儿童支气管哮喘患者血浆中miRNA-125b及miRNA-133b的表达及临床意义

目的探讨miRNA-125b和miRNA-133b在支气管哮喘患儿中表达水平及其辅助诊断价值。方法纳入2016年1月~11月常州市儿童医院、高邮市中医医院30例哮喘患儿,分别收集其急性发作期和稳定期血液标本(AP组,SP组)。同期匹配30例变应性鼻炎患儿(AR组)及30例健康儿童为对照(NC组)。应用实时荧光定量PCR检测miRNA在各组中的表达水平并相互比较。应用ROC曲线及AUC(95%CI)评估其作为哮喘诊断指标的诊断效能。结果 miRNA-125b在AP组及SP组中的表达量较AR组升高,差异有统计学意义(t=3.913,3.120,P值均<0.01)。miRNA-133b在AP组及AR组中的表达量较高,与NC组相比差异有统计学意义(t=4.426,4.720,P值均<0.01)。miRNA-125b在哮喘诊断中最佳临界值为1.998,敏感度为64.52%,特异度为92.67%,AUC为0·798 9,95%CI为0.7111~0.886 4;miRNA-133b在哮喘急性期及变应性鼻炎等气道炎症性疾病发作期中诊断最佳临界值为1.667,敏感度为58.06%,特异度为86.67%,AUC为0.727 4,95%CI为0.5865~0.8630。结论哮喘患儿中miRNA-125b表达量较NC组及AR组升高,miRNA-125b可作为哮喘辅助诊断指标,miRNA-133b可用于气道炎症性疾病发作期的辅助诊断。

miRNA-125b靶向p16促进套细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭的机制探讨

目的:探讨miRNA-125b抑制靶基因p16对套细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:选择人源套细胞淋巴瘤细胞系JeKo-1作为实验对象。实验共分为五组:空白对照组(不转染)、miRNA-125b阴性对照组(转染miRNA-125b inhibitor-NC)、miRNA-125b抑制剂组(转染miRNA-125b inhibitor)、p16 siRNA阴性对照组(转染p16 siRNA-NC)、p16 siRNA组(转染p16 siRNA)。于转染后48 h收集细胞。采用RT-PCR法检测各组JeKo-1细胞miRNA-125b的表达水平;采用双荧光素酶靶标实验验证miRNA-125b与p16基因的靶向关系;采用Western Blot和RT-PCR法检测各组细胞p16基因的表达水平;采用MTS法检测各组细胞增殖水平;采用流式细胞术检测各组细胞周期分布;采用Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力。结果:与空白对照组、miRNA-125b inhibitor-NC组相比,miRNA-125b inhibitor组miRNA-125b表达水平显著降低,而p16表达水平显著升高,细胞增殖受到抑制、Je Ko-1细胞穿膜细胞数显著减少,细胞G0/G1期比例显著增加,而S期比例逐渐减少(P <0.05);与p16 siRNA-NC组相比,p16 siRNA组p16表达水平明显被抑制,细胞增殖能力及细胞侵袭能力均显著升高,细胞G0/G1期比例显著降低,而S期、G2/M期比例升高,差异均具有统计学意义(P <0.05)。双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,miRNA-125b与p16基因3’UTR端存在互补结合位点,miRNA-125b和p16能够靶向结合,p16基因是miRNA-125b的靶基因。结论:miRNA-125b能够通过抑制靶基因p16促进套细胞淋巴瘤细胞的增殖和侵袭能力,可通过抑制miRNA-125b,促进p16基因的表达,使套细胞淋巴瘤细胞阻滞于G0/G1期,抑制其增殖转化。

miRNA-125b对舌鳞状细胞癌的增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响

目的研究miRNA-125b对舌鳞状细胞癌的增殖、凋亡、侵袭及迁移产生影响。方法采用RT-qPCR检测手术切除的舌鳞癌组织及癌旁正常组织中miRNA-125b的表达,构建细胞实验,CCK-8法细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞的凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕试验检测细胞迁移能力。结果TSCC组织中miRNA-125b的表达明显低于癌旁正常组织(P<0.05);miRNA-125b过表达组中细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低,凋亡率明显升高(P<0.05);而miRNA-125b干扰组上述结果相反(P<0.05)。结论miRNA-125b在TSCC组织中低表达,低表达的miRNA-125b促进舌鳞状细胞癌的增殖,减少细胞凋亡,增强其侵袭及迁移能力。

miRNA-125b在恶性肿瘤发生发展中的研究进展

恶性肿瘤是导致人类死亡的重要原因之一,其发生发展与某些特定的微小RNA(miRNA)密切相关,miRNA在各种恶性肿瘤中发挥着癌基因或抑癌基因的作用。miRNA-125b是一种非编码小分子RNA,在多种恶性肿瘤的生物学行为中发挥关键作用。越来越多的研究发现,miRNA-125b或许能够成为诊断某些恶性肿瘤的生物学标志物,为恶性肿瘤的诊断、治疗及预后评估提供依据。本文就miRNA-125b在肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移、凋亡中的研究进展作一综述。

miRNA-125b、miRNA-34a在不同分型鼻息肉中的表达与相关性分析

目的探讨miRNA-125b、miRNA-34a水平在不同分型鼻息肉中的表达与相关性。方法选取2020年3月至2021年3月收治的初发鼻息肉及复发鼻息肉患者51例,正常对照20例。鼻息肉患者收集患者切除的鼻息肉组织,对照组收集鼻黏膜组织作为试验材料,共收集标本71份;采用全血细胞自动分析仪进行(嗜酸性粒细胞,EOS)水平检测,当EOS比例>5.0%时记录为阳性(+);采用荧光定量PCR检测miRN-125b和miRN-34a的表达在鼻黏膜组织及息肉组织中的表达,通过列联系数法分析miRNA-125b、miRNA-34a水平与不同分型鼻息肉相关性。结果正常组织、初发鼻息肉组织、复发鼻息肉组织中EOS的阳性率分别为10.00%、70.37%、83.33%,不同类型鼻息肉组织与正常鼻黏膜组织中EOS阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);初发组、复发组标本组织中miRNA-125b平均水平约为正常标本组织的4倍,miRNA-34a的平均表达水平分别接近正常标本组织2倍,各组间miRNA-125b水平存在显著差异(P<0.05),miRNA-34a的水平也存在显著差异(P<0.05);EOS与miRNA-125b的相关系数为0.375,与miRNA-34a的相关系数为0.283。结论miRNA-125b、miRNA-34a水平与EOS水平及鼻息肉的发病存在密切相关性,此相关性对鼻息肉靶向治疗及预后具有重要意义。

血清miRNA-125b与miRNA-21联合检测对前列腺癌的诊断价值

目的探讨血清miRNA-125b与miRNA-21联合检测前列腺癌患者的临床诊断价值。方法选择崇州市人民医院2014年1月至2016年1月收治的65例前列腺癌患者为研究对象,另选择同期良性前列腺增生患者65例、健康体检者65例作为对照,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测血清miRNA-125b与miRNA-21表达量,并进行统计学分析。结果前列腺癌患者血清miRNA-125b、miRNA-21水平显著高于良性前列腺增生和健康体检者(P <0. 05),而良性前列腺增生和健康体检者之间比较差异无统计学意义(P> 0. 05); miRNA-125b在年龄> 60岁、Gleason评分> 7、PSA≥10μg·L^(-1)、T3～4期、远处转移患者高表达(P <0. 05),miRNA-125b在Gleason评分> 7、PSA≥10μg·L^(-1)、T3～4期患者高表达(P <0. 05); miRNA-125b诊断前列腺癌的ROC曲线下面积(AUC)为0. 799(95%CI:0. 650～0. 949),miRNA-21的AUC为0. 733(95%CI:0. 588～0. 879),而二者联合诊断的AUC为0. 904(95%CI:0. 798～0. 982)(P <0. 05)。结论血清miRNA-125b与miRNA-21在前列腺癌患者血清高表达,且与患者病理特征有一定关系,二者联合检测可提高对前列腺癌的诊断效率。

结核性脑膜炎患者外周血及脑脊液中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163表达的临床意义

目的 分析结核性脑膜炎(TBM)患者外周血及脑脊液(CSF)中微小RNA-155(miRNA-155)、微小RNA-125b(miRNA-125b)、可溶性CD163(sCD163)表达的临床意义。方法 选取2018年1月至2023年1月于新乡医学院第一附属医院就诊的183例TBM患者作为TBM组,根据其病情分为Ⅰ期57例,Ⅱ期73例和Ⅲ期53例。另选同期60例原发性头痛患者作为对照组,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组外周血及CSF中miRNA-155、miRNA-125b表达,以酶联免疫吸附(ELISA)法测定外周血及CSF中sCD163表达。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血及CSF中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163表达对TBM的早期诊断价值。分析外周血及CSF中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163表达与TBM病情程度的关系。结果 TBM组患者外周血及CSF中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163表达水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);外周血中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163诊断TBM的ROC曲线下面积(AUC)依次为0.886、0.865、0.782,CSF中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163诊断TBM的AUC依次为0.925、0.905、0.915(P均<0.05);TBM患者外周血和CSF中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163表达水平比较:Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示,TBM患者外周血及CSF中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163表达水平与其病情程度分别呈正相关关系(r=0.810、0.562、0.325、0.611、0.472、0.682,P<0.05)。结论 TBM患者外周血及CSF中miRNA-155、miRNA-125b、sCD163均显著升高,此三项指标可作为TBM患者临床诊断和病情评估的生物学标志物。

GDM患者miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1变化及益生菌联合胰岛素治疗效果

目的:探究微小RNA-125b(miRNA-125b)、分泌型卷曲相关蛋白-5(SFRP5)和丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(SerpinB1)对妊娠期糖尿病(GDM)诊断价值及益生菌联合胰岛素治疗效果。方法:选取2020年1月-2022年12月入院接受治疗的GDM孕妇90例纳入病例组,同期待产的90例健康孕妇纳入健康组;病例组给予益生菌冻干粉联合门冬胰岛素治疗,PCR分析miRNA-125b相对表达水平,酶联免疫吸附试验法测定SFRP5和SerpinB1水平;检测病例组空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平、餐后2 h血糖(2 h PG)水平。对比病例组和健康组miRNA-125b、SFRP5和SerpinB1水平,分析miRNA-125b、SFRP5和SerpinB1对GDM诊断价值;对比干预前后病例组miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1和血糖水平。结果:病例组miRNA-125b(0.62±0.11)和SFRP5(9.16±1.37 ng/ml)均低于健康组(1.55±0.29、14.96±3.18 ng/ml),SerpinB1(2.89±0.95 ng/ml)高于健康组(2.34±0.58 ng/ml)(均P<0.05);miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1联合诊断GDM的ROC曲线下面积为0.941,特异性(93.2%)敏感度(96.5%)高于单独指标检测(P<0.05);病例组治疗3个月后,miRNA-125b和SFRP5水平均高于治疗前,SerpinB1、FBG、2hPG和HbAlc水平均低于治疗前(均P<0.05),发生低血糖2例、皮疹1例、恶心呕吐2例,但症状均较轻,减少用药剂量或停药后症状均消失。结论:相较于健康孕妇,GDM患者miRNA-125b和SFRP5水平降低,SerpinB1水平升高,3项联合检测对GDM有较高诊断价值;应用益生菌联合门冬胰岛素治疗,可明显改善GDM患者miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1和血糖水平。

IL-10对miRNA-125b表达和非小细胞肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究白细胞介素10(IL-10)对miRNA-125b表达和非小细胞肺癌增殖与凋亡的影响。方法:采用实时荧光定量PCR检测IL-10刺激肺癌细胞系NCI-H460各微小RNA(miRNA)的表达水平变化;利用细胞计数试剂盒(CCK8)比较IL-10刺激后和恢复miRNA-125b表达后对细胞增殖的影响;流式细胞术检测IL-10刺激后和恢复miRNA-125b表达后对细胞凋亡的影响;荧光定量PCR技术验证miRNA-125b在非小细胞肺癌组织和癌旁组织中的表达情况。结果:IL-10刺激NCI-H460细胞后,miRNA受到调控的程度不同,所测21种miRNA中,miRNA-125b下调程度最大;miRNA-125b恢复表达后,抑制了由IL-10刺激引起的细胞增殖(P<0.01),促进了细胞凋亡;miRNA-125b在非小细胞肺癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。结论:在IL-10诱导的细胞增殖中,miRNA-125b起到抑癌的作用,可作为未来治疗非小细胞肺癌的药物研发对象。

miRNA-125b在牛病毒性腹泻病毒感染MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究

为研究miRNA-125b在致细胞病变牛病毒性腹泻病毒(cpBVDV)感染牛肾细胞(MDBK细胞)过程中诱导细胞凋亡的机制,本研究将cpBVDV感染MDBK细胞,并将构建的pcDNA-miR-125b转染MDBK细胞作为阳性对照。采用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测细胞中miRNA-125b和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)mRNA转录水平,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率。检测结果显示,cpBVDV感染MDBK细胞12 h和24 h,细胞中miRNA-125b的转录水平分别为正常细胞对照组的2.01倍和3.85倍,Bcl-2 mRNA的转录水平分别为对照组的0.71倍和0.31倍;pcDNA-miR-125b转染MDBK细胞48 h后,Bcl-2 mRNA的转录水平为正常细胞对照组的0.42倍。细胞凋亡检测结果显示,cpBVDV感染MDBK细胞12 h和24 h,细胞的凋亡率分别为15.06%和36.43%;pcDNA3.1-miR-125b转染48 h,细胞的凋亡率为25.56%。结果表明miRNA-125b在cpBVDV感染MDBK细胞过程中能够通过抑制抗凋亡基因Bcl-2 mRNA转录水平从而诱导细胞产生凋亡。

miRNA-125b在鼻咽癌中的表达及与顺铂化疗敏感性研究

目的探讨微小RNA-125b(miRNA-125b)在鼻咽癌组织、血清中的表达及与顺铂化疗敏感性的相关性。方法收集34例临床确诊鼻咽癌完整病例资料及组织和血清标本,另取患者癌旁组织为组织对照,同时收集34例健康体检者血清标本为血清对照,运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time qPCR)法检测miRNA-125b在癌组织、癌旁组织、血清中的表达,并进行统计学分析。结果 miRNA-125b在癌组织的表达显著低于癌旁组织(P=0.006),在鼻咽癌患者血清中的表达显著低于健康体检者(P=0.000);miRNA-125b在患者癌组织与血清中的表达无相关性(r=0.112,P=0.528)。miRNA-125b在癌组织中的表达与病理分型、T分期、N分期有关(P<0.05),在患者血清中的表达仅与N分期相关(P<0.05)。miRNA-125b在癌组织中表达与顺铂化疗敏感性呈负性相关(P<0.05),在患者血清中的表达与顺铂化疗敏感性无明显相关性(P>0.05)。结论 miRNA-125b的低表达可能参与了鼻咽癌的发生、发展,对鼻咽癌诊断、分型、分级有一定意义,在癌组织中的表达水平可作为筛选顺铂化疗方案的指标之一。

过敏性紫癜患儿血清miRNA-125b、HIF-1α水平与Th1/Th2比值的相关性

目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清微RNA(miRNA)-125b、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平与Th1/Th2比值的相关性。方法前瞻性选取2020年1月至2023年12月商洛市中心医院收治的97例HSP患儿为试验组,97名健康体检儿童为对照组。通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测miRNA-125b表达,酶联免疫吸附试验检测HIF-1α、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6及IL-1β等水平,流式细胞术检测Th1和Th2细胞数量及Th1/Th2比值。采用Pearson相关分析法分析miRNA-125b和HIF-1α与Th1/Th2比值的关系,并通过受试者操作特征(ROC)曲线评估血清miRNA-125b、HIF-1α及相关细胞因子水平对HSP的诊断价值。结果试验组患儿血清中miRNA-125b、HIF-1α、Th2细胞水平分别为0.82±0.18、125.78±20.54、7.83±1.57,均明显高于对照组(0.37±0.11、56.20±8.99、4.60±0.55),而Th1细胞、Th1/Th2比值水平分别为7.43±1.66、1.02±0.11,均明显低于对照组(11.89±2.80、2.90±0.58),差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组患儿血清TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-4的水平分别为(32.5±4.8)、(21.3±3.9)、(11.0±1.8)、(5.3±1.1)pg/mL,均明显高于对照组[(14.8±3.7)、(11.7±2.8)、(6.0±1.3)、(2.5±0.7)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miRNA-125b和HIF-1α与Th1/Th2比值、TNF-α、IL-6、IL-1β水平均呈显著负相关(P<0.05)。血清HIF-1α和miRNA-125b诊断HSP的曲线下面积分别为0.821和0.977。结论HSP患儿血清miRNA-125b和HIF-1α水平升高,Th1/Th2比值及相关免疫因子水平降低,检测血清HIF-1α和miRNA-125b水平对于诊断HSP有较高的临床价值。

miRNA-125b-1对乳腺癌SKBR-3细胞放射敏感性的影响

目的探讨miRNA-125b-1对乳腺癌SKBR-3细胞放射敏感性的影响,及其对靶基因HER-2蛋白表达的影响。方法合成miRNA-125b-1并通过lipofectamineTM2000转染SKBR-3细胞,分别用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot法检测HER-2mRNA和蛋白质表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖抑制率;经不同剂量X线照射后,平板克隆形成实验计算细胞存活率,用单击多靶数学模型进行曲线拟合作图,求曲线参数D0、Dq和N值,比较细胞放射敏感性的变化。RT-PCR和Western blot定量结果的组间比较采用单因素方差分析,细胞周期及细胞增殖实验结果的组间比较采用重复测量方差分析。结果 miRNA-125b-1转染后的SKBR-3细胞中HER-2mRNA(F=447.78,P=0.00)和蛋白质水平(F=10.07,P=0.01)显著下降;转染后的SKBR-3细胞出现了G2M期阻滞;miRNA-125b-1组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组(F=163.28,P=0.00);曲线拟合后显示,转染后的细胞(D0=1.87,Dq=2.68,N=4.21)与对照组(D0=2.51,Dq=4.10,N=5.11)相比D0,Dq和N值均下降(SER=1.34,P<0.05),提示细胞放射敏感性增加。结论 miRNA-125b-1使乳腺癌SKBR-3细胞的放射敏感性增加,可为HER-2阳性的乳腺癌提供新的治疗方法。

血清miR-372、miR-125b、miR-592表达水平对口腔癌的临床诊断价值

目的探讨血清miR-372、miR-125b、miR-592表达水平对口腔癌的临床诊断价值。方法选择2021年7月—2023年10月安徽医科大学第一附属医院和安徽医科大学第二附属医院收治的218例口腔病患者为研究对象,按口腔病是否发生癌病变分为口腔癌组(103例)和癌前病变组(115例)两组,实时荧光定量PCR检测血清miR-372、miR-125b、miR-592;多因素Logistic回归模型分析口腔癌发生的影响因素;ROC曲线分析血清miR-372、miR-125b、miR-592对口腔癌的诊断价值。结果口腔癌组患者的血清miR-372和miR-125b水平高于癌前病变组,而血清miR-592低于癌前病变组,差异有统计学意义(P<0.05);口腔癌组患者血清血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA125)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-8)水平显著高于癌前病变组,差异有统计学意义(P<0.05);口腔癌患者临床分期、分化程度与miR-372表达有关(χ^(2)=7.009、8.786,P<0.05);临床分期、淋巴结转移与miR-125b、miR-592表达有关(χ^(2)=10.310、9.993、5.946、9.062,P<0.05)。多因素分析显示,miR-372(OR=1.316)、miR-125b(OR=1.258)、miR-592(OR=0.907)、CEA(OR=1.792)、CA125(OR=1.854)、TNF-α(OR=1.539)和IL-8(OR=1.445)均为口腔癌发生的影响因素(P<0.05)。ROC结果显示,血清miR-372、miR-125b、miR-592诊断口腔癌的AUC分别为0.789、0.790、0.808,三者联合诊断口腔癌的敏感度为90.29%,特异度为83.48%,AUC为0.880,显著高于miR-372(Z=2.285,P=0.022)、miR-125b(Z=2.114,P=0.035)、miR-592(Z=1.870,P=0.042)单独诊断的AUC。结论口腔癌患者血清miR-372和miR-125b水平较高,miR-592水平较低,血清miR-372、miR-125b、miR-592对口腔癌诊断价值较高。

小鼠miRNA-125b慢病毒过表达载体的构建及病毒包装

利用化学合成miR-125b发夹前体结构RNA(small hairpin RNA,shRNA),并将其克隆入pshRNA-copGFP Lentivector中,经双酶切及测序鉴定,成功地构建了microRNA-125b(miR-125b)过表达慢病毒载体,并对其进行病毒包装与滴度测定。利用PloyFect Transfection Reagent试剂将鉴定的阳性重组Lv-miR-125b表达载体、Gag、VSV、Rev四个质粒共转染到293T细胞中。

血清人附睾蛋白4联合外泌体miRNA-200a/200b/200c用于糖链抗原125阴性卵巢上皮癌早期诊断的价值

目的研究血清人附睾蛋白4(human epididymal protein,HE4)联合外泌体中的微小RNA(miRNA)-200a/200b/200c用于糖链抗原125(sugar chain antigen,CA125)阴性卵巢上皮癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)早期诊断的价值。方法选取CA125阴性EOC患者120例作为研究对象,设为研究组;另选取同期收治的115例卵巢上皮良性肿瘤患者作为良性组,107例于武汉市第一医院体检的健康女性作为对照组。比较3组HE4、CA125、miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析各项血清指标鉴别CA125阴性EOC及卵巢上皮良性肿瘤的价值。结果研究组HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c水平显著高于良性组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经ROC分析证实,血清HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c能够用于CA125阴性EOC的诊断,且HE4+miRNA-200a/b/c联合诊断相对于单独及两两诊断可获得更高的曲线下面积,均有P<0.05。经logistic逐步回归分析证实,HE4≥163.110 pmol/L、miRNA-200a≥2.7002^(-△△CT)、miRNA-200b≥1.6652^(-△△CT)、miRNA-200c≥1.3952^(-△△CT)为CA125阴性EOC发生的危险因素(P<0.05)。结论血清HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c可用于CA125阴性EOC的早期诊断中,且四项指标联合诊断具有更高的敏感度与特异性,值得临床医师关注。

过表达miRNA-125b促进肺癌细胞A549的增殖、侵袭能力及其机制研究

目的探讨过表达miRNA-125b对肺癌细胞A549的增殖、侵袭能力的影响及其机制。方法将A549细胞分为3组:miRNA-125b组(miR-125b模拟物),NC组(NC模拟物)及空白组(同等体积的混有转染剂的胎牛血清),采用Q-PCR检测miRNA-125b的转染及表达效率。MTT法分析各组细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力。采用Western blot法检测各组细胞Bcl-2调节因子(BMF)的表达水平。结果与空白组比较,miRNA-125b组细胞的miRNA-125b表达水平、增殖能力及侵袭能力上升(P<0.05);NC组的上述指标无明显变化(P>0.05)。与空白组比较,miRNA-125b组细胞的BMF表达水平下降(P<0.05);NC组的BMF表达水平无明显变化(P>0.05)。结论 miRNA-125b能通过抑制BMF的表达促进肺癌细胞A549的增殖及侵袭。

miRNA-125b在膀胱癌中的表达和意义

目的:探讨膀胱癌组织中miR-125b的表达在膀胱癌发生发展中的作用及其临床意义。方法:采用应用茎环RT-PCR的方法检测66例膀胱尿路上皮癌组织标本的miR-125b的表达,另有16例正常膀胱黏膜组织作对照,并结合临床病理资料进行统计学分析。结果:miR-125b在膀胱癌组织中的表达显著高于非肿瘤的正常膀胱黏膜组织(p<0.05),miR-125b的水平还与表达水平与膀胱癌的组织学分级、肿瘤转移、术后复发均明显相关性(P<0.05)。结论:miR-125b在膀胱癌组织中表达量升高,且与组织学分级、肿瘤转移、术后复发相关,可能作为膀胱癌诊断和预后指标。

miRNA-125a靶向调控Bcl-2对癫痫大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨miRNA-125a靶向调控Bcl-2对癫痫大鼠神经元凋亡的影响.方法选择清洁级SD雄性大鼠32只随机分为正常对照组(A组)、癫痫组(B组)、miRNA-125a antagomir control组(C组)和miRNA-125a antagomir组(D组).qRT-PCR检测各组大鼠脑组织miRNA-125a表达水平;HE检测各组大鼠脑海马组织CA-1区病理形态学改变;TUNEL法检测脑海马CA-1区神经元细胞凋亡数;Western blot和qRT-PCR法检测各组大鼠脑组织中Bcl-2的表达水平;荧光素酶活性检测miRNA-125a与Bcl-2的靶向关系.结果与A组相比,B组和C组大鼠脑组织miRNA-125a表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05);A组海马细胞排列整齐,细胞形态结构及层次清晰完整,核仁明显,间质无水肿;B组可见坏死灶,细胞排列紊乱,细胞核固缩,核仁消失,细胞间隙增宽出现水肿;TUNEL结果显示,B组、C组和D组脑海马神经元凋亡细胞数明显高于A组,而大鼠脑组织Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低.D组miRNA-125a表达与C组相比降低而Bcl-2表达增加(P<0.05),且D组大鼠脑组织水肿现象明显减轻,海马细胞排列紊乱现象有所改善.荧光素酶报告基因实验结果显示,miRNA-125a和Bcl-2能够靶向结合.结论癫痫模型大鼠脑组织miRNA-125a可通过调控Bcl-2表达,进一步导致脑海马神经元损伤及大量神经元细胞凋亡;抑制miRNA-125a的表达水平可改善癫痫大鼠神经元损伤.

miRNA-125b经p53通路调控Alisertib耐药细胞代谢的机制研究

目的探讨Alisertib耐药的分子机制并寻找Alisertib耐药的潜在靶点。方法用Alisertib连续处理结肠癌细胞系建立耐药细胞株并命名为HCT-8-7T细胞,将HCT-8-7T细胞及人结肠癌细胞系HCT-8接种至免疫缺陷小鼠体内,观察小鼠其他器官转移瘤的情况。采用细胞克隆实验及Transwell迁移实验检测细胞的增殖及迁移能力,采用Seahorse分析仪检测细胞糖酵解及谷氨酰胺代谢能力的差异,Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应检测糖酵解及上皮-间质转化(EMT)标志物相关蛋白表达水平及mRNA水平。结果接种HCT-8-7T细胞的小鼠肝脏、肺脏、肾、卵巢等转移灶数量多于接种HCT-8细胞的小鼠(均P<0.05)。HCT-8-7T细胞腺嘌呤核苷三磷酸水平[(0.10±0.01)mmol/L]、糖酵解水平[(81.77±8.21)mpH/min]及糖酵解能力[(55.50±3.48)mpH/min]均高于HCT-8细胞[分别为(0.04±0.01)mmol/L、(27.77±2.55)mpH/min和(14.00±1.19)mpH/min,均P<0.05]。HCT-8-7T细胞中p53蛋白表达水平及mRNA表达水平低于HCT-8细胞(均P<0.05)。HCT-8-7T细胞中miR-125b表达水平(2.21±0.12)高于HCT-8细胞(1.00±0.00,P<0.001)。在HCT-8-7T细胞中,过表达p53导致细胞克隆数[(162.00±24.00)个]及细胞迁移率[(18.53±5.67)%]低于空白对照组[分别为(274.70±40.50)个和(100.00±29.06)%,均P<0.05]。miR-125b mimic组HCT-8-7T细胞糖酵解水平[(25.28±9.51)mpH/min]低于空白对照组[(54.38±12.70)mpH/min,P<0.05]。与空白对照组HCT-8-7T细胞比较,miR-125b mimic组HCT-8-7T细胞中p53和β-catenin蛋白水平升高,PFK1和HK1蛋白水平降低(均P<0.05)。结论miR-125b沉默p53是导致Alisertib耐药的机制之一,靶向miR-125b是克服Alisertib耐药的潜在可用之策。