于单一检测miR-21或者miR-134,P<0.05。【结论】miR-21和miR-134在乳腺癌患者血清中升高,血清中miR-21和miR-134的表达情况,可以作为乳腺癌诊断的理想标志物。