儿童支气管哮喘患者血浆中miRNA-125b及miRNA-133b的表达及临床意义

目的探讨miRNA-125b和miRNA-133b在支气管哮喘患儿中表达水平及其辅助诊断价值。方法纳入2016年1月~11月常州市儿童医院、高邮市中医医院30例哮喘患儿,分别收集其急性发作期和稳定期血液标本(AP组,SP组)。同期匹配30例变应性鼻炎患儿(AR组)及30例健康儿童为对照(NC组)。应用实时荧光定量PCR检测miRNA在各组中的表达水平并相互比较。应用ROC曲线及AUC(95%CI)评估其作为哮喘诊断指标的诊断效能。结果 miRNA-125b在AP组及SP组中的表达量较AR组升高,差异有统计学意义(t=3.913,3.120,P值均<0.01)。miRNA-133b在AP组及AR组中的表达量较高,与NC组相比差异有统计学意义(t=4.426,4.720,P值均<0.01)。miRNA-125b在哮喘诊断中最佳临界值为1.998,敏感度为64.52%,特异度为92.67%,AUC为0·798 9,95%CI为0.7111~0.886 4;miRNA-133b在哮喘急性期及变应性鼻炎等气道炎症性疾病发作期中诊断最佳临界值为1.667,敏感度为58.06%,特异度为86.67%,AUC为0.727 4,95%CI为0.5865~0.8630。结论哮喘患儿中miRNA-125b表达量较NC组及AR组升高,miRNA-125b可作为哮喘辅助诊断指标,miRNA-133b可用于气道炎症性疾病发作期的辅助诊断。

miRNA-133b在胃癌组织中的表达及临床意义

目的分析miRNA-133b表达水平的改变与胃癌临床病理特征之间的关系,探讨miRNA-133b在胃组织中表达的意义。方法选择手术治疗的胃癌患者肿瘤组织63例为研究对象,取切缘正常胃黏膜为对照,设计针对miRNA-133b的特异性引物,应用定量PCR方法检测胃癌组织中miRNA-133b表达水平的变化。结合临床病理资料对miRNA-133b的表达水平与肿瘤病理类型及临床病理分期之间的关系进行分析。检测胃癌细胞株中miRNA-133b的表达水平变化。结果 miRNA-133b在胃癌组织中表达水平明显低于正常胃黏膜组织[△Ct:(-6.94±3.319)vs(-4.98±2.846),P<0.001]。其中45例miRNA-133b下调≥2.0倍,占71%;6例上调≥2.0倍,占10%;12例无明显变化,占19%。miRNA-133b与肿瘤病理类型、肿瘤TNM分期无明显相关性(P>0.05)。与正常胃黏膜细胞相比,在胃癌细胞株中miRNA-133b表达明显下调(P<0.05)。结论在胃癌组织及胃癌细胞中,miRNA-133b的表达水平均有不同程度的降低,但其下降程度和比例与临床特征无明显相关性。miRNA-133b的表达水平下调可能与促进肿瘤细胞增殖有关。

冠心病病人外周血微RNA-133b表达与预后的关系分析

目的 探究冠心病病人外周血微RNA-133b(miR-133b)表达水平,并分析其表达与病人预后的关系。方法 选取2019年7月至2021年1月于华北石油管理局总医院就诊的冠心病病人95例,其中稳定性冠心病(SACD)病人54例为SACD组,急性冠状动脉综合征(ACS)41例为ACS组,另选同期该院进行体检的健康人群60例作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-133b水平;随访6个月,根据是否出现主要心脏不良事件,分为预后不良组(出现主要心脏不良事件,33例)和预后良好组(未出现主要心脏不良事件,62例)。采用Spearman相关性分析检验血清miR-133b水平与Gensini评分的关系;采用多因素logistic回归分析影响冠心病病人预后的危险因素;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-133b水平对冠心病病人预后不良的预测价值。结果 SACD组、ACS组身体质量指数、高血压、吸烟史及血脂异常者比例高于对照组(P<0.05),ACS组Gensini评分、病变支数≥3支占比高于SACD组(P<0.05)。ACS组、SACD组血清miR-133b(1.59±0.15比1.36±0.12比1.02±0.05)水平均高于对照组(P<0.05),ACS组血清miR-133b水平高于SACD组(P<0.05)。SACD组病人血清miR-133b水平与Gensini评分呈正相关(r=0.58,P<0.001),ACS组病人血清miR-133b水平与Gensini评分也呈正相关(r=0.57,P<0.001)。预后不良组病人Gensini评分、血清miR-133b水平及病变支数≥3支占比高于预后良好组(P<0.05)。Gensini评分、病变支数、miR-133b均为影响冠心病病人预后的危险因素(P<0.05)。血清miR-133b水平预测冠心病病人预后不良的曲线下面积为0.83,最佳截断值为1.55,灵敏度高达97.0%,特异度为64.5%。结论 冠心病病人血清miR-133b水平升高,对病人的预后不良有一定的预测价值。

RohA信号通路介导miR-133b调控脑缺血再灌注后血脑屏障通透性

目的:探究miR-133b在脑缺血再灌注后血脑屏障通透性调控中的作用及其机制。方法:采用大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)小鼠模型,小鼠脑内注射miR-133b agomir进行miR-133b过表达,TTC染色检测miR-133b过表达对小鼠脑梗死体积的影响;实时定量PCR检测MCAOR小鼠缺血侧脑组织及外周血miR-133b表达水平;采用悬挂实验评估miR-133b过表达对MCAO/R模型小鼠神经功能改善的影响;Western blot及ELISA检测miR-133b过表达对MCAO/R模型小鼠脑内RohA、claudin-5、ZO-1表达水平的影响;采用伊文思蓝渗透法评估小鼠血脑屏障通透性。结果:在MCAO/R模型小鼠缺血侧脑皮层组织与血浆中的miR-133b表达水平均降低,miR-133b过表达可显著减少MCAO/R小鼠脑梗死的体积,改善小鼠神经功能损害;miR-133b过表达可使MCAO/R小鼠脑内缺血区RohA、claudin-5、ZO-1蛋白表达显著降低。结论:小鼠脑缺血再灌注后体内miR-133b表达水平下降,miR-133b过表达具有降低脑缺血再灌注后脑血屏障通透性,发挥抗脑缺血作用,其机制可能是通过RohA信号通路介导的。

血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平对早期肝细胞癌的诊断价值

目的探讨微小RNA(micro RNA,miRNA)-574-5p、miRNA-106b、高敏甲胎蛋白异质体(highly sensutive-alpha fetoprotein heterogeneity L3,hs-AFP-L3)水平检测对早期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的诊断价值。方法选择吉林省肿瘤医院2020年3月至2022年3月收治的HCC患者186例(HCC组)、肝硬化患者120例(肝硬化组)、接受体检的健康人员120例(对照组)为研究对象。比较各组血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平,并比较HCC组不同病理特征患者血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平,绘制受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3对早期HCC的诊断价值。结果HCC组、肝硬化组和对照组患者血清miRNA-574-5p(1.09±0.33比0.84±0.27比0.61±0.18)、miRNA-106b(1.22±0.39比0.71±0.22比0.56±0.19)、hs-AFP-L3[(23.08±4.36)μg/L比(2.61±0.79)μg/L比(0.47±0.14)μg/L]水平差异有统计学意义,HCC组患者各项指标均显著高于肝硬化组和对照组,肝硬化组患者各项指标均显著高于对照组(P均<0.05)。HCC肿瘤个数为多发、肿瘤最大径≥5 cm、中晚期、有远处转移、有静脉瘤栓患者血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平分别高于单发[miRNA-574-5p:1.24±0.43比0.83±0.27;miRNA-106b:1.46±0.45比0.97±0.31;hs-AFP-L3:(25.73±5.21)μg/L比(19.15±4.25)μg/L]、肿瘤最大径<5 cm[miRNA-574-5p:1.29±0.46比0.82±0.24;miRNA-106b:1.51±0.44比0.95±0.29;hs-AFP-L3:(26.82±5.03)μg/L比(19.12±3.99)μg/L]、早期[miRNA-574-5p:1.31±0.44比0.90±0.28;miRNA-106b:1.49±0.51比0.99±0.32;(26.60±4.98)μg/L比(18.94±4.02)μg/L]、无远处转移[miRNA-574-5p:1.36±0.46比0.88±0.25;1.45±0.41比0.96±0.32;hs-AFP-L3:(26.79±5.44)μg/L比(19.04±3.83)μg/L]、无静脉瘤栓患者[miRNA-574-5p:1.39±0.43比0.92±0.31;miRNA-106b:1.43±0.39比1.0±0.34;hs-AFP-L3:(26.41±4.54)μg/L比(20.11±4.01)μg/L](P<0.05);肝功能Child-Pugh分级A级、B级、C级患者血清miRNA-574-5p(0.85±0.26比1.08±0.37比1.27±0.40)、miRNA-106b(0.92±0.29比1.15±0.35比1.41±0.38)、hs-AFP-L3[(18.69±3.72)μg/L比(23.17±4.88)μg/L比(26.45±5.32)μg/L]含量逐渐增加(P均<0.05)。miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3联合检测诊断早期HCC的曲线下面积为0.919(95%CI为0.873~0.980),敏感度和特异度分别为0.882、0.901。结论miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3联合检测对早期HCC的诊断具有较高的临床价值。

miRNA-133b-3p对PC12细胞P2rx4的表达调控及细胞钙活动的实验观察

目的:从离体细胞水平观察miRNA-133b-3p调控P2rx4表达对神经元钙活动的影响。方法:用转染试剂将miRNA-133b-3p mimic和miRNA-133b-3p inhibitor转入PC12细胞中。转染48 h后,用荧光定量PCR的方法检测PC12细胞中miRNA-133b-3p的含量,P2rx4 mRNA的表达变化;用免疫印迹的方法检测P2rx4受体蛋白的表达变化;用胞内钙成像技术检测ATP孵育后细胞中钙离子浓度的变化。结果:转染48 h后,与阴性对照组相比,加入miRNA-133b-3p mimic后PC12细胞中miRNA-133b-3p的含量明显增加,P2rx4 mRNA和P2rx4蛋白的表达减少,ATP孵育后细胞中钙离子浓度的升高明显减弱。转染inhibitor后,细胞内miRNA-133b-3p的含量明显减少,P2rx4 mRNA和P2rx4蛋白的表达增加,ATP孵育后胞内钙离子浓度的升高明显增强。结论:miRNA-133b-3p通过负向调控P2rx4的表达来影响细胞钙活动。

miRNA-133b在胃癌中的表达及预后价值分析

目的探讨微小RNA133b(miRNA-133b)在胃癌中的表达及其对人胃癌细胞MKN-1增殖能力的影响,分析其与胃癌患者临床特征和预后的关系。方法收集80例同一胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜上皮组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测3种组织以及人胃癌细胞MKN-1和人正常胃黏膜细胞GES-1中miRNA-133b的表达情况。将转染miRNA-133b模拟物(miRNA-133b mimics)和miRNA-133b阴性对照(miRNA-133b NC)的人胃癌细胞MKN-1分别作为miRNA-133b mimics组和miRNA-133b NC组,将仅加入LipofectamineTM2000的人胃癌细胞MKN-1作为对照组。采用qRT-PCR法检测转染效果,CCK-8法检测上调miRNA-133b表达对人胃癌细胞MKN-1增殖情况的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测上调miRNA-133b表达后人胃癌细胞MKN-1中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(BAX)、cleaved胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)的表达情况。分析胃癌组织中miRNA-133b的表达与患者临床特征及预后的关系。结果miRNA-133b在人胃癌细胞MKN-1中的相对表达量明显低于人正常胃黏膜细胞GES-1(P﹤0.01)。miRNA-133b在胃癌组织中的相对表达量低于癌旁组织和胃黏膜上皮组织(P﹤0.05)。转染后,miRNA-133b mimics组人胃癌细胞MKN-1中miRNA-133b的相对表达量高于miRNA-133b NC组和对照组,相对细胞存活比例低于miRNA-133b NC组和对照组,Bcl-2蛋白的相对表达量低于对照组和miRNA-133b NC组,BAX和cleaved caspase 3的相对表达量高于对照组和miRNA-133b NC组(P﹤0.05)。不同肿瘤直径、分化程度、浸润深度、淋巴结转移数量和TNM分期胃癌患者胃癌组织中miRNA-133b的表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-133b高表达胃癌患者的中位生存时间长于miRNA-133b低表达胃癌患者(P﹤0.05)。结论miRNA-133b可调控胃癌细胞的增殖过程,影响凋亡相关蛋白的表达,其表达的下调提示胃癌患者预后不良,miRNA-133b具有成为胃癌患者预后预测分子标志物的潜力。

血浆lncRNA SNHG12、miR-133b预测乳腺癌新辅助治疗效果的价值

目的探讨血浆长非编码RNA小核仁宿主基因12(lncRNA SNHG12)、微小RNA(miR)-133b预测乳腺癌新辅助治疗效果的价值。方法选取2022年1月至2023年1月在该院进行新辅助治疗的86例乳腺癌患者作为乳腺癌组,依据新辅助治疗效果分为病理学完全缓解(pCR)组和non-pCR组。另选取同期在该院进行健康体检的50例健康女性作为对照组。检测并比较所有研究对象lncRNA SNHG12、miR-133b表达水平。采用多因素Logistic逐步回归模型分析影响乳腺癌新辅助治疗效果的因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆lncRNA SNHG12、miR-133b单独及联合检测对乳腺癌新辅助治疗效果的预测价值。结果乳腺组血浆lncRNA SNHG12表达水平高于对照组,miR-133b表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。pCR组纳入34例患者,non-pCR组纳入52例患者。pCR组与non-pCR组雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2(HER-2)、细胞增殖核抗原、分子分型比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。pCR组lncRNA SNHG12表达水平低于non-pCR组,miR-133b表达水平高于non-pCR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic逐步回归分析结果显示,分子分型为HER-2过表达型、lncRNA SNHG12表达水平升高、miR-133b表达水平降低是乳腺癌新辅助治疗效果的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血浆lncRNA SNHG12、miR-133b单独检测预测乳腺癌患者新辅助治疗效果的曲线下面积(AUC)分别为0.850、0.951,均低于二者联合检测的0.963。86例乳腺癌中Luminal A型11例(pCR 1例、non-pCR 10例)、Luminal B型43例(pCR 12例、non-pCR 31例)、HER-2过表达型16例(pCR 14例、non-pCR 2例)、三阴型16例(pCR 7例、non-pCR 9例)。ROC曲线分析lncRNA SNHG12、miR-133b对4种不同亚型乳腺癌新辅助治疗效果的预测效能结果显示,血浆lncRNA SNHG12、miR-133b单独及联合检测预测Luminal B型乳腺癌患者新辅助治疗效果的AUC分别为0.753、0.974、0.981,预测HER-2过表达型乳腺癌患者新辅助治疗效果的AUC分别为0.804、0.857、0.893。预测三阴型乳腺癌患者新辅助治疗效果的AUC分别为0.849、1.000、1.000。结论乳腺癌患者血浆lncRNA SNHG12表达增高,miR-133b表达降低,二者联合检测对乳腺癌新辅助治疗效果具有较好的预测价值。

地红方通过miR-133b/DUSP1/JNK通路干预糖尿病肾病氧化应激损伤

目的研究地红方对糖尿病肾病细胞模型氧化应激损伤的影响。方法地红方含药血清制备,小鼠肾小球系膜细胞常规培养、传代。按以下分组:对照组(5.5mmol/L葡萄糖+正常血清)、高糖组(30mmol/L葡萄糖+正常血清)、地红方低剂量组(30mmol/L葡萄糖+5%地红方含药血清)、地红方中剂量组(30mmol/L葡萄糖+10%地红方含药血清)、地红方高剂量组(30mmol/L葡萄糖+20%地红方含药血清)。采用实时荧光定量PCR检测miR-133b、DUSP1 mRNA表达。Western blotting检测DUSP1、p-JNK、Drp1、Fis1蛋白表达。Elisa检测SOD、MDA表达。结果与高糖组比较,地红方组miR-133b、MDA、p-JNK、Drp1、Fis1表达明显下降(P<0.05),而DUSP1、SOD表达显著升高(P<0.05)。结论地红方可通过miR-133b/DUSP1/JNK通路调控线粒体分裂改善糖尿病肾病氧化应激损伤。

过敏性紫癜患儿血清miRNA-125b、HIF-1α水平与Th1/Th2比值的相关性

目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清微RNA(miRNA)-125b、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平与Th1/Th2比值的相关性。方法前瞻性选取2020年1月至2023年12月商洛市中心医院收治的97例HSP患儿为试验组,97名健康体检儿童为对照组。通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测miRNA-125b表达,酶联免疫吸附试验检测HIF-1α、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6及IL-1β等水平,流式细胞术检测Th1和Th2细胞数量及Th1/Th2比值。采用Pearson相关分析法分析miRNA-125b和HIF-1α与Th1/Th2比值的关系,并通过受试者操作特征(ROC)曲线评估血清miRNA-125b、HIF-1α及相关细胞因子水平对HSP的诊断价值。结果试验组患儿血清中miRNA-125b、HIF-1α、Th2细胞水平分别为0.82±0.18、125.78±20.54、7.83±1.57,均明显高于对照组(0.37±0.11、56.20±8.99、4.60±0.55),而Th1细胞、Th1/Th2比值水平分别为7.43±1.66、1.02±0.11,均明显低于对照组(11.89±2.80、2.90±0.58),差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组患儿血清TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-4的水平分别为(32.5±4.8)、(21.3±3.9)、(11.0±1.8)、(5.3±1.1)pg/mL,均明显高于对照组[(14.8±3.7)、(11.7±2.8)、(6.0±1.3)、(2.5±0.7)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miRNA-125b和HIF-1α与Th1/Th2比值、TNF-α、IL-6、IL-1β水平均呈显著负相关(P<0.05)。血清HIF-1α和miRNA-125b诊断HSP的曲线下面积分别为0.821和0.977。结论HSP患儿血清miRNA-125b和HIF-1α水平升高,Th1/Th2比值及相关免疫因子水平降低,检测血清HIF-1α和miRNA-125b水平对于诊断HSP有较高的临床价值。

miRNA-200b在糖尿病小鼠海马体中的异常表达及靶基因预测

目的分析糖尿病小鼠海马体miRNA-200b表达情况,并预测miRNA-200b靶基因。方法采用链脲佐菌素或联合高糖高脂饮食分别诱导1型和2型糖尿病小鼠模型,建模后处死小鼠,分离海马体组织,利用荧光定量PCR测定miRNA-200b表达量。通过miRWalk、miRDB和miRPathDB三个基因数据库预测miRNA-200b靶基因,进行GO分析和KEGG分析。结果成功建立糖尿病小鼠模型。糖尿病小鼠海马体中miRNA-200b表达量比正常小鼠下降(P<0.05)。生物信息学预测显示,miRNA-200b筛选到3个靶基因,分别是GAB1、SLC5A3和GICCL1,靶基因功能富集于糖代谢、脑部神经营养等信号通路。结论miRNA-200b在糖尿病小鼠海马体中显著下降,有望成为糖尿病治疗的新靶点。

miRNA-133b在卵巢癌组织中的表达及对MMP-9的影响

目的探讨microRNA-133b(miRNA-133b)在卵巢癌组织中的表达情况及对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法选取2016年3月至2019年10月住院行手术治疗卵巢癌患者52例,留取卵巢癌组织标本(病例组),随机选取同一时期55例因子宫肌瘤或宫颈癌行全子宫双附件切除患者的正常卵巢组织为对照组,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miRNA-133b与MMP-9 mRNA在2组标本中的表达情况,应用Pearson相关性分析对miRNA-133b和MMP-9 mRNA在卵巢癌组织中的表达量进行相关性分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析卵巢癌组织中miRNA-133b表达对卵巢癌诊断的价值。结果与正常卵巢组织相比,卵巢癌组织中miRNA-133b的相对表达量显著下调,MMP-9 mRNA的相对表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),且卵巢癌组织中MMP-9基因mRNA和miRNA-133b的表达均与卵巢癌患者的FIGO分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与患者年龄、组织学分级、肿瘤病理类型、手术残余病灶大小无关(P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示卵巢癌组织中miRNA-133b表达水平与MMP-9 mRNA表达量呈显著负相关性(r=-0.433,P=0.001)。卵巢癌组织中miRNA-133b表达水平预测卵巢癌的ROC曲线下面积为0.927(95%CI=0.881~0.975;P<0.05),最优截断点为1.638,预测卵巢癌的灵敏度和特异度分别为76.4%和94.2%。结论卵巢癌组织中miRNA-133b表达降低可能通过靶向上调MMP-9的表达,促进卵巢癌细胞的浸润和转移,从而在卵巢癌发生、发展中起作用,且miRNA-133b表达水平对卵巢癌的诊断有重要价值。

非小细胞肺癌患者血清miR-133b表达变化及其意义

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清miR-133b相对表达量的变化并探讨其临床意义。方法选择2012年1月~2015年5月我院收治的92例NSCLC患者为观察组,同期100名健康体检者为对照组。采用qRT-PCR法检测两组患者血清miR-133b相对表达量,分析观察组NSCLC患者血清miR-133b相对表达量与NSCLC患者临床病理参数和预后的关系。结果观察组、对照组血清miR-133b相对表达量分别为(0.95±1.56)、(1.92±1.61),两组相比,P<0.05。NSCLC患者血清miR-133b表达水平与患者吸烟史、肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P均<0.05)。NSCLC患者中,血清miR-133b高表达者1年生存率为76.79%(43/56),血清miR-133b低表达者1年生存率为52.78%(19/36),二者1年生存率相比,P<0.05。结论 NSCLC患者血清miR-133b相对表达量低于健康成年人。检测NSCLC患者血清miR-133b相对表达量有助于NSCLC的诊断、病情判断及预后评估。

慢性心力衰竭患者血清miR-133a、miR-133b水平与心功能和心肌重构的关系

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清miR-133a、miR-133b水平与心功能、心肌重构的关系。方法研究对象为132例CHF患者。心功能NYHA分为Ⅰ~Ⅱ级43例,Ⅲ级52例,Ⅳ级37例。超声心动图检查检测心功能指标心输出量(CO)、左室射血分数(LVEF)及左室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAP)、左心室后壁厚度(LVPW)、左室质量指数(LVMI)、左室重构指数(LVRI)。实时荧光定量PCR法检测血清miR-133a、miR-133b。结果 CHF患者血清miR-133a、miR-133b表达量随心功能分级升高而升高(P均<0.05)。LVEDD、LAP、LVPW、LVMI随心功能分级升高而升高,LVRI、CO、LVEF随心功能分级升高而降低(P均<0.05)。血清miR-133a、miR-133b相对表达量与CO、LVEF均呈负相关(r分别为-0.584、-0.622,-0.477、-0.514,P均<0.05)。miR-133a、miR-133b相对表达量与LAP、LVPW、LVMI均呈正相关(r分别为0.724、0.638,0.681、0.611,0.596、0.573,P均<0.05)。血清miR-133a、miR-133b相对表达量与LVEDD、LVRI无关(P均>0.05)。结论 CHF患者血清miR-133a、miR-133b表达量随心功能分级升高而升高。检测CHF患者血清miR-133a、miR-133b有助于判断患者心室重构情况。

血清miRNA-155-5p和miRNA-133a-3p表达对脓毒症心肌损伤的诊断价值

目的利用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p表达对脓毒症心肌损伤的诊断价值.方法前瞻性收集江苏大学附属医院收治的脓毒症患者,根据心脏超声分为对照组(n=48例)和心肌损伤组(n=40例).检测88例脓毒症患者血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p的表达量,采用ROC曲线评价血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p对脓毒症心肌损伤的诊断价值.结果与对照组比较,脓毒症心肌损伤组患者的miRNA-155-5p[(2.02-±0.45)vs.(2.89-±0.37)]和miRNA-133a-3p[(1.93±0.37)vs.(2.42±0.22)]表达量均明显增高(P<0.05).ROC曲线分析提示,miRNA-155-5p(AUC=0.92,95%CI 0.86~0.97,P=0.028,敏感度97.50%,特异度72.92%)和miRNA-133a-3p(AUC=0.87,95%CI0.80~0.95,P=0.040,敏感度95.00%,特异度70.00%)对脓毒症患者心肌损伤有较高的诊断价值.结论血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p的表达有助于诊断脓毒症心肌损伤.

急性心肌梗死患者循环血浆中miR-133a、miR-133b表达的研究

目的分析miR-133a、miR-133b在急性心肌梗死(AMI)患者血浆中的表达,并探讨miR-133a、miR-133b在诊断AMI中的应用价值。方法选取2017年1月至2017年12月于西安交通大学第一附属医院胸痛中心就诊的AMI患者为观察组(n=89),同期就诊于西安交通大学第一附属医院体检中心的既往无心脏病史,心电图正常的对照人群37例为正常对照组(n=37)。收集所有受试者的临床资料并提取血浆标本,实时定量PCR法检测循环血浆中miR-133a及miR-133b的表达水平。应用受试者工作特征曲线ROC评估对AMI的辅助诊断价值。结果AMI患者血浆中miR-133a及miR-133b的含量较正常对照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)分析表明:miR-133a的ROC曲线下面积AUC值为0.845(P<0.01),敏感度为84.5%,特异性为69.0%,漏诊率为15.5%,误诊率31.0%;miR-133b的ROC曲线下面积AUC值为0.702(P<0.01),敏感度为70.2%,特异性为51.7%,漏诊率为29.8%,误诊率为48.3%。结论循环miR-133a及miR-133b在诊断AMI方面具有较好的特异性和敏感性,可作为AMI诊断的生物学标志物。

结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中HIF-1α与miRNA-200b表达的相关性

目的探讨缺氧诱导因子HIF-1α与miRNA-200b在结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中的表达以及两者的相关性。方法采用实时定量PCR检测50例结直肠癌患者的结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α与miRNA-200b的表达。利用Co Cl_2构建结肠癌细胞系的缺氧诱导模型,通过实时定量PCR和Western blot分别测定缺氧的Caco-2细胞中HIF-1α和miRNA-200b基因表达并确立两者相关性。结果 HIF-1α在癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P〈0.01）,miRNA-200b在癌组织中的表达显著低于癌旁组织（P〈0.01）,且HIF-1α和miRNA-200b在癌组织中的表达呈负相关（r=-0.324,P〈0.05）。缺氧处理2 h后,HIF-1α表达升高,miRNA-200b表达降低;随着缺氧时间延长（4~12 h）HIF-1α表达逐渐降低,miRNA-200b的表达缓慢上升;缺氧16 h,HIF-1α的表达回升且达到另一个高峰,miRNA-200b的表达降至最低。Real-time PCR和Western blot联合检测发现,HIF-1α和miRNA-200b表达呈相反的趋势。结论 HIF-1α可能通过抑制miRNA-200b的表达从而参与结直肠癌上皮细胞EMT的过程。

低氧训练对肥胖大鼠脂肪组织miRNA-27b/PPARγ脂代谢通路的影响

目的:通过建立高脂饮食单纯营养性肥胖大鼠模型,结合脂肪组织中脂肪酸结合蛋白AFABP1、脂肪酸转运蛋白FATP4和胆固醇反转物ABCA1的表达水平变化,从脂类物质结合和转运的角度探讨低氧训练对miRNA-27b/PPARγ调节通路及其下游相关靶基因表达的影响。方法:SD大鼠肥胖模型验证成功后,随机分为常氧安静组(NC)、常氧训练组(NT)、低氧安静组(HC)和低氧训练组(HT)。NT和HT组分别以20 m/min、25 m/min进行水平跑台训练,持续训练4周,1 h/天,6天/周;NC和HC组不运动;低氧氧浓度为13.6%(相当于海拔3 500 m)。4周后取血清进行血脂测试,肾周脂肪采用q RT-PCR进行miRNA-27b、PPARγ、AFABP1、FATP4、ABCA1基因表达检测。结果:1)HT、HC和NT组大鼠体重低于NC组(P<0.01),NT组脂肪重量低于NC组(P<0.05),HT组脂肪重低于NC、HC组(P<0.01);2)HT、HC组的TC值低于NC组(P<0.05),HC、HT组的TG值高于NT组(P<0.01),HT、HC组的HDLC值低于NC、NT组(P<0.05);3)HT组的miRNA-27b表达较NC、NT和HC组下调(P<0.01);4)HT组的PPARγm RNA表达较NC、HC组上调(P<0.01);5)NT组的FABP1 m RNA表达较NC组上调(P<0.01),HC组较NC组下调(P<0.01),HT组较NC、HC组上调(P<0.01),HT组较NT组下调(P<0.01),HT组的FATP4 m RNA较NC组上调(P<0.01),HT、HC组的ABCA1 m RNA表达较NC、NT组下调(P<0.01)。结论:1)低氧训练较常氧训练和单纯低氧暴露降低肥胖大鼠体重和脂肪重量更有效;2)低氧训练通过抑制脂肪组织miRNA-27表达,上调PPARγ表达,影响下游靶基因AFABP1和FATP4的表达,促进脂肪酸的结合与转运,但却抑制ABCA1表达,引起HDL-C水平下降。

miRNA-130b在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨骨肉瘤组织中miRNA-130b的表达及其对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响。方法用Real-time PCR法检测48例骨肉瘤患者肿瘤组织与癌旁组织中miRNA-130b的表达水平。用脂质体法将miRNA-130b inhibitor瞬时转染入U2人骨肉瘤细胞,实时定量RT-PCR检测U2细胞miRNA-130b的表达,CCK8增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率,荧光素酶基因报告实验检测miRNA-130b与RUNX3之间的调控机制、荧光素酶的相对活性和转染后RUNX3及miRNA-130b的表达水平。结果骨肉瘤组织中miRNA-130b的表达明显高于癌旁组织,转染miRNA-130b inhibitor后U2细胞miRNA-130b的表达水平明显受抑制,人骨肉瘤细胞U2转染miRNA-130b inhibitor的细胞增殖速度明显下降,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率增高,细胞中RUNX3蛋白及m RNA表达水平明显升高;miRNA-130b显著抑制野生型RUNX3-3’UTR表达载体的荧光素酶活性;抑制miRNA-130b表达后,RUNX3表达明显升高;抑制RUNX3表达后,miRNA-130的表达无明显变化。结论 miRNA-130b在骨肉瘤中呈高表达水平,抑制miRNA-130b可能通过调控RUNX3抑制骨肉瘤细胞的增殖,并促进细胞凋亡。

miR-133b通过靶向调控EGFR影响食管鳞癌的侵袭、转移

目的探讨miR-133b在食管鳞癌侵袭、转移过程中的作用及机制。方法使用生物信息学工具预测miR-133b的靶基因;双荧光素酶报告基因实验验证miR-133b对靶基因表皮生长因子受体(EGFR)的直接靶向调控作用;细胞增殖实验、划痕实验和Transwell实验检测miR-133b的不同表达对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;qRT-PCR验证miR-133b与EGFR在食管鳞癌组织中的表达,并分析miR-133b与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。结果生物信息学工具预测EGFR为miR-133b的靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实miR-133b可与EGFR 3'UTR片段结合;体外实验通过上调食管鳞癌细胞中miR-133b的表达使细胞的增殖受阻(ECA109:P<0.05,KYSE150:P<0.01);细胞的迁移(ECA109:P<0.01,KYSE150:P<0.01)和侵袭能力(EC5A109:P<0.01,KYSE150:P<0.01)显著减弱。在食管鳞癌组织中miR-133b与EGFR的表达呈负相关性(P<0.01),且miR-133b的表达与食管鳞癌的TNM分期、淋巴结转移显著相关(P均<0.05)。结论 miR-133b可能通过下调EGFR的表达,抑制食管鳞癌的增殖、侵袭和转移,在食管鳞癌的演进中起负调控作用。