慢病毒介导的miRNA-197-3p-siRNA对喉癌细胞系Hep-2生物学行为的影响

目的通过构建慢病毒介导(lentivirus,LV)的miRNA-197-3p-siRNA,探讨下调miRNA-197-3p对喉癌细胞系Hep-2生物学行为的影响。方法针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体,将重组miRNA-197-3p-RNAi-LV3转染喉鳞状细胞癌Hep-2。Hep-2细胞设为干扰组(miRNA-197-3p-siRNA,MI组)、阴性对照组(negative control,NC组)和空白对照组(blank,B组);分别采用聚合酶链反应方法检测miRNA-197-3p的表达情况;用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭情况。结果 miRNA-197-3p-RNAi-LV3可显著降低miRNA-197-3p的表达。CCK8实验显示细胞增殖能力显著降低(P<0.05)。Transwell实验显示细胞侵袭能力明显减弱(P<0.05)。流式细胞仪检测表明转染后对Hep-2细胞周期及细胞凋亡均无明显影响(P>0.05)。结论 miRNA-197-3p-siRNA通过下调miRNA-197-3p的表达,可以抑制Hep-2细胞增殖,并降低其侵袭能力。

血浆miRNA-190 及miRNA-197联合检测可辅助诊断肺血栓栓塞症

目的:探讨血浆miRNA-190和miRNA-197在肺血栓栓塞症(PTE)患者中表达水平及辅助诊断价值。方法:选择2017年7月至2019年6月苏州市第九人民医院PTE患者30例为PTE组,同期匹配心肌梗死患者45例为心肌梗死组,健康体检者45例为正常对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血浆miRNA-190和miRNA-197在所有受试者外周血中的表达水平,并分析其在3组中的表达量差异。应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)及曲线下面积(AUC)(95%CI)评估两者单独或联合检测作为PTE诊断指标的意义。结果:血浆miRNA-190在3组中的相对表达量分别为3.01±2.01,1.80±1.02,1.18±0.67;其在PTE组血浆中表达量较心肌梗死组及正常对照组高(t=3.602,t=5.814,P均<0.05)。血浆miRNA-197在3组中相对表达量分别为4.82±3.80,1.88±1.50,1.38±0.83;其在PTE组血浆中表达量较心肌梗死组及正常对照组高(t=4.791,t=5.886,P均<0.05)。作为PTE的诊断指标,血浆miRNA-190的最佳临界值为1.598,敏感度为75.56%,特异度为80.00%,AUC为0.7844,95%CI为0.6858~0.8831;血浆miRNA-197最佳临界值为2.40,敏感度为75.56%,特异度为86.67%,AUC为0.7931,95%CI为0.6870~0.8991。血浆miRNA190和miRNA-197联合检测诊断PTE的敏感度为80.00%,特异度为93.33%,AUC为0.9136,95%CI为0.8516~0.9756;均高于两者单独检测。结论:血浆miRNA-190和miRNA-197在PTE患者外周血血浆中表达量明显升高,两者联合检测敏感度和特异度更高,有助于PTE的辅助诊断。

血清miRNA-145、miRNA-21和miRNA-197对非小细胞肺癌的诊断价值

目的:探讨血清miRNA-145(miR-145)、miRNA-21(miR-21)和miRNA-197(miR-197)对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断价值。方法:回顾性分析2019年1月至2020年6月四川省泸州市中医医院收治的65例NSCLC患者的临床资料,以60名健康体检者为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-145、miR-21和miR-197的相对表达量,分析其与NSCLC患者临床病理特征的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-145、miR-21和miR-197单独及联合诊断NSCLC的效能。结果:NSCLC组miR-145相对表达量低于健康对照组(1.05±0.40比1.38±0.44,t=-4.326,P<0.01),miR-21、miR-197相对表达量均高于健康对照组(2.37±0.89比0.83±0.25,4.42±0.75比1.10±0.33,均P<0.01)。NSCLC组中,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者血清miR-21和miR-197相对表达量均高于Ⅰ~Ⅱ期患者(均P<0.01),腺癌患者miR-145相对表达量高于鳞状细胞癌患者(P<0.01),淋巴结转移患者miR-21相对表达量高于无淋巴结转移患者(P<0.01)。miR-145、miR-21、miR-197单独诊断NSCLC时,曲线下面积(AUC)分别为0.842(95%CI 0.795~0.907)、0.868(95%CI 0.812~0.938)、0.857(95%CI 0.801~0.913),诊断最佳截断值分别为1.14、2.03、2.98;采用最佳截断值进行诊断时,单独检测灵敏度最高的是miR-145(83.76%),特异度最高的是miR-21(87.63%);三者联合检测时AUC为0.939(95%CI 0.904~0.965),诊断灵敏度为91.58%,特异度为79.86%。结论:miR-145、miR-21、miR-197相对表达量与NSCLC患者病理类型、TNM分期、淋巴结转移相关,可能成为辅助诊断NSCLC的标志物,三者联合检测可提高诊断效能和灵敏性。